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A Review: Interactions of Equine Herpesvirus-1 with Immune System and Equine Lymphocyte 被引量:2
1
作者 Nor Dini Rusli Khairiyah Binti Mat Hasnita Che Harun 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2014年第12期294-307,共14页
Equine herpesvirus-1 (EHV-1) remains one of the most common viral pathogens affecting horses worldwide presenting as a persistent infection which can establish latency in nerve ganglia (trigeminal ganglion), lymphoid ... Equine herpesvirus-1 (EHV-1) remains one of the most common viral pathogens affecting horses worldwide presenting as a persistent infection which can establish latency in nerve ganglia (trigeminal ganglion), lymphoid tissues of the respiratory tract and peripheral blood lymphocytes. EHV-1 infection induces both humoral and cellular immune responses in horses. Virus neutralising antibody, particularly in the nasopharynx, is to kill free virus shed from infected epithelial cells. Hence this antibody has important functions in reducing virus shedding and spreading infection to cohorts. Cellular immune responses, particularly those carried out by cytotoxic T lymphocyte (CTL), have been shown to be effective in killing virus-infected cells in vitro. This review underlines the state of knowledge regarding immunity to EHV-1 and also its interaction with equine lymphocyte. Finally, the review also includes the importance of the viral immediate early (IE) protein in the pathogenesis of EHV-1. This information can be used as the basis for future research. 展开更多
关键词 EQUINE Herpesvirus-1 (EHV-1) lymphocyte CYtOtOXIC t lymphocyte (ctl) Immune Response Peripheral Blood MONONUCLEAR cell (PBMC)
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猪源病毒细胞毒性T淋巴细胞表位研究进展
2
作者 鲜钰涵 冯宏盛 +7 位作者 高永宇 李海洋 杨思宇 桑辰君 曹玉蝶 唐越 李子彬 高凤山 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3086-3099,共14页
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子,也称为猪白细胞抗原(swine leukocyte antigen,SLA)Ⅰ类分子,在机体抗原递呈、器官移植、细胞免疫应答和调控等方面起重要作用。细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T ly... 主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子,也称为猪白细胞抗原(swine leukocyte antigen,SLA)Ⅰ类分子,在机体抗原递呈、器官移植、细胞免疫应答和调控等方面起重要作用。细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位是抗原经抗原递呈细胞加工后,与SLA-Ⅰ类分子结合并递呈的线性肽段,具有高度特异性,在机体抗原识别递呈和细胞免疫抵抗病毒感染方面发挥着关键作用。CTL表位能够刺激CTLs发挥细胞杀伤作用,主要表现为杀伤病毒。作者将对口蹄疫病毒、非洲猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒等几种重要的猪源病毒的CTL表位研究现状进行综述,并利用生物信息学手段分析SLA-Ⅰ与CTL表位结合基序特征,以期为今后相关猪源病毒CTL表位的研究和多表位疫苗的设计提供参考。 展开更多
关键词 细胞毒性t淋巴细胞(ctl)表位 猪口蹄疫病毒 非洲猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒
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The Cell Biology of Systemic Hyperinflammation Resulting from Failed Cytolytic Target Cell Killing
3
作者 Bor Luen Tang 《CellBio》 2015年第3期37-45,共9页
Mutations in genes encoding a key component of cytotoxic granules, or the machinery for their release, underlie the systemic hyperiflammatory symptoms of familial hemophagocytic lymphohistiocytosis (FHL), a typically ... Mutations in genes encoding a key component of cytotoxic granules, or the machinery for their release, underlie the systemic hyperiflammatory symptoms of familial hemophagocytic lymphohistiocytosis (FHL), a typically pediatric onset autosomal recessive disorder with five known genetic subtypes (FHL1 - 5). FHL1 mutations have been mapped to chromosome 9, while the respective genes mutated in FHL2 (PRF1), FHL3 (UNC13D/Munc13-4), FHL4 (STX11) and FHL5 (STXBP2/ Munc18b/Munc18-2) have been identified. Perforin gene mutation directly affected the cytolytic activity of the cytotoxic granules. All the other FHL mutations appear to affect some aspect of cytotoxic granule exocytosis, resulting in impaired target cell killing by cytolytic T lymphocytes (CTLs) and/or natural killer (NK) cells. Recent findings suggest that failure to kill and detach from target cells, and prolonged synapse connection time, promote cytokine hypersecretion by the defective CTLs and NKs, which in turn result in systemic inflammation. Deciphering the genetics of FHL has contributed towards our understanding of the cell biology of hyperinflammatory responses and hemophagocytic lymphohistiocytosis accompanying pathological conditions such as cancer and viral infections. 展开更多
关键词 Cytokine Storms cytolytic t lymphocytes (ctls) FAMILIAL HEMOPHAGOCYtIC LYMPHOHIStIOCYtOSIS (FHL) Natural Killer (NK) Cells Hyperinflammation
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HBsAg体外冲击的慢性乙肝患者树突状细胞的生物学特性及其对HBV特异性CTL的诱导作用 被引量:12
4
作者 汪晓莺 孙晓雷 +3 位作者 汤伟 孙伟红 苏丽 张学光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期850-853,共4页
目的 :研究HBsAg冲击的慢性乙肝患者单核细胞来源的树突状细胞 (DCs)的功能状况及体外对HBV特异性CTL的诱导作用 ,初步探讨诱导特异性抗HBV细胞免疫的途径。方法 :分离慢性乙肝患者外周血单核细胞 ,以GM CSF +IL 4 +TNF α培养诱导DCs,... 目的 :研究HBsAg冲击的慢性乙肝患者单核细胞来源的树突状细胞 (DCs)的功能状况及体外对HBV特异性CTL的诱导作用 ,初步探讨诱导特异性抗HBV细胞免疫的途径。方法 :分离慢性乙肝患者外周血单核细胞 ,以GM CSF +IL 4 +TNF α培养诱导DCs,加入HBsAg冲击以诱导HBV特异性DCs。采用FCM测定细胞表面免疫分子CD1a、CD83、CD86、CD80、CD4 0以及HLA DR的表达水平 ,ELISA法检测培养上清中细胞因子IL 6、IL 12的分泌含量 ,MTT法测定DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力 ,LDH法检测DC诱导的患者外周血T细胞对HepG2 2 2 15 (转染HBVDNA)、HepG2肝癌细胞株及K5 6 2白血病细胞株的细胞毒作用。