姬松茸粗多糖防治烟草花叶病毒病

烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)是导致茄科(Solanaceae)作物减产的重大因素,为探寻防治烟草花叶病的食用菌源多糖材料,采用半叶法、五点注射试验和系统寄主侵染活性评价测定6种粗多糖对TMV的防治效果。结果表明:姬松茸(Agaricus blazei)粗多糖提取率最高,可达24.32%,其次是平菇(Pleurotus ostreatus)为18.56%,最低为杏鲍菇(Pleurotus eryngii)10.04%。总糖含量中,姬松茸总糖明显高于其他种类,达到37.71%,其次是桑黄(Phellinus igniarius)和灵芝(Ganoderma lucidum),总糖含量均超过32.00%,此外姬松茸粗多糖的硫酸基含量高达2.10%。半叶法测定6种粗多糖对TMV的防治效果,结果显示,多糖喷施48 h后对接种病毒能达到较好的预防效果,其中云芝粗多糖、姬松茸粗多糖、平菇粗多糖的预防效果均达到60.00%以上。尤其是24 mg/mL姬松茸粗多糖的预防效果达92.04%,叶片的枯斑数目明显少于清水对照组。在五点注射试验中,姬松茸粗多糖处理的荧光斑点亮度弱于对照组,同时新叶上未出现荧光点,抑制率达38.18%,在病毒侵入前期姬松茸粗多糖有抑制作用,能够延缓TMV的移动速度,减慢系统侵入进程。在系统寄主NC-89上,姬松茸粗多糖对TMV的防治效果高达76.81%,效果优于0.5%香菇多糖水剂和1.8%辛菌胺醋酸盐水剂处理组,当姬松茸粗多糖浓度为48 mg/mL时植株出现损伤,多糖浓度过高在植株表面形成沉淀,引起植株黄化。大田试验显示,姬松茸粗多糖对TMV的治疗效果为70.31%,对叶片扭曲、蜷缩、停止生长的植株有明显改善。同时对TMV有一定的抑制作用,喷施姬松茸粗多糖的烟草发病时间延后,烟草长势良好,叶片伸展。本研究结果为进一步研究真菌多糖防治烟草花叶病毒的作用方式和机制奠定基础,对绿色防控作物TMV有一定的理论意义和实际意义。

烟草镰刀菌根腐病病菌致病粗毒素的研究

本试验测定了经尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和茄病镰刀菌(F.solani)粗毒素浸泡后烟草幼苗抗病相关酶系的活性及细胞膜透性的变化,以研究毒素对烟草的致病作用。结果表明,引起烟草根腐病的尖孢镰刀菌和茄病镰刀菌的毒素属于非寄主专化性毒素(NHST)。烟草幼苗经毒素处理12～60h,其过氧化物酶(peroxidase,POD)和多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)的活性都迅速升高,随后下降,幼苗出现不同程度的萎蔫。50%的毒素液处理幼苗根部54h后,根部细胞膜的损伤率比对照均增加了80%,叶片的细胞膜损伤率比对照增加了90%。另外毒素处理能抑制烟草种子胚根的生长,使幼苗萎蔫,与病原菌直接接种表现相同,说明毒素是病原菌侵染烟草导致发病的一个重要因子。

烟叶粗纤维素含量与吸湿性及感官质量的相关性

检测了30种不同地区、部位烤烟烟叶的粗纤维素含量和平衡含水率,并对其进行了感官评吸,进而分析了烟叶粗纤维素含量与平衡含水率、感官质量间的关系。结果表明:粗纤维素含量与平衡含水率间呈显著正相关关系;粗纤维素含量高的烟叶,刺激性和干燥感降低、余味变差、劲头增大、杂气增重,但相关关系均不显著。

DAN荧光法测定原烟团棵期的痕量硒

本文根据文献[1]采用2，3-二氨基萘（DAN）在pH1．5－2．0条件下与样品中四价硒生成4，5-苯并硒脑配合物，经环己烷萃取，利用荧光法对原烟中的痕量硒进行测定。

