姜黄素靶向β-Catenin/BCL9信号通路对肝癌细胞自噬和凋亡的影响研究

目的:探讨姜黄素靶向β-联环素/B淋巴细胞淋巴瘤因子9(β-Catenin/BCL9)信号通路对肝癌细胞自噬和凋亡的影响。方法:将人肝癌细胞系随机分为oe-β-Catenin组、oe-BCL9组、oe-β-Catenin-BCL9组、NC组和对照组,其中mimic-β-Catenin转染oe-β-Catenin组细胞;mimic-BCL9转染oe-BCL9组细胞;mimic-β-Catenin和mimic-BCL9转染oe-β-Catenin-BCL9组;空载质粒转染NC组细胞;对照组细胞中仅加入等量的转染试剂。采用MTT法检测细胞增殖抑制率。采用流式细胞仪检测细胞凋亡。采用丹酰尸胺(MDC)法检测细胞自噬情况。采用蛋白免疫印迹法(WB)检测自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、P62和通路相关蛋白β-Catenin、BCL9蛋白表达水平。结果:oe-β-Catenin-BCL9组中β-Catenin、BCL9 mRNA表达水平高于NC组和对照组(P<0.05);oe-β-Catenin组中β-Catenin mRNA表达水平高于NC组和对照组(P<0.05);oe-BCL9组中BCL9 mRNA表达水平高于NC组和对照组(P<0.05)。各个时间点中,oe-β-Catenin-BCL9组的细胞增殖抑制率和细胞凋亡率低于oe-β-Catenin组、oe-BCL9组、NC组和对照组(P<0.05);oe-β-Catenin组和oe-BCL9组的细胞增殖抑制率和细胞凋亡率低于NC组和对照组(P<0.05)。对照组和NC组中可见大量自噬泡,oe-β-Catenin组、oe-BCL9组和oe-β-Catenin-BCL9组中自噬泡较少。oe-β-Catenin-BCL9组的LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、P62的表达水平均低于oe-β-Catenin组、oe-BCL9组、NC组和对照组(P<0.05);oe-β-Catenin组和oe-BCL9组的LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、P62的表达水平低于NC组和对照组(P<0.05)。oe-β-Catenin-BCL9组的β-Catenin、BCL9蛋白表达水平均高于oe-β-Catenin组、oe-BCL9组、NC组和对照组(P<0.05);oe-β-Catenin组和oe-BCL9组的β-Catenin、BCL9蛋白表达水平高于NC组和对照组(P<0.05)。结论:姜黄素可以靶向抑制肝癌细胞中β-Catenin/BCL9信号通路,从而起到促进肝癌细胞凋亡的作用,并且可以调控自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、P62,促使肝癌细胞发生自噬。

姜黄素对老年胃肠道肿瘤根治术患者术后谵妄的影响

目的探究术前口服姜黄素胶囊对行胃肠道肿瘤根治术的老年患者术后谵妄(POD)的影响,并初步探讨姜黄素作用于POD的炎性机制。方法选取2024年3-7月于某医院全身麻醉下行腹腔镜胃肠道肿瘤根治术的老年患者70例为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和姜黄素组,每组35例。术前2 d对照组和姜黄素组患者分别给予安慰剂(与姜黄素组相同材质空胶囊)和姜黄素胶囊500 mg,两组均口服1次/d,至手术当天麻醉前服用最后一次,共3次。入组前使用简易智力状态检查量表(MMSE)对患者认知功能进行评定,于术后第1天(T2)、第2天(T3)、第3天(T4)采用ICU意识模糊评估量表(CAM-ICU)和视觉模拟评分法(VAS)分别对患者POD的发生情况及疼痛程度进行评估。于干预前(T0)、术毕(T1)、T2、T4时点分别收集患者静脉血3 mL,采用酶联免疫吸附测定法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平。记录两组患者术后恶心、呕吐发生率。结果与对照组比较,姜黄素组术后T2、T4时点POD发生率,T2和T4时点IL-1β和IL-6水平,T1、T2和T4时点TNF-α,T1时点CRP水平均降低(P<0.05);两组患者T1、T2、T4时点IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP和MCP-1水平均高于T0(P<0.05)。两组患者术后VAS评分及恶心、呕吐发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论老年患者术前预先服用姜黄素胶囊可降低术后3 d POD总发生率及炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP水平,且不会增加恶心、呕吐不良反应发生率。

