Ecthyma Gangrenosum in Patient with Bone Marrow Aplasia: A Case Report and Review of the Literature

Background: Ecthyma gangrenosum (EG) is an infrequent and discernible cutaneous disease caused by Pseudomonas aeruginosa. In situations where it is associated with septicemia in debilitated patients, the prognosis is usually unfavorable. Objective: In this case, we aim to verify risk factors, clinical, bacteriological and therapeutic characteristics of ecthyma gangrenosum and we review the literature to highlight the features of this rare condition and discuss the role of early diagnosis and treatment. Case Report: We describe the clinical case of a 4-year-old male with bone marrow aplasia who was presented with characteristic skin lesions of EG and developed sepsis later. Conclusion: EG is a cutaneous disease characterized by its aggressive nature. The presence of delayed diagnosis and therapy, along with sepsis, is closely linked to a high mortality rate. Treatment is empirically founded on an aggressive initial approach.

再生障碍性贫血患儿骨髓间充质干细胞的生物学特点

为了观察和比较再生障碍性贫血患儿、正常同年龄段儿童和胎儿3种来源的骨髓间充质干细胞(MSC)的体外增殖能力及表面标志的表达,利用体外培养的方法从再生障碍性贫血患儿的骨髓分离培养MSC,以胎儿和儿童的MSC作为对照;通过对细胞形态和生长特性的观察,并用流式细胞术和免疫细胞化学方法进行检测以比较三者之间的异同。结果表明:从再生障碍性贫血患儿骨髓中分离、培养、扩增得到了MSC,与胎儿和正常儿童骨髓来源的MSC在细胞形态、流式表达模式和免疫细胞化学表达方面基本一致,但再生障碍性贫血患儿骨髓MSC的体外扩增能力有别于胎儿及正常儿童。虽然在早期培养时再生障碍性贫血患儿的骨髓MSC具有与正常儿童相似的扩增速度,但当群体倍增值(populationdoubling,PD)达20之后基本不再有增殖能力了,而正常儿童和胎儿来源的MSC却可稳定扩增到30PD。结论:再生障碍性贫血患儿骨髓MSC在表面抗原标志方面与对照组相比无明显异常,但体外增殖能力弱于对照组。

恶性婴儿型石骨症相关眼部病变的临床特征分析

背景恶性婴儿型石骨症患者临床上非常少见，合并眼部症状的病例罕见。由于该病延误治疗时预后差，因此受到临床医师的高度关注，而恶性婴儿型石骨症合并眼部症状的患儿治疗后眼部症状是否改善也是值得研究的问题。目的分析恶性婴儿型石骨症合并眼部症状患者的发病特点、眼部表现、治疗及预后。方法收集在首都医科大学附属北京儿童医院确诊的恶性婴儿型石骨症合并眼部症状的患儿2例，对患儿进行全身临床检查和眼部检查，包括一般体格检查、实验室血液学检查、腹部B型超声检查、全身骨骼x线摄片、外眼检查、闪光视觉诱发电位（F—VEP）检查和眼部CT检查。对患儿行骨髓造血干细胞移植术并进行5年的随访，观察患儿的症状改善情况。结果患儿白细胞总数增加、血小板数量减少，进行性贫血，腹部B型超声检查提示肝脏、脾脏肿大，全身骨骼系统均有密度增高、增厚等特征性改变。治疗前1例女性患儿同时存在视神经管狭窄、视盘苍白、右侧面部肌肉麻痹和麻痹性内斜视；而另1例男性患儿存在视神经管狭窄和交替性外斜视，2例患儿均存在F—VEPP，波潜伏期延长和振幅下降。2例患儿均成功进行骨髓造血干细胞移植术，术后全身症状均明显改善，女性患儿F-VEP结果稍有改善，术后1年视神经管直径为1．9mm，随访至5年视神经管直径增宽到3．2mm，但斜视和视神经萎缩症状无改善；而男性患儿除视神经管增宽外，双眼共转性斜视症状消失。结论斜视和眼部症状是恶性婴儿型石骨症重要临床表现的一部分，是中枢神经系统受损的反映，发病机制尚不明确，应该引起重视。恶性婴儿型石骨症的早期治疗可有效改善全身症状和部分眼部症状，挽救患者的视功能。

