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Colloidal Gold Immunochromatographic Assay for Rapid On-Site Detection of Tetracycline in Seawater 被引量:2
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作者 LI Haiping MENG Fanping LI Aifeng 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2023年第4期1129-1138,共10页
Recently increasing concerns from the scientists and public have been paid for seawater pollution due to tetracycline(TC)overuse in maricultural area.However,there are few methods or instruments that can be used for s... Recently increasing concerns from the scientists and public have been paid for seawater pollution due to tetracycline(TC)overuse in maricultural area.However,there are few methods or instruments that can be used for specific and rapid detection of this antibiotic in seawater.In this study,the colloidal gold immunochromatographic assay(CG-ICA)was used to achieve this goal.A commercialized monoclonal antibody against TC(anti-TC mAb)was selected because of its higher sensitivity(half-maximal inhibitory concentration of 2.38μgL^(-1)).The prepared CG particles(average diameter of 20 nm)were used to label anti-TC mAb at pH 8.0.The conjugate pad was formed by spraying the CG-labeled anti-TC mAb on a glass fibre membrane followed by proper dryness.The test pad was made by immobilizing artificial antigen and anti-mouse mAb in the test line and the control line,respectively,in a nitrocellulose membrane.The test strip,assembled with sample pad,conjugate pad,test pad and absorbent pad,could be used to detect TC during seawater sample flowing through these components in turn.The results could be observed by the naked eye in 10min.The visible limit of detection(vLOD)was 20μgL^(-1) for TC in seawater.The CG-ICA test results were in good agreement with those of liquid chromatography-tandem mass spectrometry(LC-MS/MS).The assay also showed that,oxytetracycline(OTC)and chlortetracycline(CTC),as the structural analogues of TC,did not interfere with TC determination.Furthermore,the TC concentration given by test strip could not be affected by the fluctuation of temperature(10℃–30℃),pH(7–9)and salinity(0–40)of seawater.Therefore,CG-ICA is a suitable tool for rapid,on-site,and semi-quantitative detection of TC in seawater. 展开更多
关键词 tetracycline(TC) seawater colloidal gold(CG) immunochromatographic assay SEMI-QUANTITATIVE
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Effects of 105 traditional Chinese medicines on the detection ofβ-agonists in medicine extracts and swine urine based on colloidal gold immunochromatographic assay 被引量:2
