肉苁蓉对小鼠血清肌酸激酶和骨骼肌超微结构的影响

肉苁蓉水煎液小白鼠灌胃,可使其游泳时间延长,负荷运动后血清肌酸激酶升高幅度降低。骨骼肌超微结构显示肌糖原含量丰富,运动后线粒体普遍增生、肥大,未见肿胀、空泡等。肌原纤维结构保持完整,无明显损伤。

Electroacupuncture preconditioning protects against focal cerebral ischemia/reperfusion injury via suppression of dynamin-related protein 1

Electroacupuncture preconditioning at acupoint Baihui （GV20） can reduce focal cerebral ischemia/reperfusion injury. However, the precise protective mechanism remains unknown. Mitochondrial fission mediated by dynamin-related protein 1 （Drp1） can trigger neuronal apoptosis following cerebral ischemia/reperfusion injury. Herein, we examined the hypothesis that electroacupuncture pretreatment can regulate Drp1, and thus inhibit mitochondrial fission to provide cerebral protection. Rat models of focal cerebral ischemia/reperfusion injury were established by middle cerebral artery occlusion at 24 hours after 5 consecutive days of preconditioning with electroacupuncture at GV20 （depth 2 mm, intensity 1 mA, frequency 2/15 Hz, for 30 minutes, once a day）. Neurological function was assessed using the Longa neurological deficit score. Pathological changes in the ischemic penumbra on the injury side were assessed by hematoxylin-eosin staining. Cellular apoptosis in the ischemic penumbra on the injury side was assessed by terminal deoxyribonucleotidyl transferase-mediated dUTP-digoxigenin nick end labeling staining. Mitochondrial ultrastructure in the ischemic penumbra on the injury side was assessed by transmission electron microscopy. Drp1 and cytochrome c expression in the ischemic penumbra on the injury side were assessed by western blot assay. Results showed that electroacupuncture preconditioning decreased expression of total and mitochondrial Drp1, decreased expression of total and cytosolic cytochrome c, maintained mitochondrial morphology and reduced the proportion of apoptotic cells in the ischemic penumbra on the injury side, with associated improvements in neurological function. These data suggest that electroacupuncture preconditioning-induced neuronal protection involves inhibition of the expression and translocation of Drp1.

围产期窒息后血浆cTnI、CK-MBmass的影响因素及临床应用价值

为探讨围产期窒息后血浆心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶心型同工酶质量 (CK_MBmass)的影响因素及临床应用价值 ,对71例围产期窒息新生儿及27例对照组新生儿生后6小时～48小时血浆cTnI、CK_MBmass水平进行测定 ,运用逐步回归等方法进行分析。结果显示①血浆cTnI水平的变化与胎龄、5分钟Apgar评分有关。②围产期窒息组足月儿 (59例 )cTnI明显高于对照组足月儿 (19例 ) ;重度窒息组 (17例 )与轻度窒息组 (16例 )比较 ,cTnI差异无显著性 ,而CK_MBmass差异有非常显著性 ;围产期窒息组的重度心脏损害患儿 (8例 )cTnI、CK_MBmass水平均明显高于无重度心脏损害患儿 (63例 )。表明围产期窒息持续时间越长 ,血浆cTnI的水平越高。相对于CK_MBmass而言 ,cTnI对心肌损伤的敏感性可能稍差 ,而且由于cT nI的水平随着胎龄的增加而增加 。

ERK1/2在慢性冬眠心肌中变化及意义的实验研究

目的 探讨慢性冬眠心肌(chronic hibernating myocardium,CHM)组织中胞外信号调节蛋白激酶(extracellular-signal regulated kinase,ERK1/2)的蛋白表达及其磷酸化形式(p-ERK1/2)的变化和意义。方法 10只小型中国家猪随机分为实验组(EXP,n=6)与对照组(CON,n=4)。实验组以右冠状动脉为靶血管,经右股动脉送入自制的缩窄器后继续喂养一个月制备成慢性冬眠心肌的模型。处死动物前三天采用硝酸甘油介入^(99)Tc^m-MIBI(^(99)锝~m-甲氧基异丙基丙腈)心肌灌注显像(SPECT)方法检测慢性冬眠心肌,获取对照组心肌组织(CON)、实验组中的正常心肌组织(NM)及慢性冬眠心肌组织(CHM)的样本进行光镜、电镜检查。采用免疫印迹(Western blotting)分析三组心肌组织中ERE1/2的蛋白表达及p-ERK1/2的变化。结果CHM中p-ERK1/2明显增高,与NM、CON中p-ERK1/2相比较有显著性差异(p<0.05,p<0.01)。结论 慢性冬眠心肌组织中ERK1/2被激活。

