高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷的含量

目的建立同时测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素含量的高效液相色谱法。方法采用VP-ODSC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脱;流速:1.0mL/min;检测波长:278nm。结果绿原酸在0.44～6.60μg范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率为97.0%;黄芩苷在0.52～6.18μg范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率为98.98%;连翘苷在0.20～2.04μg范围内线性关系良好(r=0.9993),平均回收率为103.55%;汉黄芩素在0.13～1.76μg范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率为96.49%。结论本方法简便可行、准确、快速,可用于双黄连口服液中上述4种成分的含量测定。

HPLC法同时测定茵山莲颗粒中绿原酸和原儿茶酸的含量

目的建立同时测定茵山莲颗粒中绿原酸和原儿茶酸含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为DiamonsiL C18柱（4．6mm×200mm，5μm），流动相为乙腈-质量分数为0．2％的磷酸水溶液（体积比10：90），流速为1．0mL·min^-1，柱温为30℃，检测波长为285nm，进样量为20μL。结果绿原酸与原儿茶酸质量浓度分别在4．80～43．2mg·L^-1、4．08～36．7mg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率分别为101．8％（RSD=1．0％，n=9）和98．5％（RSD=1．4％，n=9）。结论该方法操作简便准确，重复性好，可作为茵山莲颗粒质量控制方法之一。

植物活性成分对细胞存活率的影响及其测定方法的比较研究

选用植物活性物质单体白藜芦醇和绿原酸作用于中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,采用MTS法、WST-1法、CCK-8法、XTT法和MTT法测定细胞存活率,并将MTS法、WST-1法、CCK-8法、XTT法这4种方法与传统的MTT法进行比较分析,从中选出最佳的检测方法;通过IC50值比较白藜芦醇和绿原酸毒性大小。结果显示:CCK-8法所得结果稳定,且与MTT法所测得的IC50值最接近,为最佳选择;WST-1法的实验可重复性较差,结果偏小;XTT法是4种方法中最不稳定的,作用时间、检测波长最难确定,且实验重复性差。CCK-8法、MTS法、WST-1法、XTT法和MTT法测定所得白藜芦醇的IC50值分别是116.86、124.68、64.90、162.86、86.30μmol/L;绿原酸的IC50值分别为2808.60、1119.96、1029.72、1325.43、2852.63μmol/L,同种方法下绿原酸的IC50值均高于白藜芦醇的IC50值。结论是测定植物活性成分对细胞存活率影响的方法以CCK-8为最好。白藜芦醇对CHO细胞的毒性比绿原酸大。

超高效液相色谱-紫外检测法快速同时测定烟丝中的多酚

建立了超高效液相色谱(UPLC)-紫外检测法同时快速测定烟丝中的绿原酸、芸香苷和莨菪亭。采用1%的乙酸水溶液对烟丝进行超声提取后,经0.2μm滤膜过滤直接进行UPLC分析。利用PDA检测器分别对绿原酸、芸香苷和莨菪亭进行定性定量。相对标准偏差为2.57%～4.57%,回收率为87.29%～91.67%。该法具有前处理简便、分析时间短、重现性好等优点,适合卷烟烟丝多酚类物质的批量快速检测。

膜技术分离纯化绿原酸提取液的研究

本实验研究了膜技术分离纯化绿原酸提取液的过程。首先,以透水通量为指标,比较了两种微滤膜MF1和MF2、两种超滤膜UF1和UF2及两种纳滤膜NF1和NF2对绿原酸提取液的过滤特性。结果表明,MF2膜的通量可高达167.7kg/h,UF2膜的通量可达148.8kg/h和NF2膜的通量可达109.8kg/h,分别明显高于MF1(103.6kg/h)、UF1(48.0kg/h)和NF1(45.6kg/h);其次,研究了浓缩液的水洗对绿原酸截留率的影响。结果表明,经一次水洗后,MF2膜的截留率可由12.5%降低到3.4%,UF2膜的截留率可由15%降低到8%;最后,分析了膜分离过程中各物料的成分。结果表明,纳滤浓缩液含绿原酸为17964mg/L,比原提取液提高了24.8倍,绿原酸的纯度由2.8%上升到27%。

