反相高效液相色谱测定氨溴特罗口服溶液中盐酸克仑特罗的研究

建立氨溴特罗口服溶液中盐酸克仑特罗成分含量测定的方法并开展方法学验证。采用ZORBAX SB-C18色谱柱,流动相为磷酸二氢钾溶液-甲醇,检测波长244 nm,柱温40℃,流速1.0 mL·min^(-1),进样量10μL。结果显示,盐酸克仑特罗在0.0511~0.4099μg·mL^(-1)范围内线性关系良好;平均回收率(n=9)为100.0079%,RSD为1.57%。测得盐酸克仑特罗含量为标示量的98.96%,符合药典标准。

小儿热速清口服液HPLC指纹图谱的建立及多指标成分的含量测定

目的建立小儿热速清口服液高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并对其中12种指标成分进行含量测定。方法采用HPLC法。以Venusil MP C18为色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为210 nm;柱温为30℃;进样量为10μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立13批小儿热速清口服液的HPLC指纹图谱,并进行相似度评价,测定12种指标成分,即(R,S)告依春、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、葛根素、连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、黄芩苷、柴胡皂苷d、汉黄芩苷、黄芩素、大黄素、大黄酚的含量。结果13批小儿热速清口服液指纹图谱的相似度均大于0.97,指认了14个共有峰。13批小儿热速清口服液中上述12种指标成分的含量分别为0.078~0.172、1.564~2.736、1.338~2.578、0.426~0.872、1.477~2.628、1.396~2.447、4.052~9.146、0.367~0.692、1.974~4.674、1.274~2.969、0.085~0.167、0.155~0.307 mg/mL。结论本研究建立的HPLC指纹图谱及含量测定方法准确度高、专属性好,可用于小儿热速清口服液的质量评价。

油莎豆微量营养素含量测定及经口毒理试验的评估

为明确油莎豆茎豆中微量营养素的种类和含量,评价其经口食用的安全性。本研究以黄淮地区主栽品种豫油莎2号为材料,按照相关国家标准检测茎豆中氨基酸、维生素和矿物质元素的种类和含量;以SPF级SD大鼠为饲喂对象,分别采用10、8、4、2 g/(kg·d)作为14 d急性经口毒性和90 d亚慢性经口毒性试验的处理浓度,通过对大鼠身体各项指标的连续测定,分析油莎豆经口毒性的安全特性。结果表明,油莎豆茎豆中含有16种氨基酸,其中含量最高为精氨酸,其次为谷氨酸、天冬氨酸及赖氨酸,维生素中维生素E和维生素C含量最高,矿物元素中含量最高为镁;根据急性毒性剂量分级标准,油莎豆属实际无毒级。90 d经口毒性试验中各剂量的受试动物的体重、食物利用率、脏器质量、脏器系数均无异常改变;眼部检查未发现异常变化;尿液、血液学、血液生化结果各项指标均在正常范围。各脏器病理组织学检查均未见与受试样品有关的病理改变,且未观察到迟发效应。因此,在本研究条件下,根据GB 15193.13—2015 《食品安全国家标准90天经口毒性试验》判定,油莎豆经口毒性属于安全级别。

脱落细胞DNA定量分析技术动态监测口腔扁平苔藓伴上皮异常增生病情及光动力治疗1例

口腔扁平苔藓是一种临床上常见的慢性炎性口腔黏膜病,具有癌变风险,临床上应积极干预并随访监测。光动力治疗具有微创、有效、选择性好以及可重复性高等优势,在治疗口腔扁平苔藓中已显现出良好疗效,但其疗效评估方法仍然存在局限性。脱落细胞DNA定量分析技术是一种无创辅助检查手段,可用于口腔潜在恶性疾患癌变及口腔癌的早筛早诊。本文报道1例采用脱落细胞DNA定量分析技术动态监测口腔扁平苔藓癌变风险及光动力治疗疗效的诊疗过程,以期为建立口腔扁平苔藓伴上皮异常增生的精准微创诊疗体系提供参考。