姜黄素对嗜铬细胞瘤细胞系PC12增殖及侵袭的影响

目的研究姜黄素对嗜铬细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的作用。方法用不同浓度的姜黄素处理大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖,计算IC50;采用划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力;采用流式细胞测量术检测细胞凋亡;qPCR检测细胞凋亡和抗凋亡基因(Bax和Bcl-2)的mRNA表达,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达。结果姜黄素(10~80μmol/L)呈浓度依赖性抑制PC12细胞增殖,IC50为29μmol/L。姜黄素呈浓度依赖性抑制PC12细胞迁移,对照组迁移率为66%,姜黄素10μmol/L组、20μmol/L组和30μmol/L组迁移率分别为51%、5%和0.5%。姜黄素(20~30μmol/L)能显著抑制PC12细胞侵袭(P<0.0001)。此外,姜黄素显著促进PC12细胞凋亡,姜黄素10、20和30μmol/L组凋亡细胞比对照组分别升高2.25%、18.53%和26.89%。姜黄素处理后,Bax基因mRNA和蛋白表达显著升高,Bcl-2基因mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论姜黄素可显著抑制PC12细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,其促凋亡作用可能与Bax和Bcl-2基因表达改变有关。

利用^(1)H NMR测定姜中姜辣素与姜黄素

该研究采用核磁共振氢谱(proton nuclear magnetic resonance,^(1)H NMR)技术对冻干生姜与烘干生姜中的姜辣素和姜黄素类化合物的变化进行定性定量分析,发现姜中姜辣素提取物主要包括6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚等姜酚类物质以及少量姜烯酚。经过烘干处理后,总姜酚的含量由(1.5±0.3)mg/g降低至(0.89±0.06)mg/g(鲜重),总姜辣素的含量由(2.3±0.4)mg/g降低至(1.4±0.1)mg/g,6-姜烯酚的含量由(4.8×10^(-3)±2.7×10^(-3))mg/g升高至(0.0209±0.0004)mg/g。烘干后姜黄素类化合物的含量由(4.4±0.2)mg/100 g降低至(1.5±0.6)mg/100 g,香草醛的含量由(1.20±0.07)mg/100 g升高至(1.87±0.01)mg/100 g,说明热处理会导致生姜中的姜辣素与姜黄素类化合物降解,姜酚类物质向姜烯酚转化。该试验结果为研究姜中姜辣素与姜黄素类化合物的变化机理以及姜制品的生产与工艺优化提供了参考。

姜黄素药食特性及应用综述

姜黄素是从姜科植物中提取出来的天然多酚类物质,食品中添加姜黄素能使食品具有独特色泽,赋予食品特殊香味。另外,姜黄素药用价值显著,能提高人体免疫力和加速机体代谢。此外,姜黄素具有消炎抗菌、抗氧化、降脂和利胆等多种生物活性,已在食品、医药学及动物生产等领域中得到良好的应用,但其水溶性和稳定性较差的特点,局限了其应用范围。为此,该文章将对姜黄素的理化性质、提取、功能特性、应用情况及其增溶技术进行综述,为姜黄素的进一步研究提供参考。

姜黄素光动力技术在微生物杀菌中的研究进展

光动力杀菌技术是基于光敏剂、光能和氧分子等,通过光敏剂吸收光能产生活性氧化物,从而实现杀菌效果的非热杀菌技术;姜黄素作为常见的食品级光敏剂,在光动力杀菌技术中具有显著的应用前景。描述了姜黄素光敏剂的功能特性,总结了姜黄素光动力技术在杀灭细菌、真菌和病毒方面的应用进展,并探讨了影响姜黄素光动力杀菌效果的关键因素(如姜黄素浓度、光的类型和光照时间等),以期为姜黄素光动力技术在食品产业化应用提供借鉴。

