抗HPV16E6核酶增加宫颈癌CaSKi细胞对顺铂敏感性的研究

目的 :研究抗HPV16E6核酶 (Ribozyme)导入宫颈癌CaSKi细胞对顺铂 (DDP)敏感性的影响。 方法 :以脂质体法将抗HPV16E6 Ribozyme、空载体质粒分别导入CaSKi细胞 ,命名为CaSKi R ,CaSKi P细胞。点杂交检测核酶在细胞中的表达 ,Northern杂交检测 3种细胞中E6基因的表达。检测 3种细胞的细胞生长曲线和克隆形成实验 ,MTT法检测 3种细胞对DDP的敏感性 ,Annexine/PI双标法检测细胞凋亡率 ,流式细胞术检测Bcl 2 ,P5 3,Bax蛋白表达。结果 :点杂交证实核酶能在CaSKi R细胞中稳定表达 ,Northern杂交证实CaSKi R中表达E6较CaSKi P ,CaSKi明显降低。与CaSKi P和CaSKi细胞比较 ,CaSKi R细胞的生长速率明显减慢和克隆形成率下降 ,对DDP的敏感性明显增加 (P <0 .0 1) ,凋亡率明显增加 (P <0 .0 1) ,P5 3,Bax蛋白表达明显增加 ,Bcl 2蛋白表达明显减少 (P <0 .0 1) ,CaSKi P和CaSKi细胞比较无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :抗HPV16E6 Ribozyme抑制了CaSKi R细胞的生长和克隆形成率 ,CaSKi R细胞对顺铂的敏感性增加。