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检测牙龈卟啉单胞菌胶体金试纸条的制备与应用
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作者 徐玉 陈园园 +3 位作者 朱斐然 宋琳 李华 杨秋波 《北京口腔医学》 CAS 2024年第4期261-265,共5页
目的制备简单、快速检测唾液P.gingivalis的胶体金试纸条。方法采用识别P.gingivalis不同表位的单抗E10、G3建立双抗夹心ELISA体系,鉴定双抗夹心ELISA识别P.gingivalis的特异性及敏感性。利用单抗E10、G3制备胶体金试纸条,检测胶体金试... 目的制备简单、快速检测唾液P.gingivalis的胶体金试纸条。方法采用识别P.gingivalis不同表位的单抗E10、G3建立双抗夹心ELISA体系,鉴定双抗夹心ELISA识别P.gingivalis的特异性及敏感性。利用单抗E10、G3制备胶体金试纸条,检测胶体金试纸条识别P.gingivalis的特异性。应用胶体金试纸条与实时定量PCR检测受试者唾液P.gingivalis并比较二者检测P.gingivalis的差异。结果单抗E10、G3建立双抗夹心ELISA体系可特异性识别P.gingivalis,识别敏感性≥5×10^(7)CFU/mL。单抗E10和G3制备的胶体金试纸条特异性识别P.gingivalis。胶体金试纸条与实时定量PCR分别检测受试者唾液P.gingivalis,试纸条与PCR检测对牙周炎的检出效果无统计学差异,检测P.gingivalis的细菌数量无统计学差异。胶体金试纸条检测唾液P.gingivalis,牙周炎组、牙周健康组阳性率分别为40%、10%。结论制备出检测P.gingivalis的胶体金试纸条,可特异性检测P.gingivalis,具有检测唾液中P.gingivalis的潜力。 展开更多
关键词 胶体金试纸条 牙周炎 牙龈卟啉单胞菌 单克隆抗体 血凝素2
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有机磷农药胶体金免疫层析竞争法快速检测方法的建立 被引量:1
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作者 李洋洋 崔琳 +2 位作者 张宇彤 郑佳慧 艾金霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期428-434,共7页
目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试... 目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试纸条工作参数,并进行性能测试。结果抗血清效价在1∶32~1∶64之间,蛋白含量约为2 mg/mL。纯化后的多克隆抗体在相对分子质量(M r)25000和55000处出现目的条带,纯度较好;试纸条反应时间在5~10 min,样本检测限为200 ng/mL,特异性及准确性良好,试纸条有效期为6个月。结论建立了简便快速检测多种有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法,适合大量样本的现场初筛。 展开更多
关键词 乙酰胆碱酯酶 多克隆抗体 有机磷农药 胶体金试纸条 免疫层析法
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同时快速检测蔬菜中百菌清和多菌灵的胶体金免疫层析法
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作者 许奂源 梁植雯 +6 位作者 许景皓 黄苇 尹青春 李斌 江林峰 郭美媛 徐振林 《食品研究与开发》 CAS 2024年第8期139-148,共10页
该研究制备分别特异性识别百菌清、多菌灵的两种单克隆抗体,并建立一种同时快速检测蔬菜中百菌清和多菌灵的胶体金免疫层析法。在最适工作条件下,所建立的方法对百菌清、多菌灵的检测限分别为0.08 ng/mL和1.95 ng/mL,线性范围分别为0.08... 该研究制备分别特异性识别百菌清、多菌灵的两种单克隆抗体,并建立一种同时快速检测蔬菜中百菌清和多菌灵的胶体金免疫层析法。在最适工作条件下,所建立的方法对百菌清、多菌灵的检测限分别为0.08 ng/mL和1.95 ng/mL,线性范围分别为0.08~10.00 ng/mL和1.95~250.00 ng/mL。黄瓜、番茄、包菜3种样品加标回收率为79.2%~112.1%(百菌清)和63.3%~97.5%(多菌灵),变异系数均低于18.9%,试纸条所需检测时间为20 min,可应用于蔬菜中百菌清、多菌灵残留的现场高通量快速筛查。 展开更多
关键词 百菌清 多菌灵 单克隆抗体 胶体金免疫层析 同时检测
