Clinical Study on Adjuvant Chemotherapy of Cinobufacin Injection in Senior Patients with Colorectal Cancer

To investigate the clinical efficacy of adjuvant chemotherapy of cinobufacin injection in the treatment of senior patients with colorectal cancer and its influence on serum tumor markers and immune function,from November 2018 to November 2019,84 senior colorectal cancer patients in author's hospital were al randomly divided into control group and observation group,42 cases in each group,and the control group was treated with routine chemotherapy,the observation group was treated with routine chemotherapy and intravenous injection of cinobufacin,the two groups were all treated for 4 cycles,then the short-term efficacy,serum tumor markers[carbohydrate antigen 19-9(CA19-9),carbohydrate antigen 724(CA724),carcinoembryonic antigen(CEA)]and immune function indexes(CD3+,CD4+,CD4+/CD8+),as well as the unward reaction of chemotherapy were compared between the two groups before and after treatment.As results,Short-term efficacy:the total effective rate of observation group was significantly higher than that of control group(78.57%vs 47.62%,P<0.05).Tumor markers:after treatment,the levels of CA19-9,CA724 and CEA in the two groups were significantly lower than those before treatment(P<0.05).Compared between the two groups,the levels of each index in observation group were lower(P<0.05).Immune function after treatment the levels of CD3+,CD4+,CD4+/CD8+in observation group were significantly higher than those before treatment while the levels of CD3+,CD4+,CD4+/CD8+in control group were significantly lower(P<0.05).After treatment,the above each index in observation group were higher than those in control group(P<0.05).Untoward reaction:the incidence of leukopenia,thrombocytopenia,gastrointestinal response,fatigue and myelosuppresion in observation group were significantly lower than those in control group(P<0.05).The results show that cinobufacin injection in the adjuvant treatment of senior patients with colorectal cancer can improve the shortterm efficacy of chemotherapy,reduce the untoward reaction,and reduce the serum levels of CA19-9,CA724 and CEA,improve the immune function of the body,thus with high clinical application value.

华蟾素对晚期非小细胞肺癌患者证候及血清肿瘤标志物、免疫功能的影响

目的:探讨华蟾素对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的中医证候及血清肿瘤标志物、免疫功能的影响。方法:将120例晚期NSCLC患者采用随机数字表法分为观察组和对照组各60例。对照组患者采用化疗治疗,观察组患者采用化疗联合华蟾素片治疗。比较两组患者治疗前后各中医证候评分、肺癌生命质量量表EORTCQLQ-C30评分、中位生存时间及血清肿瘤标志物与免疫功能指标水平。结果:两组患者中医证候评分、EORTCQLQ-C30评分均较治疗前改善,且观察组改善更明显,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者疗效指数高于对照组(P<0.05);观察组生存时间长于对照组(P<0.05);治疗后,观察组患者癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等肿瘤标志物较治疗前降低,且低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);观察组NK、CD3^(+)、CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前及对照组治疗后上升,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组治疗后NK、CD3^(+),CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:华蟾素可改善晚期NSCLC患者中医证候,降低血清肿瘤标志物水平及增强免疫功能,延长患者中位生存期,提高患者生存质量。

贝伐珠单抗联合华蟾素片改善肝癌患者腹水的临床观察

目的:探讨贝伐珠单抗联合华蟾素片治疗肝癌伴腹水患者的临床疗效。方法:选取本院2020年2月~2021年12月收治的96例肝癌伴腹水患者,按随机数字表法分为观察组和对照组,各48例。采取腹腔灌注贝伐珠单抗及顺铂进行治疗,每周用药1次,4周为1个疗程,共2个周期。观察组在对照组基础上于腹腔灌注前1周口服华蟾素片,连续口服至腹腔灌注治疗2个周期结束。比较两组总有效率、生活质量改善情况及毒副反应。结果:观察组腹水治疗的总有效率为79.17%,高于对照组58.33%(P<0.05)。观察组治疗后的生活质量改善率为68.75%,高于对照组47.92%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间未出现Ⅲ、Ⅳ度毒副反应,患者耐受情况良好。两组白细胞减少、血小板减少、血红蛋白减少等毒副反应总发生率的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:贝伐珠单抗联合华蟾素片治疗肝癌伴腹水患者可通过抑制肿瘤浸润与癌性渗出有效改善腹水,促进患者生活质量的提高,患者耐受良好,值得推广。