藏药独一味中30种化学成分的UPLC-ESI-TOFMS分析鉴定

目的:建立快速高效的方法,对藏药独一味的化学成分进行有效的鉴定,为该药材质量监督提供技术支持。方法:采用超高效液相-电喷雾-飞行时间质谱(UPLC-ESI-TOF MS)联用技术,色谱分离用ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相组成比例分别为0.05%甲酸水和乙腈,梯度洗脱,流速0.3 m L·min-1,进样量1μL;质谱定性采用飞行时间质谱,正离子模式扫描。结果:在优化的液质联用条件下,通过电喷雾-飞行时间质谱鉴定出独一味30个成分,分别为(1)phlomiol;(2)lamalbid;(3)phlorigidoside C;(4)胡麻属苷;(5)山栀苷甲酯;(6)5-羟基马钱苷;(7)vanillyl-O-β-D-葡萄糖苷;(8)绿原酸;(9)6-O-乙酰山栀苷甲酯;(10)cistanoside E;(11)7,8-dehydropenstemoside;(12)chlorotuberoside;(13)7-epi-loganin;(14)7-dehydroxy-2-zaluzioside;(15)马钱苷;(16)连翘酯苷B;(17)8-O-乙酰山栀苷甲酯;(18)芦丁;(19)木犀草苷;(20)毛蕊花糖苷;(21)木犀草素-7-O-β-D-呋喃芹糖基(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷;(22)salviifoside A;(23)8-epi-7-deoxyloganin;(24)异类叶升麻苷;(25)芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷;(26)6β-n-butoxy-7,8-dehydropenstemonoside;(27)芹菜素;(28)6-O-syringyl-barlerin;(29)木犀草素;(30)槲皮素。结论:通过UPLC-ESI-TOF MS联用技术,阐明了独一味的化学成分,为独一味及其制剂的质量控制和监管提供了科学依据;同时,为其他藏药的化学成分快速分析提供参考。

杜仲叶中总黄酮检测方法的改进研究

黄酮是杜仲叶中的一种活性成分,NaNO2-A(lNO3)3法作为总黄酮检测中普遍使用的方法从20世纪90年代沿用至今,但由于绿原酸的干扰,使得采用该法检测富含绿原酸原料中的总黄酮含量,检测结果往往偏高或不真实。本文考察了采用NaNO2-A(lNO3)3法绿原酸对总黄酮的检测结果的干扰,并找到适用于富含绿原酸的原料中总黄酮化合物的检测方法。通过比较和分析确定以ZrOCl2作为显色剂采用分光光度法对杜仲叶中总黄酮含量进行检测,确定了优化检测条件:2%ZrOCl2甲醇溶液2 mL,醋酸-醋酸钠缓冲液添加量1 mL,放置时间70 min,在440 nm波长处检测。在1.25μg/mL^20μg/mL范围内,芦丁浓度与吸光度呈良好线性关系,回归方程为y=0.033 6x+0.001 9,相关系数R2=0.999 4,精密度实验RSD值为1.587%,样品平均加标回收率为101.63%。

正交试验优化纤维素酶法提取牛蒡根皮中绿原酸工艺

目的:研究纤维素酶法提取牛蒡根皮中绿原酸的提取工艺。方法:通过单因素试验探讨纤维素酶用量、料液比、酶解温度、酶解时间、pH值对绿原酸提取率的影响,并通过正交试验对影响绿原酸提取率的参数进行优化。结果表明牛蒡根皮中绿原酸提取的最佳工艺条件为纤维素酶用量4mL、酶解温度60℃、酶解时间1.5h、pH6.0、料液比1:20,此条件下绿原酸提取率为1.45%。

甘薯叶绿原酸的微波协同双水相提取及其抗氧化活性

采用微波辅助乙醇-磷酸氢二钾双水相的方法对甘薯叶中绿原酸进行提取,探讨了双水相体系的磷酸氢二钾用量、乙醇体积分数、液料比、提取时间和微波功率等因素对绿原酸提取的影响,并采用正交实验法进行优化。并以对照物VC作比较,通过清除DPPH·的能力对甘薯叶绿原酸粗提液抗氧化活性进行评价。实验结果表明:以40%乙醇溶液、磷酸氢二钾质量浓度100 mg/mL组合的乙醇-磷酸氢二钾双水相萃取体系,微波提取时间75 s、液料比100∶1(V/m)、微波功率为320 W等条件下,绿原酸得率可达(3.72±0.036)%。甘薯叶绿原酸粗提液清除DPPH·的能力强于对照物VC。本实验优化甘薯叶绿原酸的提取工艺参数准确可靠、稳定、可行,所提取的甘薯叶绿原酸纯度高、抗氧化活性较好,为甘薯叶的进一步资源化开发利用提供了参考。

