流式微球分析技术检测Hs-CRP对冠心病的临床诊断价值评价

目的探讨流式微球分析技术检测人血清中高敏C反应蛋白(Hs-CRP)水平对冠心病诊断的临床价值。方法采用流式微球分析技术检测健康人群和冠心病患者血清中Hs-CRP水平,用统计软件对其临床诊断效能进行评价。结果健康对照人群和患者血清标本中Hs-CRP水平差异有显著性。疾病组内不同病理类型(稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛和急性心肌梗死)之间Hs-CRP的检测结果差异均有显著性。根据Hs-CRP的ROC曲线下面积(AUC)进行统计分析,血清Hs-CRP水平用于诊断冠心病有显著意义,诊断灵敏度为87.5%,特异性为82.5%。结论血清中Hs-CRP水平对冠心病的诊断和分层有一定的应用价值,值得在临床上推广。

流式免疫磁珠法检测BCR-ABL融合蛋白在白血病中的意义

目的:探讨流式免疫磁珠(CBA)法检测白血病患者BCR-ABL融合蛋白的方法学评价及其意义。方法:采用CBA法检测64例白血病患者和10例正常人外周血白细胞中BCR-ABL融合蛋白表达,同时与实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)和荧光原位杂交(FISH)法比较。结果:正常人外周血白细胞BCR-ABL融合蛋白平均荧光强度(MFI)是10.58±3.88,64例白血病患者中BCR-ABL阳性25例,仅1例B-ALL患者检测结果与RQ-PCR结果不一致,与FISH检测结果完全一致。结论:CBA法检测BCR-ABL融合蛋白方法可靠,重复性好,简单,快速,具有良好的临床应用前景。

三种小鼠血清中Th1/Th2类细胞因子正常值比较

目的建立健康正常BALB/c、C3H/HeJ和C3H/SW小鼠Th1/Th2中5种细胞因子正常水平,比较三种小鼠的差异性。方法用流式细胞仪及CBA试剂盒测定BALB/c、C3H/HeJ和C3H/SW小鼠血清中5种细胞因子水平。结果三种小鼠5种Th1/Th2细胞因子呈正态分布,95%可信区间可以被认可;三种小鼠IL-4I、L-5水平差异性不大(P>0.05),INF-γ、TNF-αI、L-2差异性较大,其中BALB/c小鼠Th1细胞因子水平均比两种C3H小鼠高,其中INF-γ和TNF-α具有显著性意义(P<0.05)。结论本实验建立了健康正常BALB/c、C3H/HeJ和C3H/SW小鼠Th1/Th2中5种细胞因子的正常参考值;BALB/c小鼠比C3H/HeJ、C3H/SW小鼠处于高免疫反应状态。

细粒棘球蚴慢性感染阶段小鼠血清中炎症因子的变化及意义

目的研究细粒棘球蚴慢性感染阶段小鼠血清中细胞因子水平的变化,探索机体对抗寄生虫感染的免疫应答机制。方法从病羊内脏分离细粒棘球绦虫原头节,注射入BALB/c小鼠腹腔（2 000个原头节/只）,建立细粒棘球蚴感染小鼠模型,对照组小鼠腹腔注射等体积PBS。于感染5个月后,采集对照及感染组小鼠血清,采用流式液相多重蛋白定量技术检测血清中多种细胞因子水平并分析。结果感染组小鼠腹腔、肝脏、肺脏等部位均出现多个单一性包囊;其血清中IL-17A、IL-6、IFN-γ、MCP-1、IL-12P70、TNF-α等炎症因子水平均显著高于对照组（t=2.713～9.255,P均〈0.05）;而抑炎因子IL-10水平亦显著升高（t=3.936,P〈0.001）。结论细粒棘球蚴慢性感染阶段小鼠体内炎症因子水平较高,有助于抑制虫体生长。

流式微球技术检测参芪扶正注射液对化疗小鼠Th1/Th2平衡状态的影响

目的:研究参芪扶正注射液对化疗小鼠Th1/Th2平衡状态的影响。方法:57只荷瘤小鼠随机分成5组,分别为荷瘤对照组、环磷酰胺组、参芪扶正注射液高剂量组(8g·kg-1组)、临床等效剂量组(4g·kg-1组)和低剂量组(2g·kg-1组)。后4组给予环磷酰胺ip2次造模。荷瘤对照组及环磷酰胺组ip生理盐水,1次/d,其他3组ip相应剂量参芪扶正注射液。9d后摘小鼠眼球取血约0.5mL进行流式微球(CBA)检测,再脱颈处死小鼠,称取肿瘤重量,计算肿瘤系数。结果:参芪扶正注射液临床等效剂量组(4g·kg-1)可显著降低化疗小鼠的肿瘤重量和肿瘤系数(P<0.01),提高化疗小鼠的TNF-α及IL-2的浓度(P<0.01～0.05)。结论:参芪扶正注射液4g·kg-1可诱导化疗小鼠的Th1/Th2平衡向Th1细胞占优势的方向转化。

利用 THP-1 细胞进行致敏物鉴定的方法验证

目的探讨建立以THP-1源性巨噬细胞为受试细胞,以细胞上清液中细胞因子表达改变为检测指标的体外检测化学物致敏性的试验方法。方法将人单核细胞株THP-1细胞用佛波酯(PMA,0.1μg/ml)诱导,使之转化为具有贴壁能力的THP-1巨噬细胞。选择5种已知的化学致敏物硫酸镍(NiSO4)、2,4-二硝基氯代苯(DNCB)、苯二胺(PPDA)、重铬酸钾(K2Cr2O7)、异氰酸酯(TDI)和2种非化学致敏物十二烷基磺酸钠(SDS)、异丙醇(IPA)为受试物,检测不同浓度受试物处理细胞的不同时间点时细胞因子表达的变化。分别用ELISA法检测细胞培养上清IL-6、TNF-α的水平,用流式液相多重蛋白定量技术(CBA)检测IL-1β、IL-8细胞因子的表达水平。结果 NiSO4、DNCB和K2Cr2O7作用6h,PPDA、TDI作用12h时,THP-1细胞上清中IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-8四种细胞因子的表达量最高。5种化学致敏物NiSO4、DNCB、K2Cr2O7、PPDA和TDI在最适时间点最适浓度刺激细胞分泌IL-6的水平分别为对照组的40、25、20、50和50倍,TNF-α水平为对照组的20、12、20、8和5倍,IL-1β水平为对照组的30、60、25、30和45倍,IL-8水平为对照组的15、12、15、12和7倍;非致敏物SDS与IPA处理组IL-6水平均有升高,其中SDS组升高最明显,约为空白对照组的20倍。TNF-α、IL-1β和IL-8表达水平无明显变化。结论利用THP-1巨噬细胞检测细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-8表达水平的试验方法可以有效区分化学致敏物与非致敏物,因此这3个指标可作为鉴别化学致敏物和非致敏物的有效参考指标。