华蟾素对人乳腺癌细胞阿霉素多药耐药性的逆转作用

目的以耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADM为对象,验证华蟾素(cinobufacine,Cino)能否逆转其对阿霉素(ADM)的耐药性。方法采用MTT法检测药物细胞毒性作用及耐药细胞逆转倍数,高效液相色谱法检测细胞内ADM的浓度,流式细胞术测定P-糖蛋白(permeability glycoprotein,P-gp)的表达。结果Cino15mg·L-1能增加MCF-7/ADM细胞对ADM的敏感性,使ADM的半数抑制浓度(IC50)由38.14mg·L-1降至12.93mg·L-1;能提高ADM在MCF-7/ADM细胞内的浓度,降低MCF-7/ADM细胞P-gp的表达。结论研究表明Cino能部分逆转MCF-7/ADM细胞的MDR,其机制与抑制P-gp的功能与表达,增加细胞内ADM的含量有关。

华蟾素胶囊联合放射治疗用于中晚期鼻咽癌的临床观察

目的:探讨华蟾素胶囊联合放射治疗用于中晚期鼻咽癌患者的临床疗效及安全性。方法:回顾性分析我院肿瘤中心2011-2012年中晚期鼻咽癌患者95例,按治疗方案分为对照组(57例)和观察组(38例)。对照组患者接受单纯放射治疗,观察组患者在对照组基础上加服华檐素胶囊0.5 g,tid,4周为1个疗程,直至放疗结束。比较两组放射治疗时间延长情况,观察两组患者临床总有效率及随访1、3年的生存率和不良反应发生情况。结果:对照组放射治疗时间延长患者比例为89.47%,显著高于观察组的52.63%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗结束时和治疗结束后1个月,观察组患者临床总有效率分别为81.58%、63.16%,显著高于对照组的70.18%和45.61%,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者3~4级白细胞下降、血红蛋白下降、放疗局部副反应、鼻咽部的呑咽困难/疼痛等发生率显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访第1、3年两组患者生存率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:华蟾素胶囊联合放射治疗用于中晚期鼻咽癌患者疗效显著,可明显减轻急性放疗副反应,但尚未发现对患者生存率的提高。

华蟾素联合三氧化二砷抑制鸡胚尿囊膜血管生成的实验研究

目的:观察和比较华蟾素注射液、三氧化二砷注射液单药以及联合用药后对鸡胚尿囊膜(CAM)血管生成的抑制作用。方法:100只七日龄鸡胚随机分为4组(每组25只):生理盐水(NS)对照组、华蟾素组、As2O3组和华蟾素联合As2O3组。CAM上植入甲基纤维素碟,加入各组药物,观察对血管生长的影响。结果:华蟾素、As2O3以及两药联合对鸡胚尿囊膜新生血管均有抑制作用,以两药联合后抑制血管的作用最强。结论:华蟾素、As2O3以及两药联合均具有抗血管生成作用,两药联用后且具有协同作用。

华蟾素联合吉西他滨对肝癌HepG2细胞的抑制作用及对骨桥蛋白表达的影响

目的探讨华蟾素、吉西他滨及华蟾素与吉西他滨联合对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡情况的影响,研究华蟾素作用HepG2细胞后骨桥蛋白(OPN)表达的变化。方法采用MTT法及流式细胞技术检测HepG2细胞对华蟾素、吉西他滨及华蟾素+吉西他滨的药物敏感性差异;采用免疫细胞化学法检测HepG2细胞中OPN的表达。结果华蟾素和吉西他滨单药或联合用药对HepG2细胞的增殖呈抑制作用且呈现时间与浓度的依赖性,并能诱导HepG2细胞凋亡,联合组凋亡诱导作用强于单药组(P<0.05);华蟾素能下调HepG2细胞中OPN的表达。结论华蟾素与吉西他滨联合对肝癌HepG2细胞具有协同抑制作用,可能通过抑制OPN的表达发挥抗癌作用。

