基于肠道菌群平衡分析微生态制剂联合浙贝黄芩汤对急性淋巴细胞白血病大剂量化疗后患者的临床影响

目的探讨微生态制剂联合浙贝黄芩汤对急性淋巴细胞白血病(ALL)大剂量化疗后患者粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)、粒单系集落形成单位(CFU-GM)、肠道菌群及红系爆式集落形成单位(BFU-E)的影响。方法选取延安大学附属医院2019年6月至2022年12月收治的ALL患者130例作为研究对象,根据治疗方法将患者分为A组、B组、C组,3组患者均接受大剂量化疗,化疗结束48 h后A组患者实施常规治疗,B组患者单纯浙贝黄芩汤治疗,C组给予微生态制剂联合浙贝黄芩汤治疗,治疗12 d后,对3组患者G-CSFR、CFU-GM、BFU-E表达情况及血细胞数量进行检测。结果治疗后,C组血红蛋白、白细胞、血小板[(79±6)g/L、(3.8±0.4)×10^(9)/L、(66.4±3.6)×10^(9)/L]与A组[(59±7)g/L、(3.2±0.4)×10^(9)/L、(52.6±2.8)×10^(9)/L]、B组[(61±7)g/L、(3.1±0.3)×10^(9)/L、(52.8±2.6)×10^(9)/L]对比,差异有统计学意义(P<0.05)。C组G-CSFR(5.35±0.16)pg/ml和白细胞介素-11受体(IL-11R)(6.38±0.54)μg/kg水平均高于A组[(2.23±0.13)pg/ml和(1.49±0.24)μg/kg]和B组[(2.31±0.16)pg/ml和(2.31±0.49)μg/kg]差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,C组患者7 d CFU-GM(18.5±6.0)个和14 d BFU-E(83.5±7.5)个高于A组[7 d CFU-GM(9.5±2.0)个和14 d BFU-E(59.5±6.5)个]和B组[7 d CFU-GM(12.0±6.5)个和14 d BFU-E(63.5±5.0)个],差异有统计学意义(P<0.05)。7 d后,C组双歧杆菌(12.56±3.25)lgCFU/g、乳酸杆菌(13.56±2.58)lgCFU/g、肠杆菌(5.12±1.45)lgCFU/g、肠球菌(5.14±0.58)lgCFU/g高于A组[(9.26±1.03)lg CFU/g、(8.65±0.84)lg CFU/g、(8.08±0.64)lgCFU/g、(8.15±0.46)lgCFU/g]和B组[(11.35±1.36)lg CFU/g、(12.43±1.14)lgCFU/g、(6.49±0.55)lgCFU/g、(6.66±0.43)lgCFU/g],差异有统计学意义(P<0.05)。结论微生态制剂联合浙贝黄芩汤治疗可以有效提高ALL大剂量化疗后患者的G-CSFR、CFU-GM、BFU-E水平,可能更好地改善化疗引起的患者骨髓抑制情况,改善肠道菌群,具有临床研究价值。

地黄低聚糖对快速老化模型小鼠造血功能的影响

目的：研究地黄低聚糖（ＲＧＯＳ）对快速老化模型小鼠（ＳＡＭＰ８）造血功能的影响。方法：采用造血祖细胞体外克隆培养等实验血液学方法。结果：ＲＧＯＳ１０，２０ｍｇ·ｋｇ－１可使ＳＡＭＰ８小鼠的ＣＦＵ－Ｓ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ明显增多，并可使外周血中降低的ＷＢＣ数明显增加。提示ＲＧＯＳ可刺激ＳＡＭＰ８小鼠造血干细胞、祖细胞的增殖分化。集落刺激活性实验显示ＲＧＯＳ可使小鼠体内的集落刺激因子产生明显增多。小鼠骨髓组织学研究结果也进一步证实了ＲＧＯＳ增强ＳＡＭＰ８小鼠造血功能的作用。结论：ＲＧＯＳ可以增强ＳＡＭＰ８小鼠的造血功能。

