焦磷酸测序技术检测细胞色素2D6* 10基因多态性方法的建立

目的利用焦磷酸测序技术建立高通量细胞色素2D6*1 0突变检测方法。方法应用带有生物素标记的扩增引物,经聚合酶链式反应扩增及Beads分离,制备该突变位点焦磷酸测序单链模板,并在PyroMarkID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,以经典ABI测序法测序结果作为标准对照,观察批量检测96例高血压患者DNA标本细胞色素2D6* 10突变的可靠性。结果建立了基于焦磷酸测序技术的一次性96例细胞色素2D6* 10突变位点的批量检测平台,经重复性检测和标准的ABI测序可靠性检测,焦磷酸测序法对细胞色素2D6* 10突变位点的突变检出率及重复率均达100%。结论本方法可准确、快速、高通量检测细胞色素2D6*10突变,可应用于该单核苷酸多态性位点批量检测需要。

CYP2D6*10等位基因多态性对文拉法辛血药浓度的影响

目的旨在研究细胞色素P450酶2D6*10(CYP2D6*10)基因多态性对文拉法辛血药浓度的影响。方法随机选择65例抑郁症患者为研究对象,提取其外周血中的DNA并利用特异性的引物对其进行扩增,对得到的扩增产物进行酶切,通过电泳表征酶切结果并分析65例抑郁患者CYP2D6*10基因的基因类型。根据所选择患者基因类型的不同,将其分为3组,即A组:纯合突变(CYP2D6*10/*14),B组:杂合体[CYP2D6*1(*2)/*14]及C组:野生型纯合体[CYP2D6*1(*2)/*5];各组患者口服文拉法辛225 mg后,使用高效液相色谱仪测定患者文拉法辛(VL)和O-去甲文拉法辛(ODVL)的血药浓度以研究文拉法辛在不同基因携带者体内的代谢情况。通过汉密尔顿抑郁量表(HAMD)和药物不良反应量表(TESS)来明确文拉法辛对不同CYP2D6*10基因携带者的治疗效果和产生不良反应情况。结果电泳结果显示,在65名患者中,纯合突变(CYP2D6*10/*14)为29例(44.6%),杂合体([CYP2D6*1(*2)/*14]为17例(26.1%),野生型纯合体[CYP2D6*1(*2)/*5]为19例(29.3%);3组间CVL、CODVL及CODVL/CVL比较均具有显著地差异(P<0.05);根据CODVL/CVL值可知,A组、B组及C组对文拉法辛的代谢类型分别为快型(EM)、中型(IM)及慢型(PM)。各组间TESS评分和HAMD评分差异具有统计学意义(P<0.05)。结论不同CYP2D6*10基因是通过决定抑郁症患者对文拉法辛的代谢类型而影响其血药浓度。

快速测定cyp2d6~*10等位基因类型的PCR法

目的建立一种简单易行经济的方法检测cyp2d6*10等位基因类型,研究其多态性在中国人群中的分布情况。方法建立新的PCR扩增法,并以经典的PCR-RFLP法与之对比,用所建立的新方法测定224份标本。结果两种方法的结果完全一致,标本cyp2d6*10等位基因多态性的分布频率与报道相似。结论所建立的新方法准确、简单,为临床个体化用药提供遗传学依据。

细胞色素P450 2D6*10基因多态性对汉族人群术后吗啡自控镇痛效果的影响

目的:评估细胞色素P450 2D6*10基因多态性,对汉族人群术后吗啡自控镇痛效果的影响。方法:美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesiologists,ASA)Ⅰ～Ⅱ级患者共64名被纳入此实验,56名患者完成实验。根据CYP2D6基因型,患者分为3组:野生型纯合子组(w/w组,n=19),杂合子组(m/w组,n=21)和突变型纯合子组(m/m组,n=16)。在手术结束前10 min给予复合剂量吗啡(静脉注射,0.1 mg/kg)后,患者可通过吗啡(单次给药1 mg)自控输注泵进行自控镇痛(patient-controlled analgesia,PCA)。全身麻醉诱导后采集血样。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)进行CYP2D6*10基因分型。记录并比较术后72 h各组间的吗啡用量及视觉模拟评分(visual analogue score,VAS)。结果:与m/m组相比,m/w组吗啡在T0.5～4 h的累积量显著升高(P<0.05)。3组中各时间段的VAS评分对比差异无统计学意义。结论:在全麻术后0.5 h至4 h急性疼痛治疗中,CYP2D6*10 m/w组所需吗啡的量比m/m组高,以此推测m/w组产生的内源性阿片肽比m/m组低。

