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外泌体及预处理方式对牙髓再生的作用 被引量:2
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作者 杨润泽 王玮 +2 位作者 陈三 周学东 吴家媛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第13期2105-2113,共9页
背景:现有研究已经证实外泌体可有效促进牙髓再生,而经预处理来源的外泌体其生物学功能和特性会发生显著改变,对细胞的增殖、迁移和成牙分化产生不同的影响。目的:探讨外泌体及其预处理方式在牙髓再生领域的应用现状,归纳和总结影响外... 背景:现有研究已经证实外泌体可有效促进牙髓再生,而经预处理来源的外泌体其生物学功能和特性会发生显著改变,对细胞的增殖、迁移和成牙分化产生不同的影响。目的:探讨外泌体及其预处理方式在牙髓再生领域的应用现状,归纳和总结影响外泌体发挥作用的预处理方式,并阐述外泌体及其预处理方式对牙髓再生的作用。方法:检索万方、中国知网、PubMed和Web of Science数据库中2006-2022年发表的相关文献,以“外泌体,牙髓再生,预处理方式”等为中文检索词,以“Exosomes,Pulp regeneration,Preconditioning method”等为英文检索词进行检索,共纳入78篇文献进行综述分析。结果与结论:①外泌体具有良好的生物相容性、低免疫原性和无细胞毒性等优势,可以通过促进干细胞成牙、成神经和成血管化进而诱导牙髓组织的新生。②经预处理衍生的外泌体可以增强对组织的修复和再生能力,并对再生牙髓的质量有显著影响。③目前应用在牙髓再生领域中的预处理方式包括炎症刺激、低氧诱导、条件培养基和三维培养,其分泌的外泌体均能有效改善再生牙髓的质量,但是不同的预处理方式对牙髓再生的具体效果和机制在未来尚需探索。 展开更多
关键词 外泌体 牙髓再生 预处理方式 炎性刺激 脂多糖 低氧 条件培养基 三维培养 成牙分化 血管再生 神经再生
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陕北白绒山羊卵巢颗粒细胞分离及培养条件的优化
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作者 刘娇容 魏宇新 +4 位作者 李艳艳 宋晓越 刘锦旺 朱海鲸 屈雷 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第18期45-50,131,132,共8页
为了解析颗粒细胞的生物学特性及其在卵巢排卵、母羊高产中的生物学作用,试验以陕北白绒山羊卵巢为研究对象,比较了切剖法和注射器抽吸法分离卵巢颗粒细胞,检测细胞活率;分别用DMEM、DMEM/F12和MEM培养基加入10%FBS、β巯基乙醇和1%双... 为了解析颗粒细胞的生物学特性及其在卵巢排卵、母羊高产中的生物学作用,试验以陕北白绒山羊卵巢为研究对象,比较了切剖法和注射器抽吸法分离卵巢颗粒细胞,检测细胞活率;分别用DMEM、DMEM/F12和MEM培养基加入10%FBS、β巯基乙醇和1%双抗培养颗粒细胞(即DMEM组、DMEM/F12组和MEM组),用CCK-8法检测培养24 h、48 h的细胞活力,EdU掺入法检测细胞增殖,RT-PCR法检测增殖相关基因(PCNA、CyclinD1、CDK2)及凋亡相关基因(BAX、BCL-2、Caspase3)的表达。结果表明:注射器抽吸法分离卵巢颗粒细胞所得的细胞活率高于切剖法,切剖法可以获得更多的细胞数量;MEM组的细胞活力极显著高于DMEM/F12组和DMEM组(P<0.01),DMEM/F12组细胞活力在24 h、48 h时高于DMEM组但差异不显著(P>0.05)。MEM组与DMEM/F12组EdU染色阳性细胞数差异不显著(P>0.05),MEM组与DMEM/F12组均显著高于DMEM组(P<0.05);MEM组PCNA、CyclinD1基因的表达量高于其他两组,但差异不显著(P>0.05),CDK2基因的表达量极显著高于其他两组(P<0.01),DMEM/F12组和DMEM组的PCNA、CyclinD1和CDK2基因的表达量差异不显著(P>0.05)。MEM组Caspase3的表达量低于其他两组但差异不显著(P>0.05),BCL-2/BAX的相对表达量极显著高于DMEM/F12组和DMEM组(P<0.01)。说明采用抽吸法分离卵巢颗粒细胞并辅以MEM培养基培养,可以实现对陕北白绒山羊卵巢颗粒细胞的有效体外培养。 展开更多
关键词 陕北白绒山羊 卵巢 颗粒细胞 分离方法 培养液 细胞增殖
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柴达木盆地昆特依盐湖可培养嗜盐细菌多样性研究
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作者 马想蓉 马欣 +3 位作者 陈胤勋 龙启福 王嵘 邢江娃 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期285-298,共14页
