闭合性颅脑损伤VEGF、MMP-9、Connexin-43表达及其表达时相的研究

目的研究大鼠闭合性脑损伤后基质金属蛋白酶9(MMP-9)、缝隙连接蛋白43(Connexin-43)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其不同损伤时间的相关性。方法清洁级成年雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组(n=5),假损伤组(n=5)和损伤组(损伤后1、6、12h及1、2、3、5、7、10、14d共10组)。采用免疫组织化学染色法(SP法)检测MMP-9、Connexin-43在闭合性颅脑损伤后不同时间的表达情况;采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测外周血中VEGF的含量。结果脑损伤6h后MMP-9表达明显增高,于24h达高峰,维持较高水平至7d;脑损伤后Connexin-43表达逐渐增加,伤后6h即可见表达增加,3d达高峰,14d基本正常;损伤组VEGF在损伤后6h明显增高,3dVEGF表达水平升至高水平,并维持高水平至10d。结论大鼠闭合性颅脑损伤后MMP-9、Connexin-43、VEGF表达与脑损伤时间密切相关,且各自呈一定的时序性变化规律,可望为法医学颅脑损伤时间的推断提供参考。

不同施肥处理对黑河43农艺性状、产量及品质的影响

为促进黑龙江省北部大豆产业提质增效,本研究以目前国内种植面积最大的大豆品种黑河43为研究对象,设置8组不同施肥处理:常规施肥区,尿素2 kg·666.67 m^(-2)、磷酸二铵8 kg·666.67 m^(-2)、硫酸钾5 kg·666.67 m^(-2);磷处理1区,磷酸二铵8 kg·666.67 m^(-2)、硫酸钾5 kg·666.67 m^(-2);磷处理2区,磷酸二铵10 kg·666.67 m^(-2)、硫酸钾5 kg·666.67 m^(-2);磷处理3区,磷酸二铵12 kg·666.67 m^(-2)、硫酸钾5 kg·666.67 m^(-2);无钾区,尿素2 kg·666.67 m^(-2)、磷酸二铵8 kg·666.67 m^(-2);无磷区,尿素5.13 kg·666.67 m^(-2)、硫酸钾5 kg·666.67 m^(-2);无氮区,磷酸钙8 kg·666.67 m^(-2)、硫酸钾5 kg·666.67 m^(-2);空白区。研究轮作条件下氮、磷、钾对黑河43农艺性状、品质及产量的影响。结果表明:不同肥料处理对黑河43农艺性状影响存在一定差异,其中氮肥施用与株高、底荚高显著正相关,其他性状差异均不显著;肥料处理对黑河43籽粒大小及品质的影响差异显著,其中空白CK与缺氮PK处理区百粒重、蛋白质含量均显著低于其它处理,缺氮PK处理区脂肪含量均显著高于其他处理;在合理范围内增施氮肥、磷肥可显著提高黑河43的产量,补充钾肥可显著提高黑河43抗病性进而提高产量,其中N3P3K处理区2年产量均显著高于其他处理区。缺素处理区2年产量结果一致,效应依次:NK>NP>PK;通过相关性聚类热图分析,将黑河43综合农艺性状分成2大类,第Ⅰ类为蛋白与产量构成因子:包含产量、单株粒重、单株粒数、单株荚数、节数、感病率、蛋白、底荚高、百粒重、株高,相邻性状两两相关性最高,第Ⅱ类为脂肪与密度,脂肪含量与密度显著正相关。将不同肥料处理分成2大类,第I类是缺N区,包含空白CK处理区和PK缺氮区,第Ⅱ类是含氮肥区,进一步说明氮肥是黑河43生物量形成的基础,平衡施肥对黑河43产量及品质具有重要促进作用。

抗旱丰产春小麦新品种陇春43号选育报告

为甘肃省小麦生产提供抗旱、抗病、丰产、优质小麦新品种,以促进小麦更新换代,实现小麦稳产增产,以衡7728为母本、陇春27号为父本进行了有性杂交,通过异地生态选择、采用系谱法成功选育出了抗旱丰产春小麦新品种陇春43号。2018—2019年参加甘肃省旱地春小麦区域试验,平均折合产量3074.70 kg/hm^(2),较对照品种西旱2号增产10.02%。2020年参加甘肃省旱地春小麦生产试验,平均折合产量3582.61 kg/hm^(2),较对照品种西旱2号增产9.81%。该品种具有高产稳产,优质,株型紧凑,抗旱,抗倒伏,中抗条锈和白粉病等特点,适宜在甘肃省中部旱地春麦区以及类似生态地区种植。