结果 :HBsAg冲击的DC其表达CD1a、CD83、CD86、CD80、CD4 0、HLA DR表面分子明显高于对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,分泌IL 12的水平也高于对照组 (P <0 0 1) ,而分泌IL 6的水平则较对照组显著降低(P <0 0 1) ;HBsAg冲击的DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力明显增强 (P <0 0 5 ) ,并可有效地诱导自体CTL对转HBV基因的HepG2 2 2 15细胞高效特异性杀伤作用 (P <0 0 1)。结论 :慢性乙型肝炎患者单核细胞来源的DCs经HBsAg抗原冲击后 ,生物学活性增强 ,并且能有效地诱导对HBV特异性反应的CTL。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 树突状细胞 HBSAG 细胞毒性t淋巴细胞
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肝癌热休克蛋白-抗原肽复合物的构建及诱导CTL反应的初步研究 被引量:9
5
作者 郭爱林 隋延仿 +3 位作者 张立红 曲萍 王小平 叶菁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期725-728,共4页
目的:研究体外构建热休克蛋白-抗原肽复合物的方法,观察其在体外的抗肿瘤作用。方法:用经43℃热处理1小时的人肝细胞悬液,经过裂解液裂解,60%~80%饱和硫酸铵沉淀,用SephadexG-100柱制备,取分子量为70KD组份,Westernblot进行性质鉴定。... 目的:研究体外构建热休克蛋白-抗原肽复合物的方法,观察其在体外的抗肿瘤作用。方法:用经43℃热处理1小时的人肝细胞悬液,经过裂解液裂解,60%~80%饱和硫酸铵沉淀,用SephadexG-100柱制备,取分子量为70KD组份,Westernblot进行性质鉴定。应用多肽解离液处理该组份,SephadexG-25柱过滤获得未结合多肽的蛋白分子,使其在体外与肝癌抗原肽SLIVHLNEV结合,构建成热休克蛋白-抗原肽复合物。应用此复合物刺激树突状细胞,激活同源外周血T淋巴细胞产生肿瘤特异性杀伤T淋巴细胞(CTL),应用MTT法检测其对T2细胞及肿瘤细胞的杀伤活性。结果:所得蛋白经电泳及Westernblot进行蛋白分子量及性质鉴定为热休克蛋白70。SephadexG-25柱双分离法证实应用上述方法成功构建了肝癌热休克蛋白70-抗原肽复合物,用该复合物负荷树突状细胞在体外可以诱导出较强的肝癌抗原肽特异性CTL,可以杀伤负荷有该肽的T2细胞及递呈该肽的肿瘤细胞系。结论:体外构建的热休克蛋白-抗原肽复合物可以增强抗原肽诱导CTL反应能力,热休克蛋白是良好的T细胞免疫佐剂,有可能在肿瘤疫苗治疗中发挥重要作用。 展开更多
关键词 热休克蛋白 肝癌 抗原肽 特异性杀伤性t淋巴细胞 树突状细胞
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胞质转导肽-HBcAg_(18-27)-Tapasin诱导C57BL/6小鼠T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及HBV特异性CTL的表达 被引量:4
6
作者 唐余燕 陈小华 +2 位作者 汤正好 臧国庆 余永胜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期229-232,共4页
目的观察融合蛋白胞质转导肽(CTP)-HBcAg18-27-Tapasin诱导C57BL/6小鼠T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及HBV特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的表达。方法 C57BL/6小鼠随机分为实验组CTP-HBcAg18-27-Tapasin、对照组CTP-HBcAg18-27、HBcAg18-27-... 目的观察融合蛋白胞质转导肽(CTP)-HBcAg18-27-Tapasin诱导C57BL/6小鼠T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及HBV特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的表达。方法 C57BL/6小鼠随机分为实验组CTP-HBcAg18-27-Tapasin、对照组CTP-HBcAg18-27、HBcAg18-27-Tapasin及空白组(生理盐水)。经肌肉免疫小鼠,ELISA检测T淋巴细胞分泌细胞因子;流式细胞术(FCM)检测T淋巴细胞内的细胞因子;CCK-8法检测T淋巴细胞增殖活性。结果实验组能有效刺激小鼠T细胞分泌Th1型细胞因子;FCM检测实验组融合蛋白诱导的CTL水平明显高于其他组;且实验组T淋巴细胞增殖活性明显高于对照组及空白组。结论 CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白免疫C57BL/6小鼠后,能提高T淋巴细胞增殖活性,能有效刺激T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及增加CTLs的表达。 展开更多
关键词 胞质转导肽 tAPASIN t细胞增殖 细胞毒t淋巴细胞
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穿心莲二萜类化合物对B16细胞致敏小鼠CTL杀伤活性的影响 被引量:3
7
作者 李满妹 徐炎 +4 位作者 程燕 张坤 吕艳青 姚新生 栗原博 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期688-692,共5页