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牛传染性鼻气管炎病毒胶体金检测试纸条的研制和评价
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作者 刘文晓 张坤 +1 位作者 程晶 李永清 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期70-76,共7页
为建立快速检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的病原学检测方法,本试验采用杂交瘤细胞融合技术制备IBRV单克隆抗体,以其作为检测原,优化反应条件并组装IBRV胶体金检测试纸条,验证该试纸条的特异性、灵敏性、敏感性和稳定性,并与实时荧光定... 为建立快速检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的病原学检测方法,本试验采用杂交瘤细胞融合技术制备IBRV单克隆抗体,以其作为检测原,优化反应条件并组装IBRV胶体金检测试纸条,验证该试纸条的特异性、灵敏性、敏感性和稳定性,并与实时荧光定量PCR(qPCR)进行比较分析。结果显示,共制备7株针对IBRV的单克隆抗体,其中以胶体金标记的单克隆抗体2B7作为捕获抗体、1B9作为检测抗体,建立的胶体金检测试纸条能够检测样品中的IBRV;该试纸条与病毒性腹泻/黏膜病毒、牛冠状病毒和大肠杆菌无交叉反应,检测限为4.04×10~4TCID50/0.1 mL,敏感性为86.7%;在室温条件下保存12个月仍能够有效检测IBRV,说明该试纸条稳定性良好。与qPCR比较结果显示,2种方法检测结果的符合率为92.85%,说明该胶体金检测试纸条能够用于IBRV的临床诊断。结果表明,本试验利用IBRV的单克隆抗体建立的胶体金检测试纸条灵敏度高且特异性好,为IBRV抗原检测和流行病学调查提供技术支持。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV) 胶体金检测试纸条 单克隆抗体
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啶酰菌胺单克隆抗体制备及其试纸条的研究
5
作者 朱亮亮 王磊 +2 位作者 杨洪丹 孟庆林 万宇平 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第11期249-253,共5页
啶酰菌胺是一种新型烟酰胺类杀菌剂,常用来防治果蔬各种类型的真菌病害。为构建一种啶酰菌胺简便、准确的检测方法,该实验首先应用啶酰菌胺人工抗原免疫BALB/c小鼠,免疫后取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合,筛选得到可产生啶酰菌胺单... 啶酰菌胺是一种新型烟酰胺类杀菌剂,常用来防治果蔬各种类型的真菌病害。为构建一种啶酰菌胺简便、准确的检测方法,该实验首先应用啶酰菌胺人工抗原免疫BALB/c小鼠,免疫后取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合,筛选得到可产生啶酰菌胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株,随后建立了啶酰菌胺的胶体金免疫层析方法。结果表明,所制备的啶酰菌胺单克隆抗体特异性强,选取了蔬菜水果中可能与啶酰菌胺联合用药的17种药物进行特异性测定,均未产生交叉反应,灵敏度高,半数抑制浓度(IC_(50))值为1.03 ng/mL;建立的胶体金免疫层析法对蔬菜水果的检测限为5μg/L,符合GB 2763—2021《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》规定的最大残留限量要求,可用于实际样品中啶酰菌胺残留的快速检测,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 啶酰菌胺 单克隆抗体 胶体金免疫层析技术
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两种艾滋病抗体检测方法在艾滋病诊断中的作用
6
作者 才莹 《中国现代药物应用》 2024年第1期77-79,共3页
目的 分析酶联免疫法和胶体金法在艾滋病抗体检测中的使用效果。方法 选取45例艾滋病抗体检测阳性患者及45例健康体检者为研究对象,所有受检者均接受酶联免疫法和胶体金法艾滋病抗体检测。分析两种检测方法的艾滋病检出情况,比较两种检... 目的 分析酶联免疫法和胶体金法在艾滋病抗体检测中的使用效果。方法 选取45例艾滋病抗体检测阳性患者及45例健康体检者为研究对象,所有受检者均接受酶联免疫法和胶体金法艾滋病抗体检测。分析两种检测方法的艾滋病检出情况,比较两种检测方法的诊断敏感性、特异性。结果 酶联免疫法检出艾滋病阳性43例,阳性检出率为47.78%(43/90);胶体金法检出艾滋病阳性44例,阳性检出率为48.89%(44/90)。酶联免疫法的诊断敏感性为95.56%(43/45),特异性为100.00%(45/45);胶体金法的诊断敏感性为97.78%(44/45),特异性为100.00%(45/45)。酶联免疫法和胶体金法的诊断敏感性、特异性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 艾滋病对人体危害较大,会破坏患者自身免疫屏障,降低患者自身免疫力,损伤患者内脏器官。患者应尽早筛查并采取治疗措施,避免病情继续发展。目前采取酶联免疫法和胶体金法均能够获得较好的检测结果 ,胶体金法常用于窗口期检测,而酶联免疫法主要用于初筛,在实际检测过程中可以结合实际情况选择适合的检测方式。 展开更多
