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短链脱氢酶Lvchun的分子改造及其在氯霉胺合成中的应用
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作者 韩惠 张舰 任宇红 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期81-92,共12页
2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇俗称氯霉胺(ANP),由于具有两个手性中心,且结构中的O原子和N原子有良好的配位能力,具有广泛的应用价值。针对化学合成法存在生产成本高、原子经济性低、环保压力大等诸多缺点,旨在通过化学水解法与生... 2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇俗称氯霉胺(ANP),由于具有两个手性中心,且结构中的O原子和N原子有良好的配位能力,具有广泛的应用价值。针对化学合成法存在生产成本高、原子经济性低、环保压力大等诸多缺点,旨在通过化学水解法与生物催化法相结合的方式,构建以对硝基-α-乙酰氨基-β-羟基苯丙酮(p-NAH)为底物合成(1R)-ANP的新途径。首先采用化学法水解p-NAH制备1-(4-硝基苯基)-2-氨基-3-羟基苯丙酮(AHNA),并筛选对水解产物具有催化活性的羰基还原酶,通过分子改造提高该酶的催化活性,并对突变体mut-V112Y的酶学性质进行研究;然后构建mut-V112Y与甲酸脱氢酶的双酶共表达及融合表达重组菌株,并对重组菌株的催化效率进行比较;最后优化催化反应条件,并进行制备反应。结果表明,化学法可水解p-NAH生成AHNA,筛选到的短链脱氢酶Lvchun可催化AHNA生成(1R)-ANP,通过对该酶进行定点突变获得了催化效率提高3.47倍的突变体mut-V112Y,其最适温度为30℃,最适pH为7.5,具有良好的温度和pH稳定性。成功构建了mut-V112Y和甲酸脱氢酶CbFDH的双酶共表达和融合表达重组菌株,通过比较发现共表达菌株mut-V112Y-CbFDH的催化效率最高。通过优化催化反应条件,最终可在最适条件下反应30 min催化50 mmol/L AHNA生成14.56 mmol/L(1R)-ANP,收率为29.12%。化学水解法与生物催化法相结合的方式可有效地催化p-NAH合成(1R)-ANP,该方法为合成光学纯的ANP提供了新途径。 展开更多
关键词 氯霉胺 短链脱氢酶 分子改造 定点突变 甲酸脱氢酶 双酶共表达
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海带基因工程选择标记的研究 被引量:28
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作者 武建秋 王希华 +1 位作者 秦松 曾呈奎 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期42-45,共4页
海带幼孢子体对抗生素的敏感性实验证明,氯霉素可以作为海带基因工 程中较理想的选择压力。本文得出了氯霉素对海带的半致死剂量,提示 CAT(氯霉 素乙酸转移酶)基因可以用作海带基因工程的阳性选择标记基因。
关键词 海带 基因工程 选择标记 抗生素 氯霉素
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HPLC同时测定护肤粉刺霜中4种有效成分的含量 被引量:15
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作者 原永芳 石力夫 +1 位作者 郑晓梅 苑锦英 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第1期42-44,共3页
目的:测定护肤粉刺霜中甲硝唑、氯霉素、地塞米松磷酸钠及维生素A酸的含量。方法:高效液相色谱法,以氢化可的松为内标,NovaPakC18柱,甲醇水为流动相;变换检测波长;梯度洗脱。结果:一次进样即可完成4种化学性质... 目的:测定护肤粉刺霜中甲硝唑、氯霉素、地塞米松磷酸钠及维生素A酸的含量。方法:高效液相色谱法,以氢化可的松为内标,NovaPakC18柱,甲醇水为流动相;变换检测波长;梯度洗脱。结果:一次进样即可完成4种化学性质不同组分的含量分析。甲硝唑6.046μg·ml-1~66.51μg·ml-1,氯霉素5.872μg·ml-1~64.59μg·ml-1,地塞米松磷酸钠0.6022μg·ml-1~6.624μg·ml-1,维生素A酸0.4654μg·ml-1~5.119μg·ml-1范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系;平均回收率依次为96.51%,RSD=1.3%;98.74%,RSD=0.9%,96.03%,RSD=1.7%,97.61%,1.9%。结论:方法简便、快速、准确,可作为样品的检测方法。 展开更多
关键词 甲硝唑 氯霉素 地塞米松 HPLC 护肤粉刺霜
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超声波法制备氯霉素泼尼松搽剂 被引量:9