低浓度铅接触大鼠海马突触损伤和学习记忆能力改变及中药的干预作用

【目的】从海马突触损伤、CaMK Ⅱ表达等方面探讨低浓度铅接触行为记忆改变及中药的干预机制。【方法】40只大鼠随机分为4组:空白组饮双蒸水;其他3组饮水中均添加0.02%醋酸铅,中药高低剂量组分别按驱铅丸3.5 g/(kg.d)和2.0 g/(kg.d)的剂量2 ml/d灌服。60 d后,进行Morris水迷宫试验,检测全血、脑组织铅含量;海马组织电镜观察,RT-PCR法和免疫组织化学方法检测脑组织CaMK Ⅱ mRNA及其蛋白表达。【结果】与空白组比较,模型组血铅、脑铅含量显著增高(P<0.01),与模型组比较驱铅丸高剂量组脑铅、血铅含量显著降低(P<0.05);Morris水迷宫试验结果提示模型组大鼠空间定位航行能力下降(P<0.05),中药干预组定位能力较模型组明显提高(P<0.001);模型组CaMK Ⅱ mRNA及其蛋白表达显著降低(P<0.05),与模型组比较高剂量组CaMK Ⅱ mRNA及其蛋白表达显著增高(P<0.05);电镜结果显示驱铅丸能缓解铅导致的海马区神经细胞变性与凋亡。【结论】驱铅丸可以改善铅接触大鼠的记忆障碍,其机理与减缓神经细胞的炎性变及凋亡、增强海马区CaMK Ⅱ mRNA及其蛋白表达等有关。

阿霉素对围麻醉期心肌肌钙蛋白Ⅰ和心肌超微结构影响的实验研究

目的研究阿霉素(ADM)化疗对大鼠围麻醉期心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同功酶(CKMB)活性的变化和心肌超微结构的影响,探讨围麻醉期心肌损伤的程度与特点。方法32只Wistar大鼠随机分成A、B、C、D组,每组8只。A、B组腹腔注射(ip)ADM2.50mg.kg-1,隔日1次,共6次(11d);C、D组ip相同容积的生理盐水。所有Wistar大鼠于最后一次注药后3d实施麻醉:A、C组选择吸入异氟烷麻醉;B、D组选择ip戊巴比妥钠麻醉。分别于麻醉前、麻醉后20min采血1ml,离心分离血清检测cTnI、CK和CKMB,并取出心脏制作病理和透射电镜标本。结果①4组Wistar大鼠麻醉前cTnI水平的差异无统计学意义,而麻醉后均有不同程度升高(P<0.01),A和B组、B和D组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);B组麻醉前、后比较,差异有统计学意义(P<0.05);②4组Wistar大鼠麻醉前或后CK、CKMB值的差异均无统计学意义,麻醉前、后配对比较差异也无统计学意义(P均>0.05);③心肌病理改变:A、B组见心肌细胞变性、坏死;而C、D组结果正常,4组心肌组织病理评分差异有统计学意义(P<0.01)。结论cTnI是动态监测围麻醉期心肌损伤敏感的指标;是判断麻醉是否加重ADM化疗患者心肌损伤的重要标志。与戊巴比妥钠相比,吸入麻醉药异氟烷没有进一步加重ADM引起的心肌损伤,具有一定的心肌保护作用。

