香烟烟气溶液对大鼠淋巴细胞活力的影响及抗氧化物质的干预作用

目的 了解香烟烟气溶液对大鼠淋巴细胞活力的影响 ,并探讨多种抗氧化物质的干预作用。方法以PBS作吸收液 ,用大包氏管收集香烟主流烟气 ,分别以 0、1× 10 - 3、2× 10 - 3、4× 10 - 3、8× 10 - 3、12× 10 - 3和16× 10 - 3支 毫升的香烟烟气溶液 (CSS)作用于大鼠淋巴细胞 ,2小时后加入AlamarBlue ,以其还原率评价细胞的活力。选择中作用剂量 8× 10 - 3支 毫升的香烟烟气溶液处理细胞 ,之前用维生素C(VC)、维生素E(VE)、谷胱甘肽 (GSH)、褪黑素 (MLT)、二甲基亚砜 (DMSO)等抗氧化物质预处理 ,检测细胞的AlamarBlue还原率。结果 2× 10 - 3～ 16× 10 - 3支 毫升各组AlamarBlue还原率均显著低于对照组 ,且随CSS浓度的增高而下降。 0 0 5mmol LVC、0 2mmol LVE、0 1mmol LMLT、1mmol LGSH、1%DMSO均能显著增加CSS染毒组细胞的AlamarBlue还原率。结论 CSS能使大鼠淋巴细胞活力下降 ,VC、VE、MLT、GSH、DMSO等抗氧化物质能拮抗这种损伤作用。

维生素C对香烟烟雾的氧化应激作用的影响

目的 了解维生素C(VC)对香烟烟雾溶液 (CSS)作用下的大鼠淋巴细胞产生氧化应激的影响。方法 将香烟烟雾溶液作用于经VC预处理的大鼠淋巴细胞 ,用 2’ ,7’ -二乙酰二氯荧光素 (DCFH -DA)检测细胞内活性氧自由基 (ROS)水平 ,用彗星实验评价DNA的损伤状况 ,同时检测细胞内超氧化物歧化酶 (SOD)活性和脂质过氧化物(LPO)水平。结果 8× 10 -3 支 /mlCSS作用下大鼠淋巴细胞内ROS和LPO水平增高 ,DNA损伤增强 ,SOD活性降低。用 5 0 μmol/LVC干预后 ,与相应非干预组相比细胞内ROS和LPO水平降低 ,DNA损伤减轻 ,SOD活性增强 ,且均有显著性差异。结论 5 0 μmol/LVC能保护大鼠淋巴细胞 ,减轻CSS导致的氧化应激。

砷和香烟烟气溶液联合作用对大鼠淋巴细胞核因子κB的影响

目的研究亚砷酸钠和香烟烟气溶液(CSS)联合作用对核因子κB(NF-κB)的影响。方法将雄性Wistar大鼠淋巴细胞分为4组:亚砷酸钠单独作用组(亚砷酸钠:20μmol/L;CSS:0支/ml)、CSS单独作用组(亚砷酸钠:0μmol/L;CSS:0.008支/ml)、亚砷酸钠和CSS联合作用组(亚砷酸钠:20μmol/L;CSS:0.008支/ml)和对照组(均不暴露于砷酸钠和CSS),染毒后用凝胶迁移率变动分析检测NF-κB与DNA的结合水平,用免疫印迹检测其内源性抑制蛋白IκBα表达情况。结果亚砷酸钠单独作用组、CSS单独作用组的NF-κB与DNA结合水平显著高于对照组(P<0.05),而两者联合作用组的NF-κB与DNA结合水平却显著低于两个单独作用组(P<0.05)。亚砷酸钠单独作用组、CSS单独作用组IκBα的蛋白表达显著低于对照组(P<0.05),而两者联合作用组IκBα的蛋白表达却显著高于两个单独作用组(P<0.05)。结论亚砷酸钠和CSS单独作用能够增高NF-κB与DNA结合水平,而两者联合作用却使这种增高作用消失。