雪莲口服液药渣残留化学成分中总多糖和总多酚的含量测定

本研究通过预实验证明了雪莲口服液药渣中残有多糖及多酚类物质,为了充分利用这两种活性物质,采用水提醇沉的方法,于雪莲口服液药渣中得到粗多糖,用苯酚-硫酸法进行含量测定;采用超声提取法提取多酚类物质,并用Folin-酚法对其进行含量测定。结果表明,多糖和多酚在2.5~17.5μg·mL^(-1)浓度范围内均与吸光度呈线性关系,其平均含量分别为21.40%、0.089%,RSD分别为1.85%、2.42%,作为二次利用产物,雪莲口服液药渣中总多糖和总多酚类物质含量较高,有较大的利用价值,可作进一步研究。

基于UPLC-Q-TOF-MS技术建立银花抗病毒口服液的指纹图谱及多指标含量测定

目的建立银花抗病毒口服液的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱,对其主要化学成分进行分析鉴定,并测定6个化学成分的含量。方法采用UPLC-Q-TOF-MS技术,正、负离子模式,Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(3.0 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以水相(A,含0.1%甲酸)和有机相乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),进样量为1μL。建立12批银花抗病毒口服液的指纹图谱,确定共有峰并进行相似度评价、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析,通过一级、二级质谱及对照品比对鉴别共有峰的化学成分。结果在正、负离子模式下共鉴定了12批银花抗病毒口服液的指纹图谱,确定共有峰32个,指纹图谱相似度均≥0.978,通过聚类分析将样品各分为4类、3类,与主成分分析一致,筛选出汉黄芩苷、千层纸素A苷、连翘酯苷I、异绿原酸B等8个成分是导致不同批次样品差异的标志性化合物。结论所建立的指纹图谱结合多指标含量测定方法稳定、重复性好、特征性强,可为银花抗病毒口服液的质量评价和临床应用提供有效参考。

靶向纳米载体用于口服胰岛素递送的研究进展

皮下注射胰岛素主要用于治疗糖尿病,但存在局限性。虽然口服胰岛素作为简便的给药方式,能降低副作用、提高患者的依从性;但是蛋白类药物口服后会被胃肠道酶解失活。随着纳米技术的快速发展,靶向纳米递送体系被广泛用于口服胰岛素的研究。其通过与肠细胞表面的受体进行配体-受体特异性结合,增强胰岛素的肠道吸收来提高降血糖作用。本文基于靶向纳米载体的作用机理及主要影响因素,综述了用于口服胰岛素递送的靶向纳米载体的最新进展。

复方苦玄参口服液的制备工艺与质量控制

【目的】丰富复方苦玄参颗粒剂型,用于防控畜禽细菌性腹泻,研制复方苦玄参口服液并对其进行质量控制,为后期临床试验奠定药理学基础。【方法】基于前期试验基础,评价联合使用0.25%苯甲酸和0.075%山梨酸作为防腐剂的适用性,筛选0.025%~0.100%亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠和抗坏血酸中适宜的抗氧化剂;建立处方中苦玄参、救必应、桃金娘根、南刘寄奴四味药材的薄层色谱(TLC)鉴别分析方法和君药苦玄参指标性成分苦玄参苷IA高效液相色谱(HPLC)含量测定分析方法,并参照《中华人民共和国兽药典》2020版口服液相关规定对口服液进行质量控制。【结果】添加0.25%苯甲酸和0.075%山梨酸作为防腐剂,复方苦玄参口服液中大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和白色念珠菌活菌数在第14和28天时均符合抑菌效力标准;与阴性样品相比,添加0.075%焦亚硫酸钠作为抗氧化剂10 d时苦玄参苷IA降解量由7%下降到1.38%,显著增强了复方苦玄参口服液的稳定性;TLC结果显示,复方苦玄参口服液中苦玄参、救必应、桃金娘根、南刘寄奴与对照品或对照药材在相应位置上显示相同颜色的荧光斑点,表明建立的TLC方法专属性良好;HPLC结果显示,苦玄参有效成分苦玄参苷IA在14.063~450μg/mL(R 2=0.9996)范围内线性关系良好,精密度试验、重复性试验、稳定性试验结果相对标准偏差(RSD)分别为1.02%、0.44%和0.60%;苦玄参苷IA平均加样回收率为98.50%,RSD(n=6)为0.56%,表明所建立的复方苦玄参口服液HPLC方法专属性、精密度、重复性、稳定性等均符合方法学要求。测得3批复方苦玄参口服液中苦玄参苷IA的含量平均值依次为214.97、213.85、214.82μg/mL,RSD为0.38%。其他质控指标,如外观性状呈黄褐色,相对密度为1.039~1.055 g/mL、RSD为0.88%,pH为5.50~5.66、RSD为0.72%,微生物限度等均符合《中华人民共和国兽药典》2020版口服液相关规定。【结论】本研究制备的复方苦玄参口服液工艺简单,质量控制方法准确、可靠,可用于后续中试生产与质量控制。