【目的】探究不同富集时间、培养盐度、稀释梯度、培养基等对氯化物型昆特依高盐盐湖可培养嗜盐细菌多样性的影响,确定嗜盐细菌的最佳分离培养条件,挖掘更多的环境嗜盐细菌资源。【方法】从昆特依盐湖中采集水泥混合样本,选取7种培养基... 【目的】探究不同富集时间、培养盐度、稀释梯度、培养基等对氯化物型昆特依高盐盐湖可培养嗜盐细菌多样性的影响,确定嗜盐细菌的最佳分离培养条件,挖掘更多的环境嗜盐细菌资源。【方法】从昆特依盐湖中采集水泥混合样本,选取7种培养基和10%、18% NaCl两个盐度,采用富集培养法、平板稀释涂布法和平板分区划线法分离嗜盐菌;通过16S rRNA基因测序与BLAST序列比对确定菌株系统分类学地位。同时采用免培养Illumina MiSeq高通量测序技术分析昆特依盐湖细菌群落结构多样性特征。【结果】免培养昆特依盐湖样本中共鉴定到细菌39门64纲101目219科703属,其中假单胞菌门(Pseudomonadota)、厚壁菌门(Bacillota)、拟杆菌门(Bacteroidota)和放线菌门(Actinomycetota)为主要的优势菌门。根据菌落的大小、形态、颜色、光泽度、透明度、质地、隆起状态和边缘特征等,共分离出436株嗜盐菌,隶属于3门3纲6目9科28属77种,其中16株可能为潜在新种。3门为厚壁菌门(Bacillota)、假单胞菌门(Pseudomonadota)和放线菌门(Actinomycetota),且均为免培养测序结果中的优势菌门。在属水平上,芽孢杆菌属(Bacillus)、盐单胞菌属(Halomonas)、喜盐芽孢杆菌属(Halobacillus)、枝芽孢菌属(Virgibacillus)和卤水杆菌属(Salicola)为优势菌属。肿块芽孢杆菌属(Tuberibacillus)、越南蔷薇菌属(Rossellomorea)和谷氨酸杆菌属(Glutamicibacter)是首次从盐湖中分离得到。18% NaCl分离得到的菌株数量明显少于10% NaCl,且多样性较低,芽孢乳杆菌科(Sporolactobacillaceae)是该条件下分出的特有菌科。7种培养基中,1/2 RCA培养基分离效果最好。最佳富集培养时间为0、7和60 d,最佳样品稀释梯度为10^(-2)和10^(-3)。【结论】从昆特依盐湖中共分离出嗜盐细菌3门3纲6目9科28属77种。应用多种培养基,设置不同盐度、富集培养时间和稀释梯度等可显著提升可培养嗜盐菌的多样性。 展开更多
关键词 嗜盐细菌 生物多样性 氯化物型盐湖 分离培养基 富集培养 梯度稀释 高通量测序
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15种医院口腔抑菌制剂微生物限度检查方法的建立
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作者 赵慧雯 冯斌 《中国药业》 CAS 2024年第8期75-79,共5页
目的建立15种医院口腔抑菌制剂的微生物限度检查方法。方法以醋酸氯己定口崩片、醋酸氯己定洗剂、复方替硝唑溶液、碘甘油、甲醛甲酚涂剂、硼酸甘油涂剂、人工唾液、脱敏糊剂、干髓糊剂、锌麝酚醛糊剂、牙周塞糊剂、甲硝唑膜、复方克林... 目的建立15种医院口腔抑菌制剂的微生物限度检查方法。方法以醋酸氯己定口崩片、醋酸氯己定洗剂、复方替硝唑溶液、碘甘油、甲醛甲酚涂剂、硼酸甘油涂剂、人工唾液、脱敏糊剂、干髓糊剂、锌麝酚醛糊剂、牙周塞糊剂、甲硝唑膜、复方克林霉素膜、多聚甲醛新失活剂、多聚甲醛牙髓失活剂为样品(制剂1-15),按2020年版《中国药典(四部)》通则1105,1106,1107项下方法,采用平皿法、薄膜过滤法和培养基稀释法,对5种常见菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉)进行回收试验,并进行控制菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌)检查方法适用性试验。结果制剂1-5、9-11、14-15需氧菌总数检查均采用薄膜过滤法,其余制剂均采用平皿法;制剂1-3、6-8、12-13霉菌和酵母菌检查均采用平皿法,其余制剂均采用薄膜过滤法,试验菌回收比均在0.5~2.0范围内;控制菌检查,制剂1-3、5、9-11、14-15均采用薄膜过滤法,其余制剂均采用培养基稀释法,试验组相应阳性菌均能正常检出。结论所建立的方法适用于此15种医院口腔抑菌制剂的微生物限度检查。 展开更多
关键词 微生物限度检查 口腔抑菌制剂 方法适用性试验 平皿法 薄膜过滤法 培养基稀释法
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响应面法优化生防暹罗芽孢杆菌JZ1-4-10的发酵参数
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作者 蒙耀 陈红雨 +2 位作者 吴慧芳 魏琳 沈硕 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1671-1681,共11页