高温与香烟联合对大鼠早期胚胎致畸作用的研究

为了探讨高温与香烟联合对胚胎的毒性和致畸作用 ,用高温 ( 40、4 1、4 2、4 3℃ )及香烟烟雾水溶物联合处理怀孕的大鼠。结果表明 ,高温与香烟联合可加强胚胎的致畸作用 ,并与温度、香烟浓度和高温持续时间明显相关 ,当持续 3分钟的高温与香烟联合 ,胚胎致畸率达 70 %以上 ,与单独高温组、单独给烟组有明显差异 (P >0 0 1 ) ,并具有协同效应。结果提示 ,持续高温与香烟联合有明显的胚胎毒性和致畸作用。

主流烟气中氨与部分羰基化合物的偏相关分析及应用

为提高离子色谱（IC）法测定卷烟主流烟气中氨的待测液的稳定性,分析了57种卷烟主流烟气中氨与部分挥发性羰基化合物（甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛和2-丁酮）的偏相关性;根据偏相关分析结果,以甲醛-HCl混合溶液（甲醛质量分数为15%,HCl物质的量浓度为100 mmol/L）作为萃取液对现行的检测方法（YC/T 377—2010）进行了改进,并考察了5种卷烟样品氨待测液的稳定性。结果表明：1主流烟气中的氨与甲醛呈极显著负相关,且二者在氨的待测溶液中会协同升高;2改进现有IC方法的萃取液后,5种卷烟样品的氨待测液经过24 h仍然比较稳定;3方法改进后,检出限为0.30μg/支,加标回收率为97.05%-102.40%,日间相对标准偏差（RSD）为1.28%。该方法较好地解决了待测液氨检测结果随时间不断升高的问题,适用于分析卷烟主流烟气中氨的释放量。

枸杞对大鼠肾草酸钙结石生成的干预效果及其机制

目的研究枸杞对大鼠肾草酸钙结石生成的干预效果及可能机制。方法Wistar大鼠根据诱石方式(吸烟或饮用乙二醇或两者联合)、枸杞浸泡剂干预与否以及干预浓度(10%或25%)进行分组,设立空白对照组,每组10只。分组处理40d后,收集24h尿液并采集肾组织样本。检测尿液中钙、草酸及枸橼酸浓度;观察各组大鼠肾小管草酸钙结晶沉积情况并进行等级评分;检测肾组织脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性;TUNEL染色观察肾小管细胞凋亡并计算凋亡指数。结果吸烟联合乙二醇诱石组尿钙浓度明显高于空白对照组(P<0.01);单纯饮用乙二醇和吸烟联合乙二醇诱石组大鼠肾小管草酸钙结晶评分、肾组织MDA含量及肾小管上皮细胞凋亡指数均高于空白对照组,而尿液中枸橼酸浓度和肾组织T-SOD活性均低于空白对照组。10%和25%枸杞浸泡剂干预可显著降低吸烟联合乙二醇诱石组大鼠尿钙浓度(P<0.01);同时使单纯饮用乙二醇和吸烟联合乙二醇诱石组大鼠肾小管草酸钙结晶评分、肾组织MDA含量及肾小管上皮细胞凋亡指数下降,而尿液中枸橼酸浓度和肾组织T-SOD活性升高。枸杞浸泡剂两种浓度间未见明显量效关系。结论枸杞能有效抑制吸烟和(或)乙二醇诱导的大鼠肾草酸钙结石的生成,其机制可能与降低肾组织内自由基水平,抑制肾小管上皮细胞凋亡,以及减少尿液中促石成分而增加抑石成分有关。