乌司他丁通过上调Cx43表达减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞铁死亡的作用机制

目的探讨乌司他丁(UTI)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞铁死亡的影响,并分析其保护机制。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,分为对照组、H/R组、铁死亡诱导剂(Erastin)组、UTI组、UTI+Erastin组、UTI+小干扰RNA(siRNA)阴性对照(si-NC)组、UTI+连接蛋白43(Cx43)siRNA(si-Cx43)组,各组给予相应干预后,检测各组细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧、Fe^(2+)、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及Cx43、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)mRNA和蛋白水平。结果与对照组比较,H/R组细胞活力、SOD、CAT活性和Cx43、GPX4、FTH1mRNA及蛋白水平显著降低,LDH活性、活性氧、丙二醛、Fe^(2+)和ACSL4mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.01)。与H/R组比较,UTI组细胞活力[(71.40±8.05)%vs(42.63±6.71)%]、SOD、CAT活性和Cx43、GPX4、FTH1mRNA及蛋白水平显著升高,LDH活性、活性氧、丙二醛、Fe^(2+)和ACSL4mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.05)。与UTI组比较,UTI+Erastin组和UTI+si-Cx43组细胞活力、SOD、CAT活性和Cx43、GPX4、FTH1mRNA及蛋白水平显著降低,LDH活性、活性氧、丙二醛、Fe^(2+)和ACSL4mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论UTI可能通过上调Cx43抑制H/R诱导的心肌细胞铁死亡。

血清Cx43、Gal-9水平对老年急性脑梗死患者超早期静脉溶栓治疗预后的评估价值

目的探讨血清间隙连接蛋白43(Cx43)、半乳糖凝集素-9(Gal-9)水平对老年急性脑梗死(ACI)患者超早期静脉溶栓治疗预后的评估价值。方法选取2020年9月至2022年9月在该院行超早期静脉溶栓治疗的106例老年ACI患者作为研究组,另外选取同期来该院体检的100例体检健康者作为健康组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有研究对象的血清Cx43、Gal-9水平。治疗2周后参考美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分将106例老年ACI患者分为预后良好组(81例)与预后不良组(25例)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Cx43、Gal-9水平对老年ACI患者超早期静脉溶栓治疗预后的评估价值,采用多因素Logistic回归分析探讨老年ACI患者超早期静脉溶栓治疗预后不良的影响因素。结果研究组血清Cx43、Gal-9水平高于健康组(P<0.05);预后不良组血清Cx43、Gal-9水平高于预后良好组(P<0.05);血清Cx43、Gal-9预测老年ACI患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.721(95%CI:0.673~0.758)、0.837(95%CI:0.787~0.886),二者联合预测的AUC为0.901(95%CI:0.857~0.946)。预后不良组高血压占比高于预后良好组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,高血压(OR=3.487,95%CI:1.564~7.773),血清Cx43≥106.53 pg/mL(OR=4.586,95%CI:1.982~10.611),血清Gal-9≥11.84 ng/mL(OR=4.345,95%CI:1.957~9.648)是老年ACI患者超早期静脉溶栓治疗预后不良的危险因素(P<0.05)。结论血清Cx43、Gal-9在老年ACI患者中均呈高表达,可用于评估老年ACI患者超早期静脉溶栓治疗的预后,二者联合检测的评估价值更高。