CYP2D6＊10基因多态性对托烷司琼术后止吐效果的影响

目的观察CYP2D6*10基因多态性对托烷司琼术后止吐效果的影响。方法选择择期手术行全身麻醉女性患者60例(ASAⅠ～Ⅱ级),手术结束前30 min静脉给予托烷司琼5 mg,记录术后发生恶心呕吐的情况并对其进行呕吐分级。全组患者于麻醉诱导前采集静脉血3 mL,运用等位基因特异扩增法(ASA-PCR)进行CYP2D6*10基因分型,并记录患者术中循环状态、术后疼痛评分及其他不良反应的情况。结果按照变异位点筛选出野生型纯合子(wt/wt)11例(3.1%),杂合子(m/wt)25例(65%),突变型纯合子(m/m)24例(21.7%),突变纯合子患者恶心呕吐发生率低于其他两类患者(P<0.05);术中循环状态平稳、无不良反应。结论 CYP2D6*10基因多态性是个体产生对托烷司琼代谢差异的影响原因之一,其中突变纯合子类患者术后托烷司琼止吐效果较好。

CYP2D6*10基因多态性对曲马多与托烷司琼术后镇痛的影响

目的 观察CYP2D6＊10基因多态性对曲马多与托烷司琼术后镇痛的影响.方法 120例ASA Ⅰ～Ⅱ级择期手术患者,手术部位限于下腹部及下肢,手术时间少于3h.术前静脉采血4 mL,采用等位基因特异扩增法（ASA-PCR）进行CYP2D6＊10基因分型.术后采用曲马多和托烷司琼静脉镇痛,采用视觉模拟评分（VAS）、曲马多负荷量、曲马多总用量评价术后镇痛效果,并统计术后恶心呕吐发生率.结果 按基因型分为三组：19例野生型纯合子（wt/w t）,55例杂合子（Ⅱm/w t）,46例突变型纯合子（m/m）.m/m组术后VAS评分及恶心呕吐发生率明显高于（w[/wt）组和（Ⅱm/w t）组（P＜0.05）.结论 CYP2D6＊10基因多态性使个体对曲马多与托烷司琼的药代动力学产生差异,影响术后镇痛止吐效果.

宁夏回族人群CYP2D6*10等位基因及基因型分布频率

目的了解宁夏回族人群CYP2D6*10等位基因及基因型分布频率,为临床使用CYP2D6底物药物提供依据。方法采用等位基因特异扩增(ASA-PCR)技术,分析了180例回族体检者的CYP2D6基因型。结果CYP2D6*10基因点突变结果中野生型纯合子频率为32.3%,杂合子频率为38.3%,突变型纯合子频率为29.4%,突变型等位基因频率为48.6%。结论宁夏回族人群CYP2D6*10突变基因频率与国内外其他民族有一定差异,在临床应用经CYP2D6代谢的药物时应考虑个体间的代谢速率差异,确保用药安全有效。

CYP2D610等位基因与口服他莫昔芬的乳腺癌患者发生潮热的相关性

目的分析CYP2D6*10等位基因与口服他莫昔芬的乳腺癌患者发生潮热的相关性。方法选取2017年1月-2018年10月我院采用他莫昔芬口服治疗的0-Ⅲ期乳腺癌患者50例,根据是否发生潮热分为发生组和未发生组。采用PCR直接测序法检测患者CYP2D6*10等位基因rs1065852[A/G]位点基因类型,分析CYP2D6*10等位基因类型在两组患者中的分布差异和患者发生潮热的影响因素。结果入组患者rs1065852[A/G]位点检测到野生型纯合子14例(28%)、杂合子13例(26%)、突变型纯合子23例(46%),携带不同rs1065852[A/G]基因型患者的潮热发生率比较,差异无统计学意义(χ~2=2.176,P=0.337)。结论 CYP2D6*10等位基因rs1065852[A/G]位点多态性与口服他莫昔芬乳腺癌患者发生潮热的频率无明显相关性,但该研究结果还需更大样本量进行证实。