【目的】优化暹罗芽孢杆菌JZ1-4-10的发酵培养基组分配比和发酵条件,以提高其对马铃薯干腐病菌的抑菌活性,为后续相关生防制剂的工业开发及农业应用打下理论基础。【方法】通过单因素试验筛选菌株JZ1-4-10生长的最佳碳源、氮源、无机盐... 【目的】优化暹罗芽孢杆菌JZ1-4-10的发酵培养基组分配比和发酵条件,以提高其对马铃薯干腐病菌的抑菌活性,为后续相关生防制剂的工业开发及农业应用打下理论基础。【方法】通过单因素试验筛选菌株JZ1-4-10生长的最佳碳源、氮源、无机盐及适宜浓度,通过响应面法获得菌株JZ1-4-10的最佳发酵培养基组分配比,在此基础上优化菌株JZ1-4-10的发酵温度、pH、接种量、装液量和摇床转速等发酵条件。【结果】菌株JZ1-4-10的最佳碳源、氮源和无机盐分别为玉米粉、大豆蛋白胨和KCl。以玉米粉(A)、大豆蛋白胨(B)和KCl(C)为因变量,菌株JZ1-4-10对马铃薯干腐病病原菌茄病镰刀菌的抑菌活性为响应值,拟合得到菌株JZ1-4-10抑菌率(y)的二次多项回归方程为y=64.02+0.4937A+2.31B-2.19C-1.17AB+138AC-1.81BC-4.73A2-4.58B2-3.86C2,其中,玉米粉、大豆蛋白胨和KCl间的交互作用对菌株JZ1-4-10抑菌活性的影响均达显著水平(P<0.05),尤其玉米粉与KCl及大豆蛋白胨与KCl的交互作用对抑菌活性的影响达极显著水平(P<0.01)。响应面分析优化得到菌株JZ1-4-10的最佳发酵培养基组分配方:玉米粉0.94%、大豆蛋白胨1.23%、KCl 0.72%,且该条件下菌株JZ1-4-10的抑菌活性的实际值为65.20%,与试验预测的64.63%非常接近。经单因素优化后菌株JZ1-4-10的最佳发酵条件为装液量90 mL/250 mL、接种量1.5%、摇床转速160 r/min、培养温度30℃、pH 7。【结论】优化后的培养基提高了菌株JZ1-4-10的产孢量和抑菌活性,优化的发酵方案可用于快速、大批量培养菌株JZ1-4-10菌悬液。 展开更多
关键词 暹罗芽孢杆菌 培养基 培养条件 响应面法 发酵优化
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复方银唑散的含量测定及微生物限度检查方法学验证
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作者 吴坤林 沈秋莲 +1 位作者 黄燕鹏 杨八十 《安徽医药》 CAS 2024年第8期1532-1536,共5页
目的建立反向高效液相色谱法同时测定复方银唑散中磺胺嘧啶银和酮康唑的含量并探讨其微生物限度检查方法。方法色谱柱为Agilent C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.07%三乙胺(A,冰醋酸调节pH至5.07)-甲醇(B),梯度洗脱:0~6 min,A... 目的建立反向高效液相色谱法同时测定复方银唑散中磺胺嘧啶银和酮康唑的含量并探讨其微生物限度检查方法。方法色谱柱为Agilent C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.07%三乙胺(A,冰醋酸调节pH至5.07)-甲醇(B),梯度洗脱:0~6 min,A80%;6~8 min,A80%~22%;8~21 min,A保持22%;21~22 min,A22%~80%,流速1.0 mL/min,检测波长:240 nm,柱温:30℃。采用培养基稀释法作为需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数计数方法并按《中国药典》2020年版四部通则微生物限度检查法对控制菌检查法进行验证。结果磺胺嘧啶银在0.02964~0.06915 g/L浓度范围下与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),酮康唑在0.03054~0.07126 g/L浓度范围下与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),磺胺嘧啶银和酮康唑的平均回收率分别为101.5%(n=6,RSD=0.33%)和98.8%(n=6,RSD=0.65%)。采用培养基稀释法,各试验菌的回收率均在0.5~2.0。结论所建立的高效液相色谱法定量准确、专属性良好,可用于同时测定复方银唑散中磺胺嘧啶银和酮康唑的含量。采用培养基稀释法对复方银唑散进行微生物限度检查可行。 展开更多
关键词 磺胺嘧啶银 酮康唑 复方药 质量控制 高效液相色谱法 含量测定 微生物限度 培养基稀释法
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Methodology Validation of Microbial Limit Test of Bupi Qiangli Ointment
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作者 李江萍 杨亮 蒋玲 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2017年第2期365-367,共3页