香烟烟雾溶液作用下大鼠淋巴细胞的氧化应激反应

目的 以细胞内活性氧自由基 (ROS)水平、DNA损伤、脂质过氧化物 (LPO)水平以及超氧化物歧化酶 (SOD)活力为指标 ,研究细胞在香烟烟雾溶液作用下产生的氧化应激反应。方法 以PBS作吸收液 ,用大包氏管收集香烟主流烟雾 ,将香烟烟雾溶液 (CSS)分别以 0、1× 10 - 3、2× 10 - 3、4× 10 - 3、8× 10 - 3、12× 10 - 3、16× 10 - 3支 ml的浓度作用于大鼠淋巴细胞。用 2′ ,7′ 二乙酰二氯荧光素 (DCFH DA)测定细胞内ROS水平 ,用彗星试验检测细胞DNA损伤 ,同时检测细胞内SOD活力和LPO水平。结果 2× 10 - 3支 ml以上剂量组二氯荧光素 (DCF)荧光强度、彗星尾长以及LPO水平均显著高于对照组 ,且随剂量增加而增加。 16× 10 - 3支 ml组SOD活力显著低于对照组。与对照组相比 ,1× 10 - 3支 ml组LPO水平显著降低、SOD活力则显著增高。结论 CSS达到一定剂量时使细胞内ROS水平增高 ,引起细胞DNA损伤和脂质过氧化 ,高剂量时SOD活力降低 。

香烟烟气溶液和砷联合作用对淋巴细胞的影响

目的研究香烟烟气溶液和亚砷酸钠联合作用对大鼠淋巴细胞活力和氧化应激反应的影响,并探讨两者之间是否存在交互作用。方法香烟烟气溶液和亚砷酸钠单独作用或联合作用于大鼠淋巴细胞,用AlamarBlue还原法定量评价细胞活力变化,用细胞内还原型谷胱甘肽含量和丙二醛含量评价细胞内的氧化应激反应,并利用2×3析因设计研究两者的交互作用。结果染毒各组的AlamarBlue还原率以及细胞内还原型谷胱甘肽含量显著降低,细胞内丙二醛含量显著升高。析因设计分析结果表明,香烟烟气溶液和亚砷酸钠对AlamarBlue还原率的影响不存在交互作用,而对细胞内还原型谷胱甘肽含量和细胞内丙二醛含量的影响存在交互作用。结论在本研究中香烟烟气溶液和亚砷酸钠单独作用或联合作用均能够降低大鼠淋巴细胞活力,增强细胞内的氧化应激反应,且两者对细胞内的氧化应激反应的影响存在交互作用。

铬盐与香烟烟雾溶液对A549细胞毒性和DNA断裂的影响

目的 研究重铬酸钾和香烟烟雾溶液 (CSS)对A5 49细胞的细胞毒性和DNA损伤的联合作用。方法 应用四甲基偶氮唑盐法和单细胞凝胶电泳法检测了重铬酸钾和CSS联合处理对A5 49细胞的细胞毒性以及DNA链的断裂损伤。结果 低浓度重铬酸钾 (0 2～ 0 6μmol/L)与高浓度CSS(10支 /L)联合作用促进了细胞的增殖 ,高浓度重铬酸钾(5 4～ 16 2 μmol/L)与高浓度CSS联合作用表现为明显的细胞毒性。重铬酸钾 (0 2、0 6和 1 8μmol/L)或CSS(0 1、0 2、0 5支 /L)单独处理均可诱导DNA断裂 ,存在一定的剂量 -反应关系。在重铬酸钾的 0 6μmol/L时 ,随CSS(0 1、0 2、0 5支 /L)浓度的升高 ,A5 49细胞DNA链断裂程度逐渐增加。结论 重铬酸钾和CSS对A5 49细胞均有细胞毒性和DNA损伤作用。重铬酸钾和CSS联合处理诱导A5 49细胞DNA链断裂 ,并显著高于两者单独处理引起的DNA链断裂作用。

