传统干酪中一株产Ⅱa类细菌素乳酸菌的分离与鉴定

从内蒙古传统干酪中分离到一株产抑菌活性物质的乳酸菌M-2,其对单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌等食品中常见致病菌和腐败菌都有抑制作用。排除有机酸、H_2O_2等的干扰后,仍有抑菌活性:进一步硫酸铵沉淀、透析及浓缩处理后,其抑菌活性显著增强;用蛋白酶K处理后,其抑菌活性消失,因此确定该抑菌活性物质为蛋白类物质,进而确定乳酸菌M-2为细菌素产生菌。通过生理生化实验和16SrRNA基因序列分析对该菌株进行了鉴定。PCR扩增得到1675bp的16SrRNA序列,并将其通过BLAST软件在NCBI网站中进行同源性比,同时,通过Bioedit 7．0和Treedrawing软件绘制系统发育树。结果显示,M-2的16S rRNA序列和数据库中的屎肠球菌SF菌株的序列的同源性为99．87%。在细菌系统发育分类学上,M-2菌株归属屎肠球菌(Enterococcus faecium)。这与生理生化实验初步鉴定结果一致。根据细菌素的分类原则,将该细菌素归类为Ⅱa类细菌素。