外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43对冠心病的预测价值分析

目的探讨外周血单个核细胞缝隙连接蛋白37(Cx37)、黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)、缝隙连接蛋白43(Cx43)对冠心病的预测价值。方法选取2019年1月至2023年10月该院收治的460例因“疑似冠心病或者胸闷、胸痛待查”而入院拟择期行冠状动脉造影(CAG)的患者作为研究对象,根据CAG检查结果分为冠心病组(212例)和非冠心病(248例)。比较两组临床特征及外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43,并予以多因素Logistic回归分析冠心病发生的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43对冠心病的预测价值。结果冠心病组年龄、体质量指数大于非冠心病组(P<0.05),心率、血清糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)水平高于非冠心病组(P<0.05),吸烟、高血压、高脂血症、冠心病家族史的患者占比高于非冠心病组(P<0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于非冠心病组(P<0.05)。冠心病组外周血单个核细胞Cx37、Cx43表达水平低于非冠心病组,外周血单个核细胞AIM2表达水平高于非冠心病组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,吸烟,高血压,高脂血症,冠心病家族史,外周血单个核细胞Cx37、Cx43表达水平降低,外周血单个核细胞AIM2表达水平升高是冠心病发生的独立危险因素(OR=2.568、2.375、3.313、2.713、0.647、0.464、2.995,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43及3项联合检测预测冠心病的曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.732、0.708、0.922,灵敏度分别为66.51%、70.28%、71.70%、89.15%,特异度分别为69.76%、70.16%、69.35%、82.26%,其中联合检测的AUC最大(P<0.05)。结论外周血单个核细胞Cx37、AIM2、Cx43对冠心病发生具有一定的预测价值,其中联合检测的预测价值最高。

柴胡疏肝散对胃肠功能紊乱大鼠结肠肌层缝隙连接蛋白43表达的影响

目的:探讨柴胡疏肝散对胃肠功能紊乱大鼠结肠肌层缝隙连接蛋白43(CX43)表达的影响。方法:将8周龄SD大鼠100只随机分为对照(sham)组、模型(FGID)组、FGID+药物组及sham+药物组,每组25只。对于FGID组、FGID+药物组,利用腹腔注射利血平的方式建立胃肠功能紊乱大鼠模型;sham组及sham+药物组大鼠实施生理盐水腹腔注射;完成造模后,为sham+药物组及FGID+药物组大鼠实施柴胡疏肝散汤剂灌服,sham组与FGID组大鼠灌服灭菌注射用水;通过实时荧光定量聚合酶链反应、Westeron Blot及组织免疫荧光技术检测四组大鼠结肠肌层CX43 mRNA、CX43蛋白表达水平及CX43阳性表达率。结果:四组大鼠结肠肌层CX43 mRNA、CX43蛋白表达水平及CX43阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:柴胡疏肝散能够提高胃肠功能紊乱大鼠结肠肌层CX43的表达水平,从而改善胃肠功能。

稳定转染TDP-43导致NSC34细胞自噬异常

目的 探讨稳定转染TDP-43对NSC34细胞自噬的影响。方法 体外培养稳定转染空质粒的NSC34细胞系(E细胞)和转染TDP-43的NSC34细胞系(TDP-43细胞)。应用CCK-8试剂盒测定两组细胞活力,应用EdU试剂盒测定两组细胞增值能力,应用透射显微镜观察两组细胞线粒体形态,应用免疫荧光检测两组细胞自噬相关蛋白表达水平。结果 与E组细胞相比,TDP-43组细胞活力明显下降,增殖能力下降,差异有统计学意义(P<0.05);线粒体形态异常,自噬相关蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 稳定转染TDP-43可导致NSC34细胞自噬异常,线粒体形态改变,降低细胞活力和增殖能力。

WE43镁合金SLM成形数值模拟及试验验证

目的研究WE43镁合金激光选区熔化(SLM)成形过程、成形后变形及应力分布的变化规律,得到SLM态WE43常温拉伸力学模型。方法采用SLM方法制备了WE43镁合金悬臂梁及拉伸试样,通过对比悬臂梁局部切割翘曲试验结果与数值模拟结果,得到WE43镁合金固有应变模型,实现WE43镁合金SLM成形过程的模拟及变形预测;对SLM态WE43镁合金开展拉伸试验,使用金相显微镜及扫描电镜进行微观组织及断口形貌观察;采用Normalized Cockcroft&Latham模型对拉伸试验进行模拟,实现SLM态WE43常温拉伸过程分析。结论常温SLM态WE43的抗拉强度为313 MPa,屈服强度为236 MPa,延伸率为7.6%,试样中存在不规则孔洞缺陷;在SLM成形过程中,WE43镁合金固有应变值exx、eyy、ezz分别为−0.0025、−0.0025、−0.0115,悬臂梁最大翘曲高度为1.99 mm,模拟结果显示未切割悬臂梁最大等效应力为12.3 MPa;当NC&L断裂准则临界损伤值为0.1时,WE43常温拉伸过程模拟结果与试验结果最为接近,预测准确率为93%。

