磷酸二酯酶在慢性疼痛与阿尔茨海默病共病中的作用研究进展

慢性疼痛与阿尔茨海默病(AD)是困扰人类的两大疾病。流行病学调查显示,慢性疼痛患者常伴有情感和认知功能异常,而AD患者也常伴有慢性疼痛,这提示慢性疼痛与AD可能存在相似或共同的病理生理机制,但其详细机制尚不明确。磷酸二酯酶(PDE)具有特异性水解细胞内第二信使环磷酸腺苷(cAMP)和(或)环磷酸鸟苷(cGMP)的功能。最新研究报道,PDE家族中PDE2,4,5或7亚型可通过激活cAMP/蛋白激酶A和(或)cGMP/蛋白激酶G,促进其下游信号通路磷酸腺苷反应元件结合蛋白的磷酸化和脑源性神经营养因子的表达,从而不同程度地改善AD小鼠的认知功能障碍,缓解慢性疼痛小鼠的痛觉异常。本文综述PDE在慢性疼痛和AD共病中的作用及相关机制。

桃金娘对颈动脉血栓形成的影响及其机制的实验研究

目的探讨桃金娘对血栓形成的影响及其机制。方法经大鼠颈静注射桃金娘5、10 mg/kg,用血栓生成仪观察大鼠颈动脉血栓形成情况;分别采用全血与桃金娘及生理盐水孵育5 min,用全血血小板聚集仪观察全血血小板聚集情况;用ELISA法检测血小板环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)的含量;用硝酸还原酶法观察血小板释放NO情况。结果桃金娘5 mg/kg和10 mg/kg能够促进大鼠颈总动脉血栓形成,堵塞率分别为(87.46±10.31)%和(95.26±12.42)%。200、400和800μg/mL的桃金娘均能够诱导全血血小板聚集,其最大聚集率分别为(0.75±0.50)、(3.75±2.36)和(7.75±0.96)Ω。200、400和800μg/mL的桃金娘均能减少血小板cAMP、cGMP和NO的生成,含量分别为[(22±5.05)、(18.71±5.11)、(15.62±6.19)pmol/mL]、[(6.54±1.86)、(5.34±2.36)、(5.03±1.67)nmol/mL]和[(120.89±26.34)、(104.28±21.27)、(86.61±16.98)μmol/mL]。结论桃金娘能促进血栓形成和血小板聚集,可能机制为下调血小板cAMP、cGMP和NO水平。

柚皮素通过环核苷酸通路拮抗血小板聚集的体外研究

目的:探讨柚皮素拮抗二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集的作用机制。方法:采用ELISA检测柚皮素对ADP诱导的大鼠血小板内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平的影响。采用高效液相法检测柚皮素对血小板磷酸二酯酶(PDE)活性影响。采用Western blot检测柚皮素对ADP刺激的血小板内血管扩张刺激磷蛋白(VASP)磷酸化形式p-VASP(Ser157)、p-VASP(Ser239)的蛋白水平的影响。分别给予蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89、蛋白激酶G(PKG)抑制剂Rp-8-Br-PET-cGMPS和蛋白激酶C(PKC)抑制剂GF109203X预先孵育血小板后,再用柚皮素处理,然后给予ADP刺激,Western blot检测p-VASP(Ser239)蛋白水平。采用血小板聚集仪进一步观察PKA抑制剂、PKG抑制剂预先孵育血小板是否影响柚皮素对ADP诱导血小板聚集的抑制作用。结果:柚皮素剂量依赖性地升高ADP抑制的血小板内cGMP水平,而并不改变cAMP水平。柚皮素还能显著升高血小板PDE活性。Western blot结果显示,柚皮素可明显升高由ADP抑制的p-VASP(Ser239)水平,但不影响p-VASP(Ser157)的蛋白水平,预先孵育PKG或PKC抑制剂并不影响柚皮素对p-VASP(Ser239)蛋白表达的作用,而预先孵育PKA抑制剂后,则能抑制柚皮素对p-VASP(Ser239)蛋白表达的作用。PKA抑制剂能阻断柚皮素对血小板聚集的拮抗作用,而PKG抑制剂并不影响其作用。结论:柚皮素可能通过升高血小板内cGMP水平和激活PKA依赖的信号通路来介导VASP的磷酸化,从而发挥抗血小板聚集的作用。

偏头痛患者血浆内皮素与环核苷酸水平变化研究

目的:观察偏头痛患者发作期与间歇期血浆内皮素与环苷酸水平的变化,探讨其变化在偏头痛发生与发展中的作用。方法:选择80例偏头痛患者,用放免法检测血浆内皮素(ET)、环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)水平的变化。结果:偏头痛患者发作期ET、cAMP水平显著高于对照组及间歇期水平(P<0.05P<0.01);偏头痛发作期cGMP水平明显低于对照组及偏头痛间歇期水平(P<0.05)。结论:偏头痛发作期ETcAMP与cGMP水平变化可能参与了偏头痛的发作过程。

2,3-吲哚醌对大鼠离体胸主动脉舒缩功能的影响

2,3-吲哚醌（2,3-indolinedione,isatin,ISA）为吲哚类衍生物,又名靛红,是近年发现存在于人和动物体内的一种内源性活性物质,且广泛存在于海洋生物如龙虾和十字花科植物中[1-2]。基础及临床研究表明,ISA 在人体不同器官和体液中均有分布[3-5]。研究表明,ISA使动物产生类似焦虑的行为,并且在焦虑和紧张的状态下,心脏、脑、血浆中其水平会升高[6-8]。然而,目前ISA对胸主动脉舒缩功能的调控作用及机制尚不十分清楚。因此,本研究利用离体血管环实验模型,探讨ISA对大鼠离体胸主动脉舒收缩功能的影响及机制,为心血管疾病的防治提供新的理论依据。

Ⅱ．大鼠1－烯丙基氯－3亚急性中毒神经组织cAMP、cGMP及CaM含量变化

为探讨１－烯丙基氯－３的神经毒作用机理，用Ｗｉｓｔａｒ大鼠形成动物疾病模型，用放免法（ＲＩＡ）及酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）分别测定了大鼠１－烯丙基氯－３亚急性中毒后神经组织中ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和游离钙调素（ＣａＭ）的含量。结果表明，实验组大鼠纹状体、小脑和坐骨腓神经中ｃＡＭＰ含量增加，ｃＧＭＰ和游离ＣａＭ则低于对照组。这一指标的变化程度与染毒剂量及组织有关。