常压室温等离子体(ARTP)诱变对凡纳对虾不同家系幼体发育及仔虾抗逆性状的影响

为研究物理诱变对虾类前期幼体发育及抗逆性状的影响,探讨通过诱变技术增加选育群体遗传多样性和可利用遗传变异的可行性,本研究利用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术对4尾来自不同家系(A、B、C和D)的凡纳对虾(Penaeus vannamei)个体所产的受精卵(原肠胚期)分别进行相同功率(360 W)、不同时间(2、4、8和12 min)的批量诱变处理,并对孵化率、肢芽期孵化畸形率、存活率、变态率以及仔虾低氧耐受性和氨氮胁迫指标进行分析。结果显示,ARTP对凡纳对虾进行诱变处理后在不同家系间有一些共性的规律,在幼体发育前期阶段,4个家系随着诱变时间的增加,肢芽期畸形率均呈上升趋势,孵化率均呈下降趋势;与未经过诱变的对照组相比,除A和D家系诱变2 min组外,其余处理组肢芽期孵化畸形率均显著升高(P<0.05);除A家系诱变2 min组外,其余各家系处理组孵化率均显著降低(P<0.05);肢芽期孵化畸形率和孵化率与诱变时间均呈现中度或高度相关;与对照组相比,A、B、C和D4个家系在相同阶段的同一处理组存活率的表现具有不定向性,A家系诱变8min组存活率显著降低(P<0.05),而C家系诱变4和8min组存活率显著升高,D家系诱变2和4 min组存活率显著降低,而诱变8 min组则显著升高。可能是诱变的不定向性以及诱变作用于个体造成的。通过存活率和各期变态率综合分析可得,低剂量(2min组)诱变死亡高峰期多发生于幼体发育后期,高剂量(4、8和12min组)诱变幼体死亡高峰期多发生于幼体发育中前期。对A家系幼体的低氧耐受性和氨氮胁迫测试结果表明,低剂量的辐射可能会在一定程度上提高低氧耐受能力;诱变2 min组和8 min组分别在氨氮胁迫实验第4天、第7天存活率很高,诱变对该家系幼体对抗氨氮胁迫的能力有一定的影响。说明ARTP诱变凡纳对虾受精卵在不同家系中幼体发育前期具有一些共性趋势,在幼体发育后期和性状的改变上具有不定向性。研究结果对凡纳对虾新种质创制及功能研究材料的制备提出了新的方法,并为凡纳对虾诱变育种提供了基础数据和科学依据。

ARTP诱变选育高产腺苷菌株及发酵条件优化

为获得高产腺苷菌株,实现降本增效,该研究基于一株腺苷产生菌枯草芽孢杆菌SB-37,对其进行ARTP诱变选育,采用单因素实验和响应面方法优化菌株发酵条件。结果表明,最佳处理时间为30 s,菌株诱变致死率为98.75%。比对初始菌株腺苷产量,获得8株高产腺苷突变株,其中菌株Q40-2-37腺苷产量最高,为6.20 g/L,是出发菌株的2.58倍。该菌株最适发酵条件为葡萄糖99 g/L、蛋白胨25 g/L、pH 7.04、接种量8.03%、发酵时间72 h,此条件下,腺苷产量为6.92 g/L。该研究结果为高产腺苷菌株的诱变选育和发酵条件的优化提供了技术支撑。

红色诺卡氏菌高产菌的ARTP诱变选育与发酵条件优化

以红色诺卡氏菌(Nocardia rubra)FIM-PO8为出发菌株,采用常压室温等离子体(ARTP)技术进行诱变,经筛选获得遗传较稳定的Nocardia rubra高产菌株FIM-PO8-16,并通过单因素实验和正交实验优化了菌株FIM-PO8-16的发酵工艺。确定最佳发酵培养基组分为:酵母粉2.5%、葡萄糖2.5%、蛋白胨0.5%、糊精1.0%;最佳发酵条件为:种子液菌龄30 h、初始pH值7.2、接种量2.0%、装料量100 mL/500 mL、转速230 r·min^(-1)、发酵温度32℃。在此条件下,FIM-PO8-16菌体细胞浓度大幅提高,达到8.31%。