高效液相色谱法同时测定金银花口服液中6种成分含量

目的建立同时测定金银花口服液中新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、异绿原酸B、异绿原酸C含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Shimadzu-GL C18柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm,柱温为30℃,进样量为10µL。结果新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、异绿原酸B、异绿原酸C的质量浓度分别在6.52~62.5µg/mL、15.48~154.8µg/mL、1.82~18.2µg/mL、2.62~26.2µg/mL、3.34~33.4µg/mL、2.18~21.8µg/mL范围内与峰面积线性关系良好(R2≥0.9993,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于3.0%;平均加样回收率分别为98.95%,101.37%,99.34%,97.85%,100.94%,98.95%,RSD分别为2.06%,1.91%,2.54%,1.58%,2.18%,1.66%(n=6)。3批样品中上述6种成分的含量分别为0.3502~0.3944 mg/mL、0.8513~0.9214 mg/mL、0.0349~0.0370 mg/mL、0.0837~0.1091 mg/mL、0.1079~0.1172 mg/mL、0.1264~0.1362 mg/mL。结论该方法操作简便、结果准确、专属性和重复性好,可用于同时测定金银花口服液中6种成分的含量。

高效液相色谱法测定复方黄番口服液中芍药苷含量

目的建立测定复方黄番口服液中芍药苷含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Agilent Eclipse Plus C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5µm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(26∶74,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为230 nm,柱温为30℃,进样量为10µL。结果芍药苷的质量浓度在15.35~168.85µg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9996,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于1.0%(n=6);平均回收率为95.03%,RSD为0.78%(n=9)。结论该方法结果准确、稳定性和重复性均良好,可用于复方黄香口服液中芍药苷的含量测定。

液相色谱-串联质谱法测定蓝芩口服液中16种化学成分的含量

目的 建立同时测定蓝芩口服液中16种化学成分含量的方法。方法 采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。Fortis Xi C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B);梯度洗脱;流速:0.3 mL/min;进样量:2μL;柱温:40℃;质谱采用电喷雾离子源(ESI)正负离子模式,多反应监测(MRM)方式进行测定。结果 蓝芩口服液中汉黄芩苷、黄芩苷、异牡荆苷、栀子苷、巴马汀、黄柏碱、木兰花碱、小檗碱、鸟苷、汉黄芩素、黄芩素、腺苷、胞苷、表告依春、山栀苷和绿原酸等16个成分浓度分别在所考察的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.999 0);精密度、稳定性、重复性RSD均<2.5%,加样回收率(n=9)在91.7%~108.3%范围内,RSD<3.5%。结论 所建立的LC-MS/MS方法简便、可靠、选择性好、灵敏度高,可用于蓝芩口服液的质量控制。

高效液相色谱法同时测定补肾健骨口服液中4种成分的含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定补肾健骨口服液中没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素等4种成分含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Shim-pack GIST C_(18)(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,进行梯度洗脱;柱温为30℃;进样量为10μL;检测波长为285 nm。结果:4种成分线性关系良好,没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素的线性质量范围分别是0.036 970~0.735 800μg、0.205 400~4.108 000μg、0.014 130~0.282 600μg、0.004 853~0.097 060μg;线性方程分别是Y=2 513.700X-18.223(r=0.998 7),Y=2 165.500X+40.317(r=0.999 8),Y=2 480.400X+0.768(r=0.999 8),Y=3 845.800X+0.778(r=0.999 9)。结论:本试验建立的方法稳定可靠、简便、重复性好、准确度高,可为补肾健骨口服液的含量测定提供参考依据。