运动性骨骼肌损伤后不同时刻大鼠肱三头肌超微结构及肌酸激酶的变化

通过建立大鼠下坡跑运动损伤模型,研究运动损伤后骨骼肌超微损伤和恢复发生的机制。主要结果：运动后大鼠肱三头肌超微结构发生改变,电镜下可见肌纤维排列紊乱,Z线异常（包括Z线流、Z线模糊、Z线扭曲和Z线消失）,肌细胞膜模糊、溶解,线粒体肿胀、空泡样改变等。这些现象随运动时间的不同而发生改变。运动后24 h表现最为明显,而后逐渐恢复;运动后72 h恢复明显,但没有完全恢复。运动后即刻血清CK活性（2035.42±426.49）U/L与对照组血清CK活性（293.66±76.07）U/L相比,非常显著增高（P〈0.01）,达到了峰值,而后逐渐恢复。运动后72h组血清CK活性（425.51±143.34）U/L与即刻组血清CK活性相比已显著恢复（P〈0.01）。结论：运动后24h骨骼肌的损伤程度最为严重,72 h后可明显恢复;大强度运动对CK的活性具有非常显著的影响,血清CK活性的变化能够反映运动后骨骼肌超微结构损伤的状况。

温血持续灌注心肌保护对心肌酶和超微结构的影响

目的 观察含钾温氧合血持续和冷氧合血间歇灌注心肌保护方法应用于先天性心脏病直视手术的疗效。方法 室间隔缺损20例随机分为含钾温氧合血持续灌注组（温血组）与含钾冷氧合血间歇灌注（冷血组），每组各10例，检测体外循环前、再灌注即刻、再灌注后6h、再灌注后24h外周静脉血肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK．MB）；主动脉阻断即刻与开放主动脉前分别取房间隔组织，用透射电子显微镜观察心肌超微结构变化。结果 两组再灌注后各时点外周静脉血CK、CK-MB温血组较冷血组低（P〈0．05）；温血组心肌细胞超微结构改变轻微。结论 含钾温氧合血持续灌注心肌保护明显减轻心肌缺血再灌注损伤，应用于先天性心脏病直视手术显示优越的心肌保护作用。

同时快速检测全血cTnI、MB、CK-MB诊断急性心肌梗死的评估

目的 评估同时快速检测全血肌钙蛋白、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶的金标定性法在急性心肌梗死 (AMI)早期诊断中的价值。方法 应用美国PBM公司试剂盒测定 59例AMI发病后不同时间和 43例不稳定性心绞痛患者全血中cTnI、MB、CK MB并与生化法测定CK、CK -MB作对照。结果 59例AMI在症状出现后 ,(3.9± 2 .3)h首次检测 ,金标定性法阳性率cTnI>6 0 % ,CK -MB >6 2 % ,MB >6 5%。酶法检测CK -MB、CK升高 (与新法比较 )分别为 45% (P <0 .0 1 )和 36 % (P <0 .0 0 1 ) ;此后 4h再次检测 ,上述结果分别为 98%、94%、92 %、91 % (P >0 .0 1 )和 6 1 % (P <0 .0 0 1 )。在AMI发病 1周后 ,定性法cTnI阳性率仍达 76 .4%。结论 同时快速检测cTnI、MB、CK

心肌肌钙蛋白T对冠状动脉旁路移植术患者围术期心肌梗死的诊断意义

目的：观察心肌肌钙蛋白T（cTnT）与肌酸激酶同功酶（CK-MB）在冠状动脉旁路移植（CABG）术围术期变化,比较两者对心肌损伤的诊断差异,研究cTnT对CABG术围术期心肌梗死的诊断意义。方法：连续152例患者在心脏停跳体外循环下行CABG术,平均年龄62.5±20.7（39~80）岁,平均每例移植血管2.7（1~5）支,平均心肺转流（CPB）时间113±54min,平均主动脉阻断时间56±31min。围术期9个时间点取静脉血标本,测定cTnT与CK-MB。结果：cTnT与CK-MB均于主动阻断钳开放后明显升高,开放后10h达峰值。CK-MB术后5d恢复至术前水平,而cTnT术后10d才恢复至术前水平。13例围术期心肌梗死（PMI）患者术后各时间点所测cTnT均显著高于无PMI者,术后10h达峰值,为2.97±1.12μg.L-1,且术后10d仍明显高于正常范围,为0.87±0.31μg.L-1,其中有7例术后因PMI而死亡。而无PMI者,无1例因心脏原因死亡。结论：cTnT与CK-MB在CABG术后前期的动态变化相似,但cTnT高于正常值的持续时间长,对心肌缺血损伤诊断时间窗宽于CK-MB。因此,cTnT诊断心肌损伤的晚期敏感性高于CK-MB。围术期cTnT的检测是诊断PMI高度敏感性指标,也是预测CABG术后发生PMI及预后的可靠指标。

