STUDIES ON THE CHEMICAL CONSTITUENTS OF CLAUSENA LANSIUM(LOUR.)SKEELS Ⅲ.The structural elucidation of homo-and zeta-clausenamide(1)

The structures of two novel lactams isolated from Clausena lansium were elucidated mainly on the bases of their spectral data. They are homoclausenamide(1),a -lactam,and zetaclausenamide(4), an eight-membered ring lactam.

STUDIES ON THE CHEMICAL CONSTITUENTS OF CLAUSENA LANSIUM (LOUR.) SKEELS Ⅳ THE STRUCTURAL ELUCIDATION OF SECO-AND SECODEMETHYL-CLAUSENAMIDE

The spectral data and chemical properties of two new amides isolated from Clausena lansium led to the assignment of acyclic structures of C-6 and C-7. The absolute configurations of the two chiral carbons in C-6 were determined by degradation to be 3S4R.

黄皮酰胺的合成

根据推测的生源关系，以仿生路线合成了有保肝活性的植物成分黄皮酰胺。

疏果对黄皮果实发育着色及树体器官碳水化合物含量的影响

以‘大鸡心’黄皮为材料,研究了不同程度疏果对果实发育、着色、产量及树体不同器官碳水化合物含量的影响。结果表明:疏果减少了树体产量,但促进了果实发育,花后95d(采收)时,疏果50%和25%处理的果实鲜样质量分别比对照增加了33.7%和13.9%,疏果有利于果实的着色,同时提高了叶片、1cm粗枝条、结果母枝及果实的总碳水化合物含量。此外,疏果有利于采果后新梢生长,显著增加新梢的长度和粗度。

黄皮果提取物对急性乙醇中毒致小鼠肝损伤的保护作用

目的探讨黄皮果提取物(EFCL)对小鼠急性乙醇中毒致肝损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法 ICR小鼠40只,随机分为正常对照、模型及EFCL 1.5和3.0 g·kg-1组。EFCL 1.5和3.0 g·kg-1组小鼠分别ig给予相应剂量的EFCL;30 min后ig给予52℃二锅头白酒12 ml.kg-1;24 h后处死小鼠,制备血清,取肝组织制备10%肝组织匀浆,采用试剂盒方法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性,以及肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,常规HE染色和淀粉酶-过碘酸希夫法染色观察肝组织病理形态改变,并用免疫组织化学法测定肝组织中NF-κB和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与正常对照组比较,模型对照组小鼠血清ALT和AST活性分别升高28.0%和28.9%(P<0.01),肝组织匀浆中SOD活性和GSH含量分别由(706±46)kU·g-1蛋白和(251±61)mg.g-1蛋白降低至(515±68)kU·g-1蛋白和(126±18)mg.g-1蛋白,而MDA含量由(204±21)μmol·g-1蛋白升高至(258±50)μmol·g-1蛋白(P<0.05);肝组织中NF-κB和α-SMA表达增加(P<0.01)。与模型对照组比较,EFCL 1.5和3.0 g·kg-1组小鼠血清ALT活性分别降低了18.3%和19.8%,血清中AST活性分别降低了6.4%和9.7%(P<0.05,P<0.01);EFCL 3.0 g·kg-1组肝组织匀浆中GSH水平和SOD活性分别升高了61.4%和14.8%(P<0.05,P<0.01)。肝组织中NF-κB和α-SMA的表达水平明显低于模型对照组(P<0.01)。肝组织病理形态检测可见,EFCL 1.5和3.0 g·kg-1组小鼠对乙醇引起的肝细胞脂肪样变、水样变和炎症细胞浸润等均有明显改善。结论 EFCL对小鼠急性乙醇中毒所致肝损伤具有保护作用,其机制可能与升高抗氧化酶活性、促进自由基清除、降低NF-κB的表达及抑制肝星状细胞活化有关。

