胃肠道癌外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

背景与目的:检测上皮组织特异性标志物,如CK19、CK20、多形上皮粘蛋白的核心蛋白(MUC1)及CEA等,在外周血、淋巴结及骨髓中的表达,是诊断早期胃肠道癌微转移的重要手段之一。本研究通过检测手术前、后胃肠道癌患者外周血细胞角蛋白20信使核糖核酸(CK20mRNA)的表达,了解胃肠道癌血行播散转移情况及在围手术期综合治疗中的意义。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链式反应(Nest-RT-PCR)检测62例胃肠道癌患者手术前后外周血CK20mRNA的表达状况。结果:62例样本中,34例(54.3%)术前CK20mRNA检测为阳性,31例(50.0%)术后CK20mRNA检测为阳性,对照组10例正常人及12例良性胃肠病患者CK20mRNA测定均为阴性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CK20mRNA阳性率依次为37.5%、36.3%、66.7%、100.0%。Ⅰ、Ⅱ期患者与Ⅲ、Ⅳ期患者比较,两者间CK20mRNA的阳性率(分别为36.9%和83.3%)有显著性差异(P<0.05)。胃肠道癌的分化程度及癌栓的形成与外周血CK20mRNA的表达无关。有局部淋巴结转移患者与无淋巴结转移患者的阳性表达率有显著性差异(P<0.01)。手术前后外周血CK20mRNA阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论:外周血CK20mRNA检测可作为胃肠道癌微转移的判断指标之一,对临床正确分期及治疗起指导作用。

CK20 mRNA和hTERT mRNA在大肠癌围手术期血行微转移中的转录特征

目的探讨细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA作为大肠癌围手术期血行微转移标志物的价值。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例大肠癌患者术前、术中及术后外周血CK20mRNA和hTERTmRNA的表达,并对不同分化程度、不同Dukes分期的大肠癌患者CK20mRNA和hTERTmRNA的表达进行比较。结果40例大肠癌患者外周血CK20mRNA和hTERTmRNA的表达率,术前分别为47.5%(19/40)和45.0%(18/40),术中为70.0%(28/40)和70.0%(28/40),术后为10.0%(4/40)和32.5%(13/40)。除术后hTERTmRNA阳性率与术前无显著差异(P>0.05)外,术中外周血CK20mRNA、hTERTmRNA阳性率和表达强度(与内参照β-actin比值)均显著高于术前(P<0.01,P<0.05),术后明显低于术前和术中(P<0.01)。hTERTmRNA在低分化肿瘤的表达明显高于高、中分化组(P<0.05),而CK20mRNA在低分化肿瘤的表达强度低于高、中分化组(P<0.01)。大肠癌围手术期DukesB期和C+D期之间CK20mRNA和hTERTmRNA均无显著性差异(P>0.05)。结论大肠癌患者围手术期血行微转移的发生几率较高,病理分化程度低者更易发生,但与Dukes分期无明显相关,CK20mRNA和hTERTmRNA联合检测对大肠癌血液微转移具有较高的敏感性和特异性,是判断围手术期血行微转移的良好标志物。

核基质蛋白22、细胞角质素20和存活素mRNA对膀胱癌诊断价值的研究

目的探讨核基质蛋白22(NMP22)、细胞角质素20(CK20)和存活素mRNA在膀胱癌诊断中临床应用价值。方法选择因血尿和膀胱刺激症状到该院泌尿外科诊治的患者107例,分为对照组(44例)和观察组(63例)。观察组中按照肿瘤TNM分期和WHO分级,包括T1s^T1 44例,T2~T4 19例;G1 14例,G2 31例,G3 18例;另外选择45例健康志愿者作为健康组。通过ELISA方法检测所有志愿者尿液中NMP22水平,通过RT-PCR方法检测对照组和观察组受试者尿液中CK20和存活素mRNA表达量,比较这3种检测方法的灵敏度和特异度,以评估对膀胱癌诊断的价值。结果观察组患者尿液中NMP22的水平(37.92U/mL)显著高于健康组(4.31U/mL)和对照组(7.04U/mL),差异有统计学意义(P<0.05)。NMP22检测指标的灵敏度和特异度分别为82.54%和61.36%,与肿瘤分期和分级无明显相关性;CK20和存活素mRNA检测指标的灵敏度和特异度分别为83.70%、63.64%和85.71%、90.91%,与肿瘤分期有显著的相关性;T2~T4亚组患者CK20和存活素mRNA检测灵敏度高于T1s^T1亚组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论尿液NMP22、CK20和存活素mRNA检测对膀胱癌的诊断均有较高的灵敏度和特异度,是诊断膀胱癌较好的无创性手段。