黄芪注射液对人巨细胞病毒感染的粒-单系祖细胞体外增殖的影响

目的 探讨黄芪注射液对人巨细胞病毒 (HCMV)感染的粒—单系祖细胞 (CFU GM )体外增殖的影响。方法 采用造血祖细胞体外培养技术 ,用黄芪干预HCMV感染的CFU GM ,观察计数CFU GM的产率 ,大小 ,峰期及维持时间。结果 ①黄芪组每 2× 10 5个细胞中CFU GM簇和集落的产率分别为 333.33± 12 .6 9和81.2 3± 4 .93,病毒组每 2× 10 5个细胞中簇和集落的产率分别为 16 7.80± 16 .6 3,5 3.70± 1.6 7,两者相比差异有显著性 (P <0 .0 1)。②黄芪组大集落的比例占 (9.5± 0 .8) % ,明显高于病毒组 (2 .7± 1.0 ) % ,P <0 .0 1。③黄芪组大集落峰期出现早 ,集落和大集落维持时间长。结论 在体外黄芪注射液可以促进HCMV感染的CFU GM增殖。

人参总皂甙诱导人内皮细胞和单核细胞表达GM-CSF的实验研究

目的:研究人参总皂甙(TSPG)对人内皮细胞和单核细胞表达粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的影响,及其与人粒单系血细胞发生调控的关系。方法:采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术,检测内皮细胞和单核细胞中GM-CSF的表达。结果:经TSPG诱导制备的内皮细胞和单核细胞条件培养液中富含GM-CSF样活性,能显著促进人粒单系造血祖细胞的增殖分化;TSPG能显著促进内皮细胞与单核细胞的GM-CSF蛋白和mRNA表达。结论:TSPG可能通过直接和间接途径促进造血诱导微环境中的内皮细胞和单核细胞合成和分泌GM-CSF,进而促进血细胞生成。

黄芪对辐射小鼠造血功能的影响

结果表明黄芪能促进造血干细胞的增殖和向红系与粒系细胞分化，但对外周血血小板却无明显影响。

乌贼墨对小鼠造血干细胞、粒-单系祖细胞及外周白细胞的影响

目的探讨乌贼墨对小鼠造血干细胞、粒-单系祖细胞及外周血WBC的影响。方法用不同剂量的乌贼墨灌胃正常小鼠、环磷酰胺(Cy)和辐射骨髓损伤模型小鼠,采用造血祖细胞体外培养方法和实验血液学技术,检测小鼠骨髓造血干细胞生成数(CFU-S)、粒-单系祖细胞集落生成数(CFU-GM)和外周血WBC数量。结果乌贼墨能够显著提高正常小鼠CFU-S,CFU-GM和外周血WBC数量,有效拮抗模型小鼠体内CFU-S,CFU-GM及外周WBC的降低,并显著促进模型小鼠上述各指标的恢复。结论乌贼墨具有显著的促进小鼠骨髓粒系造血作用。其作用机制可能通过调节机体的免疫机能,诱导机体产生粒/单核细胞集落刺激因子和多种细胞因子,促进造血细胞的增殖,并诱导造血细胞向粒单系细胞分化。

低能量激光对人胎肝造血细胞的增殖作用

低能量激光对生物体具有刺激作用。经Ar^+激光波长514.5nm照射后的人胎肝造血细胞,可以在体外培养体系中分裂增殖,造血细胞集落明显增多。用激光照射产生集落刺激因子(CSF)的细胞,可以提高CSF的活性,在造血细胞体外培养体系中,使用该CSF,也能明显地提高造血细胞集落的形成率。用激光技术来处理造血细胞,可以成倍地提高细胞产率。这一技术不仅有理论意义而且有实用价值。

重型再生障碍性贫血患者免疫抑制治疗后骨髓造血祖细胞水平的变化及其意义

为更好地评价重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)后骨髓造血功能恢复程度,采用造血祖细胞体外培养技术,动态观察了48例接受IBT的SAA患者及20例正常对照者骨髓晚期红系爆式集落形成单位(mBFU-E)及粒-巨噬系集落形成单位(CFU-GM)的水平变化。结果表明,IST前所有SAA患者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平均显著低于正常对照组(P<0.001);IST后1年,29例有效者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平显著增高,增高程度与其临床疗效相关;12例mBFU-E及10例CFU-GM水平恢复正常,其中8例患者mBFU-E及CFU-GM水平同时恢复正常。这表明SAA确是一组异质性疾病,其造血功能衰竭与异常免疫关系密切,若去除这种异常,造血功能可获得部分甚至完全重建。