目的研究穿心莲二萜类化合物(DAP)对B16细胞致敏小鼠脾脏CTL杀伤活性的影响。方法将♂BALB/c小鼠分为对照组、致敏组、50mg·kg-1及150mg·kg-1DAP给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群,乳酸脱氢酶(LDH... 目的研究穿心莲二萜类化合物(DAP)对B16细胞致敏小鼠脾脏CTL杀伤活性的影响。方法将♂BALB/c小鼠分为对照组、致敏组、50mg·kg-1及150mg·kg-1DAP给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群,乳酸脱氢酶(LDH)法和DiO/PI双染色法分别测定CTL杀伤活性。结果50mg·kg-1及150mg·kg-1DAP口服给药可以增加B16细胞致敏小鼠脾脏淋巴细胞中T细胞及CD8+T细胞比例,降低T细胞中CD4+/CD8+比值并增强CTL对B16细胞的杀伤活性。结论DAP可增加B16细胞致敏小鼠脾脏T细胞比例及提高CTL杀伤活性。 展开更多
关键词 穿心莲 二萜类化合物 B16细胞 ctl 流式细胞术
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白血病相关抗原MLAA-34 HLA-A2^+限制性CTL表位的预测及鉴定 被引量:4
8
作者 赵建强 何爱丽 +3 位作者 张王刚 张磊 古流芳 张文娟 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期424-428,共5页
目的采用生物信息学方法预测和鉴定白血病相关抗原MLAA-34 HLA-A2+限制性CTL表位,探索基于MLAA-34为靶标的白血病免疫治疗的可能性。方法采用超基序法和量化基序法对靶抗原MLAA-34 HLA-A2+限制性CTL表位进行预测;选取评分较高且排位在... 目的采用生物信息学方法预测和鉴定白血病相关抗原MLAA-34 HLA-A2+限制性CTL表位,探索基于MLAA-34为靶标的白血病免疫治疗的可能性。方法采用超基序法和量化基序法对靶抗原MLAA-34 HLA-A2+限制性CTL表位进行预测;选取评分较高且排位在前10位的抗原表位肽为候选表位肽,并进行人工合成。利用T2细胞,以肽结合试验及流式细胞术检测各候选CTL表位肽的结合亲和力[以荧光指数(fluorescence index,FI)表示];选取亲和力较高的4种多肽进行特异性CTLs的体外扩增,同时用LDH释放法对CTLs的活性进行检测。结果预测的前10位候选MLAA-34 CTL表位肽中,MLAA2(ILLKNQPKL)、MLAA3(LLTRHKVLV)、MLAA5(LLVTLI-ADL)和MLAA9(YLIKQIRDL)具有较高的亲和力,其FI分别为1.65、1.73、1.82、1.02,可作为候选表位肽进一步分析。细胞毒实验分析显示,MLAA5(LLVTLIADL)可在体外有效诱导特异性CTLs的产生,杀伤靶细胞。结论 MLAA5(LLVTLIADL)为白血病相关抗原MLAA-34的HLA-A2+限制性CTL表位,为基于MLAA-34的治疗性多肽疫苗的设计制备奠定了基础。 展开更多
关键词 白血病相关抗原 MLAA-34 ctl表位 生物信息学方法
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HLA-A^*0201限制性CTL表位肽的三维定量构效关系的研究 被引量:6
9
作者 林治华 胡勇 吴玉章 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第18期1835-1840,共6页
运用比较分子力场 (CoMFA)和比较分子相似性指数分析 (CoMSIA)方法研究了 5 0个HLA A 0 2 0 1限制性CTL表位九肽结构与亲和性间的关系 ,另外 15个表位九肽作为预测集用于检验模型的预测能力 .结果表明采用CoMSIA得到的构效关系模型 (q2 ... 运用比较分子力场 (CoMFA)和比较分子相似性指数分析 (CoMSIA)方法研究了 5 0个HLA A 0 2 0 1限制性CTL表位九肽结构与亲和性间的关系 ,另外 15个表位九肽作为预测集用于检验模型的预测能力 .结果表明采用CoMSIA得到的构效关系模型 (q2 =0 .62 8,r2 =0 .997,F =840 .419)要明显优于采用CoMFA得到的构效关系模型 .在CoMSIA计算中 ,当引入疏水场时 ,三维构效关系模型得到明显改善 ,通过该三维构效关系模型 ,可较精确地估算预测集中 15个CTL表位肽与HLA A 0 2 0 1间的亲和力 (r2pred=0 .743 ) .通过分析分子场等值面图在空间的分布 ,可以观察到表位肽分子周围的立体及疏水特征对表位肽与HLA A 0 2 0 1间结合亲和力的影响 ,从而为进一步对CTL表位肽进行结构改造并基于此进行治疗性疫苗分子设计提供理论基础 . 展开更多
关键词 细胞毒性t淋巴细胞 肿瘤免疫学 HLA ctl表位肽 结构 亲和性 三维定量构效关系 比较分子力场 比较分子相似性指数分析
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EBV-LMP2A肽诱导的特异性CTL对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用 被引量:1
10
作者 杜娟 苏舒 +4 位作者 孟凡岩 邵洁 徐秋萍 邹征云 刘宝瑞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期938-943,共6页
