IKBKE、YAP1和TEAD2在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨核因子κb激酶亚基ε的抑制剂(IKBKE)、Yes相关蛋白1(YAP1)和转录增强结构域转录因子2(TEAD2)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其临床意义。方法收集2016年1月至2017年12月在蚌埠医科大学第一附属医院手术切除的142例CRC组织及对应癌旁组织,采用免疫组化法检测标本中IKBKE、YAP1和TEAD2的表达情况。分析3种蛋白在CRC组织中表达的相关性,分析蛋白阳性率与患者临床病理参数及预后的关系;绘制Kaplan-Meier生存曲线,比较这些蛋白不同表达情况患者的生存差异。采用Cox回归分析影响患者预后的危险因素。结果CRC组织中IKBKE、YAP1和TEAD2的阳性率均显著高于癌旁组织(65.5%比9.9%,73.9%比14.1%,66.9%比8.5%,均P<0.05)。IKBKE的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、肿瘤-淋巴结-远处转移(TNM)分期有关,YAP1和TEAD2的表达均与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关。Spearman秩相关分析显示CRC组织中IKBKE与YAP1、TEAD2表达均呈正相关(均P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析显示IKBKE、YAP1和TEAD2阳性表达组的总生存率降低。Cox回归分析显示IKBKE、YAP1和TEAD2阳性、肿瘤分化程度高、TNM分期高是CRC患者预后的独立危险因素。结论CRC中IKBKE、YAP1和TEAD2阳性表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、转移等因素有关,可能成为CRC治疗的潜在靶点;检测这3个蛋白的表达有助于评估预后。

细胞周期调控基因及Bcl-2、c-Jun基因在人肝细胞脂肪变性过程中的表达变化

目的观察细胞周期调控基因及Bcl-2、c-Jun基因在人肝细胞L02脂肪变性过程中的表达变化。方法以油酸和软脂酸(2∶1)混合液处理L02细胞0、5、10、20 h,建立人肝细胞脂肪变性模型。用油红O染色检测L02细胞内脂质含量;用荧光定量PCR技术检测L02细胞脂肪变性过程中CDK2、CDK4、Cyclin D1、Bcl-2、c-Jun mRNA表达。结果随造模时间延长,L02细胞内橘红色脂滴聚集越来越多,至造模20 h,肝细胞染成橘红色。L02细胞内CDK2 mRNA相对表达量逐渐升高,造模5 h达最高(P均<0.05),随后逐渐下降;CDK4 mRNA相对表达量逐渐升高,造模10 h达最高(P均>0.05),随后逐渐下降,造模20 h最低(P均>0.05);不同时间点Cyclin D1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P均>0.05);Bcl-2 mRNA相对表达量随造模时间延长而升高,造模10 h达最高(P<0.05),随后降低;造模5、10、20 h的c-Jun mRNA相对表达量均较造模0 h高(P均<0.05),但无变化规律。结论人肝细胞L02脂肪变性过程中癌症相关基因CDK2、CDK4、Bcl-2、c-Jun表达先升高后降低,Cyclin D1表达变化不明显。

口腔疣状癌中survivin与BCL-2、Skp2与P27两组蛋白表达特点及相关性研究

目的:研究口腔疣状癌(OVC)组织中survivin(生存蛋白)与BCL-2(B淋巴瘤/白血病-2基因)、Skp2(S期激酶蛋白-2)与P27(激酶抑制蛋白)两组蛋白的表达特点及其相关性。方法:以本院2012-01-2015-01期间收治的34例口腔疣状癌患者作为本次研究资料,全部患者均在本院接受手术治疗。将术中取得的口腔疣状癌组织、癌旁组织,以及2015年1月间在本院因良性病变行病理检查患者的正常口腔黏膜组织作为研究标本,测定3种口腔黏膜组织中survivin、BCL-2、Skp2、P27的蛋白表达水平并进行对比分析,分析不同类型、不同分期的口腔疣状癌组织中4项蛋白表达的差异性,研究survivin与BCL-2、Skp2与P27之间的相关性,并据此研究4项蛋白表达水平对于口腔疣状癌诊断治疗的意义。结果:口腔疣状癌组织中Survivin、BCL-2、Skp2、P27表达阳性率均显著高于癌旁组织与正常组织,P<0.01;经进一步两两对比分析,癌旁组织中4项蛋白表达的阳性率与正常组织无明显差异,P>0.05。Survivin在口腔疣状癌组织中的阳性表达与BCL-2的阳性表达呈显著正相关性,P<0.01,0<r<1;Skp2在口腔疣状癌组织中的阳性表达与P27的阳性表达呈显著负相关性,P<0.01,-1<r<0。不同肿瘤类型、不同分期口腔疣状癌组织中,Survivin、BCL-2、Skp2、P27阳性表达率差异具有统计学差异性,P<0.05。结论:survivin、BCL-2、Skp2、P27在口腔疣状癌中均可见特异性表达,Survivin与BCL-2在口腔疣状癌组织中的阳性表达以及Skp2与P27在OVC癌组织中的阳性表达均具有明确相关性。