适合青梅醋酿造的醋酸菌选育

以腐烂的青梅为筛菌对象,采用平板分离、产酸定性和青梅果醋发酵实验筛选出一株产酸能力强的热带醋酸杆菌(Acetobacter tropicalis)J-27。进一步采用常压室温等离子体(atmosphericand room temperature plasma,ARTP)诱变技术和高通量筛选(high-throughput screening,HTS)相结合的方法,获得了1株具有高耐酸性且酿造后具有典型青梅醋风味的醋酸菌J-2736。用该菌株进行青梅醋发酵实验,发酵结束时总酸质量浓度为62.47 g/L,且菌株对乙醇、乙酸耐受性良好,可以耐受体积分数10%的乙醇和40 g/L的乙酸。对青梅醋中的风味物质进行分析,其中醇类物质、酯类物质和羧酸类物质质量分数较高,分别占挥发性风味物质的11.7%、36.0%和45.9%。因此选育的热带醋酸杆菌J-2736能够较好适应青梅的高酸特性,具有工业应用的可行性。

常压室温等离子体诱变选育耐盐产香酵母菌株

利用常压室温等离子体(ARTP)技术对鲁氏酵母进行诱变,确定40 s为诱变的最佳时间,此条件下菌株的致死率为98.9%。以耐盐性为指标对诱变后的菌株进行初步筛选,获得一株耐盐性较强的正突变菌株S3-26。将出发菌株及筛选菌株S3-26分别添加到18%盐度的酱醪汁培养基中培养,发酵后进行挥发性风味成分对比分析。研究结果表明,出发菌株S组检出59种风味物质,突变菌株S3-26组检出63种,提高了6.78%。添加S3-26发酵的酱醪汁中醇类、醛类、酸类、酚类、酮类、呋喃类、吡嗪类和总风味物质含量均高于S组,其中醇类含量提高了28.50%,酚类含量提高了80.33%。OAV分析结果表明,S3-26组的典型风味物质含量高于S组,其中苯乙醛提高了45.91%,愈创木酚提高了47.59%,赋予了酱油花香和烟熏香,明显增强了酱油的香气品质。此外,经10次连续传代测试,突变菌株S3-26具有良好的稳定性,综合结果表明选育菌株S3-26具有应用于酱油发酵的潜力。

“任务-社会”视角下的电商直播间氛围线索依恋效应研究

基于“任务-社会”氛围线索框架,利用模糊集定性比较分析(fsQCA)方法,检验任务线索(信息线索、情感线索、主播任务角色)和社会线索(弹幕活跃度、社会拥挤、主播社会联系)对直播间依恋(直播间认同、直播间依赖)的组态效应,旨在探索电商直播持续发展的新方向。研究发现:存在9条引发直播间依赖的等效路径,且呈现热销氛围下的情感驱动型、互动氛围下的信息-情感双驱动型和主播引导下的信息-情感双驱动型3种构型,以及引发直播间认同的1条路径和1种构型(全线索并驱型);任务线索间、社会线索间以及二者之间均存在替代关系。

ARTP和NTG诱变选育的解脂耶氏酵母对酸肉风味的影响

采用常压室温等离子体(ARTP)和亚硝基胍(NTG)诱变技术处理解脂耶氏酵母C11,研究诱变前、后菌株的酶学性质。最终筛选出4株突变菌A6、A13、A14、N12,酶活分别为1.007,1.554,1.139,1.021 U/mL,是起始菌株的1.41,2.17,1.59,1.43倍。4株突变株的最适温度为50℃、最适pH值为8.0。乙醇对脂肪酶酶活有抑制作用,最适底物由C8酯变化为C4酯。将A13、N12接种到酸肉发酵中,采用固相微萃取结合气相色谱-质谱法测定样品中挥发性物质,结果表明接种突变株能很好地改善酸肉的感官品质,促进酯类、醛类、醇类等挥发性风味物质的产生,显著提高丁酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、庚醛、壬醛、(E,E)-2,4-癸二烯醛和1-辛烯-3-醇的气味活性值(OAV),赋予酸肉玫瑰香味、蘑菇味、焦香味、水果味等风味。

异养小球藻ARTP诱变育种试验研究

对异养小球藻进行常压室温等离子体(Atmospheric and Room Temperature Plasma,ARTP)诱变确定最佳诱变条件,在最佳诱变条件下筛选突变株,并开展突变株的摇瓶培养再验证试验、遗传稳定性试验、50 L发酵罐试验。结果表明,异养小球藻的最佳致死时间为50 s;得到6株突变株,且其细胞数多于出发菌株、质量浓度明显高于出发菌株;突变性能可以稳定遗传,突变株可提前24 h到达发酵终点,发酵液中油脂产量高于出发菌株。