当归补血汤及其服药后血清对小鼠造血祖细胞的影响

当归补血汤煎液()对小鼠粒系—巨系造血祖细胞(CFU-GM)的生长有抑制作用,剂量越大,抑制作用越强。当归补血汤口饲小鼠后的含药血清()对CFU-GM的生长有明显的激活作用,剂量越大,CFU-GM集落生长的越多。药在相同含药血清浓度下,从时—效关系求出当归补血汤的药效动力学参数,Ke=0.3961/h,T1/2(Ke)=2.1602h,Ka=1.3422/h,T1/2(Ka)=1.6057h,Tp=1.5978h,Td=14.8019h。

巨噬细胞p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路促进抗结核菌感染作用

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路在抗结核分枝杆菌感染中的作用。方法通过流式细胞仪检测肺组织中p38 MAPK磷酸化水平;蛋白印迹法检测小鼠骨髓来源的巨噬细胞在H37Ra刺激下p38 MAPK的磷酸化水平;用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580抑制巨噬细胞中p38MAPK活性后,检测H37Ra感染不同小鼠巨噬细胞后细胞内结核菌的存活率,同时利用qRT-PCR检测H37Ra感染不同小鼠巨噬细胞的细胞因子表达水平。结果 H37Ra雾化的小鼠肺组织中p38 MAPK的磷酸化水平显著高于PBS组(t=5.493,P=0.0006);与空白对照组相比,在H37Ra刺激下,巨噬细胞中p38MAPK的磷酸化水平逐渐增加;用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580抑制p38 MAPK活性后,巨噬细胞内H37Ra的存活率显著增加(t=3.674,P=0.0213),H37Ra诱导的巨噬细胞中IL-6(t=9.789、P=0.0006)、TNF-α(t=5.735,P=0.0046)和IL-1β(t=9.311,P=0.0007)的表达水平也明显降低。结论巨噬细胞中p38 MAPK信号通路可能增强机体的抗结核菌感染作用。

胎盘血移植特性的研究——Ⅰ.人胎盘血粒单系祖细胞体外长期培养观察

本文采用体外甲基纤维素长期培养观察脐血(又称胎盘血)粒单系集落形成单位(CFU—GM)生长情况。结果:脐血(n=20)7、14、21、28天CFU—GM产率分别为28.78±37.82、143.30±168.64、286.40±497.00、107.93±131.98/2×10~5,35天(n=13)为93.27±111.20,42天(n=6)为68.67±103.30/2×10~5;14、21、28天脐血与7天骨髓的产率(180.91±134.07)无明显差异(P>0.05)。正常骨髓CFU-GM产率:14天(n=11)、21天(n=9)、28天(n=6)分别为115.14±87.85、59.81±68.05、25.00±20.45/2×10~5,14天集落产率开始下降,21天后明显减少;14天后集落脐血明显大于骨髓,细胞>1000个细胞,有些特大集落,>5000个细胞;脐血集落细胞于35天开始部分溶解(骨髓为14天,21天时多已完全溶解)。可见脐血造血细胞体外培养维持时间明显长于骨髓造血细胞(4～6^+周/3周~±),表明脐血造血细胞的生物学特性不同于骨髓造血细胞——富含扩增潜能更强、可维持长期造血重建的早期造血干细胞群。

Rhodamine123介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响

目的 探讨Rhodamine12 3(Rh12 3)介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响。方法 以C5 7B/ 6小鼠为供鼠 ,BALB/c小鼠为受鼠 ,脾脏淋巴细胞混合培养 ,比较单纯Rh12 3、单纯激光照射、光动力学疗法对小鼠混合淋巴细胞增殖 (MTT法 )及骨髓粒单核巨噬细胞集落形成 (CFU -GM)的影响 (甲基纤维素培养基法 ) ;流式细胞仪检测混合淋巴细胞中CD3+ CD6 9+ 阳性率。结果 Rh12 3组及单纯激光组对细胞增殖无显著影响 ,光动力学组 2 0mW/cm2 以下剂量激光对细胞增殖无明显影响 ,30mW/cm2 以上明显抑制细胞增殖 ;30mW/cm2 以下剂量对CFU -GM集落无明显影响。光动力学疗法后细胞培养 2 4h ,CD3+ CD6 9+ 表达明显下降。结论 光动力学疗法在 30mW/cm2 激光照射时可抑制淋巴细胞增殖 ,降低早期活化T细胞表达 ,但不影响骨髓CFU

