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Identification of the epitopes on HCV core protein recognized by HLA-A2 restricted cytotoxic T lymphocytes 被引量:11
1
作者 Hong-Chao Zhou De-Zhong Xu Xue-Ping Wang Jing-Xia Zhang Ying-Huang Yong-Ping Yan Yong Zhu Bo-Quan Jin Department of Epidemiology,the Fourth Military Medical University,Xi’an 710033,Shaanxi Province,ChinaDepartment of Immunology,the Fourth Military Medical University,Xi’an 710033,Shaanxi Province,China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第4期583-586,共4页
AIM: To identify hepatitis C virus(HCV) core protein epitopes recognized by HLA-A2 restricted cytotoxic T lymphocyte (CTL). METHODS: Utilizing the method of computer prediction followed by a 4h(51)Cr release assay con... AIM: To identify hepatitis C virus(HCV) core protein epitopes recognized by HLA-A2 restricted cytotoxic T lymphocyte (CTL). METHODS: Utilizing the method of computer prediction followed by a 4h(51)Cr release assay confirmation. RESULTS: The results showed that peripheral blood mononuclear cells (PBMC) obtained from two HLA-A2 positive donors who were infected with HCV could lyse autologous target cells labeled with peptide &quot;ALAHGVRAL (core 150-158)&quot;. The rates of specific lysis of the cells from the two donors were 37.5% and 15.8%, respectively. Blocking of the CTL response with anti-CD4 mAb caused no significant decrease of the specific lysis. But blocking of CTL response with anti-CD8 mAb could abolish the lysis. CONCLUSION: The peptide (core 150-158) is the candidate epitope recognized by HLAA2 restricted CTL. 展开更多
关键词 Amino Acid Sequence Antibodies Viral B-lymphocyteS Cell Line epitope Mapping HLA-A2 Antigen HEPACIVIRUS Hepatitis C Humans Peptide Fragments Predictive Value of tests Research Support Non-U.S. Gov't t-lymphocytes cytotoxic Viral Core Proteins
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Prediction of HLA-A2-restricted CTL epitope specific to HCC by SYFPEITHI combined with polynomial method 被引量:2
2
作者 Hal-LongDong Yan-FangSui 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第2期208-211,共4页
AIM: To predict the HLA-A2-restricted CTL epitopes of tumor antigens associated with hepatocellular carcinoma (HCC).METHODS: MAGE-1, MAGE-3, MAGE-8, P53 and AFP were selected as objective antigens in this study for th... AIM: To predict the HLA-A2-restricted CTL epitopes of tumor antigens associated with hepatocellular carcinoma (HCC).METHODS: MAGE-1, MAGE-3, MAGE-8, P53 and AFP were selected as objective antigens in this study for the close association with HCC. The HLA-A*0201 restricted CTL epitopes of objective