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作者 WANG Zi-lin FENG Ke-ying +5 位作者 GE Xiu-feng MAI Jia-cheng WANG Han-chuan LIU Wen-zi ZHANG Jia-hui SHEN Xiang-guang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2021年第6期1626-1635,共10页
Colloidal gold immunochromatographic assay(CGIA)is commonly used for the on-site detection ofβ-agonists that are sometimes used illegally as feed additives in swine diets.However,few studies have evaluated the causes... Colloidal gold immunochromatographic assay(CGIA)is commonly used for the on-site detection ofβ-agonists that are sometimes used illegally as feed additives in swine diets.However,few studies have evaluated the causes of false-positive results that sometimes occur when applying CGIA in agricultural settings.In this study,we investigated if this false-positive phenomenon is related to the addition of certain traditional Chinese medicines(TCMs)to swine feed.We established and verified an extraction method for TCMs,and then applied CGIA to detectβ-agonists in the extracts of 105 TCMs and in the urine of swine dosed with TCMs,respectively.Liquid chromatography-tandem mass spectrometry was used to validate the results of the urine samples tested positive forβ-agonists using CGIA.The results were also verified using TCMs and colloidal gold test strips produced by different manufacturers.The extracts of Citri Reticulatae Pericarpium Viride,Citri Reticulatae Pericarpium,Magnoliae Officinalis Cortex,Chaenomelis Fructus,and Rhodiolae Crenulatae Radix Et Rhizoma were tested positive forβ-agonists.Meanwhile,the addition of Citri Reticulatae Pericarpium Viride and Citri Reticulatae Pericarpium to swine feed resulted in false-positive results forβ-agonists in swine urine.The results provide a new way to explain false-positive CGIA results and provide valuable information for livestock feeding programs. 展开更多
关键词 colloidal gold immunochromatographic assay false positive traditional Chinese medicine Β-AGONISTS swine urine
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非洲猪瘟病毒p30二聚体鉴定及胶体金免疫层析方法建立
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作者 张胜楠 周雅维 +3 位作者 张子羿 单玉平 夏晓莉 张鑫宇 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期77-83,共7页