HPLC-CAD法测定健儿消食口服液中黄芪甲苷的含量

目的:建立高效液相色谱-电喷雾检测器法(HPLC-CAD)测定黄芪甲苷的含量,从而改进现行标准含量测定方法。方法:采用ZORBAX SB-C_(8) Agilent液相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-水(35∶65)为流动相,梯度洗脱,流速1 mL•min^(-1),柱温室温,理论板数≥4000;电喷雾检测器检测参数:控制模式remote(N2000,1:local0),雾化管温25℃,载气(氮气)流速:4 L•min^(-1)。通过方法学考察,确认该色谱条件下黄芪甲苷含量测定方法的可行性和可靠性。结果:黄芪甲苷在2.25~101.68μg•mL^(-1)浓度范围内呈良好的线性关系,重复性试验含量测定平均值为0.824 mg•mL^(-1),RSD=1.35%;平均回收率为99.2%,RSD 1.2%;10批样品的平均含量为0.818 mg•mL^(-1),RSD为1.8%。结论:经方法学验证,本法可作为健儿消食口服液质量控制的方法。

阿胶益寿口服液指纹图谱及4种成分的含量测定

为了建立阿胶益寿口服液的高效液相色谱指纹图谱,同时测定制剂水解产生的L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸的含量,采用异硫氰酸苯酯衍生化、高效液相色谱法检测得到10批次阿胶益寿口服液的指纹图谱,并采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)进行相似度评价,确定共同拥有峰;同法测定制剂中4种氨基酸的含量。研究发现,10批次制剂中共有8个共有峰,相似度≥0.9;指认了L-羟脯氨酸(1号峰)、甘氨酸(3号峰)、丙氨酸(4号峰)、L-脯氨酸(5号峰),4种成分的线性关系良好(r≥0.9997),加样回收率平均值分别为104.39%、105.37%、102.89%、105.19%,RSD分别为3.47%、3.50%、3.68%、2.42%。该研究建立的阿胶益寿口服液指纹图谱特征性强,4种氨基酸的含量测定方法简单、准确易行,可为阿胶益寿口服液的质量评价提供参考。

高效液相色谱法测定肝胆双清口服液中3种成分含量

目的 建立测定肝胆双清口服液中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸和特女贞苷含量的高效液相色谱法。方法 牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸的含量测定,色谱柱为Agilent Extend-C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钠溶液(用三乙胺调pH至6.0)-乙腈(梯度洗脱),流速为1 mL/min,检测波长为205 nm,柱温为40℃,进样量为10μL;特女贞苷的含量测定,色谱柱为Thermo Acclaim^(TM)120A C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1 mL/min,检测波长为224 nm,柱温为40℃,进样量为10μL。结果 牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸和特女贞苷的质量浓度分别在0.040 0~1.000 5 mg/mL、0.031 0~0.776 0 mg/mL、0.029 3~0.731 5 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%(n=6);加样回收率分别为98.49%,99.49%,99.78%,RSD分别为3.04%,2.20%,1.15%(n=6)。3批样品中3种成分的含量分别为0.323 1~0.325 8 mg/mL、0.285 8~0.287 6 mg/mL、0.268 8~0.305 5 mg/mL。结论 所建立的方法操作简便快速、重复性好、结果准确,可用于肝胆双清口服液中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸和特女贞苷的含量测定。