目的:探讨HLA限制性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)表位肽EBV-潜伏膜蛋白2A(EBV-latent membrane protein2A,EBV-LMP2A)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用。方法:选用南京大学医学院附属肿瘤医院肿瘤中心HL... 目的:探讨HLA限制性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)表位肽EBV-潜伏膜蛋白2A(EBV-latent membrane protein2A,EBV-LMP2A)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用。方法:选用南京大学医学院附属肿瘤医院肿瘤中心HLA-A2阳性胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)、人胃腺癌细胞株(AGS)和人EBV阳性胃腺癌细胞株(AGSEBV),通过改良的体外细胞培养技术用HLA-A2限制性的EBV-LMP2A抗原肽从人PBMC中诱导扩增出特异性CTL,采用四聚体技术和流式细胞术检测抗原肽诱导产生的特异性CTL的含量,通过FITC-PI标记流式术检测EBV-CTL对EBV阳性和EBV阴性的胃癌细胞的体外杀伤作用。结果:经改良的细胞培养技术和抗原肽双重刺激后EBV-LMP2A抗原肽可以诱导产生出高比例的抗原特异性CTL[EBV-LMP2A-356特异性T细胞占CD8+T细胞的(47.1±5.2)%];EBV-CTL对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用较EBV阴性的胃癌细胞明显增强[(45.1±9.3)%vs(19.4±2.5)%,P<0.05]。结论:通过改良的细胞培养技术使用EBV-LMP2A抗原肽能诱导产生高比例的EBV特异性CTL,其对EBV阳性胃癌细胞有较强的特异性杀伤作用。 展开更多
关键词 EB病毒-潜伏膜蛋白2A 细胞毒性t淋巴细胞 EB病毒阳性胃癌 细胞毒作用
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王老吉凉茶对拘束应激负荷小鼠脾脏CTL活性的影响 被引量:2
11
作者 李善兵 何蓉蓉 +3 位作者 王敏 谢果 姚新生 栗原博 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期223-226,共4页
目的研究王老吉凉茶(Wanglaoji Herbal Tea,WHT)对拘束应激诱发小鼠脾脏细胞毒性T细胞(CTL)活性的影响。方法将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、致敏对照、应激对照组、125及500mg/kg王老吉凉茶给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流... 目的研究王老吉凉茶(Wanglaoji Herbal Tea,WHT)对拘束应激诱发小鼠脾脏细胞毒性T细胞(CTL)活性的影响。方法将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、致敏对照、应激对照组、125及500mg/kg王老吉凉茶给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群和CTL对P815细胞杀伤活性,同时检测小鼠脾脏淋巴细胞IL-2和IL-3的表达量。结果拘束应激明显降低Th淋巴细胞亚群的比例,显著降低CTL对P815瘤细胞的杀伤活性,同时减少脾脏淋巴细胞IL-2和IL-3表达量减少。与拘束应激组相比,王老吉凉茶给药可以增加拘束负荷小鼠脾脏淋巴细胞数目,提高CTL细胞杀伤活性,并且改善IL-2和IL-3表达量。结论王老吉凉茶对拘束负荷诱发小鼠免疫机能低下有改善作用。 展开更多
关键词 王老吉凉茶(WHt) 拘束应激 t淋巴细胞亚群 ctl杀伤活性 细胞因子
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甲型流感病毒核壳蛋白在BALB/c小鼠中酶联免疫斑点法表位的筛选及其与CTL表位的相关性研究 被引量:3
12
作者 王文玲 黄保英 +2 位作者 王秀平 谭文杰 阮力 《生物技术通讯》 CAS 2008年第3期319-323,共5页
目的:利用甲型流感病毒A/Johannesburg/33/94(H3N2)核壳蛋白(NP)全长肽库筛选BALB/c(H-2d)小鼠中NP酶联免疫斑点法(ELISPOT)表位,研究其和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位的一致性关系,为使用ELISPOT评价流感病毒NP疫苗的细胞免疫效果提供... 目的:利用甲型流感病毒A/Johannesburg/33/94(H3N2)核壳蛋白(NP)全长肽库筛选BALB/c(H-2d)小鼠中NP酶联免疫斑点法(ELISPOT)表位,研究其和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位的一致性关系,为使用ELISPOT评价流感病毒NP疫苗的细胞免疫效果提供实验依据。方法:以甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)(PR8)感染BALB/c(H-2d)小鼠后,通过检测T细胞分泌γ-干扰素(IFN-γ)的ELISPOT法和体内CTL法检测NP所诱发的细胞免疫反应,综合分析ELISPOT和CTL表位肽之间的关系。结果:Pep36(NP第141~155位氨基酸残基,SNLNDTTYQRTRALV)和Pep37(NP第145~159位氨基酸残基,DTTYQRTRALVRTGM)可以诱发较强的ELISPOT反应,根据Pep36和Pep37共有序列合成的Pep147-155(NP第147~155位氨基酸残基,TYQRTRALV)可以诱发与这2条多肽相同强度的ELISPOT反应,表明Pep147-155为NP诱发ELISPOT反应的最强表位,体内CTL也表明它是最强的CTL表位;Pep95(NP第377~391位氨基酸残基,STLELRSRYWAIRTR)、Pep96(NP第381~395位氨基酸残基,LRSRYWAIRTRSGGN)和其他表位肽诱发的ELISPOT反应较弱,体内CTL反应也较弱。结论:BALB/c(H-2d)小鼠中,甲型流感病毒NP诱发ELISPOT反应和CTL反应的表位肽高度相关;实验结果为使用ELISPOT评价流感病毒NP疫苗的细胞免疫效果提供了实验依据。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 核壳蛋白 酶联免疫斑点法 体内细胞毒性t淋巴细胞