为建立一种制备简单、灵敏度高的非洲猪瘟病毒(ASFV)抗原快速检测方法,利用双表达载体pIRES在293A细胞上表达带有His标签和Flag标签的p30重组蛋白,裂解细胞后,通过免疫共沉淀发现p30重组蛋白以聚合体形式存在,进一步用质谱方法对原核系... 为建立一种制备简单、灵敏度高的非洲猪瘟病毒(ASFV)抗原快速检测方法,利用双表达载体pIRES在293A细胞上表达带有His标签和Flag标签的p30重组蛋白,裂解细胞后,通过免疫共沉淀发现p30重组蛋白以聚合体形式存在,进一步用质谱方法对原核系统表达纯化的p30重组蛋白进行分子量测定,结果证实,ASFV p30能自发形成二聚体。在此基础上,用抗p30的单克隆抗体6H9A10建立了单一单克隆抗体夹心检测p30二聚体的胶体金免疫层析方法,该方法对p30重组抗原最低检测浓度为2.1 ng·mL^(-1),对PRV、CSFV、PRRSV、PCV-2、PEDV、PPV、SVA等抗原检测结果均为阴性;用该胶体金免疫层析方法检测已知的100份临床样品,其中包含20份ASFV阴性血清、20份ASFV阴性组织、10份ASFV阴性血浆、21份ASFV阳性血清、21份ASFV阳性组织、8份ASFV阳性血浆,结果显示,检测出的48份阴性样品和49份阳性样品与已知结果一致。综上,建立的单个单克隆抗体夹心检测p30的胶体金免疫层析方法具有良好的特异性和敏感性,有望用于ASFV抗原的临床快速检测。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 P30 二聚体 胶体金免疫层析方法
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猪瘟病毒3种检测方法的比较 被引量:7
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作者 张艳英 高桂生 +4 位作者 高光平 史秋梅 张贵贤 田和杰 李秋艳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期205-209,共5页
本研究旨在比较3种检测猪瘟病毒方法的优缺点。应用反转录—复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)、荧光抗体法、胶体金免疫层析试纸条3种方法,分别对30份疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒进行检测。试验结果显示,RT-nPCR方法检出阳性样品数为11份... 本研究旨在比较3种检测猪瘟病毒方法的优缺点。应用反转录—复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)、荧光抗体法、胶体金免疫层析试纸条3种方法,分别对30份疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒进行检测。试验结果显示,RT-nPCR方法检出阳性样品数为11份,荧光抗体法为13份,胶体金免疫层析试纸条为8份;3种方法检测全为阳性8份,全为阴性17份。试验结果表明,荧光抗体检测法所需时间较短,但需要经验比较丰富人员来判定结果,且存在假阳性结果,敏感性比较差;胶体金免疫层析试纸条诊断方法最大的优点就是简便快速,且适合基层的应用,该方法的不足之处就是敏感性较低;RT-nPCR检测法具有快速、敏感等优点,但需一定仪器设备及成熟的技术方法。RT-nPCR还能区分待检样品为疫苗毒株(弱毒)还是野毒株感染(强毒),这是其他2种方法所不可比拟的。 展开更多
关键词 猪瘟 荧光抗体法 反转录—复合套式聚合酶链式反应 胶体金免疫层析试纸条
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胶体金免疫层析法检测谷物中的黄曲霉毒素B1 被引量:12
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作者 杜兵耀 马晨 余雄 《饲料工业》 北大核心 2016年第9期58-60,共3页
采用胶体金免疫层析法检测谷物中的黄曲霉毒素B1,谷物样品经提取后,用胶体金免疫层析试纸条法对其进行黄曲霉毒素B1的测定,并与高效液相色谱法进行比较。结果表明:胶体金免疫层析试纸条法与高效液相色谱法的相符率可达90%以上,胶体金免... 采用胶体金免疫层析法检测谷物中的黄曲霉毒素B1,谷物样品经提取后,用胶体金免疫层析试纸条法对其进行黄曲霉毒素B1的测定,并与高效液相色谱法进行比较。结果表明:胶体金免疫层析试纸条法与高效液相色谱法的相符率可达90%以上,胶体金免疫层析试纸条法操作简单、快速、方便,可以应用于谷物中的黄曲霉毒素B1的现场快速检测。 展开更多
关键词 谷物 黄曲霉毒素B1 胶体金免疫层析法试纸条法 高效液相色谱
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胶体金早早孕检测试纸在绒毛膜促性腺激素定量中的应用 被引量:4
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作者 刘洪波 张念军 黄晶 《吉林医学》 CAS 2009年第21期2589-2590,共2页
目的:解决ELISA法或MEIA法由于线性窄、高浓度标本不了解而盲目检测,导致超过线性而不能一次检测的难题。方法:通过胶体金早早孕检测试纸定性检测来初步确定血β-HCG浓度,再稀释相应倍数后,应用ELISA法或MEIA法即微粒子免疫发光法测出... 目的:解决ELISA法或MEIA法由于线性窄、高浓度标本不了解而盲目检测,导致超过线性而不能一次检测的难题。方法:通过胶体金早早孕检测试纸定性检测来初步确定血β-HCG浓度,再稀释相应倍数后,应用ELISA法或MEIA法即微粒子免疫发光法测出其浓度。结果:试纸检测线显色深于对照线,定量检测时应进行稀释再作定量分析,试纸检测线显色接近或浅于对照线可直接定量分析。结论:胶体金初步确定血β-HCG浓度再进行定量分析,可快速、及时、准确、定量检测血HCG的浓度。 展开更多
关键词 胶体金早早孕检测试纸 定性ELISA法 MEIA法 血Β-HCG
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胶体金免疫层析技术快速检测沙丁胺醇残留 被引量:32
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作者 吴巧丽 叶春生 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2012年第11期1595-1599,共5页