CD117阴性胃肠道间质瘤的临床病理及超微结构分析

目的:探讨CD117阴性胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumours,GIST)的临床病理及超微结构特征.方法:采用HE、免疫组化(EnVision法)及电镜技术观察16例CD117阴性GIST,并运用Western blot技术检测4例GIST中PKC-θ蛋白的表达.结果:16例患者中男11例,女5例,年龄32～67柳岁,平均54岁.随访9例,死亡1例.组织学形态可分为梭形细胞为主型、上皮样细胞为主型及梭形和上皮样细胞混合型.肿瘤细胞免疫组化阳性表达为PKC-θ87.5%(14/16),CD117 0%(0/16),CD34 62.5%(10/16),Des 6.2%(1/16),θ-SMA 31.2%(5/16),S-100 18.8%(3/16).电镜下GIST的超微结构特点与卡哈尔细胞相似.Western blot证实了PKC-θ在CD117阴性GIST中的表达.结论:CD117阴性GIST可通过免疫标记PKC-θ和及电镜检测做出诊断.

苁蓉运动保健饮料的动物实验研究

目的 :研究苁蓉运动保健饮料的抗疲劳作用及机制。方法 :采用运动生化常用的手段做动物实验研究。结果 :实验表明苁蓉运动保健饮料可延长小鼠力竭性游泳时间 ;降低剧烈运动时肌酸激酶上升的幅度 ,保护细胞少受损伤 ;有助于提高小鼠无氧运动能力 ,加速血乳酸的清除 ;对小鼠体重的增长无明显的影响。结论 :苁蓉运动保健饮料具有明显的抗疲劳作用 ,且对体重的增长无明显的影响。

心肌肌钙蛋白及肌酸激酶定量分析对心肌损伤早期诊断的价值

目的 探讨心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)定量分析对心肌损伤早期诊断的临床价值。方法 检测80例心肌梗塞(急性50例,陈旧性30例)、100例心脏手术、60例非心脏手术患者和20例健康人的血清cTnT、cTnI、CK-MB和CK,并加以分析。结果 急性心肌梗塞及心脏手术病人血清cTnT、cTnI浓度明显升高,与CK、CK-MB的升高程度相比有显著差异(P<0.01),两组患者3h内、5d后cT nT、cTnI阳性检出率明显高于CK-MB和CK。血清cTnT、cTnI、CK-MB和CK检测心肌损伤的敏感度分别为86.2％、90.9％、54.6％、64.8％,特异度分别为100％、100％、92.3％、75.4％。结论 与CK、CK-MB相比,血清cTnT、cTnI能更确切地反应心肌损伤程度,是较敏感和特异的血清标志物,应当作为心肌损伤诊断的常规指标。

体外循环心内直视先心纠治术对心肌肌钙蛋白的影响及意义

目的 :研究心脏不停跳心内直视先心纠治术对心肌肌钙蛋白 (c Tn- T)的影响及意义。方法 :检测 16例体外循环心脏不停跳心内直视先心纠治术治疗患者术前、术中及术后血清 c Tn- T及肌酸磷酸激酶同功酶 (CK- MB) ,并进行对比分析。结果 :血清 c Tn- T明显增高 ,于停机时达到最高峰 ,并持续高于术前水平至术后 2周。CK- MB于术后 2 h达最高峰 ,术后 1周即恢复至术前水平。结论 :体外循环心脏不停跳先心纠治术中 ,血清 c Tn- T可用于评价围手术期心肌细胞损伤和心肌保护效果的指标 ,其敏感性、特异性及持续时间优于 CK- MB。