tumor antigens were predicted by SYFPEITHI prediction method combined with the polynomial quantitative motifs method. The threshold of polynomial scores was set to -24.RESULTS: The SYFPEITHI prediction values of all possible nonamers of a given protein sequence were added together and the ten high-scoring peptides of each protein were chosen for further analysis in primary prediction. Thirtyfive candidates of CTL epitopes (nonamers) derived from the primary prediction results were selected by analyzing with the polynomial method and compared with reported CTL epitopes.CONCLUSION: The combination of SYFPEITHI prediction method and polynomial method can improve the prediction efficiency and accuracy. These nonamers may be useful in the design of therapeutic peptide vaccine for HCC and as immunotherapeutic strategies against HCC after identified by immunology experiment. 展开更多
关键词 Hepatocellular carcinoma HLA-A*0201 cytotoxic t lymphocyte epitope
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Prediction of HLA-A 2.1-restricted CTL epitopes from IGFBP7 antigen of lung carcinoma 被引量:1
3
作者 Zhao Weipeng Long Haixia +2 位作者 Zhu Bo Duan Yuzhong Chen Zhengtang 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2009年第2期63-68,共6页
Objective: With the development of peptide-based cancer specific immunotherapy, the prediction of CTL epitopes from insulin-like growth factor-binding protein 7 (IGFBP7) is very important for some research about tu... Objective: With the development of peptide-based cancer specific immunotherapy, the prediction of CTL epitopes from insulin-like growth factor-binding protein 7 (IGFBP7) is very important for some research about tumor metastasis. Because HLA-A2.1-expressing individuals cover 〉50% in the population of China, we aimed at identifying IGFBPT-encoded peptide presented by HLA-A2.1. Methods: In our study, a HLA-A2.1 restricted CTL epitope was identified by using the following two-step procedure: (a) computer-based epitope prediction from the amino acid sequence of IGFBP7 antigen; (b) Validation with epitope molecular modeling. Results: We obtained four epitopes with high immunogenicity scores by all of the three algorithms, i.e., BIMAS, SYFPEITH1 and IMTECH. Each of the four candidates satisfied the criteria of the HLA-A2.1- restricted CTL epitopes in molecular modeling analysis. Conclusion: The combination of BIMAS, SYFPEITHI and IMTECH method can improve the prediction efficiency and accuracy. Due to this research herein, this four epitopes have potential value for further studied, also have potential application in peptide-mediated immunotherapy. These epitopes may be useful in the design of therapeutic peptide vaccine for lung carcinoma and as immunotherapeutic strategies against lung carcinoma after identified by immunology experiment. 展开更多