黄皮叶提取物对食品中常见致病菌抑菌作用研究

研究黄皮叶化学成分和抑菌作用。采用纸片扩散法对黄皮叶不同溶剂提取物进行初步抑菌试验,在此基础上采用纸片扩散法和稀释法对乙醇提取物进行抑菌试验,并对乙醇、石油醚提取物进行化学成分的预试验。结果显示,乙醇提取物中含有较多的生物碱、有机酸、香豆素、黄酮和酚类等;石油醚提取物中主要含有挥发油、甾体和萜类等物质。不同溶剂提取物对常见病原菌的抑菌效果为乙醇>石油醚,而水提物则无抑菌效果。黄皮叶乙醇提取物对食品中常见致病菌均有较强的抑菌效果。其最低抑菌浓度分别是:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均为<4mg/mL、啤酒酵母<8mg/mL。表明乙醇提取物对4种常见病原菌的抑菌效果显著。

黄皮叶不同溶剂提取物抗过敏活性研究

研究了黄皮叶的化学成分和抗过敏活性,用不同溶剂提取黄皮叶活性成分,并进行化学成分预实验和HPLC分析,通过透明质酸酶抑制实验法评价其抗过敏活性,并对水提物抗过敏活性的剂量-效应关系进行分析。结果显示,提取物中含有酚类、黄酮、生物碱、有机酸、香豆素等成分。水和乙醇提取物对透明质酸酶的抑制率分别为89.3%和75.3%,石油醚提取物没有抑制作用。纯化物A1和B1的抑制率分别为92.6%和95.9%,且B1在0.5～8.0mg/mL浓度范围内,随浓度增加,抗过敏作用加强,呈明显的剂量-效应关系。与广西甜茶相比,抗过敏活性明显高于甜茶。HPLC分析显示,抗过敏主要成分为酚类和黄酮。

黄皮叶萃取物镇咳、祛痰及平喘作用研究

目的研究黄皮叶不同溶剂萃取物的镇咳、祛痰、平喘作用。方法 (1)将60只小鼠随机分为正常组、枸橼酸喷托维林组、石油醚萃取物组、二氯甲烷萃取物组、乙酸乙酯萃取物组及水提物组,给予相应药物灌胃7d,用浓氨水引咳,观察小鼠咳嗽潜伏期及2min内咳嗽次数。(2)将另60只小鼠随机分为正常组、氯化铵组、石油醚萃取物组、二氯甲烷萃取物组、乙酸乙酯萃取物组及水提物组,灌胃相应药物7d后采用腹腔注射5%酚红溶液,观察小鼠气管酚红排泌量。(3)70小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、石油醚萃取物组、二氯甲烷萃取物组、乙酸乙酯萃取物组及水提物组,于第1、7、14天腹腔注射卵蛋白致敏液;第18～22天给予相应药物灌胃,并用卵蛋白溶液雾化激发,观察哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及细胞分类计数。结果 (1)与正常组比较,石油醚萃取物、二氯甲烷萃取物能延长小鼠咳嗽潜伏期并减少2min内咳嗽次数,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)与正常组比较,二氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物及水提物能增加小鼠气管酚红排泌量,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)与模型组比较,石油醚萃取物能减少哮喘小鼠BALF液中白细胞总数、嗜酸性粒细胞比例及中性粒细胞比例,差异有统计学意义(P<0.01)。结论黄皮叶萃取物具有明显的镇咳、祛痰及平喘作用。

黄皮桑寄生不同极性溶剂提取物抗氧化能力研究

试验采用清除DPPH自由基、清除ABTS+自由基和还原能力3种体外抗氧化测定方法,对寄主为黄皮树[Clausena lansium(Lour.)Skeels]的桑寄生(Taxillus chinensis)不同极性溶剂提取物的抗氧化能力进行了研究。结果表明,黄皮桑寄生乙酸乙酯和正丁醇提取物具有较优异的抗氧化能力,其结果与其有较高的总黄酮含量有关。说明黄皮桑寄生乙酸乙酯和正丁醇提取物具有较好的开发天然抗氧化剂的潜力。

广西黄皮叶挥发油化学成分GC-MS分析研究

目的:对广西黄皮叶挥发油进行气相-质谱研究。方法:利用水蒸气蒸馏法提取广西黄皮叶挥发油,采用气相色谱-质谱联用法鉴定化学成分,归一化法测定各成分相对含量。结果:从广西黄皮叶挥发油中共分离出40多个组分,鉴定了其中32个化合物,占总量的90%以上,主要成分为石竹烯(25.31%)、石竹烯氧化物(14.86%)、β-红没药烯(8.95%)、斯巴醇(8.88%)、柏木-8(15)-烯-9-醇(7.54%)、α-法呢烯(6.51%)等,并鉴定出12种文献未见报道的组分。结论:广西黄皮叶挥发油中含倍半萜醇类、倍半萜烯类及其含氧衍生物等多种化学成分,本试验为广西黄皮叶的进一步开发利用提供了科学依据。