小儿骨髓间质干细胞体外诱导分化为神经元样细胞

背景:以往相关报道大多为成人或者动物骨髓间质干细胞,关于儿童骨髓间质干细胞体外培养及定向分化的研究相对较少。目的:探讨儿童骨髓间质干细胞诱导分化为神经干细胞及神经元细胞的能力。方法:取传12代儿童骨髓间质干细胞,加入预诱导液(含体积分数为10%胎牛血清及1 mmol/Lβ-巯基乙醇的DMEM培养液)、诱导液(含2%二甲基亚砜及150μmol/L丁基羟基茴香醚的DMEM培养液)进行定向诱导分化。诱导后30 min,7 d,免疫细胞化学检测神经干细胞特异性抗原nestin、神经丝蛋白β-tublinⅢ的表达,诱导后0,5.5,6 d,RT-PCR检测nestin m RNA的表达。结果与结论:(1)经二甲基亚砜、丁基羟基茴香醚联合诱导之后,细胞胞体逐渐收缩为锥形和多角形、类圆形,胞体伸出突起并逐渐延长为细丝状。联合诱导至第6天,相邻细胞突起发生交互,形成网状;(2)诱导30 min后,nestin抗原表达呈阳性,诱导7 d后,β-tublinⅢ表达呈阳性;(3)诱导开始时(0 h)未出现nestin mRNA表达,诱导5.5 h时nestin mRNA表达呈阳性,诱导6 d时不再表达;(4)结果表明,小儿骨髓间质干细胞经二甲基亚砜、丁基羟基茴香醚体外联合诱导可分化为神经干细胞与神经元细胞。

自体骨髓血注射结合弹性髓内针治疗儿童长骨骨囊肿

目的:观察自体骨髓血注射结合弹性髓内针植入方法治疗儿童长骨骨囊肿的临床疗效。方法:自2010年1月至2015年12月采用自体骨髓血注射结合弹性髓内针植入的方法治疗儿童长骨骨囊肿29例,男22例,女7例;年龄2~12岁,平均7.7岁;病程12~84个月。其中肱骨近端17例,股骨近端9例,股骨远端2例,尺骨近端1例。全部骨囊肿患儿行术前X线片检查,必要时加做CT或MRI检查,明确诊断后,治疗方法采用骨髓血注射结合弹性髓内针支撑引流,术后行多次X线检查随访,采用Capanna骨囊肿治疗评价标准进行疗效评价。结果:29例患儿中27例获得随访,随访时间12~60个月,平均31.8个月。按照Capanna骨囊肿评价标准,其中26例治愈,1例部分愈合残留部分病灶。结论:采用自体骨髓血注射结合弹性髓内针治疗单纯性儿童长骨骨囊肿具有疗效确定、高治愈率、并发症少、治疗过程客观可控的特点。

小儿血液病骨髓针刺活检临床病理学分析

目的：探讨小儿骨髓活检特点及其病理诊断意义。方法：对比分析３６１例有血液病临床表现的患儿骨髓针刺抽吸涂片和活组织检查结果。结果：比较两种检查方法，在判断增生程度时存在显著差别。活检可以提高再生障碍性贫血、血小板减少性紫癜、骨髓异常增生综合征和转移性恶性肿瘤的诊断率。

弹性髓内针与自体骨髓血注射治疗儿童骨囊肿的疗效对比研究

目的:对比自体骨髓血注射与弹性髓内针支撑引流治疗儿童骨囊肿的临床疗效。方法:自2012年1月至2016年12月将收治的单纯性骨囊肿患儿56例分为2组,自体骨髓血注射组和弹性髓内针组。其中自体骨髓血注射组28例,男16例,女12例;年龄(7.7±1.9)岁;肱骨近端10例,股骨近端8例,胫骨近端6例,股骨干4例;采用多次自体骨髓血注射治疗。弹性髓内针组28例,男18例,女10例;年龄(7.5±2.2)岁;肱骨近端11例,股骨近端7例,胫骨近端5例,股骨干4例,股骨远端1例;采用弹性髓内针支撑引流治疗。术后采用Capanna骨囊肿评价标准评价治疗效果。结果:56例患儿均获得随访,其中弹性髓内针组随访时间17~35(25.6±4.2)个月,自体骨髓血注射组19~35(27.4±4.8)个月。按照Capanna的骨囊肿评价标准,弹性髓内针组27例治疗有效(25例治愈,2例愈合但残留部分病灶),1例复发,0例治疗无反应;自体骨髓血注射组中18例治疗有效(13例治愈,5例愈合但残留部分病灶),8例复发,2例治疗无反应;两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。通过对两组患儿中完全治愈病例,弹性髓内针组(25例)和自体骨髓血注射组(13例)随访计算整体治愈时间,弹性髓内针组患儿治愈时间(20.2±3.5)个月,自体骨髓血注射组治愈时间(27.7±4.9)个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对于儿童骨囊肿的治疗,弹性髓内针治疗疗效优于自体骨髓血注射,并且治愈时间更短。