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作者 常明泉 陈芳 +2 位作者 吕明 程晓莉 郝新才 《医药导报》 CAS 2009年第3期347-349,共3页
目的对氯霉素泼尼松搽剂制备工艺及处方进行优化选择,并建立该制剂质量标准。方法通过处方及工艺优化确定制备工艺,用高效液相色谱(HPLC)法对泼尼松和氯霉素进行定量研究。结果节约无水乙醇用量30%,制备时间相应缩短。氯霉素与泼... 目的对氯霉素泼尼松搽剂制备工艺及处方进行优化选择,并建立该制剂质量标准。方法通过处方及工艺优化确定制备工艺,用高效液相色谱(HPLC)法对泼尼松和氯霉素进行定量研究。结果节约无水乙醇用量30%,制备时间相应缩短。氯霉素与泼尼松检测浓度分别在0.30~1.50mg·mL^-1、0.02~0.10mg·mL^-1范围内线性关系良好,氯霉素和泼尼松的平均回收率分别为100.65%和101.71%。结论超声波法制备氯霉素泼尼松搽剂工艺合理,生产成本低,成品质量稳定可控。 展开更多
关键词 超声波 色谱法 高效液相 泼尼松 氯霉素 含量测定
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坛紫菜叶状体体细胞对抗生素敏感性的研究 被引量:6
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作者 赵扬 李秀 +3 位作者 左正宏 王诚 王重刚 陈奕欣 《台湾海峡》 CAS CSCD 2004年第4期496-499,共4页
坛紫菜(Porphyrahaitanensis)叶状体体细胞对氨苄青霉素有很强的耐受性,但氨苄青霉素对体细胞分裂、分化具有明显的抑制作用,导致更多的体细胞分化形成细胞团,并能抑制叶状体假根的形成.坛紫菜叶状体体细胞对氯霉素敏感,100μg/cm3和800... 坛紫菜(Porphyrahaitanensis)叶状体体细胞对氨苄青霉素有很强的耐受性,但氨苄青霉素对体细胞分裂、分化具有明显的抑制作用,导致更多的体细胞分化形成细胞团,并能抑制叶状体假根的形成.坛紫菜叶状体体细胞对氯霉素敏感,100μg/cm3和800μg/cm3组的体细胞分别于培养的12、10d全部死亡.本试验结果初步表明,氯霉素可作为坛紫菜基因工程的有效选择压力. 展开更多
关键词 坛紫菜 体细胞 菜叶 叶状体 抗生素敏感性 氯霉素 分化 氨苄青霉素 耐受性 细胞团
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杜氏盐藻基因工程选择标记的研究 被引量:23
6
作者 耿德贵 王义琴 +1 位作者 李文彬 孙勇如 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第5期1-2,共2页
研究了杜氏盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素、G4 18和氯霉素 5种常用抗生素的敏感性。结果表明 ,经 4周培养 ,盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素和G4 18不敏感 ,浓度高达 6 0 0 μg/ml时 ,也不能抑制盐藻生长。对氯霉素很敏感 ,6 0 μg/m... 研究了杜氏盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素、G4 18和氯霉素 5种常用抗生素的敏感性。结果表明 ,经 4周培养 ,盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素和G4 18不敏感 ,浓度高达 6 0 0 μg/ml时 ,也不能抑制盐藻生长。对氯霉素很敏感 ,6 0 μg/ml即可完全抑制固体和液体培养中盐藻的生长。氯霉素适合作为盐藻基因工程的筛选抗生素 。 展开更多
关键词 杜氏盐藻 基因工程 选择标记 抗生素 氯霉素
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氯霉素在对虾体内的动力学研究 被引量:15
7
作者 李兰生 王勇强 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期431-434,共4页
在水产养殖领域倍受重视的药物动力学的应用可有效地避免虾病用药的盲目性。氯霉素被认为是抑制虾原弧菌作用最强的药物,实验中取平均体长9.5cm的样本虾,经暂养后一次性投喂定量药饵,然后在不同时间间隔取样本虾速冻保存,经适... 在水产养殖领域倍受重视的药物动力学的应用可有效地避免虾病用药的盲目性。氯霉素被认为是抑制虾原弧菌作用最强的药物,实验中取平均体长9.5cm的样本虾,经暂养后一次性投喂定量药饵,然后在不同时间间隔取样本虾速冻保存,经适当预处理后测定各组织内氯霉素含量。应用高效液相色谱法进行了药物动力学研究[1],分离条件:5μmC18柱,MeOH-H2O(3070,V/V)洗脱液,M490型紫外检测器。方法快速、准确,在1~50mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.9995。 展开更多
关键词 高效液相色谱 药物动力学 氯霉素 对虾 虾病防治
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SPE-HPLC法同时测定猪肉中常见抗生素和克伦特罗的研究 被引量:9