关键词 艾滋病 诊断 抗体检测 酶联免疫法 胶体金法
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胶体金法及酶联免疫法应用于艾滋病抗体检测的价值分析
7
作者 崔一峰 《系统医学》 2024年第3期105-108,共4页
目的分析在艾滋病病毒抗体检测中,应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)和胶体金法的检验效果。方法选取2018年6月—2023年6月海安市疾病预防控制中心复检人类免疫缺陷病毒抗体检测的90份样本作为研究对象,... 目的分析在艾滋病病毒抗体检测中,应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)和胶体金法的检验效果。方法选取2018年6月—2023年6月海安市疾病预防控制中心复检人类免疫缺陷病毒抗体检测的90份样本作为研究对象,均应用胶体金法及ELISA法检测。比较两种检测方式的诊断效能。结果胶体金法检测灵敏度93.33%、特异度86.67%、准确度92.22%;ELISA法检测灵敏度100.00%、特异度93.33%、准确率98.89%。ELISA法检测灵敏度及准确度均优于胶体金法,差异有统计学意义(χ^(2)=5.172、4.709,P均<0.05)。结论在艾滋病诊断中,应用ELISA及胶体金法均有较高的诊断效能,ELISA法检测灵敏度及准确度均优于胶体金法。 展开更多
关键词 艾滋病 酶联免疫法 胶体金法 抗体检测 诊断效能
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黄曲霉毒素B_(1)胶体金免疫层析试纸条的制备及性能研究
8
作者 董高丽 江迎春 +4 位作者 胡鹏 郭宁 杨爽爽 樊海亮 刘闯军 《山东化工》 CAS 2024年第8期29-31,38,共4页
以黄曲霉毒素B_(1)为研究对象,制作出一种可实现对黄曲霉毒素B_(1)含量快速检测的胶体金试纸条。实验采用竞争抑制法,基于试纸条的层析作用,以胶体金为标记物与黄曲霉毒素B_(1)单抗偶联,将黄曲霉毒素B_(1)抗原和羊抗鼠二抗固定到硝酸纤... 以黄曲霉毒素B_(1)为研究对象,制作出一种可实现对黄曲霉毒素B_(1)含量快速检测的胶体金试纸条。实验采用竞争抑制法,基于试纸条的层析作用,以胶体金为标记物与黄曲霉毒素B_(1)单抗偶联,将黄曲霉毒素B_(1)抗原和羊抗鼠二抗固定到硝酸纤维膜上作为检测线和质控线,制备出可以快速检测黄曲霉毒素B_(1)的免疫层析试纸条。通过优化,试纸条在37℃条件下,分别在5,10,15,20 d后测试,效果没有明显降低,检测灵敏度为20 ng/mL;与磺胺类药物、“瘦肉精”类药物均无交叉反应。该试纸条具有良好的稳定性和特异性,可实现生物样本中黄曲霉毒素B_(1)的快速大量检测。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 胶体金 试纸条 抗体 快速检测
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犬巴贝斯虫抗体胶体金检测卡制备与评价
9
作者 王汝锦 孙晓笛 吴银河 《现代畜牧兽医》 2024年第3期7-11,共5页
试验旨在快速检测犬巴贝斯虫抗体,利用胶体金免疫层析技术制备犬巴贝斯虫抗体胶体金检测卡并评价其功能性。将羊抗鼠免疫球蛋白G (IgG)和犬巴贝斯虫表面抗原Bg P47重组蛋白(Bg P47 Ag)包被于NC膜上分别做为质控线和检测线,胶体金标记的... 试验旨在快速检测犬巴贝斯虫抗体,利用胶体金免疫层析技术制备犬巴贝斯虫抗体胶体金检测卡并评价其功能性。将羊抗鼠免疫球蛋白G (IgG)和犬巴贝斯虫表面抗原Bg P47重组蛋白(Bg P47 Ag)包被于NC膜上分别做为质控线和检测线,胶体金标记的鼠IgG和鼠抗犬IgG均匀喷点在聚酯纤维膜上作为标记垫,将化学品配制的玻纤溶液均匀涂在样品垫上,并用吸水纸和PVC底板制备犬巴贝斯虫抗体胶体金检测卡,对其特异性、灵敏度、均一性、加速稳定性、实时稳定性进行评价,并与ELISA、PCR检测结果进行对比。结果显示,该检测卡不与犬莱姆抗体(lyme Ab)阳性犬血清、犬瘟热病毒抗体(CDV Ab)阳性犬血清、犬细小病毒抗体(CPV Ab)阳性犬血清、犬无形体抗体(Anaplasma Ab)阳性犬血清、犬三联疫苗阳性免疫犬血清样本发生交叉反应;可检测浓度稀释至1∶256倍的样本;有效期可达到24个月。研究表明,该检测卡可快速、准确地检测犬巴贝斯虫抗体,为动物临床诊断和治疗提供参考。 展开更多