[Objective] This study was conducted to establish a microbial limit test method for Bupi Qiangli Ointment. [Method] The conventional method and medium dilution method were used for bacterial, mold and yeast counting i... [Objective] This study was conducted to establish a microbial limit test method for Bupi Qiangli Ointment. [Method] The conventional method and medium dilution method were used for bacterial, mold and yeast counting in sample recovery test. [Result] The medium dilution method (1:10 test solution, 0.5 ml/plate) could effectively eliminate the inhibition effect of the Bupi Qiangli Ointment, and the recovery of Staphylococcus aureus was greater than 70% in the 3 batches of samples; and the conventional method exhibited the recoveries of E. coil, Bacillus subtilis, Candida albicans and Aspergillus greater than 70% in the 3 batches of samples. [Conclusion] Due to Bupi Qiangli Ointment has strongly antibacterial effect on Staphylococcus au- reus, the medium dilution method was used for bacterial counting, and the conventional method was used for mold and yeast counting; and the conventional method was used for controlled bacterium examination of E. coll. 展开更多
关键词 Bupi Qiangli Ointment Microbial limit tests method validation medium dilution method
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双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法
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作者 季学猛 王硕 《实验室科学》 2024年第4期28-31,共4页
双歧杆菌在维护宿主健康方面具有重要作用,因此对其高密度培养条件的探索具有重要意义。目前,双歧杆菌的高密度培养主要受到培养基组分和培养条件优化的影响。报道了一种用于双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法。该方法使用补料... 双歧杆菌在维护宿主健康方面具有重要作用,因此对其高密度培养条件的探索具有重要意义。目前,双歧杆菌的高密度培养主要受到培养基组分和培养条件优化的影响。报道了一种用于双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法。该方法使用补料与碱泵耦合的方法进行补料,通过控制发酵培养基的pH值来调节补料培养基的补入量。此外,还进行了补料培养基的优化实验,通过调整氢氧化钠和葡萄糖浓度的比例,比较了不同补料培养基的发酵性能。实验结果表明该补料培养基及补料方法适用于两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双歧杆菌等多种双歧杆菌,而且能够达到较高的活菌密度。提出的补料培养基及补料方法可为双歧杆菌的高密度培养提供有效的解决方案。 展开更多
关键词 双歧杆菌 高密度培养 补料培养基 补料方法 碱泵耦合
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微生物降解法在氟化工废水处理中的应用研究
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作者 杨坤 《有机氟工业》 CAS 2024年第3期10-13,共4页
氟化工废水中的有机氟化物浓度高且难分解,因此处理难度较高。现行处理方法在实际应用中氟降解率较低,且处理后废水纯净度也较低,无法达到预期的处理效果。研究了微生物降解法在氟化工废水处理中的应用,首先采用加压蒸气灭菌法对降解菌... 氟化工废水中的有机氟化物浓度高且难分解,因此处理难度较高。现行处理方法在实际应用中氟降解率较低,且处理后废水纯净度也较低,无法达到预期的处理效果。研究了微生物降解法在氟化工废水处理中的应用,首先采用加压蒸气灭菌法对降解菌配制环境进行消毒灭菌,然后配制琼脂基础培养基并利用培养基培育降解菌,最后利用降解菌液对氟化工废水进行降解处理,从而实现基于微生物降解法的氟化工废水处理。试验结果证明,氟降解率达到96%以上,废水纯净度在0.8以上,因此,微生物降解法在氟化工废水处理中具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 微生物降解法 氟化工废水 处理 琼脂基础培养基 降解菌