毛药忍冬花蕾抗氧化活性部位化学成分研究

毛药忍冬(Lonicera serreana)为忍冬属(Lonicera)植物,其花和果实人药,具有清热解毒、凉散风热之功效,但至今缺乏系统化学成分及药理活性研究。为了寻找毛药忍冬中天然抗氧化活性成分,进一步开发利用忍冬属药用植物资源,该研究以DPPH自由基清除法为活性指导,首次对毛药忍冬干燥花蕾75%乙醇提取物的不同极性萃取部位进行抗氧化活性测试,结果发现乙酸乙酯萃取物表现出最强的抗氧化活性(平均清除率为89.45%)。进一步应用现代色谱手段(硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等),从毛药忍冬花蕾的乙酸乙酯萃取物中分离单体化合物,运用现代光谱分析技术(MS、~1H NMR、^(13)C-NMR、COSY、HSQC、HMBC、ROESY),并结合文献数据鉴定化合物的化学结构。结果表明:从毛药忍冬干燥花蕾75%乙醇提取物中共分离得到9个化合物,分别鉴定为4个酚酸类化合物:绿原酸(1)、绿原酸甲酯(2)、绿原酸乙酯(3)、咖啡酸(4);4个黄酮类化合物:木犀草素(5)、木犀草素7-O-β-D葡萄糖苷(6)、槲皮素(7)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(8);1个甾醇类化合物:β-谷甾醇(9)。所有化合物均为从毛药忍冬花蕾中首次分离得到。研究结果可为抗氧化类相关产品的开发提供科学依据。

高效液相色谱法测定甘薯叶中绿原酸含量

为准确测定甘薯叶中绿原酸含量,通过摸索流动相、洗脱方式、保留时间和速度等条件,建立了测定甘薯叶中绿原酸含量的高效液相色谱方法.采用色谱柱Lichrospher5-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以A(水∶乙腈∶冰醋酸=980∶20∶5),B(乙腈∶冰醋酸=1 000∶5)为流动相,线性梯度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长324 nm.结果表明,绿原酸在5～100μg/mL时,绿原酸质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为y=195.47x+144.29(r=0.999 1),平均回收率可达93.1%.

指数方程法快速测定金银花提取液中绿原酸的含量

目的:建立金银花提取液中绿原酸的快速稳定的定量方法。方法:采用反相高效液相色谱法测定金银花提取液中绿原酸的含量,同时测定对应样品的紫外光谱,选取指数方程:Y=a+bX^C+ε。依据紫外吸收度和 HPLC 法测得的绿原酸含量相关性最佳的原则,建立预测绿原酸含量的指数方程,并对预测结果进行检验。结果:以 HPLC 法测得的绿原酸含量和金银花提取液在200～400 nm 范围内201个波长点吸收度值的平均值进行相关分析,所得绿原酸含量的预测方程为 C=-0.0424+2.9712A^(1.15)(r=0.9816,n=19),固定指数参数 C=1.15,以 HPLC 法测得的绿原酸含量与相关性最佳的波长点进行相关分析,所得绿原酸含量的预测方程为 C=0.0317+2.4286(A_(304nm))^(1.15)(r=0.9566,n=19);2个方程所得到的绿原酸含量的预测值与测定值之间均具有良好的相关性,其相关系数分别为0.9888(n=10)和0.9908(n=10)。结论:本方法所建立的指数方程预测金银花提取液中绿原酸含量准确、快速,可为制药过程中金银花提取液的快速质量控制提供方法。

葵花籽粕中绿原酸提取工艺的研究进展

葵花籽粕中提取绿原酸的工艺已有不少研究。文章综合分析了葵花籽粕中绿原酸提取的不同方法,为葵花籽粕资源的充分综合利用和产业化开发提供参考。

膜技术分离回收金银花蒸馏残渣中绿原酸的流程分析

对膜技术分离回收金银花蒸馏残渣中绿原酸的过程进行分析研究。结果表明,MF2膜的通量可高达167.7 kg.h-1,UF2膜的通量可达148.8 kg·h-1和NF2(500)膜的通量可达109.8 kg·h-1,分别明显高于MF1(103.6 kg·h-1)、UF1(48.0 kg·h-1)和NF1(45.6 kg·h-1);其次,研究了浓缩液的水洗对绿原酸截留率的影响,结果表明,经一次水洗后,MF2膜的截留率可由12.5%降低到3.4%,UF2膜的截留率可由15%降低到8%;最后,分析了膜分离过程中各物料的成分,结果表明,纳滤浓缩液含绿原酸为17 964 mg·L-1,比原提取液提高了24.8倍,绿原酸的纯度由2.8%上升到27.0%。