关键词 犬巴贝斯虫病 犬巴贝斯虫抗体 胶体金检测卡 血液寄生虫病
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电化学发光法和胶体金免疫层析法检测梅毒抗体的价值分析
10
作者 杨佳莉 《中外医药研究》 2024年第6期153-155,共3页
目的:分析电化学发光法和胶体金免疫层析法检测梅毒抗体的价值。方法:选取2021年4月—2022年5月于常州市德安医院行梅毒抗体检测的检查者100例作为研究对象。所有检查者行电化学发光法、胶体金免疫层析法检测以及梅毒螺旋体抗体明胶颗... 目的:分析电化学发光法和胶体金免疫层析法检测梅毒抗体的价值。方法:选取2021年4月—2022年5月于常州市德安医院行梅毒抗体检测的检查者100例作为研究对象。所有检查者行电化学发光法、胶体金免疫层析法检测以及梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验。将梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验结果作为“金标准”,比较电化学发光法、胶体金免疫层析法的诊断准确性、敏感度、特异度。结果:100例检测者中有77例梅毒抗体阳性。电化学发光法检测梅毒抗体的准确性、敏感度、特异度高于胶体金免疫层析法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电化学发光法检测梅毒抗体的价值更高,适合应用于临床。 展开更多
关键词 梅毒抗体 电化学发光法 胶体金免疫层析法
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ELISA与GICA法在梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用价值
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作者 刘静 《四川生理科学杂志》 2024年第9期2073-2075,共3页
目的:探究胶体金免疫层析法(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)在梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用价值。方法:选择2021年7月-2023年8月期间于本院就诊的疑似梅毒患者60例作为研究对象。以明胶颗粒凝集试验(TPPA)作为梅毒螺旋体特异性抗... 目的:探究胶体金免疫层析法(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)在梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用价值。方法:选择2021年7月-2023年8月期间于本院就诊的疑似梅毒患者60例作为研究对象。以明胶颗粒凝集试验(TPPA)作为梅毒螺旋体特异性抗体检测的“金标准”。所有患者均行GICA、ELISA,分析对比两种检测方法的检测结果。对比阳性及阴性患者梅毒螺旋体特异性抗体水平;对比不同检测法的测定时间;对比不同检测方法下诊断梅毒螺旋体特异性抗体的应用价值,并计算与“金标准”的一致性。结果:60例疑似患者中经TPPA检测明确阳性47例,GICA检测明确阳性43例,ELISA检测明确阳性46例。阳性患者梅毒螺旋体特异性抗体水平显著高于阴性梅毒螺旋体特异性抗体水平(P<0.05)。GICA法检测梅毒螺旋体特异性抗体时间显著长于ELISA法检测梅毒螺旋体特异性抗体时间(P<0.05)。相比于GICA法,ELISA法诊断梅毒螺旋体特异性抗体中灵敏度、准确度均较高,有统计学差异(P<0.05)。一致性检验显示:GICA检测一致性尚可(kappa值=0.470,P=0.000),ELISA法检测一致性良好(kappa值=0.857,P=0.000)。结论:与GICA法相比,梅毒螺旋体特异性抗体检测中ELISA法具有较高的临床应用价值,检测时间较短,准确度较高,并与“金标准”一致性较高。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体特异性抗体 胶体金免疫层析法 酶联免疫吸附试验 准确度
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新型冠状病毒中和抗体与特异性抗体检测结果一致性分析 被引量:2
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作者 肖秀美 梁超 +1 位作者 刘彩红 李晓光 《检验医学》 CAS 2023年第4期352-356,共5页