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滇中高原石漠化区典型苔藓植物组织培养技术研究
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作者 陈秋帆 范永斌 +1 位作者 陈德令 胡朝仲 《现代农业科技》 2024年第21期76-80,共5页
为探索苔藓植物组织培养技术,以滇中高原石漠化区优势苔藓大灰藓(Calohypnum plumiforme)、小石藓(Weissia controversa)和蕊形真藓(Bryum coronatum)为研究对象,研究培养基类型、消毒方式、不同激素浓度等对苔藓植物生长的影响。结果表... 为探索苔藓植物组织培养技术,以滇中高原石漠化区优势苔藓大灰藓(Calohypnum plumiforme)、小石藓(Weissia controversa)和蕊形真藓(Bryum coronatum)为研究对象,研究培养基类型、消毒方式、不同激素浓度等对苔藓植物生长的影响。结果表明,短期繁殖苔藓可将消毒的原位土壤淋溶液作为培养基,且外植体在接种前不消毒,向培养基中添加6-BA 0~0.8 mg/L,但不同苔藓植物最适培养条件有差异。大灰藓较适宜的培养条件:以原位土壤淋溶液为培养基,不消毒外植体,添加6-BA 0.5 mg/L。小石藓较适宜的培养条件:以原位土壤淋溶液为培养基,不消毒外植体,添加6-BA 0.5~0.8 mg/L(或不添加激素)。蕊形真藓较适宜的培养条件:以KNOP为培养基,不消毒外植体,添加6-BA 0.2 mg/L。 展开更多
关键词 苔藓植物 培养基 消毒方式 激素 生长状况 组织培养 石漠化区 滇中高原
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不同来源条件培养基对人牙髓干细胞增殖的影响
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作者 杨燕 王静娴 +4 位作者 张荣红 李晨 范安然 崔冬冰 吴淑梅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第1期49-53,共5页
背景:利用条件培养基与人牙髓干细胞共培养,初步探索可以快速促进人牙髓干细胞增殖的方法,为今后细胞治疗、扩增高质量种子细胞提供研究基础。目的:初步探究不同来源条件培养基对人牙髓干细胞增殖的影响。方法:体外分离培养人牙髓干细胞... 背景:利用条件培养基与人牙髓干细胞共培养,初步探索可以快速促进人牙髓干细胞增殖的方法,为今后细胞治疗、扩增高质量种子细胞提供研究基础。目的:初步探究不同来源条件培养基对人牙髓干细胞增殖的影响。方法:体外分离培养人牙髓干细胞,并用流式细胞术鉴定。然后将胎牛血清超高速低温离心产物、骨折患者尿液超高速低温离心产物、骨髓来源树突状细胞体外培养上清液、人皮肤成纤维细胞培养上清液与低糖DMEM培养液配置成条件培养基后,再分别与人牙髓干细胞共培养,使用细胞无标记培养观察装置(BioStation-T)连续拍摄各组细胞生长72 h的照片、使用实时无标记细胞分析仪(RTCA)动态监测150 h,比较各组细胞的标准化细胞指数值的差异。结果与结论:①人牙髓干细胞为典型的间充质干细胞形态,表达间充质干细胞表面标志物CD90和CD105,不表达CD34和CD45;②细胞无标记培养观察装置动态监测时,发现胎牛血清超高速低温离心组的颗粒物质被吸收时间要显著早于其他实验组和空白对照组;③在实时无标记细胞分析仪检测时,与空白对照组相比,胎牛血清超高速低温离心组、骨髓来源树突状细胞体外培养上清液组、人皮肤成纤维细胞培养上清液组的标准化细胞指数值均显著升高(P<0.001),骨折患者尿液超高速低温离心组的标准化细胞指数值显著降低(P<0.001);④结果表明,胎牛血清超高速低温离心产物、骨髓来源树突状细胞体外培养上清液、人皮肤成纤维细胞培养上清液所配置的条件培养基能促进人牙髓干细胞增殖,其中胎牛血清超高速低温离心产物所配置的条件培养基对细胞还有一定保护作用。 展开更多
关键词 人牙髓干细胞 超高速低温离心 条件培养基 细胞增殖 标准化细胞指数 组织块培养法
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基于高通量测序的连续传代富集土壤可培养菌菌群变化规律研究 被引量:3
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作者 文昌丽 曹伟伟 +3 位作者 唐雪莲 赵雯淑 贾仲君 孟磊 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期123-135,共13页