裂褶菌蛋白粗提液抗植物病毒活性初探

为了研究裂褶菌(Schizophyllum commune)蛋白的生物活性,对裂褶菌蛋白粗提液进行了抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)活性测定。使用硫酸铵沉淀法,从裂褶菌中得到蛋白粗提液,采用喷施法和局部枯斑法,研究其诱导TMV的抗性,体外钝化TMV的效果及其对由CMV侵染引起的辣椒病毒病和由TMV侵染引起的番茄病毒病的控制作用。活性检测结果表明:当蛋白粗提液浓度达到100μg/mL时,诱导烟草抗TMV的侵染枯斑抑制率可达74.11%±3.7%,对TMV的体外钝化作用的枯斑抑制率为70.05%±1.25%,其对由CMV侵染引起的辣椒病毒病的平均防效为66.46%,对由TMV侵染引起的番茄病毒病的平均防效为68.50%。表明裂褶菌蛋白粗提液通过诱导抗病性和体外钝化作用达到了控制TMV和CMV的作用。

根系提取物对烤烟的自毒作用研究

为了明确连作烤烟的自毒作用,研究了烤烟根系提取物对烤烟种子萌发、烟苗干物质积累、烟苗根系生长发育及烟苗光合参数的影响。结果表明,随着根系提取物浓度的增加,烤烟种子发芽率、烟苗根系总根长、总根面积、总根体积、根尖数、气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率逐渐降低;平均根系直径,烟苗地上部干、湿重,地下部干、湿重及总干、湿重,总叶绿素含量,净光合速率均表现为先升高后降低的趋势;气孔限制值逐渐升高。烟草根系提取物对烤烟种子萌发及烟苗生长发育具有明显的抑制作用。

烟草靶斑病菌(Rhizoctoniasolani)粗毒素的生物活性及理化性质

为揭示烟草靶斑病菌毒素的致病机理,进行了烟草靶斑病菌毒素的分离、纯化和生物活性测定方法及理化特性研究。结果表明:经分离纯化获得了烟草靶斑病菌的毒素。该毒素可以损伤离体叶片,抑制种子萌发和胚根的生长,并且可致使幼苗萎蔫,离体叶片针刺法最适宜毒素的生活性测定。烟草靶斑病菌毒素具有热与光稳定性,较耐储藏,是一类极性化合物,活性物属非蛋白类物质。

印楝种子粗提物诱导烟草炭疽病抗性的生理效应

【目的】研究印楝诱抗烟草炭疽病的机理,为烟草炭疽病的生物防治提供理论依据。【方法】测定根施印楝种子粉末对烟草炭疽病的防效,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测印楝种子粉末处理后烟草的NTF6、NtLox、NtSGT1、NtPAL、NtPDF、NPR1、NtRar1和PR1a等8个相关抗病基因的表达变化;对比叶面喷施不同印楝种子提取物(甲醇、乙酸乙酯和石油醚)溶液对烟草抗氧化酶活性的影响,并测定叶面喷施印楝种子甲醇提取物不同分离流分处理的烟叶总酚含量及抗炭疽病效果。【结果】根施印楝种子粉末可使烟草炭疽病的病情指数(26.67%)较对照(74.17%)显著降低(P<0.05,下同)。qRT-PCR检测结果表明,NPR1、NtRar1、NtSGT1和PR1a等4个抗病基因的相对表达量与印楝诱导烟草抗炭疽病相关。印楝种子甲醇提取物对烟草抗氧化酶活性的影响最大,其丙酮流分段在处理后6和96 h诱导烟草的总酚含量较对照明显提高,分别为对照的2.52和3.34倍,且其诱导烟草抗炭疽病的能力最强,病情指数(25.00%)显著低于对照(69.17%)。【结论】印楝种子提取物通过诱导提高PPO和POD抗病相关酶活性及诱导NPR1、NtRar1、NtSGT1和PR1a等抗病相关基因的表达产生抗炭疽病作用,且诱导活性成分主要存在于甲醇提取物的丙酮流分,其可作为烟草炭疽病的诱抗剂推广应用于烟草生产。