噬菌体协同姜黄素介导的光动力灭活对食源性致病菌的杀菌效果及机理

光动力灭活(photodynamic inactivation,PDI)是一种能有效灭活食源性致病菌的新型环保非热杀菌技术。为提高PDI效果,以姜黄素为光敏剂,噬菌体为协同剂,探究了不同光照时间和姜黄素介导浓度的PDI对志贺氏菌和沙门氏菌的杀菌作用。优化条件下采用平板菌落计数法评估噬菌体协同姜黄素介导的PDI的杀菌效果,并通过酶标仪测定胞外活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生能力和胞内DNA渗漏情况,利用扫描电镜观察细菌表面形态变化,并采用琼脂糖凝胶电泳分析基因组DNA损伤程度,进一步阐明噬菌体协同姜黄素介导的PDI的杀菌机理。结果表明:噬菌体显著提高了杀菌效果,当光照时间为20 min,姜黄素浓度分别为50、100μmol/L时,噬菌体协同姜黄素介导的PDI分别使志贺氏菌和沙门氏菌的活菌数降低了2.77 lg(CFU/mL)和3.64 lg(CFU/mL)。随着PDI诱导胞外ROS产量的增加,细菌出现表面形态皱缩,细胞膜破坏导致的DNA渗漏和DNA显著降解现象,抑菌作用显著。噬菌体协同姜黄素介导的PDI通过诱导ROS产生破坏细胞结构,从而有效提高了对志贺氏菌和沙门氏菌的杀菌效果。研究旨在为PDI对食源性致病菌的污染防控提供一定参考。

响应面法优化超临界CO_(2)提取姜黄素工艺及抗氧化、抑菌活性研究

以生姜为试验原料,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法优化超临界CO_(2)(SC-CO_(2))提取生姜中姜黄素的工艺参数,并对获得的姜黄素进行抗氧化、抑菌活性评价。结果表明:生姜姜黄素的最佳提取工艺条件为萃取温度35℃,压力32 MPa,时间69 min,该条件下姜黄素的得率高达5.32%。经SC-CO_(2)提取的姜黄素对·OH、O2-·、DPPH和ABTS+自由基均表现出较强的清除能力,其IC50分别为10.42、6.96、8.48和10.28 mg/mL。不同浓度姜黄素(0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL)对霉菌和酵母菌均有较好的抑制作用,且随浓度的增加抑制效果增强。该研究为生姜中姜黄素的进一步开发利用、延长其产业链提供技术支撑。

姜黄素衍生物及其生物学功能研究进展

姜黄素是从姜黄等植物根茎中提取的一种天然β-二酮类多酚化合物。姜黄素具有水溶性低、化学性质不稳定以及生物利用率低等缺点,因而围绕改善姜黄素生化结构缺陷的研究衍生出多种的姜黄素衍生物。姜黄素及其衍生物具有抗病毒、抗肿瘤、抗抑郁以及保护神经等多种生理功能,因而成为目前研究比较热门并且具有发展前景的药物。总结现有部分姜黄素衍生物结构特点及其分类,同时阐明姜黄素抗氧化、抗肿瘤等作用的分子机理,为姜黄素衍生物的结构探究及其生理功能的进一步研究提供一定的视角。

姜黄素对糖尿病小鼠肺纤维化的调控作用及机制研究

目的探讨姜黄素(Cur)对糖尿病(DM)小鼠肺纤维化的改善作用及其机制。方法将50只雄性SPF级C57BL/6小鼠随机分为正常组(Con组,n=10)、姜黄素组(Cur组,n=10)、糖尿病模型组(DM组,n=12)和糖尿病姜黄素处理组(DM+Cur组,n=14)。DM组与DM+Cur组小鼠先给予高糖高脂饲料喂养4周后,小剂量腹腔注射链脲佐菌素[STZ,50mg/(kg·d)]建立糖尿病小鼠模型,1次/d,连续5d,随机血糖16.7mmol/L则为造模成功标准。造模成功后,Cur组与DM+Cur组灌胃给予Cur,200mg/(kg·d),连续16周后处死小鼠,取肺组织,HE染色法、Masson染色及Sirius Red染色观察各组小鼠肺组织病理学改变、炎细胞浸润及胶原沉积情况;Western blot法检测各组小鼠肺组织中TGF-β1、p-Smad3、p-P38MAPK、CollagenⅢ蛋白表达情况。结果与Con组相比,DM组小鼠肺组织呈明显纤维化改变,肺组织中TGF-β1、p-Smad3、p-P38MAPK、CollagenⅢ蛋白表达明显升高(P<0.01)。给予Cur处理后,DM小鼠肺组织纤维化得到明显改善,肺组织中TGF-β1、p-Smad3、p-P38MAPK、CollagenⅢ蛋白表达均有所降低(P<0.05)。结论Cur通过降低纤维化相关蛋白CollagenⅢ的表达明显改善STZ诱导的DM小鼠肺组织纤维化,其作用机制可能与Cur抑制肺组织中TGF-β1/Smad/P38MAPK信号通路激活有关。