砷和香烟烟气溶液对基因Bcl/2和Bax表达影响

目的研究亚砷酸钠和香烟烟气溶液联合作用对凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响,并探讨它们对这2种基因表达的影响是否存在交互作用。方法按照2×2析因设计将大鼠淋巴细胞分为4组:亚砷酸钠单独作用组、香烟烟气溶液单独作用组、两者联合作用组和对照组。利用免疫印迹法检测细胞的Bcl-2和Bax表达,利用磷脂酰丝氨酸外翻分析法检测各组细胞凋亡,同时采用2×2析因设计的方差分析研究两者的交互作用。结果亚砷酸钠和香烟烟气溶液单独作用或者联合作用都能够使细胞Bcl-2蛋白表达减少、Bax蛋白表达增加、凋亡细胞数增加。析因设计的方差分析结果表明,2种毒物对Bcl-2蛋白表达、Bax蛋白表达、凋亡细胞数均存在交互作用,交互作用方式为协同作用。结论亚砷酸钠和香烟烟气溶液对大鼠淋巴细胞的Bcl-2蛋白表达、Bax蛋白表达的影响存在交互作用,交互作用方式为协同作用。

石英粉尘与香烟雾吸收液致大鼠氧化损伤的实验研究

目的 探讨石英粉尘 (SiO2 )与烟溶液 (CSS)单独及联合作用致大鼠氧化损伤的影响。方法 雄性Wistar大鼠随机分为 4组 ,检测血液中一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)的含量、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)的活性以及肺巨噬细胞 (AM)的DNA损伤状况。结果 石英粉尘单独作用时 ,实验大鼠血液中NO、MDA含量以及DNA迁移长度明显增加 ,而SOD、GSH Px的活性明显降低 ,且与生理盐水组相比差异均有显著性。烟溶液单独作用于大鼠后 ,NO含量及DNA迁移长度明显增加 ,而GSH Px活性明显降低。SiO2 与CSS联合作用时 ,可协同增加大鼠体内NO、MDA的含量及DNA的损伤程度。结论 SiO2 与CSS联合作用时对机体内NO。

砷和香烟烟气溶液对氧化应激的协同作用

目的研究亚砷酸钠和香烟烟气溶液联合作用对大鼠淋巴细胞氧化应激的影响,并探讨两者对氧化应激的影响是否存在交互作用。方法大鼠淋巴细胞分为4组:亚砷酸钠单独作用组、香烟烟气溶液单独作用组、两者联合作用组和对照组,染毒后用流式细胞术检测细胞内活性氧的含量,用微量荧光法检测细胞内丙二醛含量,用彗星实验检测细胞的DNA损伤,同时采用2×2析因设计研究两者的交互作用。结果亚砷酸钠单独作用组、香烟烟气溶液单独作用组和两者联合作用组细胞内的活性氧含量、丙二醛含量、彗星尾长和细胞拖尾率均高于对照组。析因设计分析结果表明两者对细胞内活性氧含量、丙二醛含量及彗星尾长的影响存在交互作用。结论亚砷酸钠和香烟烟气溶液对大鼠淋巴细胞氧化应激的影响存在交互作用,交互作用方式为协同作用。

重组酵母测评系统对环境样品雌激素活性的检测

采用重组酵母测评系统对香烟烟雾溶液和汽车尾气提取物分别进行雌激素活性的测定.结果显示在受试浓度下,PBS烟雾溶液和DMSO烟雾溶液的β-半乳糖苷酶活性与溶剂对照相比均无显著性差异(P>0·05).汽油燃料车尾气在600mL·mL-1时,其酵母菌液OD600明显低于DMSO对照组(P<0·05);在150mL·mL-1剂量时,汽油燃料车尾气所检出的β-半乳糖苷酶活性为44·56,与DMSO对照组相比有显著性差异(P<0·05),当剂量增加至300mL·mL-1,酶活性升高为66·43,约为对照组的12倍,其它各剂量组酶活性与DMSO对照组相比无显著性差异(P>0·05);甲醇燃料车尾气的β-半乳糖苷酶活性与溶剂对照相比无显著性差异(P>0·05).提示汽油燃料车尾气具有弱雌激素活性,甲醇燃料车尾气和香烟烟雾溶液未检出雌激素活性.