儿童医院手术室护士组织氛围感知对职业偏差行为的影响

目的:调查某儿童医院手术室护士组织氛围感知、职业偏差行为现状,并分析两者之间的相关性。方法:采用便利抽样法选取2023年1月—4月某儿童医院141名手术室护士作为调查对象,采用手术室护士一般资料调查表、组织氛围量表与护理人员职业偏差行为量表对其进行调查,采用Pearson相关分析对组织氛围与职业偏差行为进行分析。结果:手术室护士组织氛围量表总分为(86.31±9.52)分,条目均分为(3.59±0.47)分,护理人员职业偏差行为量表总分为(27.56±7.34)分,条目均分为(1.31±0.41)分,相关性分析结果显示组织氛围量表条目均分与护理人员职业偏差行为量表条目均分呈负相关(r=-0.812,P<0.05)。结论:某儿童医院手术室护士组织氛围感处于中等水平,职业偏差行为良好,均有待进一步提高,护理管理者应当通过个体化的干预手段提升手术室护士的组织氛围感知水平,并提供职业发展相关培训以及发挥护士作用的平台,促进手术室护士的职业偏差行为改善。

ARTP诱变灰葡萄孢霉筛选高产脱落酸菌株

目的:利用常压室温等离子体(Atmospheric Room Temperature Plasma,ARTP)技术对生产脱落菌的潜力宿主灰葡萄孢霉进行诱变,以获得遗传稳定性好的高产脱落酸的突变菌种。方法:利用酶解法去除灰葡萄孢霉细胞壁,从而获得灰葡萄孢霉原生质体。接着将灰葡萄孢霉原生质体在输出功率120 W,工作气流10 L/min,照射距离2 mm,照射时间120 s的条件下进行ARTP诱变处理。检测突变菌株的脱落酸产量,并对最佳突变菌株进行发酵优化。结果:与野生型相比,突变菌株的脱落酸生产能力有了不同程度的提高,其中突变菌株A4和A7的脱落酸生产能力显著提高,分别提高了26.3%和30.5%。进一步通过单因素实验,确定突变菌株A7的最佳发酵碳源和氮源成分为葡萄糖和黄豆粉,最佳接种量为8%。结论:采用ARTP诱变技术能够有效获得高产脱落酸的突变菌株,为脱落酸的工业化生产提供了有利支撑。

基于BP神经网络的5G覆盖三维化方案研究

针对楼宇内5G覆盖分层准确性差的问题,在依据高度数据分层的基础上,提出了一种基于气压值的分层方法,利用BP神经网络建立分析模型,精准定位5G网络室内采样点的海拔和楼层,实现楼宇5G覆盖的精准分析,为5G室内分布精准建设提供支撑。分析结果显示,在95%的置信水平下,与多元线性拟合函数、拉普拉斯压高方程相比,BP神经网络的标准误差值仅有0.000295,性能表现最优,能够有效提升5G覆盖分层的准确率。

Dual-ionic imidazolium salts to promote synthesis of cyclic carbonates at atmospheric pressure

Novel dual-ionic imidazolium salts are shown to display excellent catalytic activity for cycloaddition of carbon dioxide and epoxides under room temperature and atmospheric pressure(0.1 MPa)without any solvent and co-catalyst leading to 96.1%product yield.It can be reused five times to keep the product yield over 90%.These intriguing results are attributed to a new reaction mechanism,which is supported by theoretical calculations along with the measurements of ^(13)C NMR spectrum and Fourier transform infrared spectroscopy(FT-IR).The excellent catalytic activity can be traced to a CO_(2)-philic group along with an electrophilic hydrogen atom.Our work shows that incorporation of CO_(2)-philic group is an feasible pathway to develop the new efficient ionic liquids.

常压室温等离子体技术在微生物诱变育种中的研究进展

主要阐述常压室温等离子体诱变(ARTP)技术的概念、诱变机理和影响诱变效果的因素,以微生物和食用菌诱变育种为主要内容,重点介绍ARTP诱变技术在细菌、放线菌和酵母等微生物菌种改良和提升生物合成能力方面的应用,以及在食用菌新品种选育等研究中的应用,分析ARTP诱变技术在微生物和食用菌育种研究中具有的优势以及面临的挑战,并说明今后研究重点是通过提高快速筛选目标菌株的技术水平,结合高通量测序、转录组和蛋白质组等多组学技术,深入探究经ARTP诱变后微生物和食用菌的遗传规律和调控生物活性物质合成的机制,以期通过新技术的建立和应用,为食用菌和微生物育种研究提供新思路,进而推动微生物和食用菌的种质创新及产业可持续发展。