反转录聚合酶链反应检测胃癌病人中心静脉血CK20mRNA表达及其临床意义

目的:运用巢式反转录聚合酶链反应(nest RT-PCR)技术,探讨细胞角蛋白20(CK20mRNA)在胃癌病人中心静脉血的表达及其临床意义。方法:nest RT-PCR检测胃癌病人中心静脉血及良性疾病病人中心静脉血CK20mRNA,表达情况与临床病理因素进行分析。结果:64例胃癌病人34例CK20mRNA阳性,阳性率为53.1%,良性病病人16例均阴性;胃癌病人血液CK20mRNA的阳性率与肿瘤大小、腹腔和肝转移、临床分期相关(P<0.05),与病理组织学类型无相关性(P>0.05);8例早期胃癌病人中2例CK20mRNA阳性。结论:扩增CK20mRNA的nest RT-PCR方法是检测胃癌病人中心静脉血微转移敏感而特异的方法。

晨尿脱落细胞角蛋白CK-20基因表达的检测及其临床意义

目的 探讨尿脱落细胞角蛋白 (CK 2 0 )基因表达的临床意义。方法 采用逆转录 -聚合酶链反应技术 ,检测 73例膀胱移行上皮细胞癌 (TCC)患者 (研究组 )、2 0例泌尿系统非恶性肿瘤疾病患者 (对照组 )和 2 1例正常人 (正常组 )晨尿脱落细胞CK 2 0基因表达 ,同时行尿脱落细胞学检查。结果 研究组尿脱落细胞CK 2 0基因表达的检出率为 86.3 % (63 /73 ) ,明显高于尿脱落细胞学检查对TCC的检出率 [2 0 .5 % (15 /73 ) ] ;对照组检出率为 2 0 .0 % (4 /2 0 ) ;正常组检出率为 0 (0 /2 1)。G3 级TCC患者尿脱落细胞CK 2 0基因表达的检出率为 10 0 .0 % (2 0 /2 0 )明显高于G1、G2 级患者的 76.5 % (2 6/3 4)和 89.5 % (17/19) ;T2 ～T4期尿脱落细胞CK 2 0基因表达的检出率为 93 .1% (2 7/2 9) ,明显高于Tis T1期的 81.8% (3 6/4 4)。结论 尿脱落细胞CK 2 0基因表达的检测有望成为 1种灵敏、特异的TCC标志物。

大肠癌患者外周血循环癌细胞检测的临床意义

目的 探讨肠癌外周血循环癌细胞检测的临床意义。方法 以ＣＫ－２０ｍＲＮＡ为靶分子，ＲＴ－ＰＣＲ技术检测３种癌细胞株（结脾性腺癌株ＷＳ－４８０、胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１、食管癌细胞株ＴＥ－１１）和６７例大肠癌患者外周血细胞ＣＫ－２０ｍＲＮＡ的表达。结果 三种癌细胞株中，只有结肠癌细胞表达ＣＫ－２０ｍＲＮＡ，ＲＴ－ＰＣＲ技术能检出１０＾７个单核细胞中的一个肿瘤细胞，６７例患者中。

胃窦癌肝十二指肠韧带淋巴结微转移与清扫

目的检测进展期胃窦癌肝十二指肠韧带淋巴结微转移状况,探讨进展期胃窦癌根治术肝十二指肠韧带淋巴结清扫的必要性。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,以细胞角蛋白20(CK20)mRNA为标志基因,对45例进展期胃窦癌患者的86枚肝十二指肠韧带淋巴结标本进行检测。结果45例进展期胃窦癌患者有23例出现肝十二指肠韧带淋巴结CK20阳性(51.11%),与常规病理检查相比,存在显著性差异(P<0.01);常规病理检查阴性的86枚淋巴结有46枚CK20阳性(53.49%),亦存在显著性差异(P<0.01)。肝十二指肠韧带淋巴结微转移与临床分期、浸润深度以及肿瘤分化程度显著相关。结论RT-PCR技术检测CK20 mRNA是诊断胃窦癌淋巴结微转移敏感而特异的方法,进展期胃窦癌根治术应包括肝十二指肠韧带淋巴结的清扫。

贲门癌患者外周血微转移的检测及其临床意义

目的探讨Cytokeratin 20（CK20）mRNA是否可以作为贲门癌患者外周血微转移的标志物。方法以巢式逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测58例贲门癌患者术前、术中、术后外周血CK20mRNA的表达情况。结果58例贲门癌患者术前外周血中CK20mRNA阳性率为36．2％。接受切除术的52例患者术前、术中、术后的阳性率分别为30．8％、42．3％、13．5％。术前组与术中组阳性率的差异无统计学意义（P〉0．05），术前组与术后组阳性率的差异有统计学意义（P〈0．05），术中组与术后组阳性率的差异有统计学意义（P〈0．01）。结论CK20mRNA作为贲门癌患者外周血微转移的标志物，具有较高的敏感性和特异性。