目的探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体与特异性IgM、IgG抗体的一致性,为疫苗接种人群特异性抗体检测结果的临床解读提供依据。方法选取排除SARS-CoV-2感染的健康医务人员148名,其中127名接种过SARS-CoV-2疫苗(按样本采集日期与第2... 目的探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体与特异性IgM、IgG抗体的一致性,为疫苗接种人群特异性抗体检测结果的临床解读提供依据。方法选取排除SARS-CoV-2感染的健康医务人员148名,其中127名接种过SARS-CoV-2疫苗(按样本采集日期与第2剂疫苗接种日期的时间间隔分为14~30 d组、31~60 d组、61~90 d组、91~120 d组、121~150 d组、>150 d组),21名未接种SARS-CoV-2疫苗。采用胶体金免疫层析法(LFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SARS-CoV-2中和抗体,采用磁微粒化学发光免疫分析法检测特异性IgM、IgG抗体,分析3种方法检测结果的一致性。结果14~30 d组ELISA中和抗体、LFIA中和抗体、特异性IgG抗体的阳性率均为100.00%,特异性IgM抗体阳性率为27.27%。随着疫苗接种时间的延长,3种方法的抗体阳性率均逐渐下降。31~120 d各组特异性IgG抗体阳性率均最高,121~150 d组和>150 d组ELISA中和抗体阳性率最高。ELISA中和抗体检测结果与LFIA的总符合率为85.14%,一致性一般(Kappa=0.698);与特异性IgM抗体的总符合率为60.14%,一致性较差(Kappa=0.144);与特异性IgG抗体的总符合率为82.43%,一致性一般(Kappa=0.649)。特异性IgG抗体与LFIA中和抗体检测结果的总符合率为83.78%,一致性一般(Kappa=0.677)。结论磁微粒化学发光免疫分析法特异性IgG抗体检测结果与LFIA、ELISA中和抗体检测结果的符合率>80%,但一致性一般,需谨慎解读特异性IgG抗体阳性结果。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 特异性抗体 中和抗体 酶联免疫吸附试验 胶体金免疫层析法 磁微粒化学发光免疫分析法
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胶体金免疫层析法快速检测食品中的米酵菌酸 被引量:13
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作者 曹雪铭 徐振林 +3 位作者 苏燕瑜 王宇 雷红涛 肖剑 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第2期309-318,共10页
制备特异性识别米酵菌酸的单克隆抗体,并以胶体金标记用作示踪物,建立胶体金免疫层析快速检测方法。研究胶体金标记体系pH值、抗原、抗体质量浓度、离子强度、表面活性剂以及样品前处理方法等对胶体金层析卡性能的影响。结果表明:在最... 制备特异性识别米酵菌酸的单克隆抗体,并以胶体金标记用作示踪物,建立胶体金免疫层析快速检测方法。研究胶体金标记体系pH值、抗原、抗体质量浓度、离子强度、表面活性剂以及样品前处理方法等对胶体金层析卡性能的影响。结果表明:在最适条件下,所建立的胶体金免疫层析方法对米酵菌酸的定量检出限为1.2μg/kg,线性范围1.8~7.2μg/kg,定性检出限16.0μg/kg。该方法特异性良好,与食品中常见的毒素无交叉反应,对银耳、木耳和米粉等样品的添加回收率在80.2%~101.2%之间,相对标准偏差小于6.4%,且结果与LC-MS/MS法一致。该方法具有准确、灵敏、简便、快速和低成本等特点,可以满足食品中米酵菌酸现场大批量筛查的需求。 展开更多
关键词 米酵菌酸 单克隆抗体 胶体金免疫层析 快速检测
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牛病毒性腹泻病毒抗原胶体金快速检测试纸条的研制 被引量:7
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作者 卜庆龙 左之才 +6 位作者 才冬杰 叶刚 田斌 李伟强 苟丽萍 王娅 邓俊良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1253-1257,共5页