癫痫患者CYP2D6＊10基因多态性分析

目的:通过比较本地区健康人与癫痫患者CYP2D6*10基因多态性的差异,探索CYP2D6*10基因多态性与癫痫易感的关系。方法:应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测健康人和癫痫患者CYP2D6*10的基因型分布及等位基因频率,通过χ2检验来比较健康人和癫痫患者的基因型分布差异和等位基因频率差异。结果:健康人和癫痫患者的基因型分布及等位基因频率差异有显著性和高度显著性(P<0.05和P<0.01)。结论:癫痫病的发生与CYP2D6*10的碱基变异具有相关性。

CYP2D610基因多态性检测体系的建立与评价

目的建立一种快速检测CYP2D6*10基因多态性的方法。方法基于荧光定量PCR平台,采用Taqman探针分型技术结合扩增阻滞突变聚合酶链式反应(ARMS-PCR)技术,建立一种适应多种类型临床样本(抗凝全血、石蜡组织切片等)的快速检测CYP2D6*10基因的方法。使用多种类型的临床样本及不同浓度的基因组DNA,对检测体系的准确性、灵敏度进行验证。结果该研究建立的检测体系适用抗凝全血、石蜡包埋组织等多种类型的临床样本,基因组DNA检测范围为30~30000 copy/μL,检测结果不受同源基因干扰,且与Sanger直接测序法检测结果一致率为100%。结论该研究建立的CYP2D6*10荧光定量PCR检测体系准确性好、灵敏度高,具有广泛的应用价值。

CYP2D6*10和CYP2C19*2基因型多态性与接受他莫昔芬治疗乳腺癌患者生存率的相关性研究

目的:研究CYP2D6*10和CYP2C19*2基因型多态性与接受他莫昔芬(tamoxifen,TAM)治疗乳腺癌患者生存率的相关性研究。方法:选择2009至2004年本院甲乳外科和肿瘤内科收治的171名术后服用TAM治疗的雌激素阳性乳腺癌患者,调查TAM使用情况和生存状态等相关资料;收集相关的石蜡组织切片用于DNA提取;用PCR技术检测CYP2D6*10和CYP2C19*2基因型多态性;查明CYP2D6*10和CYP2C19*2基因型多态性与患者生存率的相关性。结果:本次研究中,CYP2D6Wt/Wt、CYP2D6Wt/*10和CYP2D6*10/*10基因型的总生存率(overall survival,OS)类似,差异无统计学意义(P>0.05)。CYP2C19*2/*2基因型的5年OS明显优于CYP2C19 Wt/Wt,差异具有统计学意义(P<0.05);CYP2C19*2/*2基因型的10年OS明显优于CYP2C19 Wt/Wt和CYP2C19 Wt/*2,差异具有统计学意义(P<0.05);但是CYP2C19Wt/Wt与CYP2C19 Wt/*2的5、10年OS差异无统计学意义(P>0.05)。结论:研究结果显示,CYP2D6*10基因型多态性与服用TAM治疗乳腺癌患者的生存率之间不存在相关性;CYP2C19*2基因型多态性与接受TAM治疗乳腺癌患者的生存率之间存在相关性,CYP2C19*2/*2接受TAM治疗乳腺癌患者的生存率最高,CYP2C19 Wt/*2生存率较高,CYP2C19 Wt/Wt较低。

精神分裂症患者CYP2D6*10基因多态性与血清利培酮浓度的量化关系研究

目的探讨精神分裂症患者细胞色素P450(CYP)2D6*10基因多态性对血清利培酮浓度的影响及其量化关系。方法选取2019年5月至2022年5月杭州市第七人民医院收治住院的接受利培酮单一治疗的精神分裂症患者197例为研究对象,采用随机数字表法分为血清利培酮浓度预测模型的预测组99例和验证组98例。采用荧光PCR法检测CYP2D6*10基因多态性,采用超高效液相色谱-串联质谱法检测治疗4周时血清利培酮浓度,运用曲线估计对CYP2D6*10基因多态性与血清利培酮浓度进行量化关系分析。结果药物剂量、CYP2D6*10代谢酶基因型与血清利培酮浓度均显著相关(均P<0.01)。不同CYP2D6*10基因型的血清利培酮浓度与药物剂量之间存在幂函数曲线拟合(r=0.84,P<0.01)。模型验证中,预测利培酮浓度和实际利培酮浓度之间高度相关(r=0.81,P<0.01)。结论不同CYP2D6*10基因型的血清利培酮浓度与药物剂量之间存在幂函数的量化关系。