关键词 Insulin-like growth factor-binding protein 7 epitope cytotoxic t lymphocyte
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猪源病毒细胞毒性T淋巴细胞表位研究进展
4
作者 鲜钰涵 冯宏盛 +7 位作者 高永宇 李海洋 杨思宇 桑辰君 曹玉蝶 唐越 李子彬 高凤山 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3086-3099,共14页
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子,也称为猪白细胞抗原(swine leukocyte antigen,SLA)Ⅰ类分子,在机体抗原递呈、器官移植、细胞免疫应答和调控等方面起重要作用。细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T ly... 主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子,也称为猪白细胞抗原(swine leukocyte antigen,SLA)Ⅰ类分子,在机体抗原递呈、器官移植、细胞免疫应答和调控等方面起重要作用。细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位是抗原经抗原递呈细胞加工后,与SLA-Ⅰ类分子结合并递呈的线性肽段,具有高度特异性,在机体抗原识别递呈和细胞免疫抵抗病毒感染方面发挥着关键作用。CTL表位能够刺激CTLs发挥细胞杀伤作用,主要表现为杀伤病毒。作者将对口蹄疫病毒、非洲猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒等几种重要的猪源病毒的CTL表位研究现状进行综述,并利用生物信息学手段分析SLA-Ⅰ与CTL表位结合基序特征,以期为今后相关猪源病毒CTL表位的研究和多表位疫苗的设计提供参考。 展开更多
关键词 细胞毒性t淋巴细胞(ctl)表位 猪口蹄疫病毒 非洲猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒
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A Review: Interactions of Equine Herpesvirus-1 with Immune System and Equine Lymphocyte 被引量:2
5
作者 Nor Dini Rusli Khairiyah Binti Mat Hasnita Che Harun 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2014年第12期294-307,共14页
Equine herpesvirus-1 (EHV-1) remains one of the most common viral pathogens affecting horses worldwide presenting as a persistent infection which can establish latency in nerve ganglia (trigeminal ganglion), lymphoid ... Equine herpesvirus-1 (EHV-1) remains one of the most common viral pathogens affecting horses worldwide presenting as a persistent infection which can establish latency in nerve ganglia (trigeminal ganglion), lymphoid tissues of the respiratory tract and peripheral blood lymphocytes. EHV-1 infection induces both humoral and cellular immune responses in horses. Virus neutralising antibody, particularly in the nasopharynx, is to kill free virus shed from infected epithelial cells. Hence this antibody has important functions in reducing virus shedding and spreading infection to cohorts. Cellular immune responses, particularly those carried out by cytotoxic T lymphocyte (CTL), have been shown to be effective in killing virus-infected cells in vitro. This review underlines the state of knowledge regarding immunity to EHV-1 and also its interaction with equine lymphocyte. Finally, the review also includes the importance of the viral immediate early (IE) protein in the pathogenesis of EHV-1. This information can be used as the basis for future research. 展开更多