为建立一种快速准确且便携的检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的方法,本研究将制备的BVDV单克隆抗体(MAb)作为检测线(T线),以纯化的免源多克隆抗体作为金标蛋白,以羊抗兔IgG-HRP作为质控线(C线),组装成双抗体夹心胶体金层析试纸条,并优化各... 为建立一种快速准确且便携的检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的方法,本研究将制备的BVDV单克隆抗体(MAb)作为检测线(T线),以纯化的免源多克隆抗体作为金标蛋白,以羊抗兔IgG-HRP作为质控线(C线),组装成双抗体夹心胶体金层析试纸条,并优化各反应条件。结果显示,最适金标蛋白标记量为30μg/mL,BVDV MAb和羊抗兔IgG-HRP最佳浓度均为0.5 mg/mL。利用猪瘟病毒(CSFV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛丘疹性口炎病毒(BPSV)及BVDV临床分离株评估该试纸条的特异性,结果显示,除阳性对照和BVDV临床分离株检测为阳性外,其余病毒均为阴性,表明该试纸条的特异性较强,无交叉反应。将BVDV-NADL株(10^(6.6)ELD_(50)/mL)10倍倍比稀释后,利用该试纸条检测,结果显示其最低检出量为10^(4.6)ELD_(50)/mL。利用同一批次和不同批次制备的试纸条对CSFV、IBRV、BPSV、BVDV临床分离株检测,结果显示检测结果均一致,表明该试纸条的重复性良好。将制备的试纸条应用于检测临床采集的68份牛血清样品,并以RT-PCR方法同时检测,结果显示胶体金试纸条对BVDV的阳性检出率为17.5%(12/68),RT-PCR对BVDV的阳性检出率为26.5%(18/68),两者之间的总符合率为88.24%。本研究于国内首次采用双抗体夹心方式制备了检测BVDV的胶体金免疫层析试纸条,该方法方便快捷,特异性及敏感性均较好,适宜于牛场BVDV的快速筛选,为进一步研制BVDV胶体金检测试剂盒提供了实验依据。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 双抗体夹心 胶体金层析技术 检测 试纸条
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胶体金免疫层析法快速检测水产品中河豚毒素的研究 被引量:5
15
作者 韩金治 李亚茹 +5 位作者 罗林 关甜 雷红涛 蔡伟谊 王炳志 徐振林 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1598-1606,共9页
该文将特异性识别河豚毒素的单克隆抗体加以胶体金标记用作示踪物,建立了豚毒素的胶体金免疫层析技术快速检测方法。优化了胶体金体系的pH值、抗原抗体浓度、离子浓度、表面活性剂种类以及样品前处理方法。结果显示:在最优条件下,建立... 该文将特异性识别河豚毒素的单克隆抗体加以胶体金标记用作示踪物,建立了豚毒素的胶体金免疫层析技术快速检测方法。优化了胶体金体系的pH值、抗原抗体浓度、离子浓度、表面活性剂种类以及样品前处理方法。结果显示:在最优条件下,建立的胶体金免疫层析法对河豚毒素的定量检出限为0.5 ng/mL,线性范围为0.8~10.6 ng/mL,定性检出限(裸眼判别)为12.0 ng/mL。河豚、织纹螺等样品的加标回收率为70.5%~110%,相对标准偏差为3.7%~7.1%,检测结果与LC-MS/MS法一致。所建立的胶体金免疫层析技术在现场快速检测方面具有良好的可行性和实用性,可用于大量样品的快速筛查和河豚毒素中毒后的快速诊断。 展开更多
关键词 河豚毒素 单克隆抗体 胶体金免疫层析 快速检测 水产品
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鸭坦布苏病毒E蛋白Domain Ⅲ单克隆抗体胶体金试纸条的创制及应用 被引量:4
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作者 阚莹 张淼 +8 位作者 卢奇 吕炫 于胜祖 王习强 姜雅倩 王蓓 朱英奇 王晴 王桂军 《中国动物检疫》 CAS 2023年第2期131-138,共8页
为建立一种快速诊断鸭坦布苏病毒(DTMUV)的方法,以2株(B9D7B8G10和B9D10C7株)抗DTMUV的单克隆抗体制备DTMUV胶体金免疫层析试纸条。采用经典的柠檬酸钠还原法制备胶体金溶液,利用rProtein G琼脂糖凝胶亲和层析法对两株单克隆抗体腹水进... 为建立一种快速诊断鸭坦布苏病毒(DTMUV)的方法,以2株(B9D7B8G10和B9D10C7株)抗DTMUV的单克隆抗体制备DTMUV胶体金免疫层析试纸条。采用经典的柠檬酸钠还原法制备胶体金溶液,利用rProtein G琼脂糖凝胶亲和层析法对两株单克隆抗体腹水进行纯化并鉴定;以纯化的B9D7B8G10株单克隆抗体作为标记抗体,通过调节单克隆抗体浓度与pH确定胶体金探针最佳结合条件;同时,在硝酸纤维素膜(NC膜)检测带包被纯化的B9D10C7株单克隆抗体,质控带包被山羊抗小鼠IgG抗体,建立检测DTMUV胶体金免疫层析试纸条;成功建立试纸条后,对试纸条敏感性、特异性、重复性和稳定性进行检测,并与RT-PCR检测方法进行比较,对200份临床疑似感染样品进行检测。结果显示:制备的胶体金试纸条在15 min内即可完成检测,最低检测稀释度为1:50,且不与鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅星状病毒、禽白血病病毒发生交叉反应;应用试纸条和RT-PCR方法分别对200份临床疑似样品进行检测,两者符合率达98%。结果表明,制备的胶体金试纸条敏感性高、特异性强、稳定性好、重复性好,为DTMUV的快速检测提供了一种实用检测技术。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 胶体金 单克隆抗体 免疫层析试纸条