129例小儿贫血患者骨髓细胞学检查结果分析

目的 探讨小儿贫血患者发病年龄、贫血性疾病类别之间存在的差异。方法 回顾性分析 1995年 3月～ 2 0 0 2年 10月期间 ,临床上表现为贫血的小儿患者 12 9例 (血液常规检查显示 :血红蛋白 <10 0g/L)骨髓穿刺细胞学检查结果。结果 小儿贫血患者无年龄差异性并且以急性白血病 (AL)、再生障碍性贫血 (AA)、原发性血小板减少型紫癜 (ITP)的发病率较高。结论 对临床上表现为贫血 ,并且伴有发热、脾脏或淋巴结肿大的患者要进行骨髓穿刺细胞学检查 ,查找贫血原因、确定贫血类型、排除或确诊恶性血液系统疾病 ,做到早期对症治疗。

正常儿童股骨骨髓MRI信号的转换

目的了解正常儿童股骨骨髓的MRI信号转化特点,为诊断骨髓病变提供帮助.方法将34例14个月～14岁儿童分三组,A组（14个月～4岁）11例,B组（5～9岁）11例,C组（10～14岁）12例.对股骨行冠状位T1WI及STIR序列扫描,测量近侧干骺端（PM）、骨干（D）、远侧干骺端（DM）及大腿肌肉（M）的信号强度,并计算PM/M,D/M及DM/M值.结果 T1WI A组的PM/M明显低于D/M及DM/M,D/M与DM/M无显著差异;B、C组的PM/M与DM/M均低于同组D/M,而PM/M与DM/M间无显著差异;B、C组的各部位信号均显著高于A组,而B、C两组间无显著差异.STIR序列中A、B两组内各部位间骨髓信号无显著差异,只有C组的PM/M明显高于D/M及DM/M;A组的D/M明显高于B组及C组,而PM/M及DM/M在三组间均无显著差异.结论 14个月～4岁儿童的近侧干骺端脂肪含量明显少于远侧干骺端及骨干;5～14岁儿童近侧干骺端和远侧干骺端的脂肪含量仍少于骨干,9岁后股骨各部位脂肪化速度减慢;14个月～14岁儿童股骨各部位骨髓脂肪化顺序由先到后依次为骨干、远侧干骺端及近侧干骺端;T1WI较STIR序列能更敏感地显示正常儿童股骨骨髓信号的变化.

儿童急性淋巴细胞白血病骨髓细胞形态学检查多中心综合比较及评价

目的比较中国儿童白血病协作组(CCLG)成员医院儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)骨髓细胞形态学诊断综合水平,评价并规范细胞形态学检验方法、专业术语使用,同时提高检验人员骨髓细胞形态识别能力。方法随机抽取CCLG成员医院入组的ALL患儿110例,由成员医院提供上述患儿的初诊、治疗第15天、第33天以及第12周骨髓细胞涂片,共440份。将所有骨髓细胞涂片随机发放给2名专职从事骨髓细胞形态检验的中级职称技术人员进行复检,复检报告由血液专业临床医师与原始检验报告进行比对、分析,并提供书面意见。结果在取材情况及骨髓增生程度方面,共有427份(97.0%)骨髓细胞涂片的复检报告与原始报告判断基本吻合,有13份(3.0%)骨髓细胞涂片的复检报告判断骨髓稀释,故未描述增生程度,而原始报告判断骨髓取材良好,并描述骨髓增生减低。在染色程度方面,共有428份(97.3%)骨髓细胞涂片的复检报告与原始报告判断相符,有12份(2.7%)涂片的复检报告描述涂片染色偏浅或偏深,而原始报告均描述染色良好。原始报告及复检报告在描述骨髓像特点时均存在术语使用不规范,中、英文混用,使用不规范的缩略语或英文缩写等现象。在检验结论方面,除13份骨髓细胞涂片取材情况存在异议,造成检验结论不一致外,其余427份(97.0%)复检报告与原始报告基本吻合。结论多中心儿童ALL骨髓细胞涂片进行比对分析,对提高CCLG成员医院骨髓细胞形态学诊断总体水平有重要的作用和意义。同时为建立规范的细胞形态学检验模式,统一专业术语,提高检验报告互认程度也是一次必要的尝试和探索。