建立胶体金免疫层析检测法,用于动物组织或饲料样品中沙丁胺醇残留的快速检测。采用胶体金免疫竞争法,将兔抗沙丁胺醇多克隆抗体-胶体金标记物包被在胶体金聚酯结合垫上,并将沙丁胺醇-BSA抗原包被在硝酸纤维素膜上作为检测线,与待测试... 建立胶体金免疫层析检测法,用于动物组织或饲料样品中沙丁胺醇残留的快速检测。采用胶体金免疫竞争法,将兔抗沙丁胺醇多克隆抗体-胶体金标记物包被在胶体金聚酯结合垫上,并将沙丁胺醇-BSA抗原包被在硝酸纤维素膜上作为检测线,与待测试样中的沙丁胺醇竞争结合胶体金标记的兔抗沙丁胺醇多克隆抗体,从而判断试样中是否有沙丁胺醇存在。本文优化了检测试剂,可检测出猪肉等组织和饲料试样中沙丁胺醇的低限浓度为2 ng/mL,与盐酸克伦特罗的交叉反应率为2.67%,且试验在3 min内完成,肉眼可判断结果。本检测方法检测沙丁胺醇,灵敏度高,特异性好,可用于现场的快速检测和筛查。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 免疫层析 快速检测 胶体金 竞争法
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胶体金法和PCR-荧光探针法联合检测手足口病患儿肠道病毒71型 被引量:2
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作者 冯强 《中国医药指南》 2012年第27期443-444,共2页
目的探讨胶体金法检测EV71型病毒IgM抗体和检测EV71型病毒核酸的临床应用。方法胶体金法和PCR-荧光探针法联合检测EV71型病毒并对结果进行比较。结果胶体金法检测EV71型病毒IgM抗体和PCR-荧光探针法检测EV71型病毒核酸相比无显著差异(P&... 目的探讨胶体金法检测EV71型病毒IgM抗体和检测EV71型病毒核酸的临床应用。方法胶体金法和PCR-荧光探针法联合检测EV71型病毒并对结果进行比较。结果胶体金法检测EV71型病毒IgM抗体和PCR-荧光探针法检测EV71型病毒核酸相比无显著差异(P>0.05)。结论胶体金法和PCR-荧光探针法联合检测EV71型病毒既能保证快速检测,又能提高准确性。 展开更多
关键词 胶体金法 PCR-荧光探针法 肠道病毒71型
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胶体金免疫层析法同时检测肉类食品中八种兽药残留物 被引量:4
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作者 曹德康 苏建忠 +6 位作者 初晨 张伟 卢爱民 苗银萍 吴智坚 张杰 赵林萍 《解放军预防医学杂志》 CAS 2017年第3期213-217,共5页
目的研制八联盘检测肉类食品中多种兽药残留物。方法将应用胶体金免疫层析法制备好的8种试纸条组装成多联检测盘,评价该盘检测兽药残留物的灵敏度、准确度、特异性和稳定性。结果通过在空白样本中加标,确定了不同样本(猪肉、牛肉和羊肉)... 目的研制八联盘检测肉类食品中多种兽药残留物。方法将应用胶体金免疫层析法制备好的8种试纸条组装成多联检测盘,评价该盘检测兽药残留物的灵敏度、准确度、特异性和稳定性。结果通过在空白样本中加标,确定了不同样本(猪肉、牛肉和羊肉)中14种兽药的检测限;60份样本的八联盘检测结果与仪器确证结果一致,检出禁用药和限用药各6份,符合率达100%;检测盘中的试纸条与类似药物之间无交叉反应,特异性好;八联盘在室温条件下可保存至少12个月,稳定性较好。结论该八联盘操作简便、快速、检测结果准确、稳定,为兽药残留现场监控提供了有力工具。 展开更多
关键词 胶体金免疫层析法 肉类食品 八联盘 兽药残留物
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An immunochromatographic assay for rapid and simultaneous detection of levonorgestrel and methylprednisolone in water samples
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作者 Hua-Fang Chang Jun-Qing Wang +1 位作者 Bin Wang An-Ping Deng 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2013年第10期937-940,共4页
Synthetic contraceptive levonorgestrel (LNG) and glucocorticoid methylprednisolone (MP) residues are eventually discarded to environmental water system and function as environmental hormones, displaying potential ... Synthetic contraceptive levonorgestrel (LNG) and glucocorticoid methylprednisolone (MP) residues are eventually discarded to environmental water system and function as environmental hormones, displaying potential risk to humans and ecosystems, thus there is an urgent need for fast, sensitive and simultaneous detection of these compounds in water samples. In this study, a competitive immunochromatographic