人类巨细胞病毒对粒单系祖细胞分化过程中HOXB6、A5基因的影响

目的探讨人类造血干细胞(HSPC)向粒单系(CFU-GM)增殖过程中HOXB6、A5基因的表达情况,及人类巨细胞病毒(HCMV)对其的影响。方法采用real-timePCR技术测定正常对照组与HCMV组HSPC向CFU-GM增殖过程中HOXB6、A5基因的表达水平。结果①HOXA5基因表达多为阴性,HOXB6基因在增殖过程的第3天开始表达,第7天增高,第12天显著降低(P<0.05)。②相对于正常组,HCMV感染组HOXB6基因表达下调(P<0.05)。结论HOXA5可能不是人类HSPC向CFU-GM增殖分化过程的主控基因;HOXB6是人类HSPC向CFU-GM定向分化的主控基因之一,其表达呈现时间规律性;HCMV干扰的细胞组HOXB6表达下调的同时,其细胞集落生成较正常组差。提示HCMV可能通过调控HOXB6基因表达异常,引起造血干细胞增殖分化异常。

SB203580对小鼠造血组织辐射损伤的保护作用

目的观察SB203580对接受γ射线照射的C57BL/6小鼠造血组织损伤的保护作用。方法小鼠随机分为对照(Ctr)组、照射(IR)组及SB203580给药(SB)组,以6.0 Gy 137Csγ射线全身均匀照射SB组和IR组的C57BL/6小鼠。收集并计数外周血红细胞、白细胞和血小板,以及单侧股骨骨髓有核细胞(BMMNC);骨髓细胞半固体培养法检测BMMNC增殖能力。另外收集小鼠BMMNC,同样分组,IR组与SB组细胞进行1 Gy体外照射,照射之后孵育过夜,酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果 SB组外周血白细胞、血小板的数量分别比IR组高111.8%和157.7%(P<0.05);SB组BMMNC较IR组高135.4%,CFU-GM高188.5%(P<0.05);SB组BMMNC内ROS较IR组低56.2%(P<0.05)。结论 SB203580对照射造成的小鼠造血组织损伤具有一定的保护作用,这种保护作用可能与其降低照射后细胞内ROS水平有关。

人类巨细胞病毒对粒系祖细胞分化过程中HOXA9基因表达的影响

目的探讨脐血造血干祖细胞(HSPC)向粒系祖细胞(CFU-G)增殖过程中HOXA9基因表达情况,并且用人类巨细胞病毒(HCMV)进行干扰,探讨HCMV对HOXA9基因的影响。方法体外定向培养CFU-G,经MTT法检测后,HCMV-AD169滴度为106蚀斑形成单位(PFU)/mL,按0.1mL105PFU/mL接种培养体系。采用RT-PCR技术测定HOXA9基因表达。结果随时间推移,HOXA9基因在增殖分化的第7天表达最强烈,第12天表达明显减弱;HOXA9基因受HCMV影响下调(P<0.05)。结论 HOXA9基因在脐血粒系祖细胞发育过程中呈规律表达,提示HOXA9基因与粒系造血活动有相关性;HCMV下调HOXA9表达的同时,HCMV干扰细胞集落生成较正常组差,提示HCMV可能通过调控HOXA9基因表达异常引起HSPC增殖分化异常。

不同部位的巨噬细胞培养上清液对小鼠红系血细胞发生的影响

目的:探讨腹腔、肺泡和肝脏的巨噬细胞培养上清液对小鼠早期红系造血祖细胞[用红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[用晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]发生的影响。方法:采用造血祖细胞体外培养技术观察3种不同部位的巨噬细胞培养上清液对BFU-E和CFU-E集落数的影响。结果与结论:3种培养上清液均能促进BFU-E和CFU-E的分化与增殖,而肺泡巨噬细胞培养上清液的上述作用更明显。