8
作者 农以宁 蔡江帆 +3 位作者 蒙肇云 程青 章艳艳 吴庆洁 《桂林电子科技大学学报》 2009年第5期406-409,共4页
建立了同时测定猪肉中四环素族、氯霉素和克伦特罗的固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)测定方法,采用Oasis HLB固相萃取柱净化萃取,Diamonsil TM C18色谱柱分离,磷酸盐缓冲液(pH至2.5)-乙腈梯度洗脱,检测波长245nm。结果表明:... 建立了同时测定猪肉中四环素族、氯霉素和克伦特罗的固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)测定方法,采用Oasis HLB固相萃取柱净化萃取,Diamonsil TM C18色谱柱分离,磷酸盐缓冲液(pH至2.5)-乙腈梯度洗脱,检测波长245nm。结果表明:该测定方法对土霉素、四环索、金霉素、氯霉素和克伦特罗测定的线性范围均为2~12μg/ml,基底加标回收率为93.6%~96.1%,检出限符合国标要求,分离度和重现性良好,可用于肉类食品安全与质量监控,方法简便、可靠、实用、覆盖面广。 展开更多
关键词 SPE-HPLC法 猪肉 四环素族 氯霉素 盐酸克伦特罗
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HPLC法同时测定氯甲醑中氯霉素和甲硝唑的含量 被引量:5
9
作者 张金安 郭均平 +2 位作者 胡占芳 马晓琴 胡敏芳 《中国药师》 CAS 2014年第9期1596-1598,共3页
目的:建立HPLC法同时测定氯甲醑中氯霉素及甲硝唑的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱为Nov-pak C18(150mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(75∶25),流速为1.0 ml·min-1,检测波长为297 nm,柱温:30℃,进样量20μl。结果:... 目的:建立HPLC法同时测定氯甲醑中氯霉素及甲硝唑的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱为Nov-pak C18(150mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(75∶25),流速为1.0 ml·min-1,检测波长为297 nm,柱温:30℃,进样量20μl。结果:甲硝唑和氯霉素线性范围分别为5~80μg·ml-1(r=0.999 7)和50~800μg·ml-1(r=0.999 8);平均回收率分别为100.83%(RSD=1.82%,n=6)和100.20%(RSD=0.55%,n=6)。结论:本法快速方便、精密度高、重复性和稳定性好,可用于同时测定氯甲醑中氯霉素和甲硝唑的含量。 展开更多
关键词 氯甲醑 氯霉素 甲硝唑 高效液相色谱法 含量测定
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焚烧法处理氯霉素生产废水 被引量:12
10
作者 徐扣珍 陆文雄 +1 位作者 宋平 刘协民 《环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 1998年第4期69-71,共3页
采用焚烧法处理占氯霉素废水总量的60%、COD浓度为11.6×104mgL-1的浓废水,被充分焚烧后的排气符合排放要求;对COD浓度为1.09×104mgL-1的稀废水,自然稀释后浓度为500—1000mgL... 采用焚烧法处理占氯霉素废水总量的60%、COD浓度为11.6×104mgL-1的浓废水,被充分焚烧后的排气符合排放要求;对COD浓度为1.09×104mgL-1的稀废水,自然稀释后浓度为500—1000mgL-1,再经还原-氧化二级物化处理,其水质符合上海市工业废水排放标准. 展开更多
关键词 氯霉素 焚烧法 废水处理 制药
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2018年水产品国家食品安全监督抽检结果分析 被引量:16
11
作者 吕冰峰 刘敏 邢书霞 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第17期5699-5705,共7页
目的分析2018年我国水产品的食品安全形势。方法汇总2018年水产品国家食品安全监督抽检结果,对其不合格项目等信息进行分析。结果 2018年共抽检水产品1248批次,检出不合格样品58批次,总体合格率为95.4%,其中鱼类的合格率为96.8%,虾类和... 目的分析2018年我国水产品的食品安全形势。方法汇总2018年水产品国家食品安全监督抽检结果,对其不合格项目等信息进行分析。结果 2018年共抽检水产品1248批次,检出不合格样品58批次,总体合格率为95.4%,其中鱼类的合格率为96.8%,虾类和贝类的合格率分别为93.8%和91.1%,蟹类的合格率仅为81.3%。淡水鱼和海水鱼的不合格原因主要是恩诺沙星残留超标,贝类的不合格原因主要是检出禁用兽药氯霉素,海水虾和海水蟹的不合格原因主要是镉超标。结论蟹类、贝类、虾类等水产品的合格率偏低,不合格原因主要是违规使用兽药和镉污染。 展开更多