华蟾素抑制人胃癌BGC-823细胞体外侵袭、迁移的机理

目的探讨华蟾素(Cinobufacin)体外抑制人胃癌BGC-823细胞侵袭的作用及其机制。方法以0.156 mg/L和0.313 mg/L华蟾素体外作用人胃癌BGC-823细胞,采用MTT法检测华蟾素对BCG-823细胞生长的抑制效果,Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot法检测BGC-823细胞中NF-κB p56、MMP-9蛋白的表达量。结果华蟾素可浓度依赖性抑制体外BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭,同时下调BGC-823细胞中NF-κB和MMP-9蛋白表达。结论华蟾素体外可抑制胃癌的转移,该作用可能通过下调NF-κB、MMP-9的表达相关。

华蟾素对大鼠膀胱癌组织VEGF及微血管密度的影响

目的观察华蟾素对膀胱癌模型大鼠组织VEGF及微血管密度影响。方法将45只SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、华蟾素组,每组15只,正常对照组正常饲养,以BBN诱发大鼠膀胱癌作为模型对照组,以建模同时接受华蟾素膀胱灌注的大鼠作为华蟾素组,比较各组大鼠组织VEGF及微血管密度。结果华蟾素组大鼠VEGF表达显著降低(P<0.05),模型对照组膀胱组织VEGF呈高表达;华蟾素组大鼠微血管密度低于模型对照组(P<0.05),模型对照组微血管密度高于正常对照组(P<0.05)。结论华蟾素可有效降低膀胱癌模型大鼠VEGF表达,降低其微血管密度,从而抑制膀胱癌细胞生长、转移。

华蟾素胶囊辅助卡培他滨治疗老年晚期胃癌临床观察

目的:观察华蟾素胶囊辅助卡培他滨口服治疗老年晚期胃癌的临床疗效。方法:将60例老年晚期胃癌患者随机分为治疗组和对照组各30例。治疗组给予卡培他滨联合华蟾素胶囊口服,至少完成2个及以上周期治疗,对照组给予卡培他滨口服治疗,比较分析临床近期疗效、生活质量改善率、疾病进展时间及总生存时间。结果:治疗组与对照组相比,近期疗效总有效率(46.7%vs 36.7%)和毒副反应无显著统计学差异(P>0.05),生活质量总改善率(76.7%vs 50.0%)、无进展生存期(6.2个月vs 4.9个月)和总生存期(11.2个月vs 9.6个月)具有显著统计学差异(P<0.05)。结论:华蟾素胶囊辅助卡培他滨口服治疗老年晚期胃癌优于单药卡培他滨,安全有效。

华蟾素诱导人胃癌BGC-823细胞miRNA表达变化的实验研究

目的研究华蟾素对人胃癌BGC-823细胞MicroRNA(miRNA)表达谱的影响。方法应用华蟾素处理胃癌细胞系BGC-823细胞,以MTT法确定细胞增殖受到抑制后,基因芯片方法分析BGC-823细胞在药物处理前后miRNA表达谱的变化,qRT-PCR法验证miRNA的表达水平。结果随华蟾素质量浓度增加及作用时间的延长,华蟾素对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖抑制率相应增加,具有时效和量效关系。人胃癌细胞BGC-823中,华蟾素诱导了33个miR-NA的表达上调,12个miRNA的表达下调。qRT-PCR验证华蟾素诱导的miR-29a和miR-26a的表达上调的结果。结论华蟾素可能通过诱导miRNA表达谱的改变参与抑制人胃癌细胞增殖作用。

华蟾素诱导膀胱癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨华蟾素对人膀胱癌细胞株BIU87细胞凋亡的影响。方法:采用MTT法测定华蟾素对体外膀胱癌细胞的抑制作用,倒置显微镜、TUNEL法观察细胞形态变化,用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期的变化;半定量RT-PCR法检测凋亡相关基础Bcl-2、bax、caspase-3mRNA表达的变化,比色法测定caspase-3活性变化。结果:MTT法显示,华蟾素对膀胱癌细胞有显著的增殖抑制作用与华蟾素的浓度和作用时间有关,0.2mg/L华蟾素作用72h可以杀死50%以上的细胞;可诱导BIU87细胞凋亡,细胞周期停滞在S-和G2期;凋亡相关基因Bcl-2表达减少,bax无明显变化,caspase-3表达及活性增高。结论:华蟾素在体外有较强的抗膀胱癌作用,细胞凋亡的发生可能与细胞周期阻滞,Bcl-2和caspase-3基因表达及活性变化有关。

