Cry1Ac和sck双价抗虫基因遗传转化甘蔗的研究

将双价抗虫基因,即修饰的苏云金芽孢杆菌毒蛋白基因(Cry1Ac)和修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(sck)导入甘蔗优良品种ROC22,获得潮霉素抗性转化植株95株,35株能检测到外源抗虫基因,获得的13株RT-PCR双基因均呈阳性的甘蔗植株,斑点杂交检测有4株呈阳性。结果表明:外源抗虫基因已导入甘蔗基因组中。

CryIA(c)基因植物表达载体的构建及转基因甘蔗的获得

构建了玉米UBI启动子驱动Bt CryIA(c)基因的高效植物表达载体pUBTC,通过农杆菌介导法导入甘蔗愈伤组织,经过除草剂PPT 3次连续筛选,获得89株抗性植株,经过PCR扩增检测,得到71株阳性植株,对其中7株进行RT-PCR检测,证明外源基因已经成功的整合到甘蔗基因组中,并得到有效的表达。

抗虫基因在转基因植株中聚合的初步研究

以质粒 pBUSCK HPT ,pCUSBK HPT和pGNA HPT作抗虫基因供体 ,优良籼型三系恢复系SH5 2 7和广亲合系W 2 0 0 8为受体 ,采用基因枪转化法 ,获得了转修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因 (sck)、修饰的Bt毒蛋白基因 (sbk)和雪花莲凝集素基因 (gna)的植株 .通过人工杂交 ,将外源基因聚合 .分子证据显示 ,作者获得了抗性基因聚合的材料 .蛋白活性测定表明 ,聚合基因的表达因载体结构相似而受到影响 ,但抗虫性却得到提高 .作者还讨论了聚合转基因在水稻育种中的作用和及其相关问题 .

基因枪介导法获得转BtCry1Ac基因抗虫玉米植株的研究

利用基因枪介导法将含有Cry1Ac基因的质粒转入玉米愈伤组织,获得转Bt基因玉米植株,对所获得的转基因植株进行PCR分析和金标免疫试纸鉴定。结果表明,部分转化植株呈阳性,说明目的基因已经整合到玉米基因组中。将转基因植株自交获得T1代种子,对T1代植株进行田间抗虫鉴定,结果表明,与对照相比转基因玉米植株的抗虫活性明显强于非转基因植株。

Expression of two insect-resistant genes cryIA (b&c)/GNA in transgenic tobacco plants results in added protection against both cotton bollworm and aphids

The synthesized Bacillus thuringiensis insecticidal protein gene crylA(b&c) and the synthesized gene GNA, (the mannose specific lectin from snowdrop ( Galanthus nivalis)), tumefaciens have been inserted into plant expression vector pGW4BAI. Leave stripes of Nico-tiana tabacum var. K326 have been transformed with Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 harboring the plant expression vector. 28 kanamycin resistant tobacco plants

转基因工程稻大米对小鼠的急性毒性与致突变研究

以转cry1Ac/sck双价抗虫基因工程稻MSA4、KF6-304、21S/MSB与II-32A/MSB大米为材料,进行了小鼠急性毒性试验、精子畸形试验与骨髓细胞微核试验研究,检测转基因稻大米对小鼠表观体症行为、脏器系数、血常规、精子畸形与微核率等的影响,以进一步评价转基因工程稻大米的食品安全性.小鼠急性毒性试验结果显示:转基因工程稻MSA4、KF6-304、21S/MSB与I-I-32A/MSB大米各剂量组灌喂小鼠,小鼠的行为、姿势、呼吸、毛色均正常;解剖观察其肝、脾、肾、心脏、胃、肠、生殖腺等主要脏器的外形、颜色、大小比例等无异常;血常规分析也显示受试鼠与对照材料组小鼠没有显著差异.小鼠精子畸形试验与骨髓细胞微核试验结果均显示转基因工程稻没有明显诱发小鼠精子畸变与骨髓细胞产生微核.其结果是:转基因工程稻MSA4、KF6-304、21S/MSB与II-32A/MSB大米未引起小鼠明显的急性毒性反应,对小鼠无明显的致畸与致突变作用.

转基因工程抗虫杂交稻大米的食品安全性评价

为评价转基因工程抗虫杂交稻大米的食品安全性,以转crylAc/sck双价基因抗虫杂交稻II-32A/MSB,KF6-304大米为材料,进行了大鼠30d喂养试验,检测转基因杂交稻大米对大鼠表观体症、脏器系数、血常规与血生化指标值的影响.结果显示:转基因抗虫杂交稻II-32A/MSB,KF6-304大米各剂量组喂养大鼠,大鼠的行为、呼吸、毛色均正常.以II-32A/MSB饲喂大鼠,除雌鼠低剂量组的胃体比、血清总蛋白与中剂量组的球蛋白明显高于对照组,雌鼠低剂量组的萄葡糖与中剂量组的白球比例、雄鼠低剂量组与高剂量组的嗜中性粒细胞百分比显著低于对照组外,其余重要检测指标值均与对照无显著差异.以KF6-304饲喂大鼠,除低剂量组雌鼠的甘油三酯与中剂量组雄鼠的萄葡糖显著低于对照组,其余重要检测指标值则与对照均无显著差异.以上结果提示转基因工程抗虫杂交稻II-32A/MSB,KF6-304大米的30d喂养试验对大鼠表观体症及生理生化无明显不良影响.表5,参12.