关键词 水产品 兽药 恩诺沙星 氯霉素
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紫菜体细胞对抗生素的敏感性实验 被引量:8
12
作者 沈怀舜 王素娟 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期67-69,共3页
The paper reported various antibiotic sensitivity test of somatic cells of Porphyra yezoensis. The result showed somatic cells are very sensitive to Chloromycetin; semicide dose is less than 100 U/ml. It is proved tha... The paper reported various antibiotic sensitivity test of somatic cells of Porphyra yezoensis. The result showed somatic cells are very sensitive to Chloromycetin; semicide dose is less than 100 U/ml. It is proved that Chloromycetin is a good selective pressure for gene transformation of P. yezoensis. Somatic cells are also sensitive to tetracin. 展开更多
关键词 紫菜 体细胞 抗生素 敏感性实验 栽培
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反相高效液相色谱法同时测定樟脑软膏中樟脑和氯霉素的含量 被引量:3
13
作者 张玉玺 姚晓颖 +4 位作者 徐莲琴 李士峰 王丽红 崔玉红 杨娇 《中国药业》 CAS 2009年第21期32-33,共2页
目的建立同时测定樟脑软膏中樟脑和氯霉素含量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法色谱柱为C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(60∶40),流速为1.5mL/min,检测波长为289nm,柱温为25℃。结果樟脑和氯霉素质量浓度分别在0.75... 目的建立同时测定樟脑软膏中樟脑和氯霉素含量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法色谱柱为C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(60∶40),流速为1.5mL/min,检测波长为289nm,柱温为25℃。结果樟脑和氯霉素质量浓度分别在0.75~3.75g/L(r=0.9999)和0.3~1.5g/L(r=0.9998)范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率分别为101.84%(RSD=0.57%)和97.13%(RSD=0.76%)。结论RP-HPLC法方便、准确,重现性好,可作为樟脑软膏的质量控制标准。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱法 樟脑 氯霉素 含量测定
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超声波对青石斑鱼体表吸收氯霉素能力的影响 被引量:3
14
作者 周永灿 2黄晖 +1 位作者 苏永全 陈国华 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期17-20,共4页
应用超声波对8~20cm青石斑鱼体表吸收能力的影响研究表明 ,超声波的超声强度和作用时间以及所浸泡的氯霉素溶液的浓度都对青石斑鱼体表吸收氯霉素的能力有显著影响 ,且呈正相关关系。此外 ,不同的超声作用方法也能显著影响实验石斑鱼... 应用超声波对8~20cm青石斑鱼体表吸收能力的影响研究表明 ,超声波的超声强度和作用时间以及所浸泡的氯霉素溶液的浓度都对青石斑鱼体表吸收氯霉素的能力有显著影响 ,且呈正相关关系。此外 ,不同的超声作用方法也能显著影响实验石斑鱼的体表吸收能力 ,其中 ,超声后浸泡比浸泡后超声以及脉冲超声比连续超声均能更显著地提高石斑鱼的体表吸收能力。 展开更多
关键词 青石斑鱼 超声波 氯霉素 体表吸收
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氯霉素生产废水处理中UASB的两种启动方式比较 被引量:3
15
作者 郑平 李甲亮 徐向阳 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1999年第S1期105-108,共4页
U A S B 反应器两种启动方式的比较研究结果表明,采用混合废水和氯霉素废水启动均能达到预期的目的;但采用混合废水启动可缩短23 % 的时间.