小儿清热止咳口服液高效液相色谱指纹图谱的建立及8种成分含量测定

目的建立小儿清热止咳口服液的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定其中8种主要成分的含量。方法色谱柱为Agilent Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm),流动相为乙腈-甲醇(89∶11,V/V)-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH 3.2),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm(0~31 min)、270 nm(31~75 min),柱温为30℃,进样量为10μL。结果共得到28个共有峰,其中26个可找到归属,各批样品间相似度均大于0.99。盐酸麻黄碱、黄芩苷、苦杏仁苷、甘草酸铵、盐酸伪麻黄碱、黄芩素、甘草苷、(R,S)-告依春质量浓度分别在2.05~41.06μg/mL、38.42~768.48μg/mL、9.00~179.93μg/mL、3.23~64.61μg/mL、1.09~21.90μg/mL、1.49~29.80μg/mL、1.94~38.87μg/mL、0.69~13.71μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.9994),检测限为0.0686~0.8576μg/mL,定量限为0.3284~1.6152μg/mL;稳定性、重复性、中间精密度试验结果的RSD均小于3.0%;平均加样回收率为97.90%~101.44%,RSD为0.45%~1.85%(n=6)。结论该方法灵敏、简便、准确,可用于小儿清热止咳口服液的质量控制。

HPLC法测定小儿肺热咳喘口服液中3种防腐剂的含量

目的:建立小儿肺热咳喘口服液中3种防腐剂苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Thermo syncronis C_(18)(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(19∶81),流速1 mL/min,柱温30℃,检测波长320 nm,进样量10μL。结果:苯甲酸、山梨酸、糖精钠在5~60μg/mL范围内与其峰面积均呈良好的线性关系(r>0.999),平均加样回收率分别为99.72%(RSD=1.57%,n=6),97.30%(RSD=1.70%,n=6),101.37%(RSD=0.99%,n=6);苯甲酸、山梨酸、糖精钠精密度试验的RSD分别为0.07%、0.21%、0.18%。结论:实验采用的HPLC法简便、准确、专属性强、重复性好,可用于液体口服制剂中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量测定。

The Application of Cooperative Learning in the Oral English Classroom

外语教学的最终目标是培养学生用外语进行交际的能力。本文就"共同参与式教学法"的基本理论,探讨了"共同参与式"教学模式在英语口语课课堂的运用,指出口语课内容应符合学生的兴趣和成长需求,教学模式要以学生为中心,在培养学生运用英语进行交流的同时,也要注重培养学生的组织材料的能力、交际能力和独立思考能力。

高效液相色谱法测定儿童口服液体制剂中抑菌剂苯甲酸钠和山梨酸钾的含量

目的建立高效液相色谱法筛查分析儿童口服液体制剂中抑菌剂苯甲酸钠和山梨酸钾。方法采用Ecosil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.02 mol·L^(-1)乙酸铵溶液-乙腈(95∶5)为流动相,检测波长为225 nm,流速为1.0 mL·min^(-1)。结果苯甲酸钠和山梨酸钾分别在1.082~108.2μg·mL^(-1)(r=1.0000)和1.140~114.0μg·mL^(-1)(r=1.0000)范围内与峰面积呈良好的线性关系;检测限分别为0.2209和0.2021 ng,定量限分别为0.7364 ng和0.6738 ng;平均回收率分别为100.4%和100.7%,RSD分别为0.4%(n=9)和0.5%(n=9);分析15个品种共21批样品,检出的苯甲酸钠和山梨酸钾均在参考限度范围。结论本实验建立的分析方法专属性强、灵敏度高、适用性好,可用于不同类型儿童口服液体制剂的质量控制。

复方明目口服液的制备工艺研究

目的:探究以枸杞子和菊花为主药,玫瑰花、麦芽、陈皮为辅药组建的复方明目口服液的最佳制备工艺。方法:以复合多糖提取率和浸膏得率为评价指标,采用单因素试验和正交试验对复方明目口服液的制备工艺进行探究。结果:单因素实验结果可得,复方明目口服液的最佳提取条件为料液比1∶14、提取温度80℃、提取时间2.5 h。正交实验方差分析表明液料比在提取工艺中为显著性因素,其次为提取温度,而提取时间对提取结果影响最小。结论:复方明目口服液的最佳制备工艺为料液比1∶14、提取温度100℃、提取时间2 h,且多糖提取率和浸膏得率分别高达15.28%±0.012%、33.89%±0.024%。