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MUC4HLA-A*0201限制性CTL表位的预测及结合力分析 被引量:1
13
作者 陈建敏 高文涛 +4 位作者 朱毅 徐泽宽 钱祝银 戴存才 苗毅 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期513-515,共3页
目的:寻找并鉴定MUC4HLA-A0201限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位。方法:结合2种常用表位预测数据库(SYFPEITHI和ProPred-I)和工具,应用多种参数和方法进行综合分析,包括MHC结合力、蛋白酶体切割位点等综合预测方法。预测得到的抗原表位合... 目的:寻找并鉴定MUC4HLA-A0201限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位。方法:结合2种常用表位预测数据库(SYFPEITHI和ProPred-I)和工具,应用多种参数和方法进行综合分析,包括MHC结合力、蛋白酶体切割位点等综合预测方法。预测得到的抗原表位合成相应抗原肽。用T2细胞株测定各肽与HLA-A0201分子的亲和力。结果:综合分析预测得到HLA-A0201的5个可能表位;合成抗原肽经纯化后纯度>95%;在5个候选表位肽中,LLLGVGTFV(1125-33)和LLGVGTFVV(1126-34)2个九肽与HLA-A0201的结合力较强。结论:多参数表位预测结果和结合力分析实验结果一致性较好,两者联合应用初步认为LLLGVGTFV(1125-33)和LLGVGTFVV(1126-34)2个九肽为MUC4HLA-A0201限制性CTL表位的可能性最大。 展开更多
关键词 MUC4 细胞毒性t淋巴细胞 表位 胰腺癌
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卵巢癌细胞系SKOV3冻融抗原诱导CTL特异性杀瘤效应的研究 被引量:2
14
作者 程琪 朱长焜 +2 位作者 叶枫 陈怀增 谢幸 《实用癌症杂志》 2005年第2期113-115,119,共4页
目的探讨卵巢癌冻融抗原对T淋巴细胞的增殖作用及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在体外杀伤卵巢癌细胞的抗原特异性细胞毒性效应。方法采用免疫磁珠分离法(magneticactivatedcellsorting,MACS)分离纯化正常人外周血CD+3T细胞,体外以SK... 目的探讨卵巢癌冻融抗原对T淋巴细胞的增殖作用及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在体外杀伤卵巢癌细胞的抗原特异性细胞毒性效应。方法采用免疫磁珠分离法(magneticactivatedcellsorting,MACS)分离纯化正常人外周血CD+3T细胞,体外以SKOV3卵巢癌细胞中提取的可溶性肿瘤抗原加以刺激。溴标法检测肿瘤抗原对T细胞增殖的影响;MTT法测定肿瘤抗原诱导的CTL体外杀伤卵巢癌细胞的能力;利用绒毛膜癌细胞抗原对比观察肿瘤抗原诱导CTL杀伤肿瘤细胞的抗原特异性。结果卵巢癌细胞抗原有很强的促进T淋巴细胞增殖的作用,且存在时间依赖性,在24h时促进作用最强。SKOV3抗原诱导的CTL在体外对SKOV3细胞的杀伤率为68.38%,显著高于它对JAR绒毛膜癌细胞的杀伤率(18.31%);而JAR细胞抗原诱导的CTL对JAR和SKOV3细胞的杀伤率分别为61.02%和14.79%,有显著的抗原特异性(P=0.0001)。结论卵巢癌细胞冻融抗原诱导的CTL在体外具有很强的增殖能力和抗原特异性杀伤卵巢癌细胞的作用。 展开更多
关键词 抗原诱导 ctl 卵巢癌细胞系 杀瘤效应 SKOV3细胞 细胞毒性t淋巴细胞 抗原特异性细胞 免疫磁珠分离法 CD3^+细胞 可溶性肿瘤抗原 t淋巴细胞增殖 杀伤肿瘤细胞 体外杀伤 细胞抗原 t细胞增殖 时间依赖性 JAR细胞 特异性杀伤
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树突状细胞对肿瘤特异性CTL体外激发、扩增及功能的作用研究 被引量:1
15
作者 夏瑜 朱一蓓 +5 位作者 戴俊 黄勇 席泓 吴明媛 李文香 张学光 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 2004年第4期475-478,共4页
目的 研究凋亡肿瘤细胞负载的DCs联合细胞因子对T细胞体外激发、扩增及功能的诱导作用。方法 人B淋巴瘤细胞株Raji经顺铂 (DDP)诱导凋亡 ,体外共育法负载DCs,DCs和T细胞体外共培养观察DCs对T细胞的效应 ,采用免疫荧光标记和流式细胞... 目的 研究凋亡肿瘤细胞负载的DCs联合细胞因子对T细胞体外激发、扩增及功能的诱导作用。方法 人B淋巴瘤细胞株Raji经顺铂 (DDP)诱导凋亡 ,体外共育法负载DCs,DCs和T细胞体外共培养观察DCs对T细胞的效应 ,采用免疫荧光标记和流式细胞仪分析T细胞表型 :ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IFN -γ、IL - 10的含量 ;溶血实验检测细胞毒性T细胞 (CTL)产生穿孔素的能力 ;体外肿瘤杀伤实验分析CTL的特异性肿瘤杀伤作用。结果 凋亡肿瘤细胞负载联合CD4 0激发的DCs能有效地激发自体T细胞的体外扩增并诱导具有较特异杀伤肿瘤细胞作用的CTL。结论 凋亡肿瘤细胞负载的DCs在CD4 0信号的作用下对自体T细胞具有较强的激发和扩增效应 ,所获得的CTL对肿瘤细胞具有较特异的杀伤作用。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞毒性t细胞 肿瘤免疫 CD40