CYP2D6*10基因型与接受他莫昔芬治疗乳腺癌患者的生存率的相关性研究

目的研究CYP2D6*10基因型对接受他莫昔芬(tamoxifen,TAM)治疗乳腺癌患者的生存率相关性的影响。方法选择该院乳腺外科2008—2003年收治的257名接受TAM治疗乳腺癌患者。调查TAM使用情况和生存状态等相关资料;采集患者外周静脉血5 mL或石蜡切片用于DNA提取;用PCR技术检测CYP2D6*10基因多态性;查明CYP2D6*10基因多态性与患者的生存率相关性的关系。结果该次研究中,携带CYP2D6*10/*10患者占15%(38/257),CYP2D6野生型(Wt)/*10患者占41%(105/257)和CYP2D6Wt/Wt占44%(114/257)。各CYP2D6*10基因型的临床病理参数之间没有相关性差异。在中国CYP2D6*10/*10基因型对接受TAM治疗乳腺癌患者的DFS和OS的影响CYP2D6Wt/Wt和CYP2D6Wt/*10基因型是类似(P>0.05),不存在相关性。结论研究结果显示,CYP2D6*10基因型与接受TAM治疗乳腺癌患者的生存率之间没有相关性。

CYP2D6*10对冠心病患者美托洛尔谷浓度和血压心率的影响

目的探讨CYP2D6*10(c.100 C>T)对冠心病患者血浆中美托洛尔及代谢物α-羟化美托洛尔谷浓度和血压心率的影响。方法将患者分成服用美托洛尔片(n=128)和美托洛尔缓释片(n=126)两组,用Taqman实时荧光定量PCR对CYP2D6*10进行基因分型,UPLC-MS/MS测定美托洛尔和α-羟化美托洛尔的谷浓度,分别比较两组患者中不同CYP2D6*10基因型患者的美托洛尔和α-羟化美托洛尔的剂量校正浓度(C/D)的差异。记录患者美托洛尔达稳态时的静息血压和心率,比较两组患者中不同基因型患者之间血压和心率的差异。结果服用美托洛尔缓释片的患者中,α-羟化美托洛尔谷浓度与收缩压相关(P=0.0204)。CYP2D6*10慢代谢型对两组患者的美托洛尔和α-羟化美托洛尔浓度均有显著影响(P<0.01),两组患者中TT型较CC型和CT型患者美托洛尔C/D高(均P<0.01);与CT型相比,TT型患者α-羟化美托洛尔C/D较低(P<0.01)。服用美托洛尔缓释片的患者中,与CC型相比,CT型(P=0.0281)和TT型(P=0.0196)患者舒张压较低,而两组患者中不同基因型患者之间收缩压和心率均无统计学差异。结论 CYP2D6*10T等位基因突变可使冠心病患者美托洛尔代谢减慢,血浆中美托洛尔浓度增加而α-羟化美托洛尔浓度和舒张压降低,CYP2D6*10对患者美托洛尔达稳态时的静息收缩压和心率无显著影响。

阿尔茨海默病CYP2D6＊10基因多态性与多奈哌齐疗效

目的研究阿尔茨海默病（AD）患者CYP2D6＊10基因多态性对多奈哌齐疗效的影响。方法筛选AD患者110例（AD组）和健康体检者124例（对照组），应用限制性片段长度多态性一聚合酶链反应（RFLP—PCR）方法对两组患者进行CYP2D6＊10基因多态性测定。AD组给予多奈哌齐治疗6个月，于服药前后，应用简易精神状态量表（MMSE）和阿尔茨海默病评定量表认知分量表（ADAS-Cog）进行认知功能测定；应用高效液相色谱一质谱法测定患者血浆中多奈哌齐的稳态血药浓度。结果AD组与对照组CYP2D6＊10的基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义（P〉0．05）；AD组CYP2D6＊10基因突变型（T/T型与C／T型）的血药浓度、MMSE和ADAS．Cog评分与野生型（C／C型）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论多奈哌齐对阿尔茨海默病CYP2D6＊10基因突变型患者的疗效优于野生型患者。