基于网络药理学探究姜黄素光动力技术机制

通过网络药理学探究姜黄素光动力技术的作用和分子机制,为进一步研究姜黄素光动力技术的分子机制提供理论指导。文章通过PharmMapper、SwissTargetPrediction、STITCH、GeneCards等在线分析平台预测姜黄素与光动力技术相关靶点,基于DAVID数据库进行GO功能注释和KEGG富集分析筛选姜黄素运用于光动力的可能机制,使用cytoscape 3.9.1软件构建蛋白—蛋白互作(PPI)网络图,获取核心靶点。结果显示:网络药理学分析可预测78个姜黄素与光动力技术共同靶点,GO富集分析的结果主要涉及RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正与负调控、凋亡过程的正与负调控、信号转导、对药物的反应、对外来刺激的反应、蛋白质磷酸化、炎症反应等173个相关生物过程;KEGG通路富集分析得到癌症的途径、PI3K-Akt信号通路、癌症中的蛋白聚糖、乙型肝炎、脂质与动脉粥样硬化、MAPK信号通路等90条潜在作用通路;PPI网络分析预测核心靶点包括AKT1、TNF、CASP3、STAT3、EGFR、ESR1、SRC、PTGS2、MMP9、ANXA5等。

姜黄素治疗高血压作用机制研究进展

姜黄素属于二酮类化合物,是从姜黄属类植物的根茎中提取出的一种橙黄色结晶粉末,具有广泛的药理活性。姜黄素可以从三个方面影响高血压进程,一是通过降低炎症细胞因子表达、抑制小胶质细胞介导的促炎反应及抑制TLR4/NF-κB/MAPK/AP-1/JAK2/STAT3等炎症相关信号通路等方面抑制炎症反应;二是通过降低活性氧诱导氧化应激反应;三是通过调节线粒体自噬紊乱、抑制血管平滑肌细胞增殖、下调血管紧张素Ⅱ型受体表达、改善肠道菌群及增强肠道屏障。目前,姜黄素具有生物利用度低、新陈代谢快、溶解度不足和敏感性等不足,如分子搭载、药物联用、纳米晶体、微球、肠溶明胶胶囊等新药递送系统可以提高姜黄素的生物利用度。姜黄素还可抑制血小板的生成,清除刺激单核血细胞快速生长的丝裂原,并部分抑制蛋白激酶,对于氧化应激反应有关的各种心脑疾病如心肌缺血、缺血再灌注、出血、休克、神经细胞损伤和癌症及高血压合并症等也具有良好作用。因此,姜黄素可能通过以上作用机制治疗高血压及相关合并症,但其实现高血压的靶向治疗仍需要更多临床研究、实验研究进行深入研究,提供更详尽的数据支持。

姜黄素调控转录因子FOXP3影响HIV-1感染辅助受体CCR5的作用机制研究

目的:探讨姜黄素通过调控转录因子FOXP3影响HIV-1感染辅助受体CCR5的作用机制。方法:利用生物信息学方法预测并分析转录因子FOXP3与CCR5启动子的结合位点;采用AutoDock 4.2软件对姜黄素与FOXP3进行柔性对接;MTT法检测姜黄素对Jurkat细胞活性的影响;qRT-PCR和Western blot检测不同浓度姜黄素作用于Jurkat细胞后CCR5和FOXP3 mRNA和蛋白表达水平;构建pcDNA3.1-FOXP3真核表达载体;结合转录因子预测结果,运用Overlap PCR法扩增突变型CCR5基因片段,构建突变型CCR5启动子报告载体pFireRluc-Mt-CCR5;利用双荧光素酶报告基因技术验证转录因子FOXP3与CCR5的启动子结合位点。结果:JASPAR转录因子预测结果显示,CCR5启动子区与转录因子FOXP3存在结合位点;分子对接结果显示,姜黄素能够与FOXP3的酶活区域结合;MTT结果显示,姜黄素作用24 h后对Jurkat细胞活性产生抑制作用,IC50为34.48μmol/L;qRT-PCR和Western bot结果显示,不同浓度姜黄素作用于Jurkat细胞后,CCR5和FOXP3 mRNA和蛋白表达水平均降低,且存在剂量依赖性;双荧光素酶报告基因技术证实FOXP3能够与CCR5启动子结合,且转录因子FOXP3可调控CCR5启动子活性;过表达FOXP3后,姜黄素对CCR5的作用结果显示:当姜黄素浓度为60μmol/L时,作用于共转染pcDNA3.1-FOXP3和pFireRluc-Wt-CCR5的HEK293T细胞CCR5启动子荧光素酶活性相对值明显高于pFireRluc-Wt-CCR5+curcumin-60组(P<0.01)。结论:FOXP3能够调控CCR5启动子活性,其作用机制可能是姜黄素通过作用于FOXP3与CCR5启动子结合位点影响CCR5启动子活性。

