鸡源产气荚膜梭菌的分离鉴定及耐药性研究

目的:对鸡源产气荚膜梭菌进行分离、鉴定和耐药性研究,以深入了解其生物学特性和潜在威胁。方法:利用TSC琼脂、血琼脂、硫酸亚铁牛乳培养基等进行分离培养,通过形态观察、生化特性鉴定,以及PCR鉴定和耐药性试验等多种方法,系统性地分析产气荚膜梭菌的性状和特性。结果:分离得到的3株产气荚膜梭菌经PCR鉴定均确认为A型。生化鉴定结果显示了其在碳源代谢上的多样性。毒素分型和16S rRNA基因分析验证了其种属身份,同时揭示了它们在分子水平上的相似性。耐药性试验结果表明,这些分离株对庆大霉素、卡那霉素、新霉素、多黏霉素B和复方新诺明表现出耐药性,对头孢唑啉、头孢曲松、头孢呋辛、氨苄青霉素和哌拉西林等抗生素则表现出高度敏感性。结论:本研究全面研究了鸡源产气荚膜梭菌的分子生物学特性,强调了其在碳源代谢和抗药性方面的多样性,为防控鸡源产气荚膜梭菌感染提供了重要的基础数据,同时为未来深入探究其致病机制和合理使用抗生素提供了科学依据。

鸡源沙门菌及其耐药性流行现状与风险评估研究进展

鸡源沙门菌及其耐药性对食品安全和公共卫生安全均具有严重威胁。通过对鸡肉供应链各环节沙门菌的流行和耐药现状以及相关风险评估研究进行综述发现:在肉鸡供应全链条中,屠宰和零售环节的沙门菌分离率显著高于养殖环节;沙门菌耐药性严重,耐药谱广,多重耐药率最高达100%;不同区域和环节的沙门菌流行率、耐药性及耐药谱有差异;鸡源沙门菌的流行风险主要与初始污染水平和交叉污染有关,屠宰过程中杀菌方法、厨房烹饪过程中的温度等也会对其产生影响。目前针对国内肉鸡源沙门菌耐药性相关风险评估的研究较少。今后需要加大从农场到餐桌全链条鸡源沙门菌的监测和风险评估研究力度,基于“同一健康”理念加强对鸡源沙门菌流行及耐药风险干预措施的评估研究。

鸡源抗菌肽研究进展

抗菌肽作为机体抵御外来病原入侵而产生的一类具有生物活性的多肽物质,能够迅速杀菌且不易产生耐药性,可单独使用或与抗菌药物联合使用,成为具有重要发展潜力的天然药物,然而关于鸡源抗菌肽的报道较少。自从鸡的异嗜性白细胞中首次分离到抗菌肽后,大量研究人员投身到鸡源抗菌肽的生物学活性、作用机理以及开发应用的研究领域。论文对鸡源抗菌肽的种类与结构、分布与表达、生物活性以及在家禽养殖中的应用进行综述,以期为研发新型、高效、环保型抗生素替代品提供理论依据。

老乡鸡北京农场旗舰店体验式设计策略研究

在体验经济时代,消费者更加注重品牌的内在文化和情感表达,对餐饮品牌转型升级提出更高要求。从体验式设计视角出发,以老乡鸡北京农场旗舰店为例,从感觉体验、行为体验、关联体验、情感体验四个方面分析老乡鸡提升顾客品牌体验的设计策略,认为餐饮品牌体验升级需以良好的感官体验吸引消费者关注,以全方位的消费者行动体验传递品牌理念,以真挚的情感体验培养品牌追随者。通过分析研究以期对餐饮企业品牌升级提供一些新思路。

生物被膜对鸡源肠外致病性大肠埃希氏菌耐药表型的影响

探讨鸡源肠外致病性大肠埃希氏菌(ExPEC)生物被膜(BF)形成能力及BF与耐药性之间的相关性,采用96孔微量板法和正交试验测定10株鸡源ExPEC的BF形成能力和BF强阳性菌株的最佳成膜条件,使用二倍倍比稀释法测定β-内酰胺类抗生素对生物被膜态与浮游态鸡源ExPEC的最小抑菌浓度(MIC)。结果显示,10株鸡源ExPEC的BF阳性率为90%,E-26、E-28、E-43为弱阳性菌株(+);E-27、E-30、E-42为中等阳性菌株(++),E-39、E-40、E-41为强阳性菌株(+++),E-20为阴性菌株;3株强阳性菌株BF最佳成膜条件不相同;3株BF强阳性鸡源ExPEC的BF形成后,对β-内酰胺类抗生素耐药性有不同程度增加,同种抗生素对不同菌株的MIC变化可能不同,不同抗生素对同一菌株变化也不同。因此,鸡源ExPEC的BF阳性率较高,但各菌株形成BF的能力存在差异,不同菌株形成BF所需的条件不完全相同,BF形成会使鸡源ExPEC对抗生素的耐药水平增强,但同为BF阳性鸡源ExPEC,形成BF后β-内酰胺类抗生素耐药水平变化存在差异。