2,10,12-三甲基-6-氧-12H-双苯并基[d,g][1,3,2]-二氧硫杂八环合成和表征

以三乙胺为缚酸剂,1,1-双(2-羟基-5-甲基苯基)乙烷和二氯亚砜为原料,合成了双酚的亚硫酸酯的化合物2,10,12-三甲基-6-氧-12H-双苯并[d,g][1,3,2]-二氧硫杂八环,最佳合成的物质的量比为:双酚∶二氯亚砜∶三乙胺=1∶2.0∶2.2,反应时间为2 h,产品收率为72%(以双酚计)。标题化合物经元素分析、IR、1H NMR对产物进行了结构鉴定,并用X射线单晶衍射法确定其单晶结构。

细胞色素P450酶2D6*10(CYP2D6*10)基因多态性对文拉法辛血药浓度的影响研究

目的对细胞色素P450酶2D6*10(CYP2D6*10)基因多态性对文拉法辛血药浓度产生的影响进行研究。方法抽取我院于2012年3月～2015年3月间收治的患有抑郁症的90例患者作为实验对象,通过研究患者外周血中DNA对其CYP2D6*10基因所表现出的基因类型作出分析,按照其基因类型进行分组,共三组,即将基因类型属纯合突变的患者编为A组,属杂合体的患者编为B组,属野生型纯合体的患者编为C组,所有患者均服用文拉法辛,比较组间血药浓度、治疗效果以及出现的不良反应等情况。结果研究分析得出,本次选取的90例研究对象中,42例基因类型属纯合突变,21例属杂合体,27例属野生型纯合体;比较组间的血药浓度,P<0.05,差异在统计学上有意义;比较组间文拉法辛代谢的类型,P<0.05,差异在统计学上有意义;比较组间汉密尔顿抑郁表评分以及药物的不良反应量表的评分,P<0.05,差异在统计学上有意义。结论抑郁症患者基因(CYP2D6*10)的所属类型决定了其对文拉法辛代谢的情况,进而对其体内的血药浓度产生了影响。

CYP2D6*10、ADRB1基因多态性在高血压患者中的分布

目的:研究高血压患者药物代谢酶CYP2D6*10、药物作用靶点肾上腺素受体ADRB1不同基因型和联合基因型的分布频率。方法:荧光染色原位杂交法检测患者基因型,SPSS统计学系统进行数据处理。结果:高血压患者CYP2D6*10的3种基因型CC、CT、TT分布频率分别为24.44%、41.89%和33.67%;ADRB1的3种基因型GG、GC、CC分布频率分别为7.55%、33.89%和58.56%,两种基因型分布频率与健康人和国内文献报道比较无显著性差异(P>0.05)。CYP2D6*10/ADRB1的9种联合基因型CC/GG、CC/GC、CC/CC、CT/GG、CT/GC、CT/CC、TT/GG、TT/GC、TT/CC分布频率分别为0.72%、9.11%、14.87%、4.80%、13.43%、24.22%、2.16%、12.95%、17.75%,CYP2D6*10/ADRB1的9种联合基因型分布频率与健康人比较有显著性差异(P<0.05)。结论:CYP2D6*10、ADRB1基因多态性不是高血压发病的独立危险因素,65%的高血压患者服用1受体阻滞药时需根据CYP2D6*10/ADRB1联合基因型调整用药剂量。

CYP2D6~* 10/ADRB1基因导向治疗对美托洛尔药动学药效学的影响

目的:研究CYP2D6~* 10/ADRB1基因导向治疗对美托洛尔药动学、药效学的影响,为β1肾上腺素能受体阻滞剂在高血压患者中的应用提供依据。方法:利用荧光染色原位杂交法、高效液相--荧光色谱法检测患者基因型及血药浓度,观察患者血药浓度、血压值、心率变化,SPSS统计学系统处理数据。结果:高血压患者CYP2D6~* 10的三种基因型CC、CT、TT分布频率分别为24.44%、41.89%和33.67%,ADRB1的三种基因型GG、GC、CC分布频率分别为7.55%、33.89%和58.56%,分布频率与健康人和国内文献报道比较无显著性差异(P>0.05)。CYP2D6~* 10/ADRB1联合基因型CC/GG、CC/GC、CC/CC、CT/GG、CT/GC、CT/CC、TT/GG、TT/GC、TT/CC分布频率分别为0.72%、9.11%、14.87%、4.80%、13.43%、24.22%、2.16%、12.95%、17.75%,与健康人比较有显著性差异(P<0.05)。结论:CYP2D6~* 10、ADRB1基因多态性不是高血压发病的独立危险因素,65%的高血压患者服用1受体阻滞剂时需根据CYP2D6~* 10/ADRB1联合基因型调整用药剂量。