利用常压室温等离子体诱变选育工厂化金针菇新菌株

为确定金针菇常压室温等离子体处理的诱变致死率,创制工厂化金针菇新种质,本研究以上研1号菌株作为亲本,收集其孢子进行常压室温等离子体诱变后,采用多孢自交技术获得新菌株,再经工厂化小试初筛和中试复筛,最终获得新种质。结果表明,从108个突变自交菌株中获得出芽快且整齐、产量高、商品性状优良(菌盖厚实、菌柄较粗)的金针菇新品种上研A130,该品种为白色,菌盖呈球形、内扣,菌柄基部绒毛少,子实体干品中必需氨基酸总含量为2.57×10^(4)mg·kg^(-1)。工厂化栽培条件下,菌丝培养温度为20℃,子实体生长发育温度为4~18℃,瓶栽菌丝培养周期为22 d,子实体生育时间为26 d,平均单瓶产量为每瓶456.41 g。本研究结合新型诱变技术和传统选育方法,提高了亲本的突变率,为筛选具有目标性状的工厂化金针菇新菌株提供了数据支撑,对金针菇产业持续发展具有实践价值。

湖泊红球藻等离子诱变及其高产虾青素藻株培养条件的优化

为进一步提高湖泊红球藻(Haematococcus lacustris)的工业利用价值,本研究使用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变仪对湖泊红球藻进行等离子诱变。以藻细胞致死率为指标确定等离子诱变的适宜输入功率和诱变时间。诱变之后通过固体平板培养初筛和液体培养复筛获得高产虾青素的突变藻株。再以藻细胞密度为指标采用单因素实验及正交试验对高产藻株的营养生长阶段的培养条件进行优化,并筛选虾青素诱导阶段适宜虾青素积累的高光照条件。在优化的培养条件下多次继代后观察高产突变藻株的遗传稳定性。结果表明,湖泊红球藻等离子诱变的适宜条件是功率240 W、诱变时间150 s或功率400 W、诱变时间120 s。通过初筛和复筛获得生长快、虾青素产量高的突变藻株有11株,其中编号为HP3的突变藻株生长最快、虾青素产量最高,培养后藻细胞密度和虾青素产量较出发株分别提高了25.5%和61.6%。经过两阶段培养条件的优化,HP3的藻细胞密度和虾青素产量较优化前分别提高了14.3%和19.3%,达7.2×10^(5)cell/mL和31.264 mg/L。湖泊红球藻高产突变藻株HP3多次继代后藻细胞生长良好,遗传稳定,培养后藻细胞密度和虾青素产量均与初代培养相近。研究结果对湖泊红球藻产虾青素工业藻株的选育具有实际意义。

微环境气调对蟠桃冷藏和常温货架品质和生理变化的影响

为研究微环境气调对蟠桃冷藏和常温货架的保鲜效果,以北京平谷蟠桃为试材,装入微环境气调箱中,粘贴不同气调元件,分别记为mMAP1、mMAP2、mMAP3,以不粘贴气调元件记为对照组(CK),然后入冷库贮藏。蟠桃每10 d从冷库中取出,在此基础上进行3 d常温货架实验,测定箱体内气体含量、果实腐烂指数、风味指数、果肉褐变指数、硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、维生素C含量、呼吸强度、乙烯生成速率和相对电导率。结果表明,冷藏期间,mMAP1组O_(2)变化范围为18.67%~19.93%,CO_(2)变化范围为1.40%~2.85%;mMAP2组O_(2)变化范围为16.35%~19.30%,CO_(2)变化范围为2.37%~4.45%;mMAP3组O_(2)变化范围为16.33%~17.33%,CO_(2)变化范围为4.12%~5.53%。在冷藏期和常温货架期内,腐烂指数和褐变指数呈上升趋势,CK组最先出现腐烂和褐变现象,且腐烂指数和褐变指数均为最高,mMAP3处理组感官品质最优;粘贴气调元件的处理组均有保鲜效果,与CK组相比,3个处理组均在不同程度上减少营养物质的消耗,使可溶性固形物、可滴定酸、维生素C含量处于较高水平,同时可抑制蟠桃的呼吸作用,降低乙烯生成速率,与mMAP1组和mMAP2组相比较,mMAP3处理组更能延缓果实衰老,减少果实营养物质损失,抑制果实的呼吸作用。通过SPSS分析,综合得分CK组<mMAP1组<mMAP2组<mMAP3组。综上所述,mMAP3处理组保鲜效果最好。

UV-ARTP复合诱变选育高产纤维素酶菌株

该研究以拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii)TP-89为出发菌株,利用紫外(UV)和常压室温等离子体(ARTP)复合诱变方法对其进行诱变,并对其遗传稳定进行测定,以期筛选高产纤维素酶且稳定遗传的突变菌株。结果表明,出发菌株TP-89通过UV诱变100 s,ARTP诱变120 s后,筛选出一株纤维素酶产量高且稳定遗传的正突变菌株UA-67,其在产酶培养基上培养4 d时,滤纸酶活为2.59 U/mL、内切酶活为4.26 U/mL、外切酶活为7.79 U/mL,较出发菌株TP-89分别提高85.0%、125.4%和70.1%。