assay (ICA) using colloidal gold-labeled polyclonal antibodies as probes for rapid and simultaneous detection of LNG and MP in water samples was developed. The visual detection limits of LNG and MP in water samples were 10 ng/mL. The detection process could be completed within 10 min. There was no cross-reactivity of the ICA with other seven compounds. The strips could be stored at 4 ℃ for 10 weeks without significant loss of activity. The assay is a suitable tool for rapid and semi- quantitative detection of LNG and MP in water samples on site. 展开更多
关键词 immunochromatographic assay kevonorgestrel Methylprednisolone colloidal gold
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基于Fh010935蛋白的绵羊肝片吸虫感染胶体金免疫层析试纸检测方法的建立
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作者 段佳慧 刘少雄 +6 位作者 张楠 李建华 宫鹏涛 王晓岑 李新 唐博 张西臣 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期655-660,共6页
利用肝片吸虫(Fasciola hepatica)重组蛋白Fh010935建立绵羊肝片吸虫感染胶体金免疫层析试纸检测方法。首先烧制胶体金溶液,对胶体金溶液pH,SPA标记量进行优化,透射电镜鉴定金标蛋白。然后优化检测(T)线重组蛋白Fh010935包被浓度、质控... 利用肝片吸虫(Fasciola hepatica)重组蛋白Fh010935建立绵羊肝片吸虫感染胶体金免疫层析试纸检测方法。首先烧制胶体金溶液,对胶体金溶液pH,SPA标记量进行优化,透射电镜鉴定金标蛋白。然后优化检测(T)线重组蛋白Fh010935包被浓度、质控(C)线抗SPA抗体包被浓度,制备胶体金免疫层析试纸。最后评价试纸条的敏感性、特异性、重复性和保存期,并对内蒙古地区绵羊血清样品进行检测。结果表明:K_(2)CO_(3)最适浓度为0.4 mmol/L,SPA最佳标记量为6μg/mL,T线Fh010935重组蛋白最佳包被浓度为0.25 mg/mL,C线最佳包被浓度为8倍稀释抗SPA抗体。性能试验表明,该方法最低血清稀释度为1∶160,与绵羊捻转血矛线虫、双腔吸虫、新孢子虫感染血清无免疫交叉反应,重复性良好,4℃和常温放置保存期均达到180 d。对内蒙古地区64份绵羊血清样品进行检测,阳性率为14.1%。以肝片吸虫重组蛋白Fh010935为包被抗原建立的绵羊肝片吸虫感染胶体金免疫层析试纸检测法具有良好的敏感性、特异性和重复性,保存期较长,可用于绵羊肝片吸虫感染的快速检测及流行病学调查。 展开更多
关键词 重组蛋白 肝片吸虫 胶体金免疫层析试纸法
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嗜肺军团菌胶体金检测试纸性能评估
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作者 任萌 张世凯 +2 位作者 杨波 王毅 胡征 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期306-309,314,共5页
目的 制备嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP)快速检测的胶体金免疫层析试纸,并对其进行性能测试,确保其符合国家临床诊断标准。方法 基于双抗体夹心ELISA法制备LP胶体金免疫层析试纸,并对其交叉反应性、抗干扰性、灵敏度、钩状效... 目的 制备嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP)快速检测的胶体金免疫层析试纸,并对其进行性能测试,确保其符合国家临床诊断标准。方法 基于双抗体夹心ELISA法制备LP胶体金免疫层析试纸,并对其交叉反应性、抗干扰性、灵敏度、钩状效应、稳定性等进行测试。结果 LP胶体金免疫层析试纸与呼吸道常见的卡他莫拉菌等22种病原菌均无交叉反应,不受呼吸道内外源干扰物的影响;对LP的最低检测限可达2.00×10^(5)cfu/m L,具有良好的灵敏度,无钩状效应;在45℃加速老化以及模拟高温运输、冷冻运输条件下,重复性和稳定性均不受影响,且同一批次内、不同批次间试纸稳定性均良好。结论 制备的LP胶体金免疫层析试纸可实现LP的快速检测,操作简便,具有较好的应用前景和推广价值。 展开更多
关键词 嗜肺军团菌 胶体金免疫层析试纸 交叉反应性 灵敏度 钩状效应
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呋喃唑酮代谢物单克隆抗体和胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量:17
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作者 李春生 刘静静 +4 位作者 杜顺丰 武孝丽 曹秀梅 吴萌 张娜 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2017年第6期326-331,共6页