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HBsAg体外冲击的慢性乙肝患者树突状细胞对HBV特异性CTL的诱导作用 被引量:3
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作者 孙晓雷 苏丽 +2 位作者 汤伟 孙伟红 汪晓莺 《南通医学院学报》 2004年第4期367-368,共2页
目的 :研究 HBs Ag冲击的慢性乙肝患者单核细胞来源的树突状细胞 (DCs)体外对 HBV特异性 CTL的诱导作用 ,初步探讨诱导特异性抗 HBV细胞免疫的途径。方法 :分离慢性乙肝患者外周血单核细胞 ,以 GM-CSF + IL -4 + TNF -α培养诱导DCs,加... 目的 :研究 HBs Ag冲击的慢性乙肝患者单核细胞来源的树突状细胞 (DCs)体外对 HBV特异性 CTL的诱导作用 ,初步探讨诱导特异性抗 HBV细胞免疫的途径。方法 :分离慢性乙肝患者外周血单核细胞 ,以 GM-CSF + IL -4 + TNF -α培养诱导DCs,加入 HBs Ag冲击以诱导 HBV特异性 DCs。采用 LDH法检测 DC诱导的患者外周血 T细胞对 Hep G2 2 .2 .15 (转染 HBVDNA)、Hep G2肝癌细胞株及 K5 62白血病细胞株的细胞毒作用。结果 :HBs Ag冲击的 DC可有效地诱导自体 CTL 对转 HBV基因的Hep G2 2 .2 .15细胞高效特异性杀伤作用 (P<0 .0 1)。结论 :慢性乙型肝炎患者单核细胞来源的 DCs经 HBs Ag抗原冲击后 ,可有效地诱导对 HBV特异性反应的 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 树突状细胞 乙型肝炎病毒表面抗原 细胞毒性t淋巴细胞
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化疗联合DC-CTL治疗不同分期非小细胞肺癌的疗效分析
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作者 刘泽杰 宋沂林 +3 位作者 杨静 李俊强 冯英明 苏海川 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第12期1899-1903,共5页
目的:分析化疗联合树突状细胞诱导的细胞毒性T淋巴细胞(dendritic cells and cytotoxic lymphocytes,DC-CTL)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的疗效及安全性。方法:收集我院2013年5月至2015年12月期间住院病理确... 目的:分析化疗联合树突状细胞诱导的细胞毒性T淋巴细胞(dendritic cells and cytotoxic lymphocytes,DC-CTL)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的疗效及安全性。方法:收集我院2013年5月至2015年12月期间住院病理确诊为Ⅰb(具有高危因素)、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲa、Ⅲb、Ⅳ期的NSCLC患者114例,其中接受肺癌根治术的患者分为术后化疗联合DC-CTL组20例和术后化疗组32例,未行手术患者分为化疗联合DC-CTL组23例和化疗组39例。回顾分析了114例患者的临床特点、疾病控制率(disease control rate,DCR)、中位无疾病生存期(median-disease free survival,M-DFS)、中位无进展生存期(medianprogression free survival,M-PFS)、副作用等资料。随访截止至2016年11月。结果:1年DCR:术后化疗联合DC-CTL组(75.0%)vs术后化疗组(43.8%)(P=0.044)。M-DFS:术后化疗联合DC-CTL组(19.5个月)与术后化疗组(11.5个月)相比,差异具有明显统计学意义(P=0.025 5)。化疗联合DC-CTL治疗与化疗组相比,DCR及M-PFS不具有统计学差异。DC-CTL治疗的副作用显著低于化疗。结论:术后化疗联合DC-CTL治疗可显著提高DCR及延缓NSCLC患者的疾病进展,且安全性高。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 化疗 细胞毒性t淋巴细胞 树突状细胞
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HLA-A^*0201限制性CTL表位肽分子力场分析
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作者 林治华 王槐亮 +3 位作者 李杰 龙海霞 万谨 王远强 《重庆工学院学报》 2007年第7期1-7,共7页