COX-2、CDKN2A在慢性乙型肝炎、肝硬化肝组织中的表达及意义

目的了解慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化肝组织中COX-2、CDKN2A的表达及其与肝脏损伤程度的关系。方法经免疫学及肝穿刺病理学证实为CHB患者46例、乙型肝炎肝硬化17例;正常肝组织10例(来自肝脏良性肿瘤手术切除的标本)。应用病理学判断肝组织的炎症及纤维化程度。采用免疫组化方法、半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹分析法检测COX-2、CDKN2A在组织中的表达。结果 (1)CDKN2A mRNA第一、第二外显子在正常肝、CHB及肝硬化组织的表达水平及CDKN2A蛋白的半定量分析差异有统计学意义(F=28.75、24.86、26.43,P=0.036、0.041、0.038)。(2)正常肝、CHB及肝硬化组织中的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异有统计学意义(χ2=13.48、15.73,P=0.042、0.021);肝组织炎症不同级别的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异具有统计学意义(χ2=22.45、23.67,P=0.038、0.027);肝组织纤维化不同程度的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异具有统计学意义(χ2=24.16、22.53,P=0.024、0.037)。结论 COX-2、CDKN2A表达与CHB、肝硬化发生发展过程明显相关,COX-2、CDKN2A可作为反应HBV相关肝病进展程度的良好指标。

霉茶总黄酮提取物对自发性高血压大鼠胸主动脉重构的影响

目的研究霉茶总黄酮提取物对自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉重构的影响及其机制。方法将SHR随机分为模型组,总黄酮提取物低剂量组(90 mg·kg-1)、中剂量组(180 mg·kg-1)、高剂量组(360 mg·kg-1)和复方罗布麻片组(50 mg·kg-1)。每日给药2次,连续7周,末次给药前禁食12h,末次给药后1 h,处死大鼠,取胸主动脉。部分胸主动脉做病理组织学检查,部分胸主动脉测定其组织ACE、AngⅡ、C-myc、Bcl-2、P27KIP1基因的表达。结果霉茶总黄酮提取物中、高剂量能明显降低血管中膜厚度与管腔内径比值,霉茶总黄酮提取物能下调血管组织中ACE、AngⅡ、C-myc、Bcl-2m RNA表达,同时上调P27KIP1基因表达。结论霉茶总黄酮提取物能抑制SHR的血管重构,其机制与调节RAS系统相关基因及VSMCs增殖相关基因有关。

B细胞淋巴瘤／白血病-2相关X蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白27在中心型软骨肉瘤组织的表达及临床意义

目的研究中心型软骨肉瘤（Central chondrosarcoma）中B细胞淋巴瘤／白血病12相关X蛋白（bax）及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白27（p27^kipl）蛋白的表达与病理分级及预后的关系，并探讨两者表达的临床意义。方法选取60例确诊的中心型软骨肉瘤患者，术后随访超过5年，按照病理分型及预后对其病理标本分别进行分组，并选用20例非肿瘤软骨标本作为对照，采用免疫组织化学法检测上述标本中bax和p27^kipl蛋白的表达。结果60例中心型软骨肉瘤中，bax蛋白各级别间阳性表达率分别为Ⅰ级90％、Ⅱ级78．9％、Ⅲ级66．7％，差异有统计学意义（P〈0．05），在不同预后组中bax蛋白阳性表达率分别为治愈组80．0％、复发组75．0％、转移组75．0％，差异无统计学意义（P〉0．05）；p27^kipl州蛋白各级别阳性表达率分别为Ⅰ级90％、Ⅱ级70．9％、Ⅲ级61．9％，差异有统计学意义（P〈0．05），在不同预后分组中p27^kipl蛋白阳性表达率分别为治愈组80．4％、复发组66．7％、转移组37．5％，差异亦有统计学意义（P〈0．05）。结论bax及p27^kipl蛋白的表达与中心型软骨肉瘤的病理分级明显相关，但bax不能作为判断预后的指标，而p27^kipl蛋白则可作为判断预后的指标。