鸡精调味料中鸡源性成分RT-PCR检测技术的建立及应用

目的:建立鸡源性成分实时荧光PCR检测方法,针对食品调味料中鸡源性成分进行检测。方法:以鸡的保守基因序列NDI设计特异性引物探针,建立鸡源性成分实时荧光PCR检测方法;并针对方法的特异性、灵敏性、稳定性进行评估。结果:本方法能够有效对鸡源性成分进行快速检测,具有较高的可行性和实用性。结论:该方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测鸡精调味料中含有的鸡源性成分,为市场上鸡精调味品质量监管提供强有力技术支撑。

青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌耐药性调查与优势基因型分析

【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对249株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证实验,采用PCR方法、序列测定以及生物学分析软件进行ESBLs耐药质粒的DNA扩展和基因型分析,利用SPSS19.0软件对产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】83.13%(207/249)的鸡源大肠杆菌菌株产ESBLs;产ESBLs菌株对7种抗菌药的耐药率高于非产ESBLs菌株,其中对庆大霉素、大观霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋等5种药物差异显著(P<0.05),而产ESBLs菌株对四环素和氟苯尼考2种抗菌药的耐药率显著低于非产ESBLs菌株;产ESBLs菌株多重耐药程度显著高于非产ESBLs菌株,其多重耐药率分别为99.03%和92.86%(P=0.035);CTX-M型、TEM型和OXA型ESBLs菌株的检出率分别为100.00%、99.52%和47.83%,未检测出SHV型ESBLs菌株;产酶菌株分属于10个基因亚型,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型是优势基因亚型,并首次从健康家禽中检测到基因重组嵌合体CTX-M-123和CTX-M-64。【结论】产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株在青岛地区广泛流行和传播;产ESBLs菌株耐药相对非产ESBLs菌株严重;相比国内其它地区,CTX-M型和TEM型同样成为青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株的流行基因型,但基因亚型存在差异,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型分别是各基因型的优势基因亚型。

不同地区101个禽源性大肠杆菌分离株的致病性试验

从国内１８个省、市、自治区大肠杆菌病疑似病禽中分离并鉴定出大肠杆菌５９５株，鉴定出其中４４０个分离株的血清型。采用Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ氏报道的方法，测定了来自不同地区的６０个优势血清型分离株对ＳＰＦ鸡、３０个其他常见血清型及１１个国内少见血清型分离株对普通易感鸡的致病性。结果表明：所测定的１０１个分离株均为致病株，且９０％以上属高、中度致病株。

禽病原性大肠杆菌1型菌毛的分离与鉴定

以旋涡混合法使禽病原性大肠杆菌分离株５６６ 、１７９４ 和ＴＫ３ 菌毛脱落，经硫酸铵沉淀、透析后进行蔗糖密度梯度离心，收集密度为１１０ 至１１５ｇ／ｃｍ３ 的蛋白带，经ＳＤＳＰＡＧＥ测定，３ 株菌菌毛蛋白的分子量分别在１７５ 、１７０ 和１７０ｋＤ；提纯菌毛保留了甘露糖敏感性凝集豚鼠红细胞的能力，证明它们为１ 型菌毛；从１７９４ 株提取的１ 型菌毛免疫ＢＡＬＢ／Ｃ 小鼠产生的高免血清在Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 中与３ 个菌株的相应菌毛蛋白均呈阳性反应。上述结果表明，受检的３ 株禽病原性大肠杆菌均表达了１ 型菌毛，其分子量在１７５ ～１７０ｋＤ 之间，３ 个菌株的１

