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Allelic variation in the coumarate 3-hydroxylase gene associated with wood properties of Catalpa fargesii Bur. 被引量:1
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作者 Nan Lu Fang Mei +6 位作者 Zhi Wang Nan Wang Yao Xiao Lisheng Kong Guanzheng Qu Wenjun Ma Junhui Wang 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2021年第6期2517-2529,共13页
Coumarate 3-hydroxylase(C3h)genes participate in the synthesis of lignin and may affect the properties of wood that are important for its commercial value.A better understanding of the natural variation in C3h genes a... Coumarate 3-hydroxylase(C3h)genes participate in the synthesis of lignin and may affect the properties of wood that are important for its commercial value.A better understanding of the natural variation in C3h genes and their associations to wood properties is required to effectively improve wood quality.We used a candidate gene-based association mapping approach to identify CfC3h allelic variants associated with traits that affect the wood properties of Catalpa fargesii.We first isolated the full-length CfC3h cDNA(1825 bp),which was expressed at relatively high levels in xylem according to real time-polymerase chain reaction.In totally,17 common single-nucleotide polymorphisms(minor allele frequency>5%)were identified through cloning and sequencing the CfC3h locus from a mapping population(including 88 unrelated natural C.fargesii individuals collected from main distribution area).Nucleotide diversity and linkage disequilibrium(LD)in CfC3h indicate that CfC3h has low nucleotide diversity(π_(t)=0.0031 andθ_(w)=0.0103)and relatively low LD(within 1800 bp;r^(2)≥0.1).An association analysis identified eight common single-nucleotide polymorphisms(SNPs)(false discovery rate,Q<0.10)and ten haplotypes(Q<0.10)associated with wood properties,explaining 4.92-12.09%of the phenotypic variance in an association population consisted of 125 unrelated natural individuals(The 88 individuals from the mapping population were comprised in the association population).Our study would provide new insight into C3h gene affecting wood quality,and the SNP markers identified would have potential applications in marker-assisted breeding in the future. 展开更多
关键词 Catalpa fargesii coumarate 3-hydroxylase Haplotype-based association analyses Linkage disequilibrium Single-nucleotide polymorphisms Wood properties
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杨树木质素合成酶c3h基因的克隆及其序列分析 被引量:7
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作者 聂会忠 薛永常 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期889-894,共6页
根据CYP98A3(GenBank登录号为AY064170)cDNA序列保守区设计引物,从正在分化的2年生‘欧美杨107’次生木质部提取的总RNA经RT-PCR扩增出一基因片段,然后与pMD20-T载体连接。重组质粒经限制性内切酶酶切、特异引物PCR扩增和测序鉴定。结... 根据CYP98A3(GenBank登录号为AY064170)cDNA序列保守区设计引物,从正在分化的2年生‘欧美杨107’次生木质部提取的总RNA经RT-PCR扩增出一基因片段,然后与pMD20-T载体连接。重组质粒经限制性内切酶酶切、特异引物PCR扩增和测序鉴定。结果表明,扩增片段长度为994bp,其中包含一个长为495bp的开放阅读框,编码的氨基酸序列(登录号为CAP47423)与NCBI中AY064170的CYP98A3编码氨基酸序列的相似性为91%,初步断定其为CYP98A3家族中的一员,其cNDA序列GenBank登录号为AM920690。参照国内外已发表的部分植物的c3h基因序列,构建了c3h的遗传进化树,分析了不同植物c3h的遗传进化关系。 展开更多
关键词 杨树 木质素 c3h基因 进化
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Changes of chlorogenic acid content and its synthesis-associated genes expression in Xuehua pear fruit during development 被引量:14
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作者 HE Jin-gang CHENG Yu-dou +2 位作者 GUAN Jun-feng GE Wen-ya ZHAO Zhe 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期471-477,共7页