再生障碍性贫血患儿骨髓间充质干细胞分离及培养

目的分离再生障碍性贫血(再障)患儿骨髓间充质干细胞,进行体外培养,为进一步研究打下实验基础。方法从再障患儿及正常志愿者骨髓中分离骨髓间充质干细胞,进行体外培养,诱导向成骨细胞、成脂细胞分化和流式细胞仪检测表面标志CD34、CD45、CD73和CD90。绘制生长曲线描述原代和传代细胞生长情况。结果分离的贴壁细胞经向成骨细胞和脂肪细胞分化诱导培养,分别显示茜素红染色和油红染色阳性;CD73和CD90阳性。生长曲线显示,与正常志愿者相比再障患儿体外培养的骨髓间充质干细胞传代培养中生长能力减低。结论再障患儿骨髓间充质干细胞存在异常,可能在再障发病机制中起着重要作用。

小儿急性淋巴细胞白血病骨髓巨核细胞的观察

报告 6 7例小儿急性淋巴细胞白血病 (以下简称急淋 )骨髓中巨核细胞的变化 ,有 16 4 %的患儿巨核细胞数量正常和增高 ,其中幼稚型巨核细胞比例增高 ,颗粒型阶段明显增高 ,产板型阶段明显减少 ,同时伴有巨核细胞形态学改变。骨髓及外周血片上血小板分布以罕见及少见为主。

儿童骨髓间充质干细胞体外培养与富集效率的研究

目的比较密度梯度离心法和全骨髓培养法分离培养儿童骨髓间充质干细胞(BMSCs)获得的细胞纯度与克隆形成效率。方法取等量抗凝的儿童骨髓分别以密度梯度离心法和全骨髓培养法分离培养BMSCs,传代至第3代分别计数2种方法所得BMSCs的细胞总数,流式细胞仪检测表面标记物及其纯度,对第5代BMSCs分别绘制生长曲线,全骨髓培养法培养至第6代流式细胞仪再检测表面标记物及其纯度。结果2种方法均能有效培养出BMSCs,BMSCs强表达CD105及CD13,低表达CD34;3mL骨髓样本用全骨髓培养法扩增至第3代平均可获得3.15×107个细胞,而密度梯度离心法3mL骨髓只获得1.08×107个细胞,二者有显著性差异(P<0.05);密度梯度离心法第3代BMSCs纯度达95%以上,全骨髓培养法第3代BMSCs纯度约85%,多次换液传至第6代纯度可达到95%以上;2种方法第5代BMSCs生长曲线近似,接种后0～3d为生长潜伏期,3～6d为对数生长期,之后进入平台期,无显著性差异(P>0.05)。结论密度梯度离心法分离培养BMSCs,可在短时间内获取纯度较高的BMSCs;全骨髓培养法分离培养BMSCs,可从少量标本获得最大数量的BMSCs,多次换液传代也可获得纯度较高的BMSCs。

急性白血病儿童骨髓间充质干细胞的生物学特点的初步研究

本研究探讨密度梯度离心法加贴壁法方式培养白血病儿童骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的条件并观察其体外增殖能力、生长曲线、多向分化等生物学特性。通过密度梯度离心、贴壁法分离白血病患儿的MSC,观察细胞的形态变化及生长曲线、流式细胞术测定其CD29、CD105、CD45、CD34、CD14、HLA-DR等表达,通过成脂、成骨诱导研究其多向分化能力。结果表明:密度梯度离心法联合贴壁法可以培养出白血病儿童骨髓来源的MSC,初诊白血病儿童骨髓来源的MSC培养成功率为57.1%,缓解白血病儿童骨髓来源的MSC成功率为41.2%,接种密度越大成功率越高,初诊白血病儿童的MSC形成集落数目较多且生长较快。形态学观察显示,骨髓间充质干细胞接种24小时即贴壁,呈集落生长,形态多样;3天后贴壁细胞增殖,逐渐以梭形细胞为主;2-3周细胞基本达80%-90%融合,第3代后细胞呈均匀一致的长梭形。细胞传代后3天内处于潜伏期,3天后进入生长期,8天后进入平台期。检测第2代后细胞免疫表型显示,MSC的CD29、CD105表达率达95%以上,CD45、CD34、CD14、HLA-DR极低表达或不表达。MSC能成功诱导成脂肪细胞及成骨细胞,油红O染色和茜素红染色为阳性。在合适的条件下冻存对细胞影响不大。结论:①白血病患儿骨髓培养出的贴壁细胞是MSC,骨髓含量在1ml以上且方法得当可以培养出MSC;②初诊的白血病患儿的骨髓相对容易培养出骨髓间充质干细胞,形成的集落较缓解期白血病患儿多,增长速度较快;③白血病儿童来源的MSC具有MSC的共同生物学特性。