华蟾素诱导人胃癌细胞株BGC-823凋亡实验研究

[目的]研究华蟾素(Cino)对胃癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。[方法]Cino与胃癌细胞株BGC-823共同孵育不同时间后,应用荧光显微镜、MTT检测技术、流式细胞分析仪技术观察其对胃癌细胞株BGC-823的凋亡诱导作用。[结果]不同浓度Cino作用于胃癌细胞株BGC-823后,可看到典型的细胞凋亡形态学变化:细胞固缩,染色质凝集,呈新月形紧贴于核膜周边,核碎裂,凋亡小体形成等。MTT法显示Cino对人胃癌细胞有显著的增殖抑制作用,且有时间和浓度依赖性。Cino(10μg/ml)处理的BGC-823细胞48h,流式细胞术检测出现明显的亚二倍体凋亡峰,凋亡率可达25.1%。[结论]Cino对胃癌细胞具有诱导细胞凋亡的作用,细胞凋亡发生率呈剂量和时间依赖性,具有治疗胃癌的潜在价值。

华蟾素联合沙利度胺、全反式维甲酸治疗低/中危-1老年人骨髓增生异常综合征疗效观察

目的探讨华蟾素联合沙利度胺、全反式维甲酸治疗低危/中危-1老年人骨髓增生异常综合征的可行性及安全性。方法将38例确诊的低危/中危-1老年人骨髓增生异常综合征患者随机分为2组,对照组19例给予沙利度胺及全反式维甲酸治疗,治疗组19例在对照组治疗基础上给予华蟾素注射液治疗。治疗6个月后评估2组临床疗效,比较2组治疗有效者治疗前及治疗6个月后血红蛋白(Hb)、中性粒细胞绝对值(ANC)、血小板计数(Plt)差异,统计2组输血情况、不良反应发生情况及随访6~36个月患者转归情况。结果治疗组总有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后2组Hb、ANC、Plt均明显升高(P均<0.05),且治疗组各指标均明显高于对照组(P均<0.05);治疗组依赖输血患者输血间隔延长率显著高于对照组(P<0.05);2组不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P>0.05);随访6~36个月,治疗组3例CR患者维持4~6个月,4例PR患者维持3~15个月;对照组2例PR患者维持2~8个月。结论华蟾素注射液联合沙利度胺及全反式维甲酸可明显改善低危/中危-1老年人骨髓增生异常综合征患者的血液指标,提高治疗有效率,且不良反应轻。

华蟾素在鼻咽癌放射治疗中的作用

目的探讨华蟾素在鼻咽癌放射治疗中的作用。方法1999年1月-2002年12月我院85例鼻咽癌分别采用单纯放疗（42例）、放疗联合华蟾素（43例）治疗，治疗结束后3个月，根据CT评价疗效，并按1995年RTOG标准评价放疗的副反应。结果术后3个月单纯放疗组有效率88．1％（37／42），放疗联合华蟾素组有效率90．7％（39／43），2组疗效无统计学差异（X^2=0．186，P=0．911）。与单纯放疗组比较，放疗联合华蟾素组的放疗急性副反应如白细胞下降、急性皮肤黏膜反应、咽食管反应、KPS变化明显减轻（X^2=4．420，P=0．036;X^2=8．731，P=0．003;X^2=9．692，P=0．021；X^2=4．518，P=0．034）。2组血红蛋白下降无统计学差别（X^2=0．565，P=0．452），2组2、3年局部复发率无统计学差异（19．0％vs.16．3％，X^2=0．112，P=0．738；35．7％ vs．37．2％，X^2=0．020，P=0．886）。单纯放疗组1、2、3年生存率分别为100％（42／42）、90．5％（38／42）、78．6％（33／42），放疗联合华蟾素组1、2、3年生存率分别为100％（43／43）、90．7％（39／43）、79．1％（34／43），2组生存率比较采用Kaplan-Meier检验，Log-rank分析X^2=0．107，P=0．744。结论华蟾素对鼻咽癌的放射治疗未见协同作用，但可明显减轻急性放疗副反应。