姜黄素对糖尿病并发抑郁症模型大鼠的改善作用及机制

目的基于环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路,研究姜黄素对糖尿病并发抑郁症模型大鼠的改善作用及潜在机制。方法采用高脂高糖饲料喂养+腹腔注射链脲佐菌素+慢性不可预测性应激致郁的方法构建糖尿病并发抑郁症模型大鼠。将造模成功的大鼠随机分成模型组,阳性对照组(0.18g/kg二甲双胍和1.8mg/kg氟西汀,灌胃),姜黄素低、高剂量组(30、60mg/kg,灌胃)和姜黄素高剂量+CREB抑制剂组[60mg/kg姜黄素(灌胃)+5mg/kgCREB抑制剂666-15(腹腔注射)],每组12只。另选取12只健康大鼠作为正常组。各组大鼠给予相应干预4周后,检测大鼠空腹血糖并对其抑郁症状进行评估;检测大鼠血清中皮质酮(CORT)、炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6]水平和海马组织中去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)水平;观察大鼠海马组织病理学变化并检测神经元凋亡情况;检测大鼠海马组织中CREB、BDNFmRNA及蛋白的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠海马组织损伤严重,神经元分散;空腹血糖,强迫游泳不动时间和悬尾不动时间,血清中CORT、TNF-α、IL-1β和IL-6水平,神经元凋亡指数均显著升高或延长(P<0.05);海马组织中NE、5-HT水平,存活神经元数以及CREB、BDNFmRNA及蛋白表达水平均显著降低或减少(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组和姜黄素各剂量组大鼠海马组织损伤有所减轻,各定量指标均显著改善(P<0.05),且姜黄素高剂量组的改善效果显著优于低剂量组(P<0.05);CREB抑制剂可显著逆转高剂量姜黄素对模型大鼠的改善作用(P<0.05)。结论姜黄素可改善糖尿病并发抑郁症模型大鼠的抑郁症状,减轻神经元损伤和炎症反应,其作用可能与激活CREB/BDNF信号通路有关。

姜黄素通过抑制乙酰转移酶P300表达促进HeLa细胞凋亡

目的:探讨姜黄素(Cur)通过下调HeLa细胞腺病毒E1A相关300 kD蛋白(P300)调控HeLa细胞的活力及凋亡。方法:将对数生长期的HeLa细胞分别采用20、40、60和80μmol/L Cur处理,并以未处理组细胞作为对照,用CCK-8法检测细胞活力;选取20和40μmol/L Cur处理细胞,以流式细胞术检测细胞凋亡,RT-qPCR、Western blot法检测E6基因的mRNA和蛋白表达及凋亡相关蛋白、P300和组蛋白的表达;构建沉默质粒shE6和阴性对照质粒shNC转染HeLa细胞,设置shNC,shNC+Cur(40μmol/L),shE6以及shE6+Cur(40μmol/L)四组,以CCK-8、流式细胞术以及Western blot法分别检测细胞活力、凋亡以及凋亡相关蛋白的表达;构建沉默质粒siP300和阴性对照质粒siNC转染HeLa细胞,RT-PCR、Western blot法分别检测P300的mRNA和蛋白表达、E6的蛋白表达。结果:与未处理组相比,用不同浓度Cur处理HeLa细胞后能显著抑制其活力并可使早期凋亡率增高(P<0.05);Cur处理HeLa细胞后,E6的mRNA及蛋白表达均下调,而敲减E6与未敲减E6的Cur处理组相比,敲减组的早期凋亡率以及促凋亡相关蛋白表达均低于未敲减组(P<0.05);敲减P300后,HeLa细胞中E6蛋白表达降低;而单以Cur处理HeLa细胞后,P300及相关组蛋白表达均下调(P<0.01)。结论:Cur抑制HPV18阳性宫颈癌细胞的活力并促进其凋亡,机制可能与其下调P300而抑制E6蛋白乙酰化有关。

