联合检测外周血及腹水中CK20水平对结直肠癌微转移的意义

目的检测患者术前外周血和腹水中细胞角蛋白(CK20)的水平对结直肠癌微转移的意义。方法采用改进的T7-RNA聚合酶催化的荧光扩增法(FACTT-T7 RNA),通过与酶联免疫法(ELISA)和流式细胞学技术(FCM)的对比,对附属第三医院2012年11月至2013年11月收治的56例结直肠癌患者术前外周血和术中腹水的CK20水平进行检测评价。结果 56例结直肠癌患者术中,外周血CK20阳性率FACTT为57.14%(32/56),ELISA为25.00%(14/56);腹水CK20阳性率FACTT为30.36%(17/56),FCM为14.29%(8/56),组内对比差异具有统计学意义(P<0.05);FACTT方法检测外周血联合腹水CK20阳性检出率达73.21%(41/56),组间对比率差异具有显著统计学意义(分别为P<0.05,P<0.01),CK20的表达与肿瘤TNM分期、分化程度有关(P<0.05)。结论 FACTT方法联合检测外周血和腹水中CK20水平的阳性表达率高,对结直肠癌患者的微转移具有重要的临床意义。

膀胱癌CK20表达的临床应用

目的探讨CK20在膀胱癌中的表达与膀胱癌的侵袭、转移及预后的关系。方法用免疫组化SP法检测154例膀胱癌组织中CK20的表达。结果 CK20在103例肿瘤组织中有表达,阳性率为66.9%。CK20的表达和膀胱癌的T分期及远处转移呈正相关(P<0.05)。结论 CK20可能参与了膀胱癌的侵袭与转移,CK20可作为预后判断因子,结合病理分级和临床分期分析能提高对膀胱癌患者预后判断的准确性。

逆转录聚合酶链反应检测结直肠癌淋巴结微转移的临床意义

背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋巴结中细胞角质蛋白CK20mRNA,揭示微转移灶的存在,并与常规病理苏木精伊红(HE)染色和免疫组化染色结果进行比较;分析HE染色和RT-PCR检测结果对判定临床病理分期和统计生存率的影响。结果:共检测432个淋巴结,HE染色、免疫组化染色和RT-PCR法淋巴结转移检出率分别为57.2%、62.3%和73.1%。HE染色和免疫组化的检出率无显著性差异(P>0.05),而HE染色和RT-PCR法检测结果有显著性差异(P<0.05)。56例患者中,按HE染色结果确定的PN0、PN1和PN2期,其5年无复发转移生存率分别为80%、60%和50%;通过RT-PCR技术检测,升级后的PN0、PN1和PN2期5年无复发转移生存率分别为100%、61.9%和55.6%,两种方法分析的结果有显著性差异(P<0.05)。结论:HE染色未确切指出淋巴结微转移癌;RT-PCR法检测CK20mRNA可以推断淋巴结微转移癌的存在,从而有助于确定结直肠癌临床分期和预测预后。

免疫组织化学和RT-PCR法检测胃癌淋巴结微转移的临床研究

目的:评价胃癌淋巴结微转移的临床意义。方法:对55例胃癌根治性手术切除的淋巴结转移资料进行回顾性分析,共切取淋巴结1225枚,每例平均切除13-49枚。采用免疫组织化学(IHC)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法同步检测细胞角蛋白20(CK20)和癌胚抗原(CEA)的表达,对比分析胃癌淋巴结微转移与临床病理参数和预后的关系。结果:IHC和RT-PCR法检测淋巴结的转移率从HE染色的74.5%分别上升为83.6%和90.9%;IHC和RT-PCR法检测微转移度分别为7.4%和17.3%;经IHC和RT-PCR法检测重新分期率分别为20.0%和40.0%;淋巴结微转移的发生与肿瘤大小、部位无关,与肿瘤Lauren分型和浸润深度密切相关;肿瘤Lauren分型为独立预后因素。结论:IHC和RT-PCR法是检测胃癌淋巴结微转移的有效手段,能够准确判断临床分期,为制定治疗方案提供依据;微转移与胃癌的预后无明显关系。

巢式RT-PCR检测胃癌患者外周血循环癌细胞的研究

目的 分析胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA及CEAmRNA的异常表达及意义。方法 采用RT PCR方法检测 5 2例胃癌患者术前外周血中CK 2 0mRNA及CEAmRNA的表达。结果 胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA、CEAmRNA阳性表达率分别为 42 .3 % (2 2 /5 2 )及 5 1.9% (2 7/5 2 ) ,CK 2 0mRNA和CEAmRNA两者中至少 1个基因为阳性的表达率为 63 .5 % (3 3 /5 2 )。胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA表达与胃癌的远处转移有关 ,CEAmRNA表达、CK 2 0mRNA和CEAmRNA都表达、CK 2 0mR NA和CEAmRNA两者中至少 1个表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移和远处转移相关 (P <0 .0 5 )。结论 胃癌患者外周血CK 2 0和CEA的RT PCR检测有助于患者预后的判断 ;联合检测CK 2