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氰烯菌酯胶体金免疫层析方法的建立与验证 被引量:3
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作者 蒋岚 孙晨晨 +5 位作者 胡荣荣 宋明姝 刘鹏琰 卞军 丁宁 张存政 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期700-709,共10页
氰烯菌酯是我国自主研发的防治小麦赤霉病的新型杀菌剂,国内外尚无类似产品,其残留免疫检测方法亦无报道。本研究通过设计合成半抗原,制备了该农药的鼠源特异性单克隆抗体,通过纳米金标记建立了胶体金免疫层析检测方法。鉴定结果表明:... 氰烯菌酯是我国自主研发的防治小麦赤霉病的新型杀菌剂,国内外尚无类似产品,其残留免疫检测方法亦无报道。本研究通过设计合成半抗原,制备了该农药的鼠源特异性单克隆抗体,通过纳米金标记建立了胶体金免疫层析检测方法。鉴定结果表明:所获得的单克隆抗体类型为IgG1。间接竞争酶联免疫吸附分析(ic-ELISA)结果表明:在38.72~438.08 ng/mL线性范围内,该单克隆抗体对氰烯菌酯的检测灵敏度即20%抑制浓度(IC_(20))为38.72 ng/mL,50%抑制浓度(IC_(50))为108.42 ng/mL,与结构类似物杀菌剂嘧菌酯、吡唑醚菌酯、氟醚菌酰胺和啶氧菌酯的交叉反应率(CR)<0.01%,表明该抗体对氰烯菌酯具有较高的特异性。胶体金免疫检测试纸条裸眼观察检出限为50 ng/mL,15 min内可完成检测,与甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂无交叉反应。以添加氰烯菌酯的面粉样本进行方法验证,胶体金免疫层析试纸条测试结果与液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法的检测结果一致,表明研发的胶体金免疫层析方法可实现样品中氰烯菌酯残留的快速定性以及半定量分析。 展开更多
关键词 氰烯菌酯 胶体金免疫层析 单克隆抗体 纳米金标记 特异性 农药残留快速检测
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阿克苏地区某规模化奶牛场牛结核抗体的监测及分析 被引量:1
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作者 刘祥杰 塔·赛日吉玛 +3 位作者 邢潇月 李虎 张家浩 李莲瑞 《现代畜牧兽医》 2023年第3期52-56,共5页
试验旨在为阿克苏地区牛结核的防控提供基础数据。试验在2020—2021年间于阿克苏地区某规模化奶牛场采集全血3215份(2020年1668份和2021年1547份),对采集的全血分离血清,使用牛结核抗体快速检测卡(胶体金法)对血清进行抗体阳性率检测,... 试验旨在为阿克苏地区牛结核的防控提供基础数据。试验在2020—2021年间于阿克苏地区某规模化奶牛场采集全血3215份(2020年1668份和2021年1547份),对采集的全血分离血清,使用牛结核抗体快速检测卡(胶体金法)对血清进行抗体阳性率检测,并对检测结果进行比对分析。结果显示,2020年共计检测1668份不同繁殖状态样品,阳性样品23份,可疑样品3份,阳性率为1.38%;其中妊娠奶牛阳性率最高,为2.03%。2021年共计检测1547份不同繁殖状态样品,阳性样品35份,可疑样品5份,阳性率为2.26%;其中妊娠奶牛阳性率最高,为2.26%。2020年共计检测1577份不同月龄样品,阳性样品23份,可疑样品3份,阳性率为1.46%;其中6~10月龄奶牛阳性率最高,为1.82%。2021年共计检测1477份不同月龄样品,阳性样品35份,可疑样品5份,阳性率为2.37%;其中6~10月龄奶牛阳性率最高,为2.84%。2020年共计检测874份不同胎次样品,阳性样品20份,可疑样品3份,阳性率为2.29%;其中7胎以上奶牛阳性率最高,为5.56%。2021年共计检测777份不同胎次样品,阳性样品29份,可疑样品4份,阳性率为3.73%;其中7胎以上奶牛阳性率最高,为10.52%。研究表明,阿克苏地区2020—2021年牛结核抗体阳性率低于国家控制标准,牛结核快速检测卡可作为初步检测依据。 展开更多