不同成形方式对WE43镁合金组织和力学性能的影响

采用激光选区熔化成形(SLM)、铸造及挤压方式制备了WE43镁合金试样,通过维氏硬度计、密度测试计、光学显微镜、扫描电镜以及拉伸试验机等设备分析了不同制备方式下WE43镁合金的宏微观组织和力学性能变化规律;设计了基于指数函数的模型对不同成形方式的WE43应力–应变曲线进行统一拟合,为WE43材料未来增材、减材以及等材工艺复合制造复杂零件打下基础。结果表明,SLM成形WE43有明显的各向异性,铸态和挤压态不明显。SLM成形WE43镁合金的强度最高,抗拉强度达到313 MPa,是铸态的183%;挤压态WE43镁合金塑性最好,伸长率达到10.2%,是铸态的232%;此外,SLM态镁合金密度只有1.731 g/cm^(3),仅为挤压态的85.7%和铸态的95.2%。在断裂特性上,SLM态和挤压态为韧性断裂,而铸造态为脆性断裂。在内部存在20μm左右孔洞形缺陷的情况下,SLM成形镁合金依然具有最高的强度,主要原因是SLM成形WE43镁合金平均晶粒尺寸仅为2.6μm,基体内存在大量的稀土相沉淀以及纳米级亚稳相。由此可知,通过进一步的后处理方法焊合SLM态镁合金内部孔洞形缺陷后,材料力学性能可以大幅提高。

缝隙连接蛋白43经典与非经典作用在疾病治疗中的潜在价值

背景:缝隙连接蛋白43在维持组织代谢稳态平衡中发挥着重要作用,传统观点认为它参与了缝隙连接过程,为细胞与细胞之间建立直接的物质信号交换通道奠定结构基础。而近年来研究对于其独特的半通道作用提出了新的看法,并发现了其亚细胞定位、自身片段等对于细胞生理活动及病理过程的重要意义。目的:综述数据库中相关文献,系统性总结缝隙连接蛋白43分子特征及在多种细胞表达的研究进展,重点阐述通道依赖性与非通道依赖性缝隙连接蛋白43的生理与病理作用,并探讨其在疾病治疗中的潜在价值。方法:分别设置“gap junction,connexin 43(Cx43),hemichannel,channel-dependent Cx43,channel-independent Cx43,extracellular vesicles(EVs),mitochondria,GJA1-20k”为英文关键词,以“缝隙连接,缝隙连接蛋白43,半通道,通道依赖性Cx43,非通道依赖性Cx43,线粒体,细胞外囊泡,GJA1-20k”为中文关键词,分别在PubMed数据库及中国知网数据库进行文献检索,最终共入选81篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)缝隙连接蛋白43的经典作用即构成缝隙连接通道,通道依赖性缝隙连接蛋白43主要可通过直接构成缝隙连接通道参与组织器官的生理或病理过程,应充分关注其结构和功能的完整性,而黏附是缝隙连接的重要特性,与屏障障碍类疾病密切相关。(2)缝隙连接蛋白43的非经典作用即非缝隙连接通道依赖性作用,缝隙连接蛋白43六聚体目前被发现定位于质膜、线粒体内膜和细胞外囊泡表面等结构,参与炎性疾病的正向促炎机制、线粒体功能代谢和细胞外囊泡的靶向摄取等,选择性截短片段则参与全长连接蛋白43靶向转运至胞内各结构域过程,并且通过促使线粒体周围肌动蛋白聚合,调控线粒体稳态。(3)以上两种作用为开发靶向治疗药物及基于组织工程技术的治疗手段中种子细胞转化机制等问题的解决提供了新思路,但现存的一些原始研究常不能全面考虑不同形式缝隙连接蛋白43的相互作用,从而混杂地描述了其总体特征,使得研究结果产生偏差。(4)未来研究需要系统地构架不同形式存在的缝隙连接蛋白43的生理特性及在各疾病中的潜在机制,为缝隙连接蛋白43完整性机制探索及多疾病的诊断和治疗提供参考依据。