姜黄素对小鼠小肠上皮细胞氧化应激损伤的保护作用及机制研究

本试验旨在研究姜黄素对小鼠小肠上皮细胞(MODE-K细胞)氧化应激损伤的保护作用及机制。使用过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠小肠上皮细胞,建立细胞氧化损伤模型,并确定最佳造模H_(2)O_(2)浓度。对照组使用正常培养液培养细胞,不进行任何处理;模型组使用正常培养液培养细胞后,加入H_(2)O_(2)处理细胞4 h;姜黄素组使用正常培养液培养细胞后,先加入不同浓度(1.25、2.50、5.00、10.00和20.00μmol/L)的姜黄素处理细胞12 h,然后再加入H_(2)O_(2)处理细胞4 h。测定小鼠小肠上皮细胞存活率、凋亡率以及细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,实时荧光定量PCR检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤相关X蛋白(Bax)、半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA相对表达水平,利用分子模拟研究姜黄素与Kelch样环氧氯丙烷关联蛋白1(Keap1)口袋结合的优势构象和相互作用,蛋白质印迹(Western blot)检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、Keap1、血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白相对表达水平。结果表明:1)最佳造模H_(2)O_(2)浓度为150μmol/L。2)与对照组相比,模型组的细胞存活率及细胞中SOD、GSH-Px活性显著降低(P<0.05),细胞中ROS、MDA含量和LDH活性显著增加(P<0.05)。与模型组相比,5.00~20.00μmol/L姜黄素组的细胞存活率及细胞中SOD、GSH-Px活性显著增加(P<0.05),细胞中ROS、MDA含量和LDH活性显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比,模型组的细胞凋亡率显著增加(P<0.05),细胞中Bcl-2的mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05),Bax和Caspase-3的mRNA相对表达水平显著提高(P<0.05)。与模型组相比,10.00μmol/L姜黄素组的细胞凋亡率显著降低(P<0.05),细胞中Bcl-2的mRNA相对表达水平显著提高(P<0.05),Bax和Caspase-3的mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。4)分子对接结果表明,姜黄素通过与Keap1的Kelch结构域结合位点相互作用,成功阻止了Keap1-Nrf2之间的相互作用,从而发挥了抗氧化的作用。Western blot结果进一步表明,与模型组相比,10.00μmol/L姜黄素组的细胞中Nrf2、HO-1的蛋白相对表达水平显著提高(P<0.05),Keap1的蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05)。由此可见,适宜浓度(10.00μmol/L)的姜黄素可通过促进Nrf2/HO-1信号通路中Nrf2和HO-1的蛋白表达,抑制Keap1的蛋白表达,减轻H_(2)O_(2)诱导的小鼠小肠上皮细胞的氧化损伤。

探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞的生长抑制作用、诱导凋亡作用及其机制研究

目的:探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响。方法:MTT法测定姜黄素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响,采用流式细胞仪测定姜黄素不同浓度下的CNE-2Z细胞凋亡情况,Western Blot测定NF-κB蛋白的表达。结果:姜黄素能影响CNE-2Z细胞的NF-κB蛋白表达,使NF-κB蛋白表达水平降低,说明姜黄素对CNE-2Z的增殖和转移有一定的影响。姜黄素对CNE-2Z的作用效果受作用时间和浓度影响,其对CNE-2Z细胞24 h的IC50数值为(43.514~45.435)μmol/L,48 h的IC50数值为(8.366~13.11)μmol/L,72 h的IC50数值为(5.658~8.469)μmol/L。结论:姜黄素能够通过NF-κB蛋白的表达,来抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖与侵袭。姜黄素浓度越高,作用时间越长,CNE-2Z细胞增殖抑制效果越好。