替吉奥联合华蟾素片治疗老年晚期胃癌的疗效及安全性

目的观察胃癌晚期不可切除或复发患者使用替吉奥单药化疗联合华蟾素的疗效及安全性。方法晚期胃癌老年患者60例随机分为治疗组和对照组，各30例，治疗组给予替吉奥胶囊联合华蟾素片，对照组给予5-氟尿嘧啶（5-Fu）静脉滴注。结果治疗组和对照组总有效率分别为33．3％（10／30）和20％（6／30），差异无统计学意义（P〉0．05）；治疗组疾病控制率73．0％（22／30），高于对照组的43．3％（13／30），差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组免疫状态（NK细胞活性）较对照组改善明显，不良反应发生（121腔黏膜、皮疹）情况低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论替吉奥联合华蟾素片对于老年晚期胃癌患者疗效确切，能改善患者免疫状态，并发症相对较少，能减轻患者黏膜及皮肤反应，但仍需大样本、长期随机对照试验进一步验证。

蟾蜍毒素对S180小鼠移植瘤的抑制作用及其毒副作用的实验研究

目的探讨醇溶性蟾蜍毒素在小鼠体内对S180肿瘤细胞的抑制作用及其毒副作用。方法本研究用乙醇溶解蟾蜍分泌物原浆，采用减压蒸馏等方法进一步部分分离纯化，获得醇溶性的蟾蜍毒素混合物（ethanol extract of toad venom，EET），将其作用于S180荷瘤小鼠模型，计算肿瘤抑制率和生命延长率，同时通过血生化和病理等检测观察其对各脏器的毒副作用。结果5mg／kg和0．5mg／kg的EET对S180荷瘤小鼠实体瘤组织的抑瘤率分别是47．096和34．196（P〈0．05）；对腹水瘤小鼠的生命延长率分别是46．2％和36．5％（P〈0．05）；同时，0．5mg／kg的EET可明显升高白细胞达（11±4）×100／L（P〈0．05）。但EET在5mg／kg时可引起总胆红素升高达（30±5）μmol／L（P〈0．05）。结论0．5～5mg／kg的EET可以明显抑制荷瘤小鼠体内S180肿瘤细胞的生长，但EET的剂量达到5mg／kg时可以损伤肝脏。

华蟾素对耐阿霉素人乳腺癌细胞内阿霉素蓄积的影响

目的:测定华蟾素(cinobufacine,Cino)对耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADM内阿霉素(ADM)积累的影响,以探索Cino逆转MCF-7/ADM多药耐药(MDR)的可能机制。方法:MTT法检测CinoMDR的逆转作用,HPLC法检测Cino作用MCF-7/ADM后细胞内ADM的浓度的变化。结果:Cino15mg/L能增加MCF-7/ADM细胞对ADM的敏感性,使ADM的半数抑制浓度(IC50)由38.14mg/L降至12.93mg/L,显著增加MCF-7/ADM株细胞内ADM的浓度。结论:Cino能明显增加MCF-7/ADM株细胞内ADM的含量,部分逆转MCF-7/ADM的MDR。

联合应用华蟾素与氟尿嘧啶对胃癌细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用

目的探讨单一华蟾素体外对人胃癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用以及与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对胃癌细胞的影响。方法实验分为对照组;华蟾素(cino)组;5-FU组和cino+5-FU组。利用体外细胞培养、倒置显微镜和荧光显微镜、MTT比色技术及流式细胞仪等方法,观察细胞形态,检测cino和5-FU对人胃癌细胞株BGC823细胞抑制率、细胞凋亡和细胞周期。结果cino对人胃癌细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖性。cino+5-FU对BGC-823细胞的增殖抑制率显著高于单独使用组(P<0.05)。定量分析显示cino+5-FU组的凋亡细胞发生率显著高于cino组和5-FU组(P<0.05)。cino+5-FU可使G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高,且大多数被阻滞于S期。结论cino对胃癌BGC-823细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用,与5-FU联用可显著提高后者的化疗效果,且呈时间剂量依赖关系。

华蟾素注射液与常用输液的配伍

目的：模拟临床应用，将华蟾素注射液与常用输液配伍，观察配伍后的外观、ｐＨ值变化及含量测定。采用紫外分光光度法进行光谱扫描和测定。结果：在室温２６℃，６ｈ内各混合液均澄明，无颜色改变，ｐＨ值无明显变化，吸收光谱和含量基本无变化。