连接蛋白43半通道介导NLRP3炎症小体激活在脑缺血中的作用

缝隙连接蛋白在脑缺血后的神经炎症扩散中发挥重要作用。连接蛋白43(connexin 43,Cx43)作为中枢神经系统中主要的连接蛋白,通常以寡聚形式形成六聚体的半通道,与相邻细胞上的半通道对接,形成缝隙连接通道。在正常生理条件下,细胞表面的半通道开放维持在正常生理水平;然而,在脑缺血的过程中,Cx43半通道的过度开放导致了大量的离子(Na^(+)、Cl^(−)、Ca^(2+)、K^(+))、谷氨酸、天冬氨酸和三磷酸腺苷(ATP)等物质的释放,引起相邻细胞功能紊乱,从而加重神经细胞的损伤。此外,Cx43半通道的开放还诱导炎症因子的释放,这与脑缺血后NLRP3炎症小体的激活密切相关。因此,通过调控Cx43半通道能够缓解脑缺血后神经炎症,进而减轻脑缺血损伤。本文重点综述了Cx43半通道蛋白与NLRP3炎症小体激活的关系,以及其在脑缺血中的作用,旨在为脑缺血的治疗提供新的思路和方法。

Beclin-1联合Cx43对甲状腺癌的诊断价值及与甲状腺细针穿刺诊断准确率对比

目的 探讨自噬相关基因Beclin-1联合细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)对甲状腺癌的诊断价值,并分析两者联合与甲状腺细针穿刺诊断对甲状腺癌准确率差异。方法 选取医院2020年10月至2023年10月收治的80例甲状腺癌患者作为观察组,另取同期收治的80例甲状腺结节患者作为对照组,取所有患者术后病理组织进行免疫组化染色,qRT-PCR仪进行检测与扩增,采用2-△△α法计算Beclin-1、Cx43的相对表达量,并将两组患者Beclin-1、Cx43水平进行对比。采用Spearman相关分析法分析Beclin-1、Cx43和甲状腺癌的相关性,并使用受试者工作特征(ROC)曲线分析Beclin-1联合Cx43诊断甲状腺癌的效果,并对比两者联合与甲状腺细针穿刺对甲状腺癌的诊断价值。结果 经免疫组化结果显示,两组细胞质内均检测到Beclin-1、Cx43,且观察组的Beclin-1、Cx43相对表达量比对照组更少(P<0.05),而Beclin-1、Cx43阳性率也同样小于对照组(P<0.05);Spearman相关分析结果显示,Beclin-1、Cx43和甲状腺癌呈现负相关(P<0.05);Beclin-1对甲状腺癌的诊断曲线下面积为0.822,最佳阈值为13.52;Cx43诊断甲状腺癌的曲线下面积为0.875,最佳阈值为18.67,两者联合的曲线下面积为0.932;Beclin-1联合Cx43对甲状腺癌的诊断灵敏度与特异度明显高于单一指标(P<0.05);Beclin-1联合Cx43对甲状腺癌的诊断准确率为93.75%,甲状腺细针穿刺对甲状腺癌的诊断准确率为98.75%,两者对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论Beclin-1联合Cx43对甲状腺癌的诊断灵敏度与特异度较高,且两者联合与甲状腺细针穿刺诊断甲状腺癌准确率对比并无显著差异,可考虑将Beclin-1、Cx43两者作为甲状腺癌诊断及预后判断的重要标志物。

缝隙连接蛋白43通过调控凋亡参与大鼠牙周炎相关肾损伤

目的本研究旨在探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在大鼠牙周炎诱导慢性肾损伤模型中的作用。方法按照完全随机数字表法将12只SPF级Wistar雄性大鼠分为对照组和牙周炎组,每组6只。对照组大鼠不做处理,牙周炎组大鼠采用钢丝结扎大鼠双侧上颌第一磨牙的颈部,构建牙周炎模型。建模8周后检查大鼠牙周临床指标。显微CT(micro‑CT)扫描大鼠上颌骨重建其三维结构并分析牙槽骨吸收情况;组织病理学检测牙周及肾组织的病理改变;MitoSOX red试剂检测肾组织中活性氧(ROS)含量;生化试剂盒检测血清氧化应激生物标志物;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾组织中Cx43、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肾组织中Cx43、NF-κB、IL-1β、Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平。结果micro-CT三维重建结果显示,牙周炎组大鼠第一磨牙牙槽骨骨质吸收明显,牙槽嵴高度降低,且釉牙骨质界到牙槽嵴顶的距离显著大于对照组。组织病理学结果显示,牙周炎组大鼠牙周组织内可见大量炎症细胞浸润和牙槽骨明显吸收;牙周炎组大鼠肾组织中肾小球基底膜轻度增厚,鲍曼氏囊腔扩张,肾小管刷状缘破坏。MitoSOX red染色结果显示牙周炎组肾组织中ROS含量明显升高。生化检测结果显示,牙周炎组大鼠血清中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平降低,丙二醛水平升高。qRT-PCR和Western blot结果显示,牙周炎组肾组织中Cx43、IL-1β、IL-6、Bax和Caspase-3 mRNA及Cx43、IL-1β、NF-κB、Bax和Caspase-3蛋白表达水平较对照组上升,而Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平下降。结论牙周炎可能通过上调大鼠肾组织中Cx43的表达激活NF-κB信号分子,引起大鼠肾脏组织中炎症水平和凋亡水平升高,最终诱导肾脏损伤的发生。