肺热阴虚型感染后慢性咳嗽大鼠模型的建立及评价

目的:建立肺热阴虚型感染后慢性咳嗽动物模型,并对该模型进行评价。方法:SD大鼠随机分为4组:空白组、肺热感染后慢性咳嗽(PIC)组、阴虚PIC组及肺热阴虚PIC组,每组8只。初期将大鼠暴露于纸烟烟雾中形成气道高反应性,后期分别采用小剂量内毒素滴鼻、甲状腺素灌胃及内毒素滴鼻+甲状腺素灌胃的方法制备病证结合模型,造模期间采用辣椒素雾化诱导慢性咳嗽的产生,分别建立肺热型、肺阴虚型及肺热阴虚型感染后慢性咳嗽模型;观察大鼠体质量、肛温、行为学的改变,测定血浆cAMP、cGMP及肺匀浆中IL-5、TNF-α及SP含量的变化,评价造模情况。结果:肺热阴虚PIC组大鼠在造模过程中体质量明显低于空白组,肛温、血浆中cAMP、cGMP及肺匀浆中IL-5、TNF-α及SP含量均明显高于空白组,提示该模型不仅具备了气道高反应性及气道炎症反应的特点,同时还复制了阴虚内热、消瘦及高能量消耗等特征,基本符合临床肺热阴虚证的病理生理特征。结论:采用小剂量内毒素滴鼻+甲状腺素灌胃+辣椒素雾化诱导及慢性吸入纸烟烟雾建立肺热阴虚型感染后慢性咳嗽大鼠模型的方法切实可行。

茶多酚对石英粉尘和烟溶液致大鼠氧化损伤治疗作用的研究

目的 :研究茶多酚 (TP)对石英粉尘、烟溶液所致大鼠脂质过氧化损伤的保护作用。方法 :雄性Wistar大鼠随机分为 5组 ,检测各组大鼠血液中一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)和肺胶原的含量及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)的活性。结果 :大鼠染粉尘与烟溶液后 ,NO、MDA和肺胶原含量明显升高 (与对照组比较 :P<0 .0 1) ,GSH- Px、SOD、CAT活性显著下降 (与对照组比较 :P<0 .0 1) ,喂饲 TP后各值均趋向正常。结论 :茶多酚可以拮抗粉尘及烟溶液中有害物质引起的脂质过氧化损害 ,提高机体抗氧化酶的活性。

香烟烟雾溶液对人淋巴细胞的损伤及修复

目的 了解香烟烟雾溶液作用于人淋巴细胞后DNA的损伤及修复状况。方法 以 8× 10 - 3 支 /ml香烟烟雾溶液作用于正常人淋巴细胞 ,用彗星试验检测 0 ,0 5,1,2 ,3 ,4,5,6h时点细胞的DNA损伤状况。结果 与 0h组相比 ,2h至 6h组彗星尾长均显著增长 (P <0 0 0 1) ,3h达到最长 ,之后逐渐降低 ,但到 6h未恢复至正常水平。结论 香烟烟雾溶液能直接引起人淋巴细胞的DNA损伤 。

砷和香烟烟气溶液联合作用对大鼠淋巴细胞凋亡的影响

目的 研究亚砷酸钠和香烟烟气溶液（CSS）联合作用对Wistar大鼠淋巴细胞凋亡的影响。方法 按2×2析因设计将大鼠淋巴细胞分为4组：对照组、亚砷酸钠组、CSS组、联合作用组。磷脂酰丝氨酸外翻分析法检测各组细胞凋亡情况，并检测各组细胞的Alamar Blue还原率以反映细胞生长代谢情况。结果亚砷酸钠组（1043．47±55．25）、CSS组（1186．52±48．90）和联合作用组（1650．64±89．65）凋亡细胞数明显高于对照组（861．22±42．67，P〈0．05）；各染毒组的细胞Alamar Blue还原率均明显低于对照组（P〈0．05）。析因设计方差分析结果表明亚砷酸钠和CSS对细胞凋亡具有协同式交互作用（F=10．39，P〈0．05）：而二者对细胞Alamar Blue还原率的影响未见交互作用（F=0．00，P〉0．05）。结论 亚砷酸钠和CSS均促进大鼠淋巴细胞凋亡，并存在协同式交互作用。