关键词 UASB 氯霉素废水 启动
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氯霉素合成废水厌氧生物处理的研究 被引量:3
16
作者 郑平 李甲亮 +3 位作者 胡宝兰 徐向阳 俞秀娥 冯孝善 《中国沼气》 1997年第4期5-10,共6页
对氯霉素合成废水的厌氧生物处理作了研究。结果表明:(1)氯霉素合成废水的平均COD浓度高达306g/L,但平均BOD5浓度仅为772g/L。BOD5/COD比值为0253。从BOD5/COD比值和降解动力学来评... 对氯霉素合成废水的厌氧生物处理作了研究。结果表明:(1)氯霉素合成废水的平均COD浓度高达306g/L,但平均BOD5浓度仅为772g/L。BOD5/COD比值为0253。从BOD5/COD比值和降解动力学来评定,氯霉素废水属于生物处理可行性较难的工业废水。(2)石灰兼备中和酸性与去除一定量COD的双重作用,可用于该废水的预处理。(3)由于基质的抑制性,在反应器的操作中,应将废水COD浓度控在6000mg/L以下。(4)反应器的运试结果良好。平均水力停留时间100天;平均进水COD浓度4613mg/L;平均出水COD浓度1067mg/L;平均COD去除率77%;BOD5去除率达95%以上;平均容积COD负荷和容积产气率分别为467kg/(m3d)和099m3/(m3d),沼气的甲烷含量为72%。 展开更多
关键词 氯霉素合成废水 厌氧生物处理 化学工业
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氯霉素废水可生物降解性研究 被引量:4
17
作者 郑平 李甲亮 +2 位作者 方照平 徐向阳 俞秀娥 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第1期5-9,共5页
研究结果表明:①氯霉素废水COD浓度达29858~49613mgL-1,BOD5/CODCr比值为0.42,属可生物降解废水.因为其中的氯霉素和氯化物对生物处理有较强的抑制作用,故宜作适当的稀释处理.②用好氧生物法处... 研究结果表明:①氯霉素废水COD浓度达29858~49613mgL-1,BOD5/CODCr比值为0.42,属可生物降解废水.因为其中的氯霉素和氯化物对生物处理有较强的抑制作用,故宜作适当的稀释处理.②用好氧生物法处理时,平均进水COD浓度为886mgL-1,平均COD去除率64.5%;用厌氧生物法处理时,平均进水COD浓度为4539.5mgL-1,平均COD去除率78%.③从BOD5/CODCr比值来看,经过生物处理,废水中的可生物降解成分基本去除,生物抑制作用也随之消失,出水的安全性大大提高. 展开更多
关键词 氯霉素废水 生物降解 生物可降解性
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Honey Safety Standards and Its Impacts on China's Honey Export 被引量:10
18
作者 WEI Guo-xue HUANG Ji-kun YANG Jun 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CSCD 2012年第4期684-693,共10页
Food safety standard draws increasing concerns on agricultural trade throughout the world.This paper aims to assess the impact of maximum residual limit standard(MRL) of chloromycetin on honey exporting from China.T... Food safety standard draws increasing concerns on agricultural trade throughout the world.This paper aims to assess the impact of maximum residual limit standard(MRL) of chloromycetin on honey exporting from China.To achieve this objective,the paper discusses the trends of China's honey production and export practices,analyzes changes on MRL of chloromycetin adopted by major importing countries,and use a gravity model to estimate the impact of MRL of chloromycetin on China's honey export.The results show that despite the rapid growth of China's honey production,honey export has declined significantly since 2000.The major reason of declining honey export was mainly due to the more stringent food safety standards indicated by MRL of chloromycetin imposed by importing countries on their honey imports. 展开更多
关键词 food safety standards MRL chloromycetin HONEY EXPORT China
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氯地滴眼液的含量测定 被引量:4
19
作者 黄春明 陈爱华 李浦清 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 1999年第4期49-50,共2页
目的 :采用HPLC法测定氯地滴眼液中氯霉素和地塞米松磷酸钠的含量。方法 :色谱分析条件 :ODS柱作分析柱 ,流动相为甲醇 /水体系 ,0~ 8min使用 4 0 %甲醇 ,8~ 1 6min使用 60 %甲醇 ,流速 1ml/min。 0~ 9min 2 4 0nm紫外检测 ,9~ 1 8m... 目的 :采用HPLC法测定氯地滴眼液中氯霉素和地塞米松磷酸钠的含量。方法 :色谱分析条件 :ODS柱作分析柱 ,流动相为甲醇 /水体系 ,0~ 8min使用 4 0 %甲醇 ,8~ 1 6min使用 60 %甲醇 ,流速 1ml/min。 0~ 9min 2 4 0nm紫外检测 ,9~ 1 8min 2 78nm紫外检测。结果 :二组分分离良好。各组分线性关系良好 ,平均回收率氯霉素 99.8%(RSD =1 .2 % ,n =5) ,地塞米松磷酸钠 99.4 % (RSD =0 .7% ,n =5)。结论 :该法用于氯地滴眼剂含量测定准确、精密、可行。 展开更多
关键词 氯霉素 地塞米松磷酸钠 滴眼液 含量测定 HPLC
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四环素抑制胶原酶活性 被引量:4
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作者 王一 陈少军 陈莉 《眼科研究》 CSCD 1995年第1期19-20,共2页
对常用四种抗生素的抑活胶原酶作用进行了体外实验观察。结果表明:氯霉素、庆大霉素、青霉素对胶原酶活性无抑制作用;而四环素则显著抑制胶原酶活性,且抑活作用与浓度成正比。
关键词 四环素 胶原酶 角膜溃疡 药物疗法
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