弥漫性骨髓疾病的MRI诊断（附22例分析）

本文分析了２２例经骨髓穿刺证实的弥漫性骨髓疾病的ＭＲＩ表现。其中儿童急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）１６例，成人髓细胞性白血病１例，神经母细胞瘤骨髓转移２例，多发性骨髓瘤２例，高雪氏病１例。对１６例ＡＬＬ进行了定量研究（Ｔ１和Ｔ２值测定）。对上述各种疾病的病理改变及ＭＲＩ表现进行了讨论。结果表明ＭＲＩ对评价弥漫性骨髓疾病具有重要临床价值。

异基因造血干细胞移植治疗粘多糖贮积症患儿的护理

目的总结行造血干细胞移植治疗的粘多糖贮积症患儿的护理经验。方法选取2015年10月-2016年10月我科收治并进行造血干细胞移植治疗的粘多糖贮积症患儿6例,予口腔黏膜炎的护理、安全护理、心理护理及健康教育。结果 6例粘多糖贮积症患儿均成功进行造血干细胞移植,于移植后平均(12±2)d中性粒细胞开始重建,平均(15±2)d时顺利出仓。结论积极有效的护理,有助于减少异基因干细胞造血干细胞移植治疗粘多糖病患儿的感染等并发症,从而促使造血干细胞移植顺利进行及预后的改善。

儿童骨髓基质细胞系免疫细胞化学初步研究

目的 了解儿童骨髓基质细胞的起源、组成及传代过程中的细胞骨架。方法 采用体外培养和免疫细胞化学染色技术 ,观察波形纤维蛋白 (Vimentin)、结蛋白 (Desmin)、α -平滑肌肌动蛋白 (α -SmoothMuscleActin)和VIII因子相关抗原 (VonWillebrandFactor)在儿童骨髓基质细胞系中的表达。结果 Vimentin在原贴壁基质细胞系由原代传至 5代的细胞中 ,其表达逐渐下降 ,而在再贴壁基质细胞传至第 3代中表达最高 ;Desmin、α -SmoothMuscleActin单克隆抗体和VonWillebrandFactor抗体染色呈阴性。结论 本结果提示本文中骨髓基质细胞来源于间充质 ,Vimentin的表达与细胞的分化、增殖有关 ,体外培养时骨髓基质细胞的组成、分化可能与培养条件有关。

应用小儿头皮针进行小儿胸骨骨髓穿刺36例

[背景 ]探讨小儿行胸骨骨髓穿刺时用头皮针代替传统骨髓穿刺针的优点 .[病例报告 ]用头皮针从 36例小儿胸骨中获取骨髓液 .[讨论 ]用头皮针行小儿胸骨骨髓穿刺的方法简单、安全、成功率高 .

骨髓细胞染色体核型分析对儿童MDS诊断的意义

目的对1例临床怀疑为骨髓增生异常综合征的女性儿童进行骨髓细胞染色体核型分析,以帮助对患儿进行确诊。方法抽取临床怀疑为骨髓增生异常综合征患儿的外周血和骨髓,对外周血淋巴细胞和骨髓细胞分别进行培养,然后进行染色体核型分析。结果患儿外周血淋巴细胞的核型均为46,XX;而骨髓细胞的核型为46,XX/47,XX+8,其中核型为46,XX的细胞占54%,核型为47,XX+8的细胞占46%。结论结合患儿的临床资料和骨髓细胞的核型分析结果,依据WHO关于儿童骨髓增生异常综合征诊断分型标准,该女性患儿可诊断为骨髓增生异常综合征。

急性白血病病儿骨髓抑制期红细胞指数的变化及意义

①目的 探讨红细胞指数对急性白血病病儿骨髓抑制期的诊断价值。②方法 应用cell DYN16 0 0血细胞自动计数仪分析外周血平均红细胞体积 (MCV)、平均红细胞血红蛋白含量 (MCH)及平均红细胞血红蛋白浓度 (MCHC)。③结果 急性白血病病儿骨髓抑制期MCV ,MCH和MCHC明显高于骨髓恢复期 ,差异有显著性(t=16 .5 7,P <0 .0 0 1;t=2 .0 7,2 .88,P <0 .0 5 ) ;而血红蛋白则明显低于恢复期 (t =2 7.0 1,P <0 .0 0 1)。④结论MCV的升高可作为判断骨髓是否处于抑制期的有效指标之一。