利用高通量测序技术研究连续传代富集过程中,固体和液体牛肉膏蛋白胨可培养土壤细菌多样性的变化规律,量化可培养菌占水稻土本底微生物群落的比例。通过设置常规营养和1/10低营养处理,包括常规牛肉膏蛋白胨固体培养(NA)、液体培养(NB),... 利用高通量测序技术研究连续传代富集过程中,固体和液体牛肉膏蛋白胨可培养土壤细菌多样性的变化规律,量化可培养菌占水稻土本底微生物群落的比例。通过设置常规营养和1/10低营养处理,包括常规牛肉膏蛋白胨固体培养(NA)、液体培养(NB),低营养固体培养(1/10 NA)和低营养液体培养(1/10 NB),开展连续传代富集10次,获得第1、3、5、7、10代细菌培养物并提取DNA,同时直接提取水稻土中所有微生物基因组DNA并对16S rRNA基因进行高通量测序,分析水稻土可培养菌群落变化规律及其占本底土著微生物的比例。结果表明,水稻土本底微生物多样性Chao指数为4806,在连续传代培养10次过程中,降幅最高为98.9%,其中,固体和液体可培养微生物Chao指数以第1代为最低,分别为49.7和142.0,低营养1/10固体和液体培养下,Chao指数分别为75.1和531.0。高通量测序16S rRNA基因后发现水稻土本底土著微生物共713属,连续10次传代富集培养过程中,固体和液体常规培养基中分别检测到52属和600属,低营养1/10固体和液体培养下,分别为62属和597属,可培养菌占比最高分别为8.7%和83.7%。连续第1、3、5、7和10次传代培养过程中,固体培养基每代独有微生物属分别为7、2、3、4和3属,液体培养基独有属则分别为5、1、102、44和24属,低营养1/10培养也得到了类似结果。假单胞菌属(Pseudomonas)是水稻土连续10次传代过程中绝对的优势类群,特别在固体培养基中相对丰度变幅范围为97.70%~99.47%,与水稻土本底土壤中相对丰度相比,增幅最高为74倍。低营养1/10固体条件下,随着传代次数的增加,杆菌属(Bacillus)和代尔夫特菌属(Delftia)成为优势类群,在第10代的相对丰度最高分别为18.07%和13.82%。液体连续传代10次过程中,假单胞菌属也是绝对优势类群,但与固体可培养菌相比略下降为45.48%~55.99%,梭菌属(Clostridium)则是第2大优势类群,其相对丰度范围为23.58%~42.40%,而赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)则保持相对稳定的增长趋势,其相对丰度范围为1.46%~6.74%。相反,低营养1/10液体培养下,梭菌属和赖氨酸芽孢杆菌属随着培养代数增加而急剧降低,假单胞菌属则成为绝对优势菌,而类芽孢杆菌属(Paenibacillus)则呈现随着传代次数增加而增加的趋势。上述结果表明,水稻土本底微生物多样性最多达可培养菌的96.7倍,连续传代富集培养过程中,水稻土可培养微生物Chao指数先增加后降低,固体和液体培养分别获得74和662属,可培养菌占水稻土所有微生物比例分别为10.4%和92.8%。在固体和液体传代培养过程中,假单胞菌属均占据绝对优势地位,液体可培养微生物多样性明显高于固体。低营养1/10固体和液体培养条件下,可培养微生物类群显著增加,第1代出现的部分微生物类群逐渐被某些优势菌替代,表明连续传代富集培养过程中,在不同代际均富集了生理代谢特征具有明显差异的类群,连续传代富集并不会导致种群结构同质化和单一化。 展开更多
关键词 微生物可培养法 连续传代 固液体培养基 氮素营养 高通量测序
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中温大曲产淀粉酶菌株的筛选鉴定及培养条件优化 被引量:5
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作者 胡晓龙 冯大鸿 +6 位作者 田瑞杰 王永亮 曹满堂 魏涛 韩素娜 沈祥坤 何培新 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第1期78-85,共8页
为获得高产淀粉酶菌株,丰富淀粉酶生产菌株资源,该研究以中温大曲为样品,利用淀粉水解圈法初筛、摇瓶发酵复筛得到高产淀粉酶菌株,结合菌落形态观察、革兰氏染色和16S rRNA同源序列分析对其进行菌种鉴定,通过单因素试验、Plackett-Burma... 为获得高产淀粉酶菌株,丰富淀粉酶生产菌株资源,该研究以中温大曲为样品,利用淀粉水解圈法初筛、摇瓶发酵复筛得到高产淀粉酶菌株,结合菌落形态观察、革兰氏染色和16S rRNA同源序列分析对其进行菌种鉴定,通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验确定其产淀粉酶的最佳培养条件。结果表明,共分离筛选得到6株产淀粉酶菌株,其中一株产淀粉酶活最高的菌株(编号为DQ47)被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其最佳培养条件为:可溶性淀粉60 g/L,酵母粉37 g/L,发酵温度39℃,装液量85 mL/250 mL,转速175 r/min,初始pH值6,接种量3%。在此优化条件下,淀粉酶活力为8158.23 U/mL,是优化前的14.75倍。 展开更多
关键词 中温大曲 淀粉酶 枯草芽孢杆菌 培养条件优化 响应面法