运用比较相似性指数分析(CoMISA)方法研究了203个HLA-A*0201限制性CTL表位九肽结构与亲和性间的关系,另外30个表位九肽作为预测集用于检验模型的预测能力.得到构效关系模型结果q2=0.548,r2=0.963,F=553.4,SD=0.154.在CoMSIA计算中,当引... 运用比较相似性指数分析(CoMISA)方法研究了203个HLA-A*0201限制性CTL表位九肽结构与亲和性间的关系,另外30个表位九肽作为预测集用于检验模型的预测能力.得到构效关系模型结果q2=0.548,r2=0.963,F=553.4,SD=0.154.在CoMSIA计算中,当引入疏水场时,三维构效关系模型能得到明显改善.通过该三维构效关系模型,可较精确地估算预测集中30个CTL表位肽与HLA-A*0201间的亲和力(r2pred=0.532,SD=0.454).通过分析分子场等值面图在空间的分布,可以观察到表位肽分子周围的立体及疏水特征对表位肽H与A-A*0201间结合亲和力的影响,从而为进一步对CTL表位肽进行结构改造,并基于此进行治疗性疫苗分子设计提供理论基础. 展开更多
关键词 细胞毒性t淋巴细胞(ctl) 表位 CoMISA
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DC-CTL免疫细胞对卵巢上皮癌细胞的靶向性治疗研究 被引量:2
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作者 周凌飞 海娣 +2 位作者 胡梦琪 魏颖颖 李劼 《中国妇幼健康研究》 2016年第11期1339-1342,共4页
目的探讨经树突状细胞(DC)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫细胞靶向性的抑制卵巢上皮癌细胞的机制,为临床上DC-CTL治疗卵巢癌提供理论基础。方法无胸腺BALB/C/nu/nu裸小鼠48只,分为4组,每组12只,裸鼠人卵巢癌SKOV3移植瘤模型成功后用... 目的探讨经树突状细胞(DC)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫细胞靶向性的抑制卵巢上皮癌细胞的机制,为临床上DC-CTL治疗卵巢癌提供理论基础。方法无胸腺BALB/C/nu/nu裸小鼠48只,分为4组,每组12只,裸鼠人卵巢癌SKOV3移植瘤模型成功后用未经DC诱导的CTL免疫细胞和经DC诱导的CTL免疫细胞进行治疗,比较各组裸鼠移植瘤体积和重量、抑瘤率、移植瘤miRNAlet-7表达和HMGA2蛋白表达的差异。结果 DC-CTL组和CTL组裸鼠的移植瘤体积和移植瘤重量低于模型对照组(F值分别为8.175、6.823,均P<0.05),DC-CTL组裸鼠的移植瘤体积和移植瘤重量低于CTL组,且差异具有统计学意义(t=13.244,P<0.05);DC-CTL组裸鼠的抑瘤率(69.57±10.81)%高于CTL组(42.35±8.15)%,且差异具有统计学意义(t=6.965,P<0.05);DC-CTL组和CTL组裸鼠的移植瘤miRNAlet-7表达均高于模型对照组(F=7.528,P<0.05),DC-CTL组裸鼠的移植瘤miRNAlet-7表达(1.69±0.40)高于CTL组(1.17±0.39),且差异具有统计学意义(t=2.964,P<0.05);DC-CTL组和CTL组裸鼠的HM GA2蛋白表达的ISH评分均低于模型对照组(F=6.419,P<0.05),DC-CTL组裸鼠的HM GA2蛋白表达的ISH评分(15.31±1.72)低于CTL组(17.18±1.86),且差异具有统计学意义(t=3.143,P<0.05)。结论经DC诱导的CTL免疫细胞能够明显抑制裸鼠卵巢癌移植瘤的生长,其机制可能为促进let-7表达和抑制HMGA2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 裸鼠卵巢癌移植瘤 树突状细胞 胞毒性t淋巴细胞 靶向性研究
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MGBA负载脐带血DC诱导特异性CTL对乳腺癌细胞的杀伤作用
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作者 胡园园 刘佩佩 姜又红 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1381-1385,共5页
目的:观察乳腺珠蛋白(mammaglobin A,MGBA)负载脐带血来源树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导产生的细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)对乳腺癌细胞的体外杀伤效果。方法:采集健康剖宫产女性志愿者的脐带血,分离脐带血单个核... 目的:观察乳腺珠蛋白(mammaglobin A,MGBA)负载脐带血来源树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导产生的细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)对乳腺癌细胞的体外杀伤效果。方法:采集健康剖宫产女性志愿者的脐带血,分离脐带血单个核细胞并诱导DC生成,用MGBA致敏DC与自体淋巴细胞共培养诱导CTL。采用流式细胞术测定DC的表型(CD83、CD86、HLADR)变化,ELISA法测定IL-10、IL-12分泌水平,CCK-8法测定CTL对乳腺癌细胞的杀伤活性。结果:成功培养出形态典型、功能成熟的DC,MGBA负载DC诱导的MGBA特异性CTL对乳腺癌细胞MDA-MB-415产生显著的杀伤效果(P<0.05);加入HLA-I抗体可显著减弱杀伤效果,加入HLA-II抗体细胞毒活性无显著变化,加入HLA-I抗体或HLA-II抗体对正常乳腺细胞的杀伤性均无影响。结论:MGBA能明显加强脐带血DC诱导的CTL对乳腺癌细胞的杀伤活性,该杀伤活性具有MHC限制性。 展开更多
关键词 脐带血 树突状细胞 乳腺珠蛋白 乳腺癌细胞 细胞毒性t细胞
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