黄皮果、黄皮核中黄皮酰胺的测定

为了测定黄皮果肉、炮制黄皮果核、自然干燥黄皮果核及其20%食用酒精浸泡液中的黄皮酰胺含量,采用高压液相色谱法测定,测定条件为:KromasilC18色谱柱(5μm),流动相为乙腈-甲醇-水(21∶16.5∶62.5),流速:1.0mL/min;紫外检测器波长:257nm。测定结果表明,黄皮酰胺的保留时间为8.68～8.70min,自然干燥黄皮果核中的黄皮酰胺为0.174%,黄皮果肉、炮制黄皮果核及20%酒精浸泡的自然干燥黄皮果核溶液中均未检出黄皮酰胺。提示自然干燥的黄皮果核可以用作天然黄皮酰胺的原料。

黄皮种子脱水敏感性与核酸、蛋白质代谢的关系

黄皮种子发育晚期 ,胚内核酸和蛋白质合成能力增强 ,而花生种子发育晚期则呈下降趋势。脱水处理使生理成熟期黄皮胚核酸和蛋白质合成能力急剧下降 ,核酸水解酶活性增强。生物大分子代谢能力的变化是黄皮种子脱水敏感性的分子基础。

广州黄皮果挥发油成分研究

目的对广州黄皮果中挥发油进行研究。方法采用水蒸气蒸馏法,从黄皮果中提取挥发油,通过GC-MS计算机联用技术对分离的化合物进行结构检索,应用峰面积归一法得出各类化学成分的相对百分含量。结果从广州黄皮果中挥发油中鉴定出64种成分,其中4-甲基-1-(1-甲乙基)-3-环己烯-1-醇(21.06%)、γ-松油烯(12.90%)、3,7,7-三甲基-二环[4.1.0]己-2-烯(9.32%)含量较高,共约占57.69%。结论不同产地黄皮果挥发油所含成分及其相对含量差别较大。

黄皮花粉的超低温(LN_2,-196℃)保存研究初报

以甜叶黄皮和鸡心黄皮的成熟花粉为试材,采用"培养基发芽法"结合显微镜镜检,对不同干燥处理的黄皮花粉进行了超低温(LN2,-196℃)保存研究。结果表明:新鲜花粉经28℃干燥处理5～6h,含水量为14.6%～19.4%,超低温保存后的生活力最高;花粉在液氮中贮藏14d和180d,其发芽率无明显差异;超低温保存后的花粉发芽时间比对照迟。初步认为黄皮花粉可以在液氮(-196℃)中长期贮存而不显著失去其生活力。

GC-MS法分析黄皮核超临界二氧化碳提取物的风味成分

分析黄皮核中风味物质的化学成分。方法:采用超临界二氧化碳提取黄皮核中的风味物质,归一法测定其含量,并用气相色谱/质谱法鉴别出黄皮核提取物中的化学成分。结果:共分离出38种挥发性成分,约占挥发油总量82.49%。主要成分包括酰胺类,烯萜类和有机酸酯类,其中酰胺类成分主要为N-甲基-N-苯乙基-桂皮酰胺,N-甲基-N-顺式-苯乙烯基-桂皮酰胺,N-甲基-N-反式-苯乙烯基-桂皮酰胺和N-甲基-桂皮酰胺,其含量达到总提取物质含量的64%以上;烯萜类主要为松油烯,β-没药烯等,占总提取物含量的13%以上;有机酸酯类主要为棕榈酸,亚麻酸乙酯,亚油酸乙酯等,占总提取物含量的6.2%以上。结论:黄皮核的SF-CO2提取物体现了黄皮果的典型香味,可用于调香,药用等多方面。