姜黄素调控PTEN/miR⁃182⁃5p轴抑制乳腺癌发生发展的机制研究

目的探究姜黄素调控人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)PTEN/miR⁃182⁃5p轴抑制乳腺癌发生发展的机制。方法取人乳腺癌细胞株MCF⁃7进行体外培养并获得对数生长期细胞,加入不同浓度姜黄素,比较不同浓度姜黄素对乳腺癌细胞的抑制效率;按照实验需求,将体外培养的MCF⁃7细胞分为正常对照组、A组(姜黄素处理)、B组(姜黄素+转染miR⁃182⁃5p模拟物)、C组(姜黄素+转染PTEN抑制剂BpV+miR⁃182⁃5p抑制物),通过RT⁃PCR检测各组细胞PTEN、miR⁃182⁃5p表达水平;Western blot检测与细胞增殖、凋亡、转移侵袭相关的KI67、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、基质金属蛋白酶⁃2(MMP⁃2)以及MMP⁃9蛋白表达水平。结果姜黄素处理24 h、48 h均对乳腺癌细胞MCF⁃7的增殖具有抑制作用,且随姜黄素浓度升高抑制率呈上升趋势:80μmol/L抑制率>60μmol/L抑制率>40μmol/L抑制率>20μmol/L抑制率(F=276.512、255.478,P<0.05)。与正常对照组比较,A、B、C三组PTEN表达水平均升高(F=11.536,P<0.05),miR⁃182⁃5p表达水平均降低(F=10.896,P<0.05);与正常对照组比较,A、B、C组KI67、MMP⁃2、MMP⁃9蛋白表达均下降(F=10.569、10.412、8.210,P<0.05),Caspase 3表达上升(F=11.911,P<0.05)。结论姜黄素可通过调控PTEN/miR⁃182⁃5p轴,促进凋亡因子Caspase 3表达,抑制细胞增殖、转移及侵袭相关蛋白表达,发挥对乳腺癌发生发展过程的抑制。

姜黄素和维生素E联用对比格犬营养物质表观消化率、血清生化指标和脂质代谢的影响

本试验旨在研究姜黄素和维生素E联用对比格犬营养物质表观消化率、血清生化指标和脂质代谢的影响。将18只约12月龄的比格犬随机分成3组(n=6),分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+50 mg/kg姜黄素+100 mg/kg维生素E(Cur-50组)、基础饲粮+100 mg/kg姜黄素+100 mg/kg维生素E(Cur-100组),30 d后测定各组的营养物质表观消化率、血清生化和脂质代谢指标,并对粪便进行评分。结果显示:与对照组相比,Cur-100组粗脂肪的表观消化率显著提高(P<0.05),血清中总蛋白(TP)含量和粪便中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著提高(P<0.05),血清中尿素氮(UN)含量以及第15和30天粪便评分显著下降(P<0.05);Cur-50组粪便中sIgA含量显著提高(P<0.05)。在脂质代谢方面,与对照组相比,Cur-100组血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著降低(P<0.05),血清中脂蛋白脂肪酶(LPL)活性显著提高(P<0.05);Cur-50组血清中TC含量显著降低(P<0.05),血清中LPL活性显著提高(P<0.05)。由此可知,姜黄素和维生素E联用可提高比格犬对粗脂肪的表观消化率,促进氮代谢,改善粪便状态,提高机体免疫力,并能促进血液中脂质代谢,降低血脂水平。

姜黄素调控TLR4/NF-κB和NRF2/HO-1信号通路改善草酸钙晶体诱导的小鼠肾损伤

目的探讨姜黄素(curcumin,CUR)对乙醛酸诱导的小鼠肾结石形成模型中肾损伤的保护作用及其机制。方法通过连续腹腔注射乙醛酸,建立小鼠肾结石形成模型。以一水草酸钙(calcium oxalate monohydrate,COM)诱导HK-2细胞作为体外模型。小鼠模型经CUR作用后,测定肾小管损伤、炎症细胞因子水平,研究CUR对小鼠肾结石的保护作用;CUR对COM诱导HK-2作用后,检测细胞活力及炎症因子;Western blot检测小鼠肾组织和HK-2细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)和核因子红血球相关因子2(NRF2)/血红素加氧酶1(HO-1)通路相关蛋白;为进一步探讨CUR对TLR4/NF-κB和NRF2/HO-1通路的调控作用,采用NRF2抑制剂ML385和TLR4激动剂CCL-34分别作用于COM诱导的HK-2细胞,以进行功能增益和功能丧失检测。结果CUR改善小鼠肾结石形成模型损伤,抑制炎症和抗氧化作用;促进COM诱导HK-2细胞的活力,抑制炎症因子的表达。CUR抑制TLR4/NF-κB通路中蛋白的表达,促使NRF2从细胞质转移到细胞核,并促进HO-1的表达。ML385和CCL-34分别抵消CUR对COM诱导HK-2细胞抗炎作用的影响。结论CUR通过调控小鼠肾结石形成模型TLR4/NF-κB和NRF2/HO-1通路改善肾损伤。