多管发酵法测定水中粪大肠菌群方法验证及注意的问题

水质粪大肠菌群是水体受人畜粪便污染的最直接指标。本文对多管发酵法测定水中粪大肠菌群中样品采集、样品保存、质量保证和质量控制措施、废物处理等内容进行探讨,并对HJ 347.2—2018方法进行验证,方法的空白对照、阴阳菌株对照、准确度和精密度结果均符合方法要求。

酶底物法和多管发酵法在废水粪大肠菌群检测中的对比

近年来,酶底物法被广泛应用于水质总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的检测分析,从而有效地应对突发环境事件。本文结合酶底物法和多管发酵法的优缺点,对二者检测结果的相关性进行试验验证,并分析酶底物法的主要影响因素。研究表明,在粪大肠菌群检测中,酶底物法结果与传统的多管发酵法相关性很好,温度是酶底物法的主要影响因素。酶底物法操作简便,适用于突发环境事件的应急监测。

2023年一次性餐具用品中大肠菌群、沙门氏菌检测能力验证结果与分析

目的:参加云南省市场监督管理局组织的一次性餐具用品中大肠菌群、沙门氏菌检测能力验证,提高实验室的检测技术能力与水平。方法:根据《一次性餐具用品中大肠菌群、沙门氏菌的测定能力验证计划作业指导书》中的规定取样,依据《食品安全国家标准消毒餐(饮)具》(GB 14934—2016)规定,对4个标本的大肠菌群和沙门氏菌进行检测,其中大肠菌群需进行初发酵试验和复发酵试验,沙门氏菌鉴定需进行分离培养、生化试验和血清学鉴定。结果:090样品中检出大肠菌群和沙门氏菌;289样品中检出大肠菌群,未检出沙门氏菌。云南省市场监督管理局反馈本实验室考核结果为满意。结论:经过本次能力验证,弥勒市疾病预防控制中心微生物实验室的检测能力得以充分发挥,提高了一次性餐具用品的微生物检验技术,也提升了实验室的质量管理水平。

食品中菌落总数与大肠菌群测定能力验证结果与分析

为了提高实验室菌落总数与大肠菌群检测能力,参加了2023年中国检验检疫科学研究院测试评价中心与一般财团法人日本食品检查协会联合组织的ACAS-PT1578(2023)中日联合微生物检测技能考核。依据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》(GB 4789.2—2022)、《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》(GB 4789.3—2016)以及能力验证作业指导书要求进行样品检测,并采用不同方法进行结果比对。本次能力验证两项测定结果均为满意。其中,菌落总数测定|Z|值为0,大肠菌群计数|Z|值为0.2。通过参加能力验证为实验室出具数据结果的可靠性和有效性提供了客观证据,提升了检验人员的检测水平。

河池市鲜湿米粉微生物现状分析

目的:通过监督抽检广西壮族自治区河池市鲜湿米粉微生物检出情况,了解其微生物现状,为河池市鲜湿米粉生产质量控制和地方监管提供数据支持。方法:对2022年河池市11个县区48家鲜湿米粉合计128批次的鲜湿米粉进行监督抽检,并对微生物检出结果进行数据汇总和分析。结果:鲜湿米粉中菌落总数和大肠菌群均有不同程度的检出及超标情况,沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均未检出。结论:菌落总数和大肠菌群是影响河池市鲜湿米粉卫生质量安全的重要指标。

整体法评定食品中大肠菌群的测量不确定度

采用整体法评定食品中大肠菌群测量不确定度,为食品微生物定量检测提供一种不确定度评定方法。依据GB 4789.3—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群汁数》中平板计数法,以人工污染大肠菌群猪肉样品为例,分析样品测量过程中引入的测量不确定度,利用整体法对其数据的离散型进行评定。本次评定的测量不确定度结果报告为1.0×10^(3) CFU/g[8.1×10^(2),1.3×10^(3)],k=2。大肠菌群测量不确定度的主要来源为再现性条件下重复测量引入的不确定度。

不同加工类型样品大肠菌群检测方法选择研究

大肠菌群作为食品安全控制环节中重要指标之一,GB 4789.3—2016中提供了2种方法,分别为第一法(MPN法)与第二法(平板计数法),为研究不同类型样品最适宜的检测方法,将570份不同类型样本分别同时采用GB 4789.3—2016的第一法和第二法进行检测。结果表明,对于经过打磨、加热等破坏性生产加工的样品,第一法(MPN法)的检测灵敏度更高。对于未经打磨、加热等破坏性的样品,第一法(MPN法)与第二法(平板计数法)检测差异性不大。