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不同厂家小儿咳喘灵颗粒微生物限度检查与分析 被引量:2
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作者 刘博 任仲丽 李瑞英 《中国药品标准》 CAS 2023年第1期32-38,共7页
目的:根据山东省药品监督管理局药品质量风险监测的方案,对16家生产小儿咳喘灵颗粒的厂家抽取48批次进行微生物限度检查,为进一步提升该药品的质量提供参考。方法:按照《中国药典》2020年版四部1105、1106,分别采用常规法、增加稀释液... 目的:根据山东省药品监督管理局药品质量风险监测的方案,对16家生产小儿咳喘灵颗粒的厂家抽取48批次进行微生物限度检查,为进一步提升该药品的质量提供参考。方法:按照《中国药典》2020年版四部1105、1106,分别采用常规法、增加稀释液或培养基体积进行微生物方法适用性试验及微生物限度检查。结果:16个厂家中8个厂家的需氧菌总数采用常规法,5个厂家的需氧菌总数采用增加稀释液法,其余3个厂家的需氧菌总数采用增加培养基体积法;霉菌和酵母菌总数、大肠埃希菌均可采用常规法进行检查。结论:不同厂家生产的小儿咳喘灵颗粒质量存在一定的差异,在进行微生物检查时需先进行方法适用性试验,用适合本产品的方法进行微生物限度检查,以保证用药安全。 展开更多
关键词 小儿咳喘灵颗粒 常规法 增加稀释液法 增加培养基体积法 适用性试验 结果分析
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草鱼肌纤维原代培养的适宜培养基筛选
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作者 张浩 龙鲜梅 +2 位作者 陈旺旺 胡广文 谭青松 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期85-92,共8页
原代培养的细胞离体时间短,生物学性状和体内细胞相似,为研究生物体的正常生理学和生物化学性质、化合物对生物体的作用等提供了模型系统。探讨不同培养基对草鱼肌纤维的培养效果,筛选出适合草鱼肌纤维原代培养的培养基,可为后期草鱼肌... 原代培养的细胞离体时间短,生物学性状和体内细胞相似,为研究生物体的正常生理学和生物化学性质、化合物对生物体的作用等提供了模型系统。探讨不同培养基对草鱼肌纤维的培养效果,筛选出适合草鱼肌纤维原代培养的培养基,可为后期草鱼肌纤维原代培养研究提供参考。分别选用DMEM、M199、L-15三种培养基采用组织块法培养草鱼肌纤维,在倒置显微镜下观察不同培养基对草鱼肌纤维生长状态和细胞形态、细胞迁出时间和细胞达到首次传代时间的影响;采用细胞计数法计算不同培养基对细胞增殖情况以及细胞贴壁率的影响;用MTT比色法测定不同培养基对细胞活力的影响。与DMEM和L-15相比,M199培养基培养的草鱼肌纤维从组织块中开始迁出时间短(P<0.05),细胞贴壁率高,2 h细胞贴壁率高达(44.60±11.46)%(P<0.05),而DMEM、L-15培养基培养的细胞2 h贴壁率分别为(33.25±8.35)%、(22.83±0.70)%(P<0.05);同时M199组的细胞增殖速度快,进入对数生长期仅需72 h,且传代培养72 h后的草鱼肌纤维平均扩增倍数最高(P<0.05);MTT法测细胞活力发现,M199培养基培养的草鱼肌纤维平均OD值为1.03±0.17显著高于DMEM和L-15组的OD值(分别为0.06±0.02和0.05±0.02)。综上M199培养基对于草鱼肌纤维的生长具有较好的促进作用,该培养基中的生长增殖速率均明显高于DMEM和L-15培养基,且肌纤维贴壁和伸展状态更好。M199培养基可作为草鱼肌纤维原代培养的培养基。 展开更多
关键词 草鱼肌纤维 培养基 组织块法 细胞培养 筛选
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蚕蛹虫草栽培方法优化试验
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作者 李海洲 陈正余 +2 位作者 王小平 孙新涛 贺才厚 《中国食用菌》 2023年第4期85-88,共4页
不同菌种、培养基配方、接种方法对蛹虫草人工栽培的影响不同。对蚕蛹虫草菌种、培养基配方、接种方法三因素进行优化,以接种后蚕蛹感菌率、出草整齐程度、转色情况等为评价指标进行试验。通过菌株活性检测,筛选出性状稳定的蚕蛹虫草菌... 不同菌种、培养基配方、接种方法对蛹虫草人工栽培的影响不同。对蚕蛹虫草菌种、培养基配方、接种方法三因素进行优化,以接种后蚕蛹感菌率、出草整齐程度、转色情况等为评价指标进行试验。通过菌株活性检测,筛选出性状稳定的蚕蛹虫草菌种;通过液体菌种培养基配方筛选试验,筛选出发菌快的液体菌种培养基配方;分别采用喷洒、浸泡、注射的方式接种蚕蛹虫草液体菌种,筛选出最优接种方法为注射。 展开更多
关键词 蚕蛹虫草 培养基 接种方法
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基于Box-Benhnken响应面法对银柴胡继代快繁培养基的优化
