cryIAc基因在转基因玉米中的遗传规律及对抗虫性影响

旨在研究目的基因在转基因植株和后代植株(株系)中的遗传规律及其对转化植株抗虫性的影响。以花粉介导法将cryIAc基因导入玉米自交系‘郑58’和‘昌7-2’,对转化植株及其后代株系进行分子检测和田间抗虫鉴定。结果表明:(1)转化‘郑58’和‘昌7-2’,T1代分别获得转基因植株24和41个,转化率高达20%以上;(2)转基因T2代、杂交F2代及回交1代(B1)的分子检测结果证明,外源基因的遗传符合孟德尔的3∶1、3∶1和1∶1的遗传分离规律;(3)连续多带的分子检测结果还表明,外源基因可稳定遗传并有效表达,表达水平在9.8-14.3 ng/g叶片鲜重之间;(4)抗虫鉴定结果显示,在阴性对照全部感虫情形下,转基因纯合株系仍表现出较高抗虫活性;(5)此外,回交试验结果还证明外源基因通过杂交可传递给下一代;(6)最终经筛选得到SZ003、SZ005、SC001、SC004和SC007五个高抗虫转基因株系。结果表明,花粉介导法是一种高效、快捷的转化方法,cryIAc基因导入玉米自交系植株后赋予和提高了转基因植株的抗虫活性。

PEG介导BT基因转化大豆原生质体获转基因植株

通过ＰＥＧ法将Ｂ．Ｔ（ＢａｃｉｌａｓｔｈａｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓＣｒｙＩＡｃ）毒蛋白基因导入到大豆主栽品种黑农３５，黑农３７，合丰２５和合丰３５的原生质体中，经３０ｍｌ／Ｌ潮霉素筛选，选择有抗性的愈伤组织进行分化，获得了三棵再生植株，移栽后全部成活，对移栽后植株的总ＤＮＡ进行ＰＣＲ分析，均显阳性。对ＰＣＲ阳性植株进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析，证明Ｂ．Ｔ毒蛋白基因已整合到大豆细胞基因组中。

果蔗‘拔地拉’植株再生与农杆菌介导的遗传转化研究

以果蔗(Saccharum officenarum L.)‘拔地拉’的幼嫩叶鞘为材料,以MS+2,4-D2.0mgL-1为诱导培养基,MS+2,4-D2.0mgL-1+6-BA1.0mgL-1为分化培养基,MS+IAA2.0mgL-1为生根培养基,建立了高效的果蔗再生体系。利用农杆菌介导法将含有cryIA基因和CPTI基因的植物表达载体导入果蔗愈伤组织,经潮霉素筛选、PCR以及Southern杂交分析表明,cryIAc基因已整合进果蔗基因组中。