心脏不停跳心内直视术中心肌肌钙蛋白T的测定及意义

目的 研究心脏不停跳心内直视术围手术期心肌肌钙蛋白T(cTn-T)的变化及意义。方法 检测26例心脏不停跳心内直视术患者术前,术中及术后血清cTn-T及肌酸磷酸激酶同功酶(CK-MB)。结果 cTn-T明显增高,于停机时达到最高峰后,出现下降趋势,术后2周仍高于术前水平。术后心功能不良患者,cTn-T持续上升。CK-MB于术后2小时达最高峰,术后1周即恢复至术前水平。结论 心脏不停跳心内直视术中,血清cTn-T可用于监测围手术期心肌细胞损伤和估价心肌保护效果。并有可能作为反映预后的指标,其敏感性、特异性及持续时间优于CK-MB。

冠心病围术期心肌肌钙蛋白T动态变化及意义

目的比较心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和心肌型肌酸激酶同工酶(MB isoenzyme of crcatine kinase,CK-MB)在冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass graft,CABG)围术期变化。方法在体外循环下行CABG术40例,年龄(61±18)岁,每例平均旁路移植2．8支,体外循环时间(118±57) min,主动脉阻断时间(58±35)min。围术期9个时间点取静脉血标本,测定cTnT与CK-MB。心肌缺血或心肌梗死的诊断用心电图、超声心动图及生化指标。结果主动脉阻断钳开放后cTnT与CK-MB均明显升高,开放后10 h达峰值,术后5 d CK-MB恢复至术前水平,而cTnT术后10 d才恢复至术前水平。手术期间心肌梗死(perioperative myocardial infarction,PMI)4例,cTnT。在整个围术期均显著高于无PMI者,在术后10 d仍明显高于正常范围,因PMI术后死亡2例(2／4)。结论cTnT与CK-MB在CABG术后前阶段改变化相似,但cTnT持续在正常值以上的时间长,诊断心肌损伤的敏感性与CK-MB类似,是预测CABG术预后的可靠指标。

1,6-二磷酸果糖对阿霉素心肌损伤的保护作用

目的研究1,6-二磷酸果糖对阿霉素心肌损伤的保护作用。方法30只SD大鼠随机分为对照组、阿霉素组和阿霉素+1,6-二磷酸果糖组。观察大鼠心率和肝、肺干湿重比变化,测定各组大鼠肌酸激酶同工酶水平。检测心肌铜—锌—超氧化物歧化酶活力,免疫组织化学法测定铜—锌—超氧化物歧化酶蛋白水平表达,半定量聚合酶链反应测定铜—锌—超氧化物歧化酶基因表达水平。结果与阿霉素组比较,阿霉素+1,6-二磷酸果糖组心率变化率明显下降(P<0.05),肝、肺干湿重比明显上升(P<0.05),肌酸激酶同工酶显著下降(P<0.01)。心肌铜—锌—超氧化物歧化酶活力明显提高(P<0.05),铜—锌—超氧化物歧化酶基因表达及蛋白表达增加(P<0.05)。结论1,6-二磷酸果糖对阿霉素心肌损伤有保护作用,其机制可能与其抑制氧化应激有关。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并贫血与本虚证关系回顾性研究

[主要目的]分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并贫血与本虚证关系。[资料来源]选取福建中医药大学附属人民医院肺病科2013年1月至2014年1月住院AECOPD患者。[选择文献量及依据]1研究类型:临床观察。2研究对象:符合《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2013年修订版)》AECOPD诊断标准;《中医内科学》第一章肺系病证喘证之虚喘,《中医诊断学》第九章脏腑辨证之辨脾病证候。3评价指标:血常规、中医证型等各项指标。排除支气管哮喘,肺结核,支气管扩张症,肺间质纤维化,矽肺,肺部肿瘤,刺激性气体、过敏等因素所致的慢性咳嗽喘息;新近和活动性出血、肝肾疾病、结缔组织病、内分泌疾病、造血系统疾病、恶性肿瘤等与贫血有关的疾病;妊娠及哺乳期妇女;依从性差,未正常服药,或失访者。共113例住院病历。[数据提炼规则及应用方法]所有患者测血常规,依据Hb将患者分成贫血组和非贫血组,根据中医肺脾肾本虚证辨证标准对纳入的AECOPD患者本虚证进行辨证分类,分析两组本虚的中医证型分布规律,研究COPD合并贫血与肺脾肾本虚的关系。使用Microsoft Excel2013建立数据库,分析AECOPD贫血与非贫血本虚证分布。[数据综合得出结果与结论]AECOPD贫血与非贫血本虚证分布,脾肾虚>肺脾肾虚>肺脾虚>肺肾虚>肾虚。[未来展望]可进行多中心、大样本长时间的调查研究,为中医中药治疗AECOPD合并贫血提供更多、准确的临床和理论依据。