用固相萃取—高效液相色谱法测黄皮中的异菌脲残留量

样品用乙腈提取,固相萃取后浓缩,采用高效液相色谱法,测定了黄皮中的异菌脲残留量。测定结果表明:异菌脲的浓度范围在1￣50μg/mL内,其峰面积与进样质量的线性相关系数为0.9990,其回收率为83.6%￣96.9%,相对标准偏差RS(Dn=5)在0.53%￣6.21%之间,检出限为0.002mg/kg。该法具有灵敏、准确,前处理简单易行等优点。

黄皮茎枝的化学成分研究

目的研究黄皮属植物黄皮茎枝Clausena lansium(Lour.)Skeels的化学成分。方法采用大孔吸附树脂、MCI吸附树脂、硅胶柱色谱、反相柱色谱、凝胶柱色谱以及制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,运用紫外光谱、质谱和核磁共振谱等方法鉴定化合物的结构。结果从黄皮茎枝的95%乙醇提取物的水萃取部位分离得到10个化合物,分别鉴定为β-腺苷(1)、伞形花内酯-7-O-α-L-鼠李糖基-(1″-6')-β-D-葡萄糖苷(2)、Haploperoside A(3)、伞形花内酯-7-O-β-D-芹糖基-(1″-6')-β-D-葡萄糖苷(4)、Marmesinin(5)、苯甲基-O-β-D-芹糖基-(1″-6')-β-D-葡萄糖苷(6)、苯甲基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、对羟基苯丙酸(8)、β-hydroxypropiovanillone(9),反式对羟基桂皮酸(10)。结论化合物1~6、8~9为首次从该属植物中分离得到。化合物1对脂多糖诱导的BV2细胞产生一氧化氮具有一定的抑制活性,其IC_(50)为4.39μmo L·L^(-1)。

提高黄皮种子贮藏活力的技术研究

黄皮种子种粒大小及活力与果实的大小有关手工剥种并及时进行处理可防止种子贮藏霉烂． ２０ ℃比１５℃、保鲜袋保湿比饱和盐保湿、采后含水量比部分脱水更适于保存种子活力．重新吸胀处理能提高失水种子的含水量、活力以及耐贮藏力．

黄皮茎化学成分的研究

目的研究黄皮Clausena lansium(Lour.)Skeels茎的化学成分。方法黄皮茎95%乙醇提取物的正丁醇部位和药渣的50%乙醇提取物采用硅胶、反相中压柱色谱、制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离出8个化合物,分别鉴定为异紫花前胡苷(1)、紫花前胡苷(2)、decurosideⅣ(3)、3,4-二甲氧基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、丁香酸葡萄糖苷(5)、2-(4-羟基-3-甲氧基苯)-乙醇-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、4-羟基-2-甲氧基-苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、4-羟基-2,6-二甲氧基-苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)。结论化合物4~6、8为首次从黄皮属植物中分离得到。

黄皮叶绿体基因组测序与分析

[目的]分析黄皮[Clausena lansium(Lour.)Skeels)]叶绿体基因组,为黄皮属不同种或品种的进化、杂交、演变,以及黄皮不同品种的鉴定等提供技术支持。[方法]使用试剂盒提取了黄皮的叶绿体DNA,通过测序、组装、注释获得了黄皮叶绿体基因组。[结果]黄皮叶绿体基因组全长159283bp,其中反相重复序列区(IRs)长53998bp,大单拷贝序列区(LSC)和小单拷贝序列区(SSC)长度分别为87301、17983bp,共注释126个基因,包括编码蛋白基因89个,tRNA基因29个和rRNA基因8个。黄皮叶绿体基因组全序列GC含量38.7%。对5种芸香科果树的全长序列、SSC、LSC、IRA、IRB进行比较分析发现,假黄皮的叶绿体全长序列、LSC、IRA、IRB区域的长度较其他4种果树长,柠檬的SSC区域长度最长,黄皮的全长序列和SSC区域长度最短。黄皮叶绿体的基因数目和编码蛋白数目较其他4种果树多。对20种园艺植物的叶绿体基因组进行分析发现,同一科下面的不同属植物或同一属下面的不同种更容易聚为一类。[结论]该研究丰富了热带果树的叶绿体基因组数据库,为种质资源的合理开发利用提供了依据。