靶向Bcl-2克服非小细胞肺癌EGFR-TKIs获得性耐药

目的:探讨靶向抗凋亡蛋白Bcl-2克服非小细胞肺癌EGFR-TKIs耐药的作用及重定位Bcl-2靶向抑制剂用于克服耐药的可行性。方法:通过药物浓度梯度递增法构建非小细胞肺癌多代EGFR-TKIs耐药株,根据亲本细胞和多代EGFR-TKIs耐药的非小细胞肺癌细胞的RNA-seq数据筛选出潜在耐药相关基因Bcl-2,通过Western blot检测其在耐药细胞中的蛋白水平。为了探讨Bcl-2诱导耐药的作用,采用siRNA干扰和使用Bcl-2的抑制剂ABT199抑制Bcl-2,通过CCK8法、IncuCyte实时监测和Western blot等方法检测其对亲本和耐药细胞的细胞活力、药物敏感性、增殖和凋亡的影响。随后使用奥希替尼分别处理亲本及耐药细胞,通过WesternBlot检测NRF2受到药物作用后及在耐药细胞中的蛋白水平,并以临床公共数据库分析辅助验证。使用siRNA干扰或NRF2抑制剂ML385敲低或抑制NRF2功能,借助WesternBlot和CCK8法检测其对Bcl-2表达水平及对EGFR-TKI敏感性的影响;通过加入NRF2的激动剂Ki696探究其对Bcl-2的诱导作用、对EGFR-TKI敏感性的影响及取消靶向Bcl-2逆转耐药的作用。结果:Bcl-2在EGFR-TKIs耐药细胞中上调;敲低或抑制Bcl-2后,可选择性抑制耐药细胞的生长和活力,并诱导凋亡,且能逆转包括第三代药物奥希替尼在内的多代EGFR-TKIs耐药;EGFR-TKI可在敏感细胞中诱导NRF2的上调,且耐药细胞中上调的Bcl-2受NRF2调控。结论:EGFR-TKIs耐药细胞通过上调抗凋亡分子Bcl-2获得耐药,该分子的上调受NRF2的调控,靶向Bcl-2则可以逆转耐药。

尼美舒利抑制胃癌细胞蛋白激酶B活性的研究

目的 观察选择性环氧化酶 2 (COX 2 )抑制剂尼美舒利对胃癌细胞株SGC790 1增殖、端粒酶活性和蛋白激酶 (PKB)的影响 ,以探讨其抗肿瘤作用机制。方法 尼美舒利作用胃癌细胞株SGC790 1不同时间后 ,采用噻唑蓝 (MTT)比色法和PCR ELISA半定量法检测细胞的生存率和端粒酶活性 ,PKB活性的检测采用非放射性蛋白激酶活性分析法。结果 尼美舒利抑制SGC790 1细胞的生长呈时间 剂量依赖性 ,同时它也显著抑制SGC790 1细胞的端粒酶和PKB活性 ,且端粒酶活性的降低与PKB活性的抑制有关。结论 选择性COX 2抑制剂能抑制胃癌细胞株的端粒酶活性 ,其作用机制可能与阻碍PKB的活性有关 ,这可能是选择性COX 2抑制剂抗肿瘤的又一新的机制。

补体C3及其相关信号通路在病理性疼痛中的作用

补体系统在识别和消除病原体、清除生理碎片、协调免疫反应以及稳态等方面发挥重要作用,作为炎症反应的一种早期预警信号,异常的补体活动是病理性疼痛发病的重要诱因。补体成分3(complement 3,C3)是病理性疼痛诱发过程中补体系统激活的重要指标。实验及临床流行病学研究发现,多种病理性疼痛中周围与中枢神经C3异常升高,通过结合特异性C3受体直接或间接通过补体信号调控神经元对神经病变的反应。C3可以通过在神经元质膜上表达的特异性补体受体直接调节神经元的生命和死亡的各个方面,也可以通过募集胶质细胞和免疫细胞经各种机制将补体信号传递给神经元间接调节,补体信号指导神经元对组织损伤、神经创伤和神经病变的反应。本文主要对C3在病理性疼痛涉及的细胞因子和信号通路的机制进行综述,探讨C3成为镇痛靶点的可能性。

中药调控相关炎症及凋亡通路治疗慢性萎缩性胃炎研究进展

细胞凋亡是一种基本的生物学现象,主要由炎症浸润转化而来,符合“炎—癌转化”模式。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型,而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。细胞凋亡对于细胞的生存与发展及维持细胞稳态具有重要的意义。细胞凋亡对于慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)的意义主要在于调控其凋亡蛋白、减少炎症反应达到抵抗CAG的作用。研究发现中药复方及中药单体药物治疗CAG效果确切,中药可以调控相关信号通路治疗CAG,主要包括:细胞信号转导抑制因子3/Toll样受体4信号通路、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路、核转录因子-κB信号通路、Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3信号通路、刺猬信号通路等,有效发挥调控炎症反应、细胞增殖与凋亡机制,促进胃黏膜恢复,阻断癌变。目前对这些研究进展缺乏系统性的整理与思考,因此本文将围绕这些信号通路和中药治疗CAG的作用机制的研究结果进行阐述,为中药治疗CAG提供相关的治疗思路。