本研究旨在建立一种快速检测呋喃唑酮代谢物残留的方法。试验用呋喃唑酮代谢物的衍生物(CPAOZ)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物免疫小鼠,利用单克隆抗体技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA和间接竞争ELISA法对阳性克隆进行筛选。单克隆细胞株... 本研究旨在建立一种快速检测呋喃唑酮代谢物残留的方法。试验用呋喃唑酮代谢物的衍生物(CPAOZ)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物免疫小鼠,利用单克隆抗体技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA和间接竞争ELISA法对阳性克隆进行筛选。单克隆细胞株诱生腹水后,经纯化即为单克隆抗体,用于胶体金标记,制备呋喃唑酮代谢物胶体金免疫层析试纸条。融合后得到2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,其中4G3纯化后的抗体效价达到1:100万,对CPAOZ的50%抑制质量浓度(IC50)为1.7μg/L,亲和常数Ka=1.6×109 L/mol。该抗体制备的胶体金试纸条的检测限为4μg/L,与其他3种硝基呋喃代谢物的衍生物CPAHD、CPSEM和CPAMOZ均不存在交叉反应,对样品的检测与高效液相色谱结果一致。本研究制备了抗呋喃唑酮代谢物特异性单克隆抗体,并研制了以单抗为基础的胶体金免疫层析试纸条,能够实现呋喃唑酮代谢物残留的快速、灵敏的检测。 展开更多
关键词 呋喃唑酮代谢物 单克隆抗体 胶体金免疫层析试纸条
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中药小分子单克隆抗体技术平台的构建 被引量:13
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作者 屈会化 赵琰 王庆国 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期895-899,共5页
抗体是现代生命科学研究中极其重要的工具,小分子抗体技术在中医药研究领域具有广阔的应用前景。结合创新团队开展的研究工作,介绍了中药小分子单克隆抗体技术平台建立的背景和抗体制备的技术难点,针对基于中药小分子单克隆抗体的技术产... 抗体是现代生命科学研究中极其重要的工具,小分子抗体技术在中医药研究领域具有广阔的应用前景。结合创新团队开展的研究工作,介绍了中药小分子单克隆抗体技术平台建立的背景和抗体制备的技术难点,针对基于中药小分子单克隆抗体的技术产品,如ELISA检测试剂盒、免疫亲和色谱柱、胶体金试纸、荧光标记抗体和抗体芯片等,探索实践了其在中医药研究领域中的多种应用,并对中药小分子单克隆抗体技术的科学意义和应用价值进行了展望。 展开更多
关键词 中药小分子 单克隆抗体制备 酶联免疫吸附法 免疫亲和色谱柱 胶体金试纸 荧光标记抗体 抗体芯片
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两种方法检测新型冠状病毒肺炎特异性IgM抗体比较分析 被引量:19
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作者 徐云云 李宗光 +1 位作者 刘海燕 胡安群 《重庆医学》 CAS 2020年第17期2798-2801,共4页
目的对胶体金免疫层析法和荧光免疫层析法检测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)进行比较,并初步探讨SARS-CoV-2特异性IgM抗体的消长情况。方法通过胶体金免疫层析和荧光免疫层析两种试剂盒对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者和... 目的对胶体金免疫层析法和荧光免疫层析法检测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)进行比较,并初步探讨SARS-CoV-2特异性IgM抗体的消长情况。方法通过胶体金免疫层析和荧光免疫层析两种试剂盒对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者和对照组(COVID-19流行期间经临床诊断排除COVID-19者)患者血清中SARS-CoV-2特异性IgM抗体进行检测,并对不同病程的COVID-19患者血清特异性IgM抗体检测结果进行统计分析。结果胶体金免疫层析法灵敏度(81.25%)略低于荧光免疫层析法(88.75%),两种方法的总灵敏度为91.25%;两种方法的特异度均为96.00%;两种方法均显示SARS-CoV-2特异性IgM抗体最早在感染SARS-CoV-23 d内即可产生,可持续存在1个月不消失,在病程的15~30 d内阳性率最高;荧光免疫层析法中,早期组与治疗后期组、治愈随访组比较,血清SARS-CoV-2特异性IgM抗体水平差异均有统计学意义(P<0.05),早期组与治疗初期组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗初期组、治疗后期组与治愈随访组间两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论荧光免疫层析法检测SARS-CoV-2特异性IgM抗体的灵敏度高于胶体金免疫层析法,特异度无差别,且在感染15~30 d内达高峰。血清SARS-CoV-2特异性IgM抗体检测可应用于SARS-CoV-2感染的筛查并与核酸检测结果互为补充。 展开更多