植物乳杆菌cqf-43及其代谢产物对断奶仔猪生长性能、抗氧化和免疫功能的影响

试验旨在研究植物乳杆菌cqf-43及其代谢产物对断奶仔猪生长性能、腹泻、抗氧化性能和免疫力的影响。选取120头28日龄、体重(8.20±0.81)kg的断奶仔猪(杜×长×大),随机分为4组,每组6个重复,每个重复5头猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,菌液组、菌体组、代谢产物组分别在基础日粮中添加1%植物乳杆菌cqf-43菌液、1%植物乳杆菌cqf-43菌体、1%植物乳杆菌cqf-43代谢产物(发酵上清)。试验期42 d。结果表明:与对照组相比,菌体组可提高断奶仔猪的末重和日增重(P<0.05),菌液组、菌体组和代谢产物组耗料增重比、腹泻指数和腹泻率均降低(P<0.01);与对照组相比,菌液组血清超氧化物歧化酶活性提高(P<0.05),菌体组和代谢产物组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性提高(P<0.01);菌液组和代谢产物组血清白介素-2(IL-2)含量高于对照组和菌体组(P<0.01),菌液组血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量高于对照组和菌体组(P<0.01);菌液组粪便中乙酸和丁酸含量均提高(P<0.05)。由此可见,日粮中添加植物乳杆菌cqf-43的菌液、菌体及其代谢产物可提高断奶仔猪的生长性能和抗氧化性能,调控机体免疫活性,提高粪便中乙酸和丁酸含量。

Cx43对胆总管结扎大鼠心肌损伤的负向调控作用及其机制

目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在胆总管结扎(CBDL)引起的大鼠心肌损伤中的作用及其分子机制。方法将18只SD大鼠随机分为假手术组、CBDL组及Cx43抑制剂组,每组6只。假手术组大鼠行胆总管游离术,CBDL组大鼠游离、结扎并切断胆总管,Cx43抑制剂组大鼠术前24 h通过尾静脉单次注射25 mg/kg的Gap 26后,游离、结扎并切断胆总管。三组大鼠饲养至术后第14天时采用心脏超声检查评估心脏射血分数(EF)、缩短分数(FS)和心率(HR);随后测定三组大鼠血清总胆红素(TBil)、苯丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶-MB(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及丙二醛(MDA)水平;取三组大鼠心脏组织行HE染色和Masson染色;采用免疫印迹实验检测心脏组织中Cx43、Wnt 3α、β-catenin蛋白的水平。结果心脏超声检查结果显示,CBDL组、Cx43抑制剂组大鼠心脏EF、FS、HR均显著低于假手术组(F=22.95~43.55,t=5.10~9.32,P<0.05)。血生化及氧化应激指标检测结果显示,与假手术组相比,CBDL组、Cx43抑制剂组大鼠血清中TBil、AST、ALT、LDH、CK-MB、MDA、GSH-PX水平显著升高,SOD的水平显著降低(F=19.29~100.60,t=3.67~13.72,P<0.05)。HE染色及Masson染色结果显示,CBDL组和Cx43抑制剂组大鼠发生心肌损伤及心肌间质纤维化。免疫印迹实验结果显示,与假手术组相比,CBDL组和Cx43抑制剂组大鼠心脏组织中Cx43水平显著下降,Wnt 3α、β-catenin水平显著升高(F=28.50~70.07,t=4.32~11.79,P<0.05);与CBDL组相比,Cx43抑制剂组大鼠心脏组织中Cx43水平显著下降,Wnt 3α、β-catenin水平显著升高(t=4.95~5.20,P<0.05)。结论CBDL大鼠心脏组织中Cx43下调可负向调控激活Wnt 3α/β-catenin通路,导致大鼠心肌组织损伤加剧及心脏功能下降。