小鼠巨噬细胞吞噬马尔尼菲青霉酵母相细胞的实验观察

目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞对马尔尼菲青霉酵母相细胞的影响,为研究抗马尔尼菲青霉的免疫机制提供一定的实验依据。方法将马尔尼菲青霉酵母相细胞与小鼠腹腔巨噬细胞在体内和体外两种方式下进行共培养,分别于60min、120min、240min和360min后进行菌落形成单位(CFU)计数,统计分析体内组与体外组CFU数结果的差异性。利用钙荧光白染色巨噬细胞胞内的马尔尼菲青霉酵母相细胞,荧光显微镜下观察细胞形态特征的变化。结果经体内和体外两种方式共培养,两组之间的CFU计数差异无统计学意义,但两组内不同时间点的CFU计数差异存在统计学意义。荧光显微镜下可见巨噬细胞内的酵母细胞被钙荧光白染上淡蓝色荧光。结论小鼠腹腔巨噬细胞在体内、外对马尔尼菲青霉酵母相细胞不起明显的杀灭或溶解作用,其最大的吞噬时间为共培养240min。钙荧光白染色可快速有效的区分巨噬细胞与真菌,是一种良好的检测真菌方法。

肺泡巨噬细胞培养上清液对小鼠粒-单系造血祖细胞和造血干细胞的影响

目的:观察肺泡巨噬细胞培养上清液(AM_(?)S)对粒-单系造血祖细胞(CTU-GM)和造血干细胞的影响。方法:采用脾集落形成和造血祖细胞体外培养技术。结果:AM__(?)S 对 CFU-GM 的增殖具有双向调控作用,即低浓度有促进作用,高浓度有抑制作用,但它对 CFU-S 无明显影响。结论:AM_(?)S 中含有粒-单系集落刺激因子(CSF-GM)和前列腺素样活性物质,这些物质浓度的变化可以调控 CFU-GM 的增殖,大肠杆菌脂多糖(LPS)可以促进肺泡巨噬细胞分泌这些生物活性物质。

人巨细胞病毒感染对脐血粒-单祖细胞集落染色体SCE的影响

目的探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对脐血粒-单祖细胞集落(colony forming unit-granu-locyte/monocyte,CFU-GM)染色体的影响。方法采用造血祖细胞体外培养和祖细胞集落染色体(sister chromatidexchange,SCE)制备技术,以HCMVAD169为攻击病毒,研究其对定向CFU-GM祖细胞集落染色体SCE率的影响。结果HCMV感染组CFU-GM集落染色体SCE率较实验对照组和空白对照组明显增高。结论HCMV可造成CFU-GM集落染色体的损伤。

BXSB狼疮鼠骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位异常与发病的关系

目的 :研究 BXSB自发性狼疮鼠骨髓粒 -巨噬细胞系的增殖情况与狼疮发病的关系。方法 :雄性 BXSB小鼠按 4、 8、 12、 16及 2 0周龄分组 ,每组 6只 ,采用甲基纤维素半固体培养方法体外培养骨髓单个核细胞(BMMC) ,计数粒 -巨噬细胞集落形成单位 (CFU - GM)及小鼠外周血单核细胞 (PBMC) ,并检测尿蛋白。相同周龄的 C5 7BL小鼠作为正常对照组。结果 :12周龄雄性 BXSB小鼠尿蛋白 (+) ,2 0周龄时尿蛋白 ( ) ,4、 8周龄 BXSB小鼠及各周龄 C5 7BL小鼠尿蛋白 (- )。 8周龄雄性 BXSB小鼠骨髓 CFU - GM为 (96 .0 0± 18.11) / 2×10 5BMMC,PBMC计数为 (111.33± 10 .97)× 10 6· L- 1 ,均明显高于 4周龄 BXSB小鼠及正常 C5 7BL 小鼠(P<0 .0 5 ) ,随着周龄增加 ,CFU- GM和 PBMC进一步增多。结论 :BXSB小鼠粒 -巨噬细胞系造血异常及外周血单核细胞增多参与了自身免疫疾病的发病过程。