Pyk2对人类结肠癌细胞肝转移能力及超微结构的影响

目的:研究在裸鼠结肠癌肝转移模型中,富含脯氨酸的蛋白酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)对人结肠癌细胞肝转移能力和超微结构的影响。方法:利用正义及反义cDNA技术,在人结肠癌细胞系SW480基础上,构建Pyk2高表达的细胞系SW480-Pyk2+及低表达的细胞系SW480-Pyk2-作为实验组,并以转染空载体的细胞系SW480-vector和原细胞系SW480作为对照组。4组共32只4周龄的Babl/c nu/nu雄性裸鼠,用脾注射保留脾脏法构建裸鼠肝转移瘤模型。6周后处死裸鼠,用Western blot检测瘤细胞中Pyk2蛋白的表达,计数肝转移瘤数目,电子显微镜下观察肝转移瘤细胞的超微结构。结果:6周后裸鼠肝转移模型建立成功,Western blot显示SW480-Pyk2+组的蛋白表达量明显高于空载体组(SW480-vector)和SW480组,SW480-Pyk2-组的蛋白表达量明显低于SW480组和SW480-vector组;肝转移瘤计数显示SW480-Pyk2+组明显少于SW480-vector组及SW480组,SW480-Pyk2-组明显多于SW480-vector组及SW480组(P<0.05),而SW480-vector组与SW480组之间无明显差异;电子显微镜下观察发现,SW480-Pyk2+组细胞连接发育较成熟,有形成腺腔趋势,微绒毛较多,细胞器较多,粗面内质网较多,细胞异型性较轻;而SW480-Pyk2-组细胞连接发育不良,细胞器少,微绒毛短小而稀疏,细胞核异形明显,有核沟。结论:Pyk2能减少结肠癌肝转移灶的数量,改善细胞的异型性和细胞连接发育,并可能通过此机制抑制肿瘤转移。

降钙素原评价急性冠脉综合征的临床研究

目的：探讨降钙素原（ PCT）评价急性冠脉综合征的临床意义。方法：通过对急诊141例缺血性胸痛患者进行心肌标志物的测定，观察患者心脏不良事件（ MACE）发生率及死亡率，并进一步比较PCT与其他心肌标志物，如肌钙蛋白T（Tn-T）、肌酸磷酸激酶同工酶（CK-MB）、肌红蛋白及超敏C反应蛋白（Hs-CRP）在评价急性冠脉综合征中的临床意义。结果：PCT诊断心肌梗死敏感性为38.3％（95％CI 28.8％～47.3％），特异性为77.8％（95％CI 70.0％～84.4％），阳性似然比[LR（＋）]1.725，阴性似然比[LR（-）]0.792；复测PCT敏感性、特异性、LR （＋）及LR （-）分别为90.0％（95％CI 80.9％～95.7％）、59.3％（95％CI 52.5％～63.5％）、2.2及0.16。 PCT评价MACE、住院期间死亡率及自入院后1个月内、6个月内的死亡率敏感性及特异性分别为81.3％（95％CI 54％～95％）/40.8％（95％CI 32％～49％）、66.7％（95％CI 13％～98％）/38.4％（95％CI 30％～47％）、50％（95％CI 9％～90％）/38％（95％CI 30％～47％）、60％（95％CI 17％～92％）/38.2％（95％CI 30％～47％）。结论：对以缺血性胸痛为主要表现的患者来说，PCT不是诊断急性冠脉综合征有效的标志物，且对心肌梗死预后无准确的评价意义。