HPLC-MS法测定氯吡格雷酸人体尿药浓度及氯吡格雷酸经尿排泄研究

目的:建立测定氯吡格雷酸人体尿药浓度的高效液相色谱-质谱联用方法,并通过监测硫酸氢氯吡格雷片经健康受试者口服后其主要Ⅰ相代谢物氯吡格雷酸尿药浓度的经时变化过程,考察氯吡格雷酸经尿排泄特征。方法:色谱采用Lichrospher C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm),以甲醇-10 mmol.L-1醋酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(42∶58)为流动相。质谱采用电喷雾离子源四级杆质谱,以选择性离子监测方式进行正离子检测。6名健康受试者单次口服硫酸氢氯吡格雷片75 mg后,定时收集尿样。采用甲醇直接稀释法处理尿样后,评价氯吡格雷酸经尿排泄特征。结果:氯吡格雷酸在4.780～9 559μg.L-1质量浓度范围内线性关系良好,平均回收率大于93.4%。受试者服药后0～2小时间,氯吡格雷酸经尿排泄速率最大;36小时内有(1.1±0.5)%的氯吡格雷以氯吡格雷酸形式从尿中排出。结论:该测定方法符合生物样品分析要求;氯吡格雷在体内以氯吡格雷酸形式经尿排泄迅速,24小时内基本排泄完全。

LC-MS/MS法同时测定人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物的浓度

目的建立快速测定人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物SR26334含量的LC-MS/MS法。方法乙醚-正己烷(4:1,V:V)2次液-液提取法(中性和酸化条件下),采用Teknokroma C_(18)色谱柱,以那格列奈和吡格列酮为内标,同时测定血浆中氯吡格雷和SR26334的浓度。流动相:甲醇-0.1%甲酸(80:20,V:V);流速:0.2mL·min^(-1);以多反应离子监测方式检测:氯吡格雷[M+H]^+,m/z 322.1→212.1;那格列奈[M+H]^+,m/z 318.3→166.2;氯吡格雷羧酸代谢物SR26334[M+H]^+,m/z 308.1→q98.1;吡格列酮[M+H]^+,m/z 357.2→134.2。结果氯吡格雷和内标那格列奈的保留时间分别在4.4和3.7min,SR26334和内标吡格列酮的保留时间分别在1.3和1.7min,氯吡格雷的线性范围为5～5000ng·L^(-1);SR26334的线性范围为20～2500μg·L^(-1)。提取回收率大于75%,方法回收率大于90%,日内、日间RSD小于10%(n=5)。结论本方法简便快速,适用于氧吡格雷制剂的新药临床研究和临床长期治疗病人血药浓度的常规监测。

人血浆中氯吡格雷及羧酸氯吡格雷浓度检测的意义

目的建立测定人血浆中氯吡格雷及羧酸氯吡格雷浓度的方法,便于临床药物浓度监测和指导临床合理用药。方法使用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),以艾司唑仑为内标,采用KromasilTM 100A C18色谱柱(150 mm LD×4.6 mm ID,5μm),流动相为10 mmol/L KH2PO4溶液(含0.25%H3PO4)-乙腈(50∶50),流速为1.0 ml/min,检测波长为220 nm,柱温40℃。结果羧酸氯吡格雷保留时间为1.8 min,标准曲线线性范围为0.12~3.84 mg/L,r=0.9984;氯吡格雷保留时间为7.4 min,标准曲线线性范围为0.11~3.52 mg/L,r=0.9994。氯吡格雷及羧酸氯吡格雷的高、中、低日间、日内变异系数均<15%,提取回收率>85%。结论检测方法简便快捷,重现性良好,准确度及灵敏度符合要求,可用于人血浆中氯吡格雷及羧酸氯吡格雷浓度的监测。