采用常压室温等离子体诱变技术选育高产多糖黑木耳菌株

为选育高产多糖的黑木耳(Auricularia auricula)菌株,以黑威单片作为出发菌株,采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变原生质体,经过3轮迭代诱变,从菌丝生长速度较快的诱变菌株中筛选多糖产量较高的菌株,通过5代继代培养测定菌株的菌丝生长速度稳定性,采用拮抗实验观察菌株间的拮抗情况,通过简单重复序列区间(inter-simple sequence repeat,ISSR)分子标记分析菌株间的遗传差异。结果表明:与黑威单片相比,诱变菌株D3-56的菌丝生物量和多糖含量分别提高15.02%和48.40%,诱变菌株D3-60的菌丝生物量和多糖含量分别提高13.15%和60.83%,诱变菌株D3-56和D3-60的多糖产量分别提高70.69%和81.97%;诱变菌株D3-56和D3-60菌丝生长速度稳定,且与黑威单片存在遗传差异。

常压室温等离子体诱变与微生物微液滴培养选育谷胱甘肽高产菌株

为提升野生毕赤酵母菌株BY-1产谷胱甘肽的能力,通过常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变技术得到诱变菌株BY-1-26。进一步在摇瓶培养过程中添加1,2,4-三氮唑,提高诱变菌株产量。最后将1,2,4-三氮唑作为筛选因子,利用微生物微液滴培养(microbial microdroplet culture system,MMC)仪对诱变菌株进行适应性进化,获得了1株高产谷胱甘肽的突变株BY-2-24,并对其遗传稳定性进行研究。结果表明:出发菌株BY-1经过ARTP诱变处理、抗性梯度平板初筛、MMC适应性进化、摇瓶复筛等,可以选育高产谷胱甘肽突变株。突变株BY-2-24摇瓶产量达(312.13±2.62)mg/L,较出发菌株提高134.26%,且经过7次传代培养,仍然具有较好的遗传稳定性。同时,生物量提高118.33%,表明诱变菌株的生长能力得到提高。研究表明,ARTP与MMC联合应用作为一种简便高效的微生物诱变方式,可用于定向诱变筛选高性能微生物菌株,为高通量选育目标菌株提供了参考。

不同自发气调包装袋对菜心薹茎木质化的影响

【目的】探究自发气调包装和市购聚乙烯膜包装对菜心薹茎木质化的影响,并分析细胞壁相关酶基因的表达水平,以期为菜心保鲜贮运和木质化调控机理研究提供理论依据。【方法】以宁夏四九菜心为试验材料,分别测定常温(25℃)贮藏期间(8 d)3种包装袋[自发气调包装(MP20、MP30)和聚乙烯薄膜(对照)]包装菜心薹茎的生理指标,以及包装袋内的O_(2)和CO_(2)含量,并通过实时荧光定量PCR分析薹茎纤维素酶基因(BrCEL3)、木葡聚糖转葡糖基酶基因(BrXET2、BrXET3)和β-甘露聚糖酶基因(BrMAN1、BrMAN5和BrMAN6)的表达情况。【结果】贮藏期间MP20和MP30自发气调包装袋能有效延缓菜心薹茎硬度增加,减少水分流失;袋内气体成分变化,形成低O2高CO_(2)的环境;使薹茎在贮藏结束时尚含有较高的可溶性蛋白含量(0.54和0.93 mg/g)和维生素C含量(0.45和0.62 mg/g),抑制木质素合成关键酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)活性的增加;减少木质素含量积累和纤维素增加,至贮藏结束,MP20和MP30气调包装的薹茎木质素含量分别为0.28和0.27 mg/g,较对照分别降低12.50%和15.63%,而纤维素含量分别为4.16和4.60 mg/g,较初始值分别降低32.57%和25.41%;抑制丙二醛(MDA)含量增加,贮藏至4~8 d时MDA含量显著低于对照(P<0.05);BrCEL3和BrMAN5、BrXET2和BrXET3、BrMAN1和BrMAN6基因相对表达量的变化趋势两两类似,且均低于对照(MP20的第4 d除外)。【结论】自发气调包装可有效减少常温贮藏期间菜心薹茎的木质素和纤维素含量积累,减缓木质化进程。经综合分析,MP30气调包装对菜心薹茎的贮运保鲜及减缓木质化更有利。