尼古丁上调Cx43促发PASMCs炎性反应致小鼠肺动脉重构的机制

目的研究缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)介导肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)炎性反应在尼古丁致小鼠肺动脉重构中的作用机制。方法5周龄雄性C57BL/6J小鼠、Tagln-Cre(+);Cx43^(flox/WT)小鼠各32只,分别随机分为对照组(灭菌注射水)、0.02、0.2和2.0 mg/(kg·d)尼古丁组,每组8只。小鼠按体重每天固定时间进行一次鼻腔滴注,持续8周。染毒结束后,通过HE染色观察各组小鼠肺动脉重构情况;采用磁性分离法培养C57BL/6J、Tagln-Cre(+);Cx43^(flox/WT)小鼠原代远端PASMCs;通过Western blot法检测小鼠PASMCs中Cx43、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)蛋白表达水平。结果与C57BL/6J小鼠对照组相比,尼古丁染毒组C57BL/6J小鼠体重总体呈现增长趋势,且随着尼古丁浓度增加,体重增长变缓。小鼠远端肺动脉出现管壁增厚、管腔狭窄等典型的动脉重构病理特征,Cx43表达上调且呈剂量依赖性关系。Tagln-Cre(+);Cx43^(flox/WT)小鼠HE染色结果显示其肺动脉管壁增厚和管腔狭窄现象有所缓解,且PASMCs中上述炎性反应因子表达减少。结论Cx43表达下调可缓解尼古丁诱导的小鼠远端PASMCs炎性反应,从而改善小鼠肺动脉重构。

间隙连接蛋白43与呼吸系统疾病相关性的研究进展

间隙连接蛋白43(Cx43)与各系统性疾病的相关性已成为近年研究的热点。Cx43一直是多学科交叉研究的核心,广泛参与疾病的病理生理过程。Cx43通过与不同通路中的不同受体产生关联影响疾病的发生、进展及结局。目前的研究主要集中于完善单个疾病中Cx43的具体作用机制,但其与呼吸系统疾病的相关性仍需进一步研究阐明。未来明确Cx43与新型冠状病毒肺炎、肺癌等呼吸系统疾病的关系,可以为相关疾病的治疗提供新思路。

缝隙连接蛋白43在阿尔茨海默病中的研究进展

星型胶质细胞的功能异常与多种神经退行性疾病的发生发展关系密切,缝隙连接的异常是其中重要的机制之一。缝隙连接主要是由缝隙连接蛋白(connexin,Cx)构成,是相邻细胞间代谢和离子耦合以及电传递的主要结构。Cx43和Cx30是在脑中含量最多的Cx亚型,其中又以Cx43为主。Cx43在脑中含量或分布与阿尔兹海默病的发生发展关系密切。本文就以Cx43与阿尔兹海默病的关系进行综述。

秋茄KoWRKY43基因克隆、表达与生物信息学分析

转录因子WRKY在开花植物中广泛存在,参与并调节植物的生长发育与防御反应等。为探究红树植物秋茄WRKY基因在非生物胁迫过程中的作用,以秋茄幼苗为试验材料,提取叶片总RNA,通过反转录PCR(RT-PCR)技术克隆获得KoWRKY43基因(GenBank登录号OR789874),采用生物信息学手段分析其基因序列和蛋白质结构特点,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术研究其表达模式。结果表明,KoWRKY43基因开放阅读框(ORF)为942 bp,编码313个氨基酸,蛋白质分子式为C_(1484)H_(2415)N_(439)O_(459)S_(14),分子量为34.2 ku,理论等电点为9.74,无信号肽,无跨膜结构,定位于细胞核,与木薯、银白杨和簸箕柳亲缘关系相对较近。qPCR检测显示,KoWRKY43基因在秋茄根中表达量最大,显著高于茎、叶、花和果实;幼叶KoWRKY43的表达量受NaCl诱导持续上升,在24 h表达量最大;激素水杨酸和脱落酸的诱导使其表达量先升高后降低,在6 h达到峰值;茉莉酸甲酯在24 h内均未显著改变其表达水平。研究结果为后续开展KoWRKY43基因的功能研究和培育抗逆秋茄品种提供了理论基础。