阿托伐他汀与氯吡格雷对急性冠状动脉综合征患者氯吡格雷羧酸代谢物血浓度的影响

目的测定急性冠状动脉综合征(ACS)患者氯吡格雷羧酸代谢物血浓度,观察阿托伐他汀和氯吡格雷有无相互作用。方法对照组为25例健康受试者,ACS组为66例ACS患者。口服阿司匹林100mg/d和氯吡格雷75mg/d,并加阿托伐他汀20mg/d,自身前后对照。采用液相色谱串联质谱法测量氯吡格雷羧酸代谢物血浓度。结果对照组在双联抗血小板治疗加阿托伐他汀治疗和双联抗血小板治疗氯吡格雷羧酸代谢物血浓度分别为(5.76±0.87)ng/dL和(5.67±0.88)ng/dL,两者间差异无统计学意义(P=0.351)。ACS组在双联抗血小板治疗加阿托伐他汀治疗和双联抗血小板治疗氯吡格雷羧酸代谢物血浓度分别为(5.96±0.87)ng/dL和(5.86±0.97)ng/dL,两者间差异无统计学意义(P=0.115)。结论未检测到血氯吡格雷原药成分,氯吡格雷和阿托伐他汀未见相互作用。

HPLC法测定患者血浆中氯吡格雷的羧酸代谢产物浓度

目的：建立一种简易快速的方法测定人血浆中氯吡格雷代谢产物羧酸氯吡格雷（CCA）的浓度。方法：血浆样品经6％高氯酸液．液萃取后采用高效液相色谱一紫外（HPLC．uv）法进样测定，内标为苯妥英钠，色谱柱为Hypersi10DSC，流动相为0．05mol／L磷酸二氢钾（三乙胺调pH至5．7）．乙腈（78：22），紫外检测波长为220μm，流速为1．0ml／min，柱温为50℃。结果：CCA血药浓度在O．10～8．0μg／ml范围内线性关系良好（r=0．9995），分析方法最低检测限为0．05μg／ml；方法回收率为99．7％～100．2％，提取回收率〉75％；日内、日间RSD均小于3％，冻融稳定性RSD均小于10％（n=5）。结论：本方法简便、准确、灵敏度高，专属性和稳定性较好，适用于氯吡格雷的临床研究和药动学研究。

HPLC-MS/MS评价健康人阿托伐他汀和氯吡格雷的相互作用

目的:了解阿托伐他汀与氯吡格雷的相互作用。方法:25例受试者口服阿司匹林和氯吡格雷,并加阿托伐他汀,5 d后暂停阿托伐他汀,继续氯吡格雷和阿司匹林口服4 d,分别于d 5,d 9采用液相色谱串联质谱法测量氯吡格雷羧酸衍生物血浓度,流式细胞仪测定血小板聚集率。结果:比较应用阿托伐他汀前后氯吡格雷羧酸衍生物血浓度和血小板聚集率,均无显著性差异。结论:氯吡格雷和阿托伐他汀无明确相互作用。

硫酸氢氯吡格雷片的人体生物等效性

目的:研究硫酸氢氯吡格雷片受试制剂与参比制剂的人体生物等效性。方法:30名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服硫酸氢氯吡格雷试验片或对照片150 mg,采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定血浆中氯吡格雷羧酸代谢产物浓度。用DAS软件计算两者的药动学参数,并评价其生物等效性。结果:受试制剂与参比制剂的tmax分别为(0.98±0.34)、(0.86±0.36)h;Cmax分别为(8 994.7±3 515.6)、(9 677.0±3 838.1)ng·mL-1;t1/2分别为(7.0±2.4)、(7.0±1.8)h;AUC0→24分别为(31 670.1±13 545.7)、(32 887.4±14 907.5)ng.h.mL-1;AUC0→∞分别为(34 096.8±14 482.3)、(35 550.4±16 455.5)ng.h.mL-1。受试制剂的相对生物利用度为(97.7±16.6)%。结论:2种制剂具有生物等效性。