关键词 冠状病毒感染 肺炎 新型冠状病毒 新型冠状病毒肺炎 特异性IGM抗体 胶体金免疫层析法 荧光免疫层析法
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寨卡病毒感染早期快速抗原检测方法的建立 被引量:1
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作者 向梦蓉 郭文靖 +2 位作者 温莺芬 李泽 庾蕾 《热带医学杂志》 CAS 2019年第4期413-416,382,共5页
目的建立检测非结构蛋白1(NS1)抗原的免疫层析胶体金试纸方法,用于寨卡病毒(ZIKV)感染的早期诊断。方法对已获得的5株人源抗ZIKV NS1的单克隆抗体(ZKns2E11、ZKns3G2、ZKns4B8、ZKns4F10、ZKns14G5)采用生物膜层光学干涉法进行竞争抑制... 目的建立检测非结构蛋白1(NS1)抗原的免疫层析胶体金试纸方法,用于寨卡病毒(ZIKV)感染的早期诊断。方法对已获得的5株人源抗ZIKV NS1的单克隆抗体(ZKns2E11、ZKns3G2、ZKns4B8、ZKns4F10、ZKns14G5)采用生物膜层光学干涉法进行竞争抑制实验,以得到它们在抗原结合位点的相互关系并根据抗体结合抗原表位的不同将其进行分类,又通过两两随机组合配对方法筛选出最佳捕获抗体及包被抗体,制备成胶体金试纸。分别用重组NS1蛋白、感染ZIKV细胞培养上清液以及感染登革病毒(DENV)病人血清/血浆多种检测样品以获得准确的特异性和敏感性。其中病毒定量采用FFA(focus-forming assay)方法。结果在竞争抑制实验结果中,根据抗体与抗原结合的剩余结合率(<20%被认为强竞争关系即结合位点相似甚至相同,>60%被认为无竞争关系即位点不同),抗体大致分为两类,并通过两两配对筛选出2株结合位点不一致的最佳配对抗体(ZKns2E11、ZKns3G2),最终建立检测ZIKV NS1抗原胶体金试纸的快速诊断方法。在试纸敏感性分析中,ZIKV重组NS1蛋白为31.25 ng/mL时肉眼仍可观测到阳性条带的出现,以2×10~4FFU/mL的ZIKV病毒量感染细胞所释放的NS1蛋白仍可被检测到。试纸在其特异性上,无论是重组蛋白、感染病毒细胞培养上清液还是临床样本,与DENV均不交叉,表现出良好的特异性。该检测方法的成功建立为ZIKV感染早期诊断带来了一定的补充作用。结论建立检测ZIKV NS1抗原胶体金试纸的方法可成功区分ZIKV和DENV,表现出良好的敏感性及特异性,为ZIKV与DENV共感染地区提供了技术储备。 展开更多
关键词 寨卡病毒 登革病毒 非结构蛋白1 免疫层析胶体金法
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胶体金免疫层析技术快速检测谷物中3种真菌毒素的研究 被引量:19
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作者 曹德康 苏建忠 +5 位作者 张瑛 秦璐 苗银萍 吴智坚 张杰 赵林萍 《中国食品卫生杂志》 2017年第3期306-312,共7页
目的应用胶体金免疫层析技术开发一种快速检测谷物中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的三联检测卡。方法优化胶体金溶液p H值、金标抗体量及抗原包被量制备3种胶体金试纸条,将试纸条组装成检测卡,研究该卡的检测... 目的应用胶体金免疫层析技术开发一种快速检测谷物中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的三联检测卡。方法优化胶体金溶液p H值、金标抗体量及抗原包被量制备3种胶体金试纸条,将试纸条组装成检测卡,研究该卡的检测限、准确度、特异性和稳定性。结果 AFB_1、ZEN和DON 3种试纸条的胶体金溶液最适p H值分别为7.5、7.5和7.0,金标抗体量分别为4.2、7.2和9.6μg/ml,抗原包被量分别为1.0、1.4和0.8 mg/ml。检测卡的检测结果与仪器检测结果基本一致,重复性较好,与结构类似物及其他霉菌毒素无交叉反应,在室温条件下可以保存12个月。结论该三联检测卡操作简便、快速、准确、稳定,且能同时检测3种真菌毒素,在谷物的现场检测中有较好的应用前景。 展开更多
关键词 胶体金免疫层析法 谷物 真菌毒素 检测卡 快速检测 食品污染物 食品安全
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胶体金试纸法与化学发光免疫法测定HCG的比较 被引量:3
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作者 王志贤 马玲 《中国实用医刊》 2013年第14期30-31,共2页
目的比较胶体金试纸法与化学发光免疫法测定人绒毛膜促性腺激素(HCG)的结果。方法56例血清标本中HCG含量分别采用胶体金试纸法和化学发光免疫法检测。结果用胶体金试纸法检测56例血清标本阴性18例(假阴性1例),弱阳性8例,阳性12例... 目的比较胶体金试纸法与化学发光免疫法测定人绒毛膜促性腺激素(HCG)的结果。方法56例血清标本中HCG含量分别采用胶体金试纸法和化学发光免疫法检测。结果用胶体金试纸法检测56例血清标本阴性18例(假阴性1例),弱阳性8例,阳性12例,强阳性18例。化学发光免疫法检测HCG〈2.9IU/L者15例,2.9~830251IU/L者41例。两种方法经配对χ^2检验差异有统计学意义(χ^2=9.6,P〈0.01)。结论胶体金试纸法较化学发光免疫法测试范围广,操作简便,偶有假阴性。化学发光免疫法灵敏度、精密度较胶体金试纸法高,但线性范围较窄。胶体金试纸法测定结果可用于预估化学发光免疫法测定HCG时血清的稀释倍数。 展开更多
关键词 胶体金试纸法 化学发光免疫法 人绒毛膜促性腺激素
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