植物源抗烟草花叶病毒活性物质的初步筛选

利用半叶枯斑法,测定了13科18种植物蛋白粗提液对烟草花叶病（TMV）的抑制效果。结果表明,不同植物蛋白粗提液对TMV侵染心叶烟的抑制效果存在差异,6种植物蛋白粗提液对TMV的抑制效果达到50%以上,其中菠菜和合欢最高,分别达到了97.44%和96.92%。进一步通过（NH4）2SO4盐析,对菠菜和合欢蛋白粗提液抗病毒活性成分进行了初步分离,并测试（NH4）2SO4盐析的不同蛋白组分对TMV的抑制效果。结果显示,菠菜蛋白粗提液盐析后的两个蛋白组分都表现出很高的抗病毒活性,而合欢蛋白粗提液只在40%~80%饱和度盐析的蛋白组分具有较强的抗病毒活性。

平菇蛋白粗提液诱导烟草对TMV的抗性与细胞中防御酶活性的关系

用200μg/mL的平菇蛋白粗提液处理枯斑三生烟后接种烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV),在不同时间测定了烟草植株叶片中苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyas,PAL)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和过氧化物酶(peroxidase,POD)的活性。结果表明,平菇蛋白粗提液处理枯斑三生烟后,TMV的侵染率下降了70.16%;接种TMV后,平菇蛋白粗提液处理的烟草叶片中的PAL、SOD、CAT和POD活性要明显高于清水对照植株,接种后12 h PAL活性最高,平菇蛋白粗提液处理为清水对照的1.57倍;接种后24 h SOD和POD活性最高,平菇蛋白粗提液处理分别为清水对照的1.55倍和1.51倍;接种后36 h CAT活性最高,平菇蛋白粗提液处理为清水对照的1.6倍。以上研究结果表明,平菇蛋白粗提液诱导烟草抗TMV的活性与烟草叶片内防御酶活性的提高有关。

一株产木质素降解酶真菌在造纸法再造烟叶中的应用

为了降低烟梗的木质素含量、节约造纸法再造烟叶生产过程中的能耗,提高再造烟叶品质,将1株可以产生木质素降解酶的真菌C2进行液体培养,测定木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶的活性变化。将发酵液过滤得到粗酶液,按5%施加量处理烟梗,测定干质量和木质素含量变化,将烟梗打浆并制备造纸法再造烟叶。结果显示,3种木质素降解酶分别在第6,8,16d达到最高活性;粗酶液处理后可以降低烟梗强度,干质量和木质素含量均降低;在造纸法再造烟叶中可以节省10%的打浆时间,产品杂气降低,余味改善。

筛选烟草抗黑胫病细胞突变体的粗毒素浓度的初步研究

烟草黑胫病严重影响烟草的生产,是一类毁灭性真菌病害。近年来,随着无公害烟叶概念的提出,降低农药残留,减少农药使用,提高烟叶品质,成为烟叶生产所追求的目标。因此,防治烟草黑胫病的研究重点应该放在强抗病性烟草品种的选育上。采用细胞突变体筛选与组织培养技术相结合的方法,以烟草黑胫病无菌粗毒素对两个烟草品种(红花大金元、云烟85)叶片外植体进行离体筛选。结果表明,筛选红花大金元细胞突变体的临界浓度为6%,筛选云烟85细胞突变体的临界浓度为7%。

