斜纹夜蛾蜕皮激素受体与超气门蛋白的原核表达及活性检测

双酰基肼类杀虫剂模拟天然蜕皮激素作用影响幼虫蜕皮。昆虫蜕皮激素受体的高度敏感性和专一性要求必须建立新的杀虫活性检测技术,以适应快速准确和大批量筛选的要求。本研究采用RT-PCR技术,获取斜纹夜蛾Spodoptera litura蜕皮激素受体(EcR)与超气门蛋白(USP)功能域目的基因,构建EcR、USP功能区基因原核表达载体(pEHISEGFPTEV-EcRcde和pEHISEGFPTEV-USPcde)。载体经诱导表达和蛋白纯化,获得EcR和USP功能区纯化蛋白。在蛋白浓度l mg/mL,3H-PonA终浓度8 nmol/L的条件下,采用放射性配基受体结合分析测定了4种药剂(虫酰肼、呋喃虫酰肼、抑食肼和灭幼脲)不同浓度下的放射性比活的变化。结果显示:随着药剂浓度的逐渐增大,前3种药剂的放射性比活都有不同程度的降低,其中虫酰肼的放射性比活降低程度最大,其次是呋喃虫酰肼和抑食肼,灭幼脲的放射性比活基本无变化。这些结果表明相同条件下虫酰肼比呋喃虫酰肼和抑食肼有更高的杀虫活力,本研究的方法可对双酰基肼类杀虫剂或者先导化合物进行初步筛选。

GlcNAcT在肿瘤^(99)Tc^m-DTPA-DG分子显像中的作用及意义

目的探讨肿瘤99Tcm-DTPA-DG分子显像的相关机制中N乙酰氨基葡萄糖转移酶(GlcNAcT)的作用及意义。方法建立负肺癌雌性裸鼠模型,剥除肿瘤组织行HE染色并进行免疫荧光检测99Tcm-DTPA-DG在不同活度下GlcNAcT变化趋势。剥离的肿瘤组织匀浆后提取胞浆蛋白及细胞核蛋白,比较细胞核是否摄取TcO4-、99Tcm-DTPA、18F-FDG和99Tcm-DTPA-DG。结果肿瘤组织摄取不同活度99Tcm-DTPA-DG后,可见GlcNAcT蛋白表达有变化,GlcNAcT表达水平与99Tcm-DTPA-DG摄取率一致,有密切相关关系;99Tcm-DTPA-DG可被摄取进入细胞核且入核比率较其他药物高。结论99Tcm-DTPA-DG进入细胞后,可以入细胞核进一步参与细胞代谢,实现肿瘤分子显像,这与99Tcm-DTPA-DG在胞质内磷酸化后被GlcNAcT糖基化修饰有关。

放射性^(125)碘对移液器容量的比对与校准

目的:建立精确有效、简便快速的同位素标记法用于实验室移液器容量的比对与校准,实现移液器准确度与精确度的有效监控。方法:以125I标记溶液为示踪材料,以放射性γ计数仪为设备,以测定CPM值为观察指标,用已通过重量分析法检定的移液器为标准,其他待检移液器容量通过放射性同位素溶液吸样测定CPM与之比较进行方法学评价。结果:放射性同位素法检测批内精密度在0.88%~1.08%之间;平均回收率98.83%;CPM值与125I浓度梯度及容量之间关系的回归方程分别为:Y=23879X-388.4(r2=0.9992)和Y=572.18X-175.83(r2=0.9994)呈正相关;标准移液器与待检移液器的容量平行试验结果良好。结论:放射性同位素125I标记进行移液器容量比对与校准技术,方法灵敏、精确、简便,可适用于临床实验室。

公共场所监测仪器直读数据与国家标准单位转换器应用软件的设计与实现

本软件可为我单位公共场所管理人员提供监测现场的仪器直读数据与国家标准单位之间的转换功能。该系统已在实际工作中投入运行,使我们的业务工作变得简便快捷、准确规范,极大地提高了工作效率,具有一定的社会效益。