2020—2022年雅安市消毒餐(饮)具大肠菌群安全现状分析

目的:通过近3年对雅安市几个区县消毒餐(饮)具大肠菌群的检测,了解其卫生状况,为卫生监督执法提供参考和技术支撑。方法:按照四川省食品安全监督抽检实施细则,随机抽取了多家餐饮单位的自消毒餐饮具进行大肠菌群的检测,并对检测结果进行分析。结果:2020—2022年随机抽取市内自消毒餐(饮)具分别是41批次、65批次、33批次,其大肠菌群的合格率分别为41%、49%、36%。结论:相关监管部门应该加强餐饮单位自消毒餐(饮)具的监管力度和监督频次,保障餐(饮)具的卫生安全。

多管发酵法测定水质粪大肠菌群的改进及探索

对比水质粪大肠菌群多管发酵法的实验条件,方法中初发酵温度温度为37℃,培养24 h,初发酵假阳性情况较多,进行复发酵工作量大,通过探索改变初发酵温度,即接种后的试管置于44.5℃培养箱,培养24 h,完成初发酵检验过程,减少初发酵中假阳性管数,从而减少检测复发酵工作量,甚至缩短检验时间,更适宜日常工作中大批量粪大肠菌群检测样品。

超高压对苹果汁微生物和多酚氧化酶的影响

研究不同处理压力和保压处理时间对鲜榨苹果汁的杀菌和钝酶效果。结果表明,随着处理压力升高和保压时间延长,菌落总数、大肠菌群数和多酚氧化酶活性均下降显著。在压力达到400 MPa,保压时间25 min时,菌落总数由9 750 cfu/mL降低到80 cfu/mL,降低达2.5个对数,大肠菌群数由30 cfu/mL降低到0 cfu/mL,多酚氧化酶活性降低了100%,符合美国FDA鲜榨果蔬汁非热力加工的安全营养要求和国家饮料食品卫生标准。

山东荣成湾月湖细菌生态学研究

采用总活异养菌 ２２１６Ｅ平板计数法（ＨＰＣ， Ｈｅｔｅｒｏｔｒｏｐｈｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ２２１６ＥＰｌａｔｅ Ｃｏｕｎｔ），弧菌ＴＣＢＳ平板计数法（ＶＰＣ，Ｖｉｂｒｉｏ ＴＣＢＳ Ｐｌａｔｅ Ｃｏｕｎｔ），对山东荣成湾月湖水体中的细菌生物量分布进行了研究。并用多管发酵法对水体中的大肠菌群进行了检测。结果显示，大肠菌群ＭＰＮ值最高为９个／１ ００ｍｌ，低于我国海水水质标准（≤１００００个／Ｌ）。水样中的异养菌数为４．９５ × １０^(４－)３．９５×１０~５ｃｆｕ／ｍｌ，弧菌数为３．０×１０(２－)９．６ｘ １０~３ｃｆｕ／ｍｌ。泥样中的异养菌数为 １． ５ ｘ １０(４－)３． ２ ｘ １０~５ｃｆｕ／ｍｌ，弧菌数为 １０ ｘ １０(３－)２．２ｘ １０~４ｃｆｕ／ｍｌ，与之相邻的荣成湾的菌量分别为 ＨＰＣ ６．６５ ｘ １０~４ｃｆｕ／ｍｌ， ＶＰＣ ２． ３７ ｘ１０ ~３ ｃｆｕ／ｍｌ，两个海区的细菌生物量差别不大，但同现有外海水的细菌生物量资料比较，结果明显偏高，总异养菌数高出二个数量级，弧菌数高出一个数量级。

食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的评定

依据国家标准和测量不确定度的评定方法以及国际通行的普松理论(poissontheory),评定食品中大肠菌群检测结果的不确定度。通过分析影响食品中大肠菌群平板计数结果的不确定度来源,建立一种简单适用的大肠菌群平板计数不确定度评定方法。结果表明,影响食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的主要因素为取样量的不确定度、稀释倍数的不确定度、加样体积的不确定度、平板上大肠菌群数量的不确定度和煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管产气比例产生的不确定度,其中后两者产生的不确定度所占分量最大。

我国部分地区原料奶中蜡样芽孢杆菌污染情况调查

对我国冀宁浙3个省典型乳品企业的原料奶中微生物污染情况进行调查与鉴定,主要检测原料奶中蜡样芽孢杆菌数,以及菌落总数和大肠菌群数,确定原料奶中微生物的污染状况与蜡样芽孢杆菌污染的关系。结果表明,3个地区的蜡样芽孢杆菌数平均值均≤105 mL-1。而细菌总数平均值,冀某乳品企业为7.61×105 mL-1,浙和宁为106 mL-1,属于超标奶。就大肠菌群平均值而言(最近似值),冀某乳品企业为21.17 mL-1,浙某乳品企业为25.15 mL-1,宁某乳品企业为15.98 mL-1。综合分析表明,蜡样芽孢杆菌数与原料奶的微生物污染状况没有相关性。本调查分析也对我国原料奶蜡样芽孢杆菌污染的溯源奠定基础。