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作者 李天顺 张倩 代晓华 《安徽农业科学》 CAS 2023年第7期179-185,共7页
[目的]解决银柴胡种苗繁殖周期长、受外界环境影响大等问题。[方法]以银柴胡不定芽为试验材料,采用单因素试验及Box-Benhnken响应面法,对比继代快繁培养基中6-BA、NAA、蔗糖浓度对银柴胡不定芽生长的影响,探究最佳培养基培养配方。[结果... [目的]解决银柴胡种苗繁殖周期长、受外界环境影响大等问题。[方法]以银柴胡不定芽为试验材料,采用单因素试验及Box-Benhnken响应面法,对比继代快繁培养基中6-BA、NAA、蔗糖浓度对银柴胡不定芽生长的影响,探究最佳培养基培养配方。[结果]通过回归模型方程的分析并结合实际验证,MS+6-BA 2.04 mg/L+NAA 0.27 mg/L+蔗糖18.54 g/L为银柴胡继代快繁最佳培养基。[结论]以优化后的培养基进行继代快繁,银柴胡不定芽生长评分可达86.70,继代快繁效果较好,可为银柴胡种苗高质量、短周期快繁提供依据。 展开更多
关键词 银柴胡 组培 继代培养基 Box-Benhnken响应面法
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化妆品中日勾维多细菌源菌检验方法的建立
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作者 刘丰 邓源昌 +1 位作者 应国红 王晓炜 《香料香精化妆品》 CAS 2023年第6期141-146,共6页
为了建立化妆品中日勾维多细菌源菌检验方法,以标准菌株ATCC 33028和化妆品中分离的日勾维多细菌源菌为试验菌,配制选择性培养基和鉴别培养基,高效地鉴定日勾维多细菌源菌。日勾维多细菌源菌在双倍葡萄糖胆盐培养基中培养48 h后,均产酸... 为了建立化妆品中日勾维多细菌源菌检验方法,以标准菌株ATCC 33028和化妆品中分离的日勾维多细菌源菌为试验菌,配制选择性培养基和鉴别培养基,高效地鉴定日勾维多细菌源菌。日勾维多细菌源菌在双倍葡萄糖胆盐培养基中培养48 h后,均产酸、产气;在卵磷脂吐温80-七叶苷琼脂培养基上的菌落均为深灰色,菌落周围的培养基呈深褐色。利用双倍葡萄糖胆盐培养基和卵磷脂吐温80-七叶苷培养基初步建立化妆品中日勾维多细菌源菌检验方法,并有效地检测出了化妆品中的日勾维多细菌源菌。 展开更多
关键词 化妆品 日勾维多细菌源菌 培养基 检验方法
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3种医院制剂微生物限度检查方法研究
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作者 方剑儒 张燕 赵翠琴 《中兽医医药杂志》 CAS 2023年第5期81-85,共5页
根据3种医院制剂的剂型和处方特性,建立相适应的微生物限度检查方法。按照《中华人民共和国药典》(2020年版)要求,采用常规平皿计数法和增加培养基体积法进行需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌计数,接种5种试验菌验证,分别计算各试验菌的回... 根据3种医院制剂的剂型和处方特性,建立相适应的微生物限度检查方法。按照《中华人民共和国药典》(2020年版)要求,采用常规平皿计数法和增加培养基体积法进行需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌计数,接种5种试验菌验证,分别计算各试验菌的回收比值;根据品种不同,采用常规法和增加培养基体积法进行控制菌检查。结果显示,用常规法检验,复方甘草合剂对5种菌株的回收比值均在0.5~2.0之间;佛香胶囊和紫露烧伤膏对部分菌株有抑制作用,采用增加培养基体积法可有效消除佛香胶囊和紫露烧伤膏的抑菌活性。说明复方甘草合剂可以采用常规法进行微生物计数和控制菌检查;佛香胶囊和紫露烧伤膏对部分菌株有抑菌作用,可采用增加培养基体积的方法进行微生物计数和控制菌检查。 展开更多
关键词 医院制剂 微生物限度检查 常规法 增加培养基体积法
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中小工贸企业安全文化建设的探究
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作者 李德明 《工业安全与环保》 2023年第12期85-88,93,共5页
在许多学者的研究基础之上,采用问卷调查法对中小工贸企业在安全文化建设方面存在的问题进行调查、整理和完善,发现其企业安全文化建设中存在的主要问题,并根据存在的问题,通过一系列外部力量和内部措施的实施,强化企业安全文化建设,推... 在许多学者的研究基础之上,采用问卷调查法对中小工贸企业在安全文化建设方面存在的问题进行调查、整理和完善,发现其企业安全文化建设中存在的主要问题,并根据存在的问题,通过一系列外部力量和内部措施的实施,强化企业安全文化建设,推动和促进中小工贸企业的安全生产和可持续发展。 展开更多
关键词 中小工贸企业 安全文化建设 问卷调查法
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