应用铅同位素比值和元素含量分析法识别有机鸡样品真实性

探究了鸡中铅同位素与相关元素在有机养殖和常规养殖中的差异性,以探讨有机鸡样品溯源的可能性。相同品种的鸡分别采用有机养殖和常规养殖2种不同的饲养方式,利用电感耦合等离子体质谱分别对有机鸡和普通鸡样品中的铅同位素比值和相关元素含量进行测定。方差分析结果表明,铅同位素比值^(204)Pb/^(206)Pb和P、Zn、Fe、Mn、Mg、Ca、Cu、Na、K元素含量具有显著性差异(P<0. 05);主成分分析初步表明,Zn、Mn、Mg、Ca、Cu、Na、K为有机鸡和普通鸡样品中的特征无机元素;聚类分析可将鸡样品分为有机养殖和常规养殖两大类,通过判别分析所得模型的初始分组正确率为100.0%,交叉验证正确率为90.0%。利用铅同位素比值(^(204)Pb/^(206)Pb)、相关元素(P、Zn、Fe、Mn、Mg、Ca、Cu、Na、K)含量分析能够对有机鸡进行有效溯源识别,研究结果可为有机鸡的鉴别研究提供新的方法。

应用血液蛋白质多态性探讨石歧杂鸡的起源和分化

本文测定了与石岐杂鸡有关的８个家鸡品种（群体）的血液碱性磷酸酶（Ａｋｐ－１及Ａｋｐ－２）、淀粉酶（Ａｍｙ－１及Ａｍｙ－２）、酯酶（Ｅｓ－１）和血红蛋白（Ｈｂ－１）多态性，用主成分分析的方法研究了石峻杂鸡的起源与分化，结果表明，石岐杂鸡主要受石岐鸡和白洛克鸡血液的影响，而与杏花鸡、清远麻鸡等也存在一定的关系，并且可能正是这种关系构成了石歧杂鸡广泛的进传基础：既保持与外种鸡相仿的生长速度与体重，又具备本地地肉质优美的特性。结果还表明了石岐杂类鸡本身的分化。

鸡源新城疫病毒人工感染鸭的病理组织学研究

本研究取120只20日龄健康非免疫建湖鸭,随机分为2组,每组60只,研究鸡源新城疫病毒人工感染鸭的病理组织学变化及其病理演变过程。试验组皮下接种1∶5稀释的鸡源新城疫病毒分离株(WF00G株)SPF鸡胚绒尿液毒0.5mL/只,对照组皮下注射等量灭菌生理盐水,隔离饲养,临床观察20d。于攻毒后第4d、8d、12d、16d、20d每组各取鸭4只,颈动脉放血致死,解剖观察心脏、肝、脾、肺、肾等器官的病变,取材制作石蜡切片及超薄切片,观察病理组织学变化。结果显示:试验鸭胸腺点状出血;心脏体积增大、心肌柔软、心包积液;肝脏肿大,质地变脆;肺脏出血;肾脏明显肿大。病理组织学变化主要为肝、脾、肺及肾等器官出血,细胞变性、坏死,细胞器溶解等。研究结果表明鸡源新城疫病毒WF00G株人工感染鸭可致鸭发病,临床症状较轻微,剖检病变和组织学病变明显。

中国6个地方鸡品种的母系起源

通过对线粒体DNA(mtDNA)D-loop区的测序和比对,探讨了中国6个地方鸡品种的母系起源。结果表明,文昌鸡、鲁西斗鸡、寿光鸡、济宁百日鸡和莱芜黑鸡分别有5、5、5、6和7种单倍型,琅琊鸡只有3种单倍型;6个地方鸡品种聚为3个分支:分支A是1个主要分支,共有17种单倍型,有寿光鸡(10只)、鲁西斗鸡(9只)、文昌鸡(5只)、莱芜黑鸡(6只)、济宁百日鸡(6只)和琅琊鸡(2只),分别占所分析各地方鸡品种个体数的100%、90%、84%、75%、60%和20%,与分布于老挝、云南红原鸡的3个大陆亚种(G.g.gallus、G.g.jabouile和G.g.spadi-ceus)关系较近;分支B中包含8只琅琊鸡(80%)和1只济宁百日鸡(10%);分支C中有1只鲁西斗鸡(10%)、1只文昌鸡(16.7%)、2只莱芜黑鸡(25%)和3只济宁百日鸡(30%);分支B和C分别与来自红原鸡G.g.gallus亚种H19单倍型和H32、H33单倍型聚在一起。推测这6个地方鸡品种分别来自云南、老挝和越南附近地区的红原鸡大陆亚种。基因流是上述品种群体间遗传分化的主要因素。错配分布和Fu’sFs检验表明,分布于山东的5个地方鸡品种未发生群体扩张。