关键词 牛结核 牛结核抗体快速检测卡(胶体金法) 流行病学监测
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应用于RPA nfo反应产物结果可视化的胶体金试纸条制备与评价
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作者 杨晨 薛俊欣 +5 位作者 林雅娟 王小妹 蒋蔚 张曼玉 王权 孙卫东 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第12期41-49,共9页
旨在利用6-羧基荧光素(6-FAM)与6-FAM单克隆抗体、生物素与链霉亲和素之间的特异性结合,制备可用于nfo酶切割探针的重组酶聚合酶(RPA)反应产物结果可视化的胶体金侧向免疫层析试纸条(GICS)。通过杂交瘤法和诱生腹水法制备了高亲和力的6-... 旨在利用6-羧基荧光素(6-FAM)与6-FAM单克隆抗体、生物素与链霉亲和素之间的特异性结合,制备可用于nfo酶切割探针的重组酶聚合酶(RPA)反应产物结果可视化的胶体金侧向免疫层析试纸条(GICS)。通过杂交瘤法和诱生腹水法制备了高亲和力的6-FAM单克隆抗体(亲和力常数为5.38×10~9 L/mol),再运用高浓度NaCl破坏试验,确定了胶体金与6-FAM抗体的最佳标记pH值为8.0,最佳抗体标记量为12μg/mL,并使用模拟样本确定了最佳检测(T)线包被缓冲液为0.2 mol/L(pH值5.0)。然后使用RPA nfo反应产物作为实际样本,观察条带的深浅,最终确定在层析液为0.1 mol/L PB(pH值7.4)、T线包被1 mg/mL SA、反应液用量5μL及金标抗体用量10μL条件下,能实现试纸条最佳检测性能。自主研发的胶体金侧向免疫层析试纸条在加样5 min后能出现清晰的条带,与目前商品化试纸条的可视化判定结果一致,能替代现有的商品化试纸条,降低检测成本、缩短检测时间,对建立RPA nfo-GICS及RPA-CRISPR Cas12a-GICS检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 6-FAM单克隆抗体 生物素-链霉亲和素系统 RPA nfo 胶体金侧向免疫层析试纸条
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MTB分泌蛋白胶体金法检测痰液在肺结核诊断中的价值 被引量:3
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作者 郭新军 杜小倩 《包头医学院学报》 CAS 2023年第4期43-46,61,共5页
目的:探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分泌蛋白胶体金法检测患者痰液在肺结核诊断中的临床应用价值。方法:选取2020年10月至2020年12月在滨州市中心医院确诊的住院肺结核患者173例作为研究对象,留取晨痰,分别采用痰... 目的:探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分泌蛋白胶体金法检测患者痰液在肺结核诊断中的临床应用价值。方法:选取2020年10月至2020年12月在滨州市中心医院确诊的住院肺结核患者173例作为研究对象,留取晨痰,分别采用痰抗酸染色涂片镜检法、痰培养法、MTB分泌蛋白胶体金法、GeneXpert MTB/RIF法进行检测,对比不同方法的诊断效能。结果:173例患者痰涂片阳性59例(34.10%),痰培养阳性66例(38.15%),痰胶体金阳性90例(52.02%),GeneXpert MTB/RIF法阳性102例(58.96%)。痰胶体金法与痰培养结果比较差异有统计学意义(χ^(2)=6.724,P=0.010);GeneXpert MTB/RIF法和痰培养法结果比较差异有统计学意义(χ^(2)=14.995,P<0.001);痰胶体金法与GeneXpert MTB/RIF法结果比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.685,P=0.194)。173例患者痰液检测,菌阳组阳性检出率明显高于菌阴组(χ^(2)=45.146,P<0.001;χ^(2)=49.406,P<0.001);通过痰胶体金法,菌阳组和菌阴组检出结果差异有统计学意义(χ^(2)=45.146,P<0.001),但初治和复治患者之间,结果比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.160,P=0.689)。结论:MTB分泌蛋白胶体金法检测患者痰液在肺结核诊断中有较大临床价值,且快速、简便,值得推广应用。 展开更多
关键词 肺结核 分枝杆菌 蛋白质组学 抗体胶体金法
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