一株烟碱降解菌的选育及其应用研究

[目的]寻求有效降低烟草中烟碱含量的方法。[方法]从延安卷烟厂发酵装置的废水中分离纯化出1株高效降解烟碱的细菌,并利用该菌制成的粗酶液作用于某等级烟叶,考察其是否可以降低烟碱含量,改善烟叶品质。[结果]利用含有烟碱的选择培养基共分离纯化出71株能够分解利用烟碱的细菌,其中W9菌分解能力最强,降解试验表明,该菌在烟碱含量1.4%左右的烟碱水提液里经16 h摇床培养,烟碱可被完全降解。将该菌的粗酶液喷施在烟叶上,经数天室内发酵后,评吸结果表明,刺激性、劲头明显降低,抽吸品质得到明显改善。[结论]研究表明,该菌在降烟碱含量及改善烟叶品质方面具有一定的应用前景。

烤烟粗脂肪提取工艺优化及光谱测定方法研究

为优化索氏提取法测定烤烟中粗脂肪的工艺条件,在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken试验设计,研究称样量、回流时间、烘干时间对粗脂肪提取量的影响,并建立一种快速测量粗脂肪含量的紫外可见吸收光谱方法。结果表明,干燥温度为105℃时,预测最佳的粗脂肪提取条件为:称样量3.08 g,回流时间6 h,烘干时间1.5 h,粗脂肪含量为6.27%。在0.276~2.211 g/L(λ=326 nm)或0.276~2.763 g/L(λ=415 nm)范围内,烟叶粗脂肪溶液的浓度与吸光度有较好的线性关系(R326nm^2=0.9982,R415nm^2=0.9993),检出限分别为0.128和0.093 g/L,定量限分别为0.387和0.281 g/L。利用响应面优化的索氏提取工艺及建立的粗脂肪紫外分光光度测定法,简便省时,且重复性和精密度较好,适合批量烟叶粗脂肪的分析测定。

八个平菇品种对烟草花叶病毒的抑制活性

通过8个平菇品种的菌株抗烟草花叶病毒活性及各菌株生长特性的测定,筛选出黑平菇为最佳菌株,摇瓶培养菌丝生长量为3.98g/100ml;胞内粗多糖含量10.6%;菌球直径平均为0.193cm。该菌株的菌丝体PBS提取液、胞内粗多糖和发酵滤液对烟草花叶病毒的抑制率分别为66.54%、83.39%和54.3%;

蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟草上烟粉虱和烟蚜的杀虫活性

测定了3株蜡蚧轮枝菌Lecanicillium lecanii的代谢粗提物(toxin_(V3450)、toxin_(Vp28)、toxin_(Vl6063))对烟草两种害虫烟粉虱Bemisia tabaci和烟蚜Myzus persicae的杀虫活性。结果表明,3株菌株的代谢粗提物对烟粉虱3龄若虫和烟蚜无翅母蚜均具有较强杀虫活性,3株菌株的代谢粗提物对烟粉虱3龄若虫的LC_(50)分别为0.11%、0.23%和0.18%;对烟蚜的LC_(50)分别为0.14%、0.35%和0.29%。表明V3450菌株的代谢粗提物对烟粉虱3龄若虫和烟蚜的杀虫活性最强,Vp28菌株的代谢粗提物toxin_(Vp28)的杀虫活性次之,Vl6063菌株的代谢粗提物toxin_(Vl6063)杀虫活性最弱。

不同浓度的万寿菊花粗提物对烤烟产量和质量的影响

以烤烟品种云烟116为试验材料,设置5个处理(对照CK施用1 L清水,处理1~处理4分别施用浓度为12.5、25.0、37.5、50.0 g/L的1 L万寿菊花粗提物),研究了不同浓度的万寿菊花粗提物对烤烟产量、质量及根结线虫病发生的影响。结果表明:处理2的烤烟田间农艺性状整体上明显优于其他处理的;其根结线虫病的发病率及病情指数均显著低于其他处理的;土壤化学性质总体上优于其他处理的;处理2的烤烟产量和产值均最高,中上等烟比例和均价仅次于处理1的。因此,施用浓度为25.0 g/L的1 L万寿菊花粗提物的效果最好。