纸片快速法监测地表水中粪大肠菌群的探讨

目的 建立粪大肠菌快速监测方法,以适应地表水微生物污染事故应急监测需求。方法 选择沈阳市新开河地表水,采用纸片快速法与多管发酵法进行对比实验。结果 用两种方法检测水样粪大肠菌群符合三类水质的合格率均为59.1％,粪大肠菌群阳性纸片率(54.24％)与阴性管率(53.76％)差异无显著性(X2=0.08,/>0.05)。两法所得粪大肠菌群MPN值差异无显著性(t=0.269,P>0.05)。结论 说明纸片法可以作为地表水粪大肠菌群快速监测方法。

我国东北部分地区原料奶中蜡样芽孢杆菌污染情况调查

对中国东北3个地区的原料奶中微生物污染情况进行调查与鉴定，主要检测原料奶中蜡样芽孢杆菌数，以及菌落总数和大肠菌群数，确定原料奶中微生物的污染状况与蜡样芽孢杆菌污染的关系。结果表明，3个地区的蜡样芽孢杆菌数平均值均≤10^5CFU／mL。而细菌总数平均值则为10^6-10^7CFU／mL，都属于超标奶。大肠菌群平均值，地区1为1349MPN／100mL。地区2为2574MPN／100mL，地区3为2032MPN／100mL。综合分析得出，蜡样芽孢杆菌数与原料奶的微生物污染状况无相关性。

紫外线系统净化近江牡蛎(Crassostrea rivularis)中细菌的研究

为保证食品安全,研究采用紫外线系统杀菌海水,以近江牡蛎为试验材料,经人工接菌、清洗、粗选等流程后,进行各净化处理条件试验及正交试验筛选,以大肠菌群和菌落总数为指标,探讨净化的最佳环境条件。结果表明,利用紫外线系统能达到海水杀菌的效果,可用于贝类净化。正交试验最优组合为第6组A2B3C1D2(温度25℃、盐度25‰、换水率1次/4 h、贝水比1∶6)和第7组A3B1C3D2(温度30℃、盐度15‰、换水率1次/8 h、贝水比1∶4)。但综合考虑净化效果及经济效益,可选取温度30℃、盐度25‰、换水率1次/4 h、贝水比1∶4,净化时间36 h作为近江牡蛎细菌净化的优化条件。

NaClO处理鲜切生菜中大肠菌群数的预测模型研究

NaClO是一种在食品消毒方面普遍使用的消毒剂。本文主要研究了NaClO处理对鲜切生菜中大肠菌群数的影响。运用中心复合设计(CentralCompositeDesign,CCD)的响应曲面(ResponseSurfaceMethod)试验,建立以NaClO浓度、浸泡时间、和水菜比三个因素为自变量,以大肠菌群减少百分率值为响应值的预测模型,通过统计学分析(线性相关系数r=0.9707,p值=0.0044)表明所建立的模型预测能够有效的预测NaClO处理后鲜切生菜中的大肠菌群数。

湛江东海岛文蛤模拟加工的细菌学分析

用行业标准分别对文蛤原料、清洗并热烫后和冷冻0.5h后等加工工序中文蛤细菌总数、大肠菌群数、粪大肠菌群数、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌进行了检验。结果发现,湛江东海岛近海文蛤原料的细菌总数为(4.0±0.1)×105cfu/g,清洗并热烫和再冷冻0.5h后对细菌总数的影响不明显。文蛤原料大肠菌群数为(790.7±21.3)MPN/g,清洗并热烫后大肠菌群数明显降低至(19.4±1.3)MPN/g,再冷冻0.5h后大肠菌群数为(18.3±1.1)MPN/g。文蛤原料粪大肠菌群数为(817.5±19.8)MPN/g,清洗并热烫后粪大肠菌群数明显降低至(194.2±10.2)MPN/g,再冷冻0.5h后粪大肠菌群数为(180.6±11.3)MPN/g。文蛤原料、清洗并热烫后和再冷冻0.5h后副溶血性弧菌的检验结果均为<3MPN/g;均未检出凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌。可见湛江东海岛近海文蛤的细菌污染主要是大肠菌群和粪大肠菌群,经清洗并热烫和再冷冻0.5h处理,能明显降低大肠菌群和粪大肠菌群数量。

自然水体中噬菌蛭弧菌与大肠菌群数细菌总数之间的关系

本文调查了３９份水样中噬菌蛭弧菌、大肠菌群、细菌总数，发现水样中噬菌蛭弧菌与大肠菌群数呈现高度正相关（ｒ＝０．７６４９，Ｐ＜０．００５），与细菌总数也呈高度正相关（ｒ＝０．８９９，Ｐ＜０．００５），当细菌总数在１０３个／ｍｌ以下，大肠菌群数在９５个／Ｌ以下时，噬菌蛭弧菌的检出为０，随水体中细菌总数的增加，噬菌蛭弧菌含量也增加。