According to synthetic pathway of plant chlorogenic acid (CGA), the expression patterns of genes encoding enzymes that are associated with CGA synthesis were studied in normally developed Xuehua pear fruit. The stud... According to synthetic pathway of plant chlorogenic acid (CGA), the expression patterns of genes encoding enzymes that are associated with CGA synthesis were studied in normally developed Xuehua pear fruit. The study demonstrated that CGA content in peel and flesh of Xuehua pear decreased as fruit development progressed, with a higher level in peel. The expression levels of PbPAL 1, PbPAL2, PbC3H, PbC4H, Pb4CL 1, Pb4CL2, Pb4CL6, PbHC T1 and PbHC T3 genes decreased in fruit, which was consistent with the pattern of variation in CGA content. That indicated that these genes might be key genes for influencing fruit CGA synthesis in Xuehua pear. However, Pb4CL7 gene expression profile is not consistent with variation of CGA content, hence, it may not be a key gene involved in CGA synthesis. 展开更多
关键词 cinnamate 4-hydroxylase gene hydroxy cinnamoyl CoA shikimate/quinic acid hydroxycinnamoyl transferasegene p-coumarate 3-hydroxylase gene 4-hydroxycinnamoyl-CoA ligase gene phenylalanine ammonia lyasegene Xuehua pear
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苎麻香豆酸–3–羟化酶基因的原核表达 被引量:1
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作者 袁有美 郭清泉 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期157-161,共5页
以湘苎3号为材料,采用RT–PCR克隆,获得苎麻香豆酸–3–羟化酶(Bn C3H)基因的开放阅读框(ORF)序列,测序正确后将该基因片段连接到原核表达载体p ET–22b中,将构建成功的重组子p ET–22b–C3H转入BL21并诱导表达。结果显示:Bn C3H基因OR... 以湘苎3号为材料,采用RT–PCR克隆,获得苎麻香豆酸–3–羟化酶(Bn C3H)基因的开放阅读框(ORF)序列,测序正确后将该基因片段连接到原核表达载体p ET–22b中,将构建成功的重组子p ET–22b–C3H转入BL21并诱导表达。结果显示:Bn C3H基因ORF区大小为1 536 bp,编码511个氨基酸,推测蛋白相对分子质量为57 800,理论等电点为8.61,编码的蛋白质为亲水性蛋白质;重组子在IPTG浓度为1 mmol/L时,融合蛋白的表达量在诱导2 h后达到最高,经IPTG诱导和SDS–PAGE检测,获得的融合蛋白与预期蛋白相符。 展开更多
关键词 苎麻 苎麻香豆酸–3–羟化酶 基因克隆 原核表达
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当归香豆酸-3-羟化酶基因ASC3H的克隆及表达模式与阿魏酸含量相关性分析 被引量:3
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作者 王漫青 程湘 +5 位作者 王广 明玥 曾静怡 白小娜 张绍鹏 徐燃 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期161-166,共6页
目的:对当归中香豆酸-3-羟化酶基因(C3H)全长进行克隆,进行生物信息学与基因表达模式分析,结合当归根不同组织部位阿魏酸的含量,推测ASC3H基因功能。方法:基于前期转录组测序结果,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)克隆全... 目的:对当归中香豆酸-3-羟化酶基因(C3H)全长进行克隆,进行生物信息学与基因表达模式分析,结合当归根不同组织部位阿魏酸的含量,推测ASC3H基因功能。方法:基于前期转录组测序结果,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)克隆全长cDNA序列,运用生物信息学方法分析该序列特征,并利用Real-time PCR和高效液相色谱法(HPLC)分别测定当归不同组织中ASC3H基因表达量及阿魏酸含量。结果:克隆获得当归ASC3H全长基因(登录号MN2550298),开放阅读框(ORF)长度为1530 bp,编码509个氨基酸,理论相对分子质量为57.86 kDa,等电点8.36,为不含信号肽的亲水性不稳定蛋白,定位于叶绿体中,有跨膜区,具有多个磷酸化位点,含有细胞色素P450的保守结构域CGYDWPKGYGPIINVW_P450(383~399 aa);多重氨基酸序列比对分析结果显示ASC3H与其他植物的C3H基因具有较高相似性,并与同科植物大阿米芹的同源性最高;Real-time PCR结果显示ASC3H基因在当归不同组织的表达量不同;HPLC结果表明阿魏酸成分在当归根皮层组织含量最高,周皮、中柱次之。结论:成功获得当归C3H基因序列,分析了其蛋白结构与特异性表达特征,推测ASC3H可能参与当归阿魏酸的合成,为进一步研究C3H基因在当归阿魏酸生物途径中的功能提供了参考依据,也为遗传改良当归品质奠定了研究基础。 展开更多
关键词 当归 阿魏酸 香豆酸-3-羟化酶 基因克隆 生物信息学分析 表达分析 含量测定
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甘薯香豆酸3'-羟化酶基因的克隆和表达分析 被引量:1
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作者 徐靖 朱红林 +4 位作者 林延慧 韩义胜 唐力琼 王新华 王效宁 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期3126-3131,共6页
香豆酸3'-羟化酶(coumarate-3-hydroxylase,C3H)是绿原酸代谢途径中的关键酶之一。为了揭示甘薯绿原酸生物合成途径和挖掘绿原酸合成相关基因,本研究从甘薯中克隆一个C3H的同源基因IbC3H。该基因全长1656 bp,包含一个1530 bp的完整... 香豆酸3'-羟化酶(coumarate-3-hydroxylase,C3H)是绿原酸代谢途径中的关键酶之一。为了揭示甘薯绿原酸生物合成途径和挖掘绿原酸合成相关基因,本研究从甘薯中克隆一个C3H的同源基因IbC3H。该基因全长1656 bp,包含一个1530 bp的完整开放阅读框,编码509个氨基酸。IbC3H蛋白具有典型P450家族蛋白结构特征,与牵牛花(Ipomoea nil)、马铃薯(Solanum tuberosum)、浆果状椒(Capsicum baccatum)和烟草(Nicotiana attenuate)中相应蛋白的同源性分别达到97.2%、85.4%、84.8%和84.8%。IbC3H启动子序列中含有脱落酸、赤霉素、乙烯和干旱等多个激素和胁迫响应元件,以及髓细胞组织增生病毒癌基因同源物(MYB)、碱性螺旋-环-螺旋蛋白(bHLH)、和WRKY蛋白等转录因子结合元件。荧光定量PCR结果显示,IbC3H在甘薯叶片中表达量最高,在茎中次之,而在块根中的表达量最低,与甘薯不同组织绿原酸含量正相关。本研究结果为进一步揭示IbC3H在绿原酸生物合成中的功能提供了依据。 展开更多
关键词 甘薯(Ipomoea batatas) 绿原酸 香豆酸- 3- 羟化酶 基因表达
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