细胞角蛋白20在尿路上皮癌中的表达及意义

目的探讨细胞角蛋白20(CK20)在尿路上皮癌中的表达形式及意义。方法选取29例病理确诊的尿路上皮癌,采用免疫组织化学Elivision TMsuper二步法进行CK20检测,并与20例非肿瘤尿路上皮病变进行对比分析。结果 CK20在尿路上皮癌中阳性表达率为51.7%,与非肿瘤尿路上皮病变比较,差异有统计学意义(P<0.05);CK20在尿路上皮癌中阴性表达率为48.3%,与非肿瘤尿路上皮病变比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CK20在尿路上皮癌中存在过表达与表达丢失两种形式,CK20对尿路上皮癌的诊断有重要价值。

血管内皮生长因子、细胞角蛋白20在膀胱移行细胞癌表达及临床意义

目的:研究血管内皮生长因子()、细胞角蛋白()在膀胱移行细胞癌表达及临床意义。VEGF20CK20方法:采用免疫组化法对例膀胱移行细胞癌及例正常膀胱粘膜组织进行、检测。S-P3013VEGFCK20结果:、在膀胱移行VEGFCK20细胞癌表达的阳性率分别为()、(),正常膀胱粘膜例、阳性表达率分别为83.3%25/3063.3%19/3013VEGFCK206.7%()、();与病理分期、分级有正相关关系;与表达有相关趋势呈正相关;有远处淋巴结转移患者2/3000/30VEGFCK20与均呈高表达。VEGFCK20结论:、在膀胱移行细胞癌高表达与癌细胞的增殖、分化及转移有关,可作为膀胱移VEGFCK20行细胞癌辅助诊断、恶性程度评价、预后判断的指标。

纳米炭在腔镜直肠癌根治术淋巴结示踪、定位、清扫和转移中的应用

目的:探讨纳米炭示踪剂在腹腔镜直肠癌根治术淋巴结的示踪、定位、清扫和转移中的应用。方法:选取2017年9月-2020年7月荆州市第一人民医院胃肠外科收治的71例直肠癌患者,随机分为实验组(纳米炭组)37例和对照组34例。术后记录实验组、对照组检出所有淋巴结直径、数量、直径≤5 mm的淋巴结数量及阳性淋巴结数量。将实验组所有淋巴结分别进行常规HE染色及CK20免疫组化,对CK20免疫组化与HE染色检出淋巴结转移进行分析。结果:两组均顺利完成手术,实验组(760枚)与对照组(459枚)检获的总淋巴结数量差异有统计学意义(P<0.05)。实验组所有患者淋巴结总数均大于12枚,而对照组有8例小于12枚,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组(460枚)与对照组(197枚)在术中检获直径≤5 mm的微小淋巴结数量差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者常规病理HE染色检出的淋巴结转移数目及术后病理分期的比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验组760枚淋巴结中,常规HE染色(43枚)与CK20免疫组化(64枚)在检测淋巴结转移方面比较差异有统计学意义(P<0.05),CK20与HE染色对直肠癌Ⅲ期患者诊断率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:将纳米炭示踪剂运用于腹腔镜直肠癌根治术中,能有效定位肿瘤,术中指导医师进行淋巴结清扫,提高淋巴结清扫数量,增加微小淋巴结(直径≤5 mm)检出的数量;术后使用CK20免疫组化可以提高淋巴结微小转移灶的检出,有助于提高术后病理分期的准确性及制订患者术后的个体化辅助治疗。

IHC和RT-PCR法对检测胃癌区域淋巴结微转移的价值及其意义

目的探讨免疫组织化学方法(IHC)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)两种方法对检测胃癌区域淋巴结微转移的临床价值及意义。方法对85例胃癌根治性手术切除的淋巴结转移患者的临床资料进行了回顾性分析。共切取淋巴结1835枚,每例平均切除21.7枚。采用IHC和RT-PCR法检测细胞角蛋白20(CK20)的表达,研究淋巴结微转移与临床病理参数和预后的关系。结果患者的淋巴结转移率经IHC法和RT-PCR法检测从HE染色的75.3%分别上升为83.5%和90.6%。经IHC和RT-PCR法检测重新分期率分别为18.8%和37.6%。淋巴结微转移的发生与肿瘤大小、部位无关,与肿瘤Lauren分型和浸润深度密切相关。82例完成随访,平均随访时间为21.2个月。微转移与预后无明显关系。结论IHC和RT-PCR法是检测胃癌淋巴结微转移的有效手段,能准确判断临床分期,可为制定治疗方案提供依据。

人细胞角蛋白20的原核表达及其单克隆抗体的制备

目的原核表达人细胞角蛋白20(cytokeratin 20,CK20),并制备其单克隆抗体。方法利用CK20蛋白的cDNA扩增CK20的外显子基因,插入原核表达载体pET28a中,构建重组表达质粒pET28a-ck20,转化大肠埃希菌BL21中,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经亲和层析柱纯化后,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,通过间接ELISA法对杂交瘤细胞进行筛选,小鼠体内诱生腹水法批量制备单抗,并进行亚型、Western blot及免疫组化鉴定。结果重组表达质粒pET28a-ck20经双酶切及测序证明构建正确,纯化的重组CK20蛋白纯度在90%以上。制备的CK20单抗重链类型为IgG2b,轻链类型为Kappa链;能够很好地与CK20蛋白抗原产生结合反应,在1∶200稀释后能够较好地对结肠腺癌组织进行染色,且效果优于进口产品。结论利用重组表达的人CK20蛋白制备的单抗可用于检测相关组织中该蛋白的表达,为CK20的临床诊断及研究提供了有效的工具。