稳定同位素碳、氮、硫、氢在鸡肉产地溯源中的应用研究

利用同位素比值质谱仪测定了来自北京、山东、湖南、广东4省9个不同地区鸡肉粗蛋白中的1δ3C、1δ5N、3δ4S、2δH值和相应各地饮水中的1δ8O值。多元方差分析结果表明,1δ3C、1δ5N、3δ4S、2δH 4种稳定同位素在不同地区的鸡肉中均有显著差异(p<0.05);4参数同时对鸡肉产地的正确判别率达到了100%;各地饮水中的1δ8O值和鸡肉中的2δH值呈现显著正相关性(p<0.01)。碳、氮同位素受饲料、气候等因素的影响,硫同位素依赖于地理位置和产地表面的地质特点。

鸡源黄病毒卵黄抗体间接ELISA检测方法的建立

为在检测产蛋鸡黄病毒抗体水平过程中减少应激,以鸡源黄病毒FQ-C1株为包被抗原,建立检测鸡源黄病毒卵黄抗体的间接ELISA方法。确定的优化条件是包被抗原浓度为5.7ng.μL-1,卵黄抗体以1∶160倍稀释,羊抗鸡IgG酶标抗体以1∶3 200稀释。经特异性、敏感性检验表明该方法特异性强、敏感性高,适合于产蛋鸡免疫后的抗体检测。

云南地方鸡资源的发掘、保护与利用

云南拥有丰富的地方鸡遗传资源,文章对云南地方鸡的挖掘、种类与品种形成、种质特征及其研究进展进行了综述,同时,对云南地方鸡的保种和选育利用也进行了探讨。

不同省区鸡源大肠杆菌耐药性调查与系统进化群分析

为有效控制鸡大肠杆菌病,对不同省区鸡源大肠杆菌致病菌株的分布情况及耐药特征进行了调查分析,分别采用PCR法和MIC法进行了系统进化群分群检测和药敏试验,采用皮下注射进行了动物致病性试验,并采用SPSS17.0软件进行差异显著性分析。结果显示:低致病群B1(38.13%)和非致病群A(34.02%)菌株分布相对较多,其次是高致病群D(21.23%)和B2(6.16%);鸡源大肠杆菌耐药严重,12种药物的耐药率在50%以上,多重耐药问题突出,多重耐药率高达98.86%;不同省区鸡源大肠杆菌菌株的耐药程度存在差异,个别药物(如奥格门丁、头孢噻呋等)差异显著;高致病群B2和D群菌株的耐药程度较B1和A群菌株严重,其中氧氟沙星、庆大霉素、大观霉素、头孢噻呋、磺胺异噁唑、复方新诺明、奥格门丁等7种药物差异显著(P<0.05)。试验表明,我国鸡源大肠杆菌高致病菌株检出率高,且耐药程度相对严重,在适宜条件下更易导致鸡群发病且较难控制。

家鸡起源和遗传多样性的研究进展

从线粒体DNA、微卫星标记、Z染色体和全基因组测序高通量SNP分型等方面,对家鸡的起源及其遗传多样性的研究进行了综述。

云南地方鸡种的遗传多样性及其与中国家鸡起源的关系

云南地方鸡种在生境、形态外貌、细胞遗传和血液蛋白等方面均表现出多样性，但mtDNA的遗传变异单一。云南地方鸡种有其独特的基因类型，由于所处的特殊地理位置和生态条件差异，形成了与我国其它鸡种相对独立的鸡种。从血液蛋白、细胞遗传和mtDNA等方面进一步证明红色原鸡为家鸡的祖先。云南可能是中国家鸡的起源中心之一。

基于线粒体DNACOⅠ基因鉴别畜禽肉中鸡源性成分

为建立畜禽肉中鸡源性成分的快速检测方法,以线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列为靶点,比较羊、牛、猪、兔、鸽、鹌鹑、鸡、鸭、鹅9种动物COⅠ基因的差异位点,设计筛选鸡特异性引物,进行常规聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和荧光定量PCR检测。结果表明:所设计的引物仅对鸡肉DNA模板有扩增条带和典型扩增曲线,且循环阈(cycle threshold,Ct)值为21.78,对其他动物DNA模板无扩增。方法特异性较强,灵敏度较高,达pg级,可以用于畜禽肉与肉制品中鸡源性成分的快速、有效、准确检测。