关键词 EQUINE Herpesvirus-1 (EHV-1) lymphocyte cytotoxic t lymphocyte (ctl) Immune Response Peripheral Blood MONONUCLEAR cell (PBMC)
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中国人群流行的乙型肝炎病毒特异性CTL表位特点分析 被引量:12
6
作者 李晓东 徐东平 +5 位作者 成军 钟彦伟 刘妍 董菁 王琳 张玲霞 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期775-777,共3页
目的研究中国人群中流行的乙型肝炎病毒(HBV)基因型B型和C型特异性CTL表位的序列特点。方法以国外文献报道的13个HBV的CTL表位氨基酸序列为参考序列,分析其与GenBank下载的45条及作者从乙型肝炎病人血清中扩增的另外5条B型或C型CTL表位... 目的研究中国人群中流行的乙型肝炎病毒(HBV)基因型B型和C型特异性CTL表位的序列特点。方法以国外文献报道的13个HBV的CTL表位氨基酸序列为参考序列,分析其与GenBank下载的45条及作者从乙型肝炎病人血清中扩增的另外5条B型或C型CTL表位氨基酸序列的差别。结果与参考序列相比,本研究分析的B型和C型HBV特异性CTL表位氨基酸序列变异发生频率较高。在本研究分析的13个表位中,变异发生率超过70%的表位在B型HBV有4个,分别是表位FLLTRILTI(A0201,S183-191)、VLQAGFFLL(A0201,S188-196)、ILSPFLPLL(A0201,S382-390)和FLPSDFFPSV(A0201,C18-27),C型HBV有2个,分别是表位ILSPFLPLL(A0201,S382-390)和FLPSDFFPSV(A0201,C18-27)。其中文献中研究最多的HBcAg表位18-27(FLPSDFFPSV),在我国流行的B型和C型HBV中表位的变异率分别高达71%和97%。结论中国人群流行的B型和C型HBV特异性CTL表位与国外文献报道的CTL表位相比在大多数位点上都出现变异,并且不同表位的变异率差异很大,在检测CTL数量和功能时应根据这一特点设计实验。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 t淋巴细胞 细胞毒性 表位 t淋巴细胞
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HBsAg体外冲击的慢性乙肝患者树突状细胞的生物学特性及其对HBV特异性CTL的诱导作用 被引量:12
7
作者 汪晓莺 孙晓雷 +3 位作者 汤伟 孙伟红 苏丽 张学光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期850-853,共4页
目的 :研究HBsAg冲击的慢性乙肝患者单核细胞来源的树突状细胞 (DCs)的功能状况及体外对HBV特异性CTL的诱导作用 ,初步探讨诱导特异性抗HBV细胞免疫的途径。方法 :分离慢性乙肝患者外周血单核细胞 ,以GM CSF +IL 4 +TNF α培养诱导DCs,... 目的 :研究HBsAg冲击的慢性乙肝患者单核细胞来源的树突状细胞 (DCs)的功能状况及体外对HBV特异性CTL的诱导作用 ,初步探讨诱导特异性抗HBV细胞免疫的途径。方法 :分离慢性乙肝患者外周血单核细胞 ,以GM CSF +IL 4 +TNF α培养诱导DCs,加入HBsAg冲击以诱导HBV特异性DCs。采用FCM测定细胞表面免疫分子CD1a、CD83、CD86、CD80、CD4 0以及HLA DR的表达水平 ,ELISA法检测培养上清中细胞因子IL 6、IL 12的分泌含量 ,MTT法测定DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力 ,LDH法检测DC诱导的患者外周血T细胞对HepG2 2 2 15 (转染HBVDNA)、HepG2肝癌细胞株及K5 6 2白血病细胞株的细胞毒作用。结果 :HBsAg冲击的DC其表达CD1a、CD83、CD86、CD80、CD4 0、HLA DR表面分子明显高于对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,分泌IL 12的水平也高于对照组 (P <0 0 1) ,而分泌IL 6的水平则较对照组显著降低(P <0 0 1) ;HBsAg冲击的DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力明显增强 (P <0 0 5 ) ,并可有效地诱导自体CTL对转HBV基因的HepG2 2 2 15细胞高效特异性杀伤作用 (P <0 0 1)。结论 :慢性乙型肝炎患者单核细胞来源的DCs经HBsAg抗原冲击后 ,生物学活性增强 ,并且能有效地诱导对HBV特异性反应的CTL。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 树突状细胞 HBSAG 细胞毒性t淋巴细胞
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结核杆菌抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8^+CTL表位的预测及鉴定 被引量:7
8
作者 吴传勇 娄加陶 +7 位作者 蒋廷旺 钱 周晔 陈燕 陈波 谷明莉 邓安梅 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期349-354,共6页