绿茶提取物对香烟烟雾致人支气管上皮细胞氧化损伤的干预作用

以烟草烟雾水溶液（CSS）为材料，用MTT等方法研究CSS对人支气管上皮细胞（HBE细胞）的损伤及绿茶提取物对HBE细胞的保护作用及机理。结果表明：CSS抑制了HBE细胞活性，并呈良好的剂量关系；绿茶提取物在低浓度时（0～100μg／mL）对CSS引起的HBE氧化损伤有较好的保护作用，但在高浓度下（100～150μg／mL）促氧化作用将急剧上升，反而加剧了CSS所引起的氧化损伤。

茶多酚对石英粉尘和烟溶液染毒大鼠肺脾锌、铜、镁含量的影响

目的 :探讨茶多酚 (TP)对石英粉尘 (SiO2 )与烟溶液 (CSS)单独及联合染毒大鼠肺及脾脏锌、铜、镁含量的影响。方法 :将 5 6只雄性Wistar大鼠随机分为 7组 ,正常对照组、SiO2 组、CSS组、SiO2 +CSS组和TP1、TP2、TP3处理组。除对照组外 ,各组采用非暴露式气管注入法染毒 ,TP1、TP2、TP3处理组于SiO2 及CSS联合染毒后分别给予 1.5 0g/ (kg·d)、2 .2 5g/ (kg·d)、3.30g/ (kg·d)的TP处理。实验结束动物称重后麻醉处死 ,取肺、脾称重并分别用原子吸收分光光度法测定其锌、铜、镁含量。结果 :与对照组比较 ,SiO2 组、CSS组及联合组大鼠脾、肺脏锌、镁含量下降 ,铜含量上升 (P <0 .0 5 ) ,且联合组与SiO2 组、CSS组比较 ,变化更显著 (P <0 .0 5 )。TP各处理组动物脾脏、肺脏锌、铜、镁含量均恢复到正常水平 ,与对照组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :SiO2 与CSS单独作用时 ,均能使脾脏和肺脏受到损伤 ,而 2者联合作用时有协同作用 ;TP可拮抗SiO2 与CSS所致脾脏。

剑桥滤片-液-液捕集系统各部分烟气捕集物的细胞毒性比较

为考察烟气捕集在卷烟主流烟气体外细胞毒性检测中的作用,采用3种捕集系统:剑桥滤片-pH7.0 PBS-丙酮、剑桥滤片-pH7.2 PBS-乙酸乙酯和剑桥滤片-pH7.4 PBS-70%甘油捕集同一卷烟主流烟气的粒相物和气相物,用中性红细胞毒性法检测了各部分烟气捕集物对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)的毒性作用,气相色谱-质谱法检测了3种有机溶剂烟气捕集物的化学成分。结果表明:①细胞毒性的大小顺序为:剑桥滤片捕集物>PBS捕集物>有机溶剂捕集物;②在第2级捕集物中,pH7.4 PBS烟气捕集物的细胞毒性显著大于pH7.0和pH7.2 PBS烟气捕集物;③在第3级捕集物中,70%甘油烟气捕集物的细胞毒性最大,丙酮和乙酸乙酯的较小,且二者比较接近;④3种有机溶剂捕集的烟气气相物部分主要是醛类、酯类、烷烃和苯系物,70%甘油捕集了较多的烷烃和苯系物。剑桥滤片捕集的烟气冷凝物反映了部分烟气对CHO细胞的中性红细胞毒性,剑桥滤片-pH7.4 PBS溶液-70%甘油捕集的烟气物质可以较全面地反映烟气的细胞毒性。