HPLC法同时测定不同产地杜仲雄花茶中3种活性成分含量

[目的]建立高效液相色谱法多波长同时测定不同产地杜仲雄花茶中桃叶珊瑚苷、绿原酸和京尼平苷3种活性成分含量。[方法]采用Thermal Hypersil BDS C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.3%磷酸溶液梯度洗脱;流速1.0 mL/min;柱温26℃;多波长检测206、238、327 nm。[结果]桃叶珊瑚苷、绿原酸和京尼平苷均在测定范围内呈良好的线性关系(r≥0.999 1)。同一时期内采集,不同产地的杜仲雄花茶因环境的影响,桃叶珊瑚苷、绿原酸和京尼平苷的含量差异较大。[结论]所建方法简便快捷、重现性好,可用于杜仲雄花茶桃叶珊瑚苷、绿原酸及京尼平苷的测定。

昆仑雪菊中原花青素B_2、绿原酸含量测定及对小鼠血糖的影响

目的:明确昆仑雪菊中原花青素B_2和绿原酸的含量,探讨昆仑雪菊对高脂饮食2型糖尿病小鼠血糖的影响。方法:采用RP-HPLC法,以流动相乙腈-0. 01%磷酸溶液,检测波长315 nm,流速1 mL/min测定昆仑雪菊中原花青素B_2和绿原酸的含量。将昆明种小鼠60只随机分为对照组、模型组、阳性组及昆仑雪菊高(4g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)剂量组,对照组与模型组给予等容量生理盐水,其余各组灌胃给予相应药物,连续14天。在造模前后以及给药后7天和14天测定各组小鼠血糖值,并观察小鼠体质量和超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量。结果:昆仑雪菊中原花青素B_2和绿原酸的含量分别为0. 016、1. 683 mg/g。昆仑雪菊能明显升高糖尿病模型小鼠体质量(P<0. 05),降低糖尿病模型小鼠血糖(P<0. 05),升高糖尿病模型小鼠SOD的活力,降低MDA含量。结论:昆仑雪菊对高脂饮食2型糖尿病小鼠有一定保护作用,其有效成分可能是原花青素B2和绿原酸。

金银花中提取绿原酸的研究

文章以绿原酸的粗提取率为指标,实验研究了乙醇作为提取剂,用索氏提取法,从乙醇体积浓度,提取溶剂的pH和虹吸次数这三个因素通过单因素和正交实验讨论提取绿原酸最佳条件。经过试验表明,乙醇的体积浓为70%,pH为4,虹吸次数为5,效果最佳;而利用超声波辅助提取绿原酸,超声波时间为0.5 h,绿原酸的粗产率较高。抑菌试验发现,绿原酸对金黄色葡萄球菌与黑曲霉具有一定的抑菌作用,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好。

正交试验法优选金银花中绿原酸的提取工艺

目的:优选金银花中绿原酸的提取工艺。方法:采用正交试验,以紫外分光光度法测定提取物中绿原酸的含量。结果:对绿原酸提取结果影响因素的大小排序为:加水量>浸泡时间>浸泡温度>提取时间,筛选的最佳提取工艺为:浸泡温度为60℃,浸泡时间为0.5 h,加水量20+18倍,提取时间1+0.5 h。结论:优选的提取工艺经济、简便,绿原酸提取效率高。

HPLC法测定牛蒡中牛蒡子苷、牛蒡子苷元、绿原酸的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定牛蒡中牛蒡子苷、牛蒡子苷元、绿原酸含量的方法,比较3种成分在不同部位以及牛蒡子不同炒制时间的含量。方法:采用Welchrom C_(18)柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱;流速为1.0m L/min;检测波长为280nm;柱温为30℃。结果:3种成分的进样量分别在4.2844~51.4128μg,0.3254~3.9048μg,0.3072~3.6864μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.64%,100.81%,97.92%,RSD值均小于1.5%;牛蒡叶和牛蒡根中几乎没有牛蒡子苷和牛蒡子苷元;牛蒡子所有炒制品与生品比较,三者的总含量均下降,炒制时间从10~40min时,牛蒡子苷、绿原酸的含量下降,牛蒡子苷元的含量增加。结论:该方法简便、准确,精密度、重复性良好,可为牛蒡子质量控制提供依据,不同部位、炒制时间结果可以为牛蒡综合开发提供依据。

超声强化超临界CO_2萃取葵粕绿原酸工艺

绿原酸具有抗氧化、清除自由基、抑制突变与抗肿瘤等生理活性。考察了萃取温度、压力、时间、流体流量和超声功率密度对超声超临界CO2萃取绿原酸的影响,结果表明,超声波的加入可以缩短超临界CO2萃取时间、降低CO2流量和提高萃取率。工艺优化后的条件为:70%乙醇加入量为400mL/100g原料,萃取温度、压力、时间、CO2流量分别为50℃、30MPa、3.5h、3.0L/h,超声频率和功率密度分别为20kHz、100W/L。优化条件下绿原酸的萃取率达4.71%