目的:预测及鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,为基于表位的结核疫苗研究提供依据。方法:应用SYFPEITHI数据库预测结核杆菌抗原Ag85C序列中可能存在的HLA-A*0201限制性T细胞表位,利... 目的:预测及鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,为基于表位的结核疫苗研究提供依据。方法:应用SYFPEITHI数据库预测结核杆菌抗原Ag85C序列中可能存在的HLA-A*0201限制性T细胞表位,利用T2细胞株分析各预测的抗原肽与HLA-A*0201分子的亲合力,选取高亲合力肽诱导特异性CTL细胞,检测各高亲合力肽刺激其特异性CTL细胞分泌的IFN-γ水平、在体外的CTL增殖反应以及细胞杀伤毒性,逐步鉴定出Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。结果:SYFPEITHI数据库从Ag85C序列中预测到14条能够结合HLA-A*0201分子的抗原肽,其中3个抗原肽(170~178 aa、317~325 aa和144~153 aa)显示与T2细胞上HLA-A*0201分子有高结合力,而抗原肽FLTREMPAWL(144~153 aa)能够诱导大多数HLA-A*0201阳性结核患者及PPD(+)健康志愿者产生特异性CTL细胞,并分泌大量的IFN-γ,能够诱导CTL体外发生增殖,能够产生特异性杀伤活性。结论:成功鉴定出抗原肽FLTREMPAWL(144~153 aa)结核杆菌抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,可作为结核疫苗设计的候选表位,为进一步研发新型有效的抗结核疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗原 表位 t淋巴细胞 细胞毒性
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原发性胆汁性肝硬化患者中自身抗原丙酮酸脱氢酶特异性CD8+CTL表位预测及鉴定 被引量:9
9
作者 刘海英 姚定康 +5 位作者 屠小卿 周晔 朱烨 陈燕 范列英 仲人前 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期500-504,共5页
目的鉴定原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者中自身抗原丙酮酸脱氢酶(PDC-E2)上的HLA-A觹0201限制性CD8+CTL表位,为临床探索特异性免疫治疗奠定基础。方法应用数据库SYFPEITHI预测PDC-E2上两段涵盖B细胞表位和CD4+T细胞表位的氨基酸序列(163~... 目的鉴定原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者中自身抗原丙酮酸脱氢酶(PDC-E2)上的HLA-A觹0201限制性CD8+CTL表位,为临床探索特异性免疫治疗奠定基础。方法应用数据库SYFPEITHI预测PDC-E2上两段涵盖B细胞表位和CD4+T细胞表位的氨基酸序列(163~184aa和36~49aa)附近可能存在的HLA-A觹0201限制性T细胞表位,再通过T2细胞株、细胞增殖试验和细胞毒性检测分别分析各抗原肽与HLA-A觹0201的结合力、诱导患者外周血单个核细胞(PBMCs)增殖能力及抗原肽诱导的抗原特异性T细胞杀伤毒性,逐步鉴定HLA-A觹0201限制性CD8+CTL细胞表位。结果数据库初步预测到5个可能性较大的HLA-A觹0201限制性抗原肽,其中两个抗原肽(159~167aa和165~174aa)显示与T2细胞上HLA-A觹0201分子有较高的亲和力,这两个抗原肽能刺激大部分HLA-A觹0201阳性PBC患者PBMC增殖,并且由其诱导产生的CTL具有特异杀伤活性。结论位于PDC-E2内酯酰区上的KLSEGDLLA穴159~167aa)和LLAEIETDKA穴165~174aa雪是PBC患者体内HLA-A觹0201限制性的CD8+CTL表位。 展开更多
关键词 原发性胆汁性肝硬化 自身抗原 CD8^+ctl抗原表位
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HLA-A^*0201限制性CTL表位肽的三维定量构效关系的研究 被引量:6
10
作者 林治华 胡勇 吴玉章 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第18期1835-1840,共6页
运用比较分子力场 (CoMFA)和比较分子相似性指数分析 (CoMSIA)方法研究了 5 0个HLA A 0 2 0 1限制性CTL表位九肽结构与亲和性间的关系 ,另外 15个表位九肽作为预测集用于检验模型的预测能力 .结果表明采用CoMSIA得到的构效关系模型 (q2 ... 运用比较分子力场 (CoMFA)和比较分子相似性指数分析 (CoMSIA)方法研究了 5 0个HLA A 0 2 0 1限制性CTL表位九肽结构与亲和性间的关系 ,另外 15个表位九肽作为预测集用于检验模型的预测能力 .结果表明采用CoMSIA得到的构效关系模型 (q2 =0 .62 8,r2 =0 .997,F =840 .419)要明显优于采用CoMFA得到的构效关系模型 .在CoMSIA计算中 ,当引入疏水场时 ,三维构效关系模型得到明显改善 ,通过该三维构效关系模型 ,可较精确地估算预测集中 15个CTL表位肽与HLA A 0 2 0 1间的亲和力 (r2pred=0 .743 ) .通过分析分子场等值面图在空间的分布 ,可以观察到表位肽分子周围的立体及疏水特征对表位肽与HLA A 0 2 0 1间结合亲和力的影响 ,从而为进一步对CTL表位肽进行结构改造并基于此进行治疗性疫苗分子设计提供理论基础 . 展开更多
关键词 细胞毒性t淋巴细胞 肿瘤免疫学 HLA ctl表位肽 结构 亲和性 三维定量构效关系 比较分子力场 比较分子相似性指数分析
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人Ⅱ型胶原的HLA-A~*0201限制性CTL表位的预测及初步鉴定 被引量:6
11
作者 陈晓玲 方勇飞 +4 位作者 尚小云 王书峰 高乐女 王莉 吴玉章 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期755-758,763,共5页
目的预测和初步鉴定类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)主要自身抗原Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,CⅡ)的HLA-A*0201限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)表位,为基于CⅡ抗原表位的特异性免疫治疗奠定基础。方法选取BIMAS... 目的预测和初步鉴定类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)主要自身抗原Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,CⅡ)的HLA-A*0201限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)表位,为基于CⅡ抗原表位的特异性免疫治疗奠定基础。方法选取BIMAS、SYFTEPITHI、IEDB、SVMHC、AntiJen预测工具预测该抗原HLA-A*0201限制性结合肽;人工合成待测表位肽,利用T2细胞株通过直接免疫荧光法测定各肽与HLA-A*0201分子的结合力。利用酶联免疫斑点检测(enzyme-linked immunospotassay,ELISPOT)方法检测候选肽刺激关节滑液单个核细胞(synovial fluid mononuclear cell,SFMC)分泌IFN-γ的能力。结果综合BIMAS、SYFTEPITHI、IEDB、SVMHC、AntiJen预测结果筛选出来可能与HLA-A*0201结合的5条肽。MHC亲和力实验表明,在候选的5条肽中,P1261、P1365及P1399具有与HLA-A*0201分子结合的能力,平均荧光强度分别为:1.35、2.53、1.78。ELISPOT试验结果表明,P1365具有刺激SFMC分泌IFN-γ的能力。结论表位预测结果与初步鉴定结果具有一致性,两者联合应用初步认为P1365是HLA-A*0201限制性CTL表位的可能性最大,为下一步表位鉴定及基于人CⅡ抗原表位的特异性免疫治疗奠定理论基础。 展开更多
关键词 HLA-A*0201 ctl 结合肽 表位 限制性
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白血病相关抗原MLAA-34 HLA-A2^+限制性CTL表位的预测及鉴定 被引量:4
12
作者 赵建强 何爱丽 +3 位作者 张王刚 张磊 古流芳 张文娟 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期424-428,共5页
目的采用生物信息学方法预测和鉴定白血病相关抗原MLAA-34 HLA-A2+限制性CTL表位,探索基于MLAA-34为靶标的白血病免疫治疗的可能性。方法采用超基序法和量化基序法对靶抗原MLAA-34 HLA-A2+限制性CTL表位进行预测;选取评分较高且排位在... 目的采用生物信息学方法预测和鉴定白血病相关抗原MLAA-34 HLA-A2+限制性CTL表位,探索基于MLAA-34为靶标的白血病免疫治疗的可能性。方法采用超基序法和量化基序法对靶抗原MLAA-34 HLA-A2+限制性CTL表位进行预测;选取评分较高且排位在前10位的抗原表位肽为候选表位肽,并进行人工合成。利用T2细胞,以肽结合试验及流式细胞术检测各候选CTL表位肽的结合亲和力[以荧光指数(fluorescence index,FI)表示];选取亲和力较高的4种多肽进行特异性CTLs的体外扩增,同时用LDH释放法对CTLs的活性进行检测。结果预测的前10位候选MLAA-34 CTL表位肽中,MLAA2(ILLKNQPKL)、MLAA3(LLTRHKVLV)、MLAA5(LLVTLI-ADL)和MLAA9(YLIKQIRDL)具有较高的亲和力,其FI分别为1.65、1.73、1.82、1.02,可作为候选表位肽进一步分析。细胞毒实验分析显示,MLAA5(LLVTLIADL)可在体外有效诱导特异性CTLs的产生,杀伤靶细胞。结论 MLAA5(LLVTLIADL)为白血病相关抗原MLAA-34的HLA-A2+限制性CTL表位,为基于MLAA-34的治疗性多肽疫苗的设计制备奠定了基础。 展开更多
关键词 白血病相关抗原 MLAA-34 ctl表位 生物信息学方法
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重组人乳头瘤病毒CTL表位疫苗的构建与表达 被引量:4
13
作者 王艳姝 田亚萍 +2 位作者 万敏 于永利 王丽颖 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期260-264,共5页
目的:构建人乳头瘤病毒的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位疫苗并在大肠杆菌中表达。方法:应用多轮PCR的方法合成CTL表位基因序列,将其亚克隆入pET28a表达载体中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白质,用Western blotting对重组蛋白进行鉴... 目的:构建人乳头瘤病毒的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位疫苗并在大肠杆菌中表达。方法:应用多轮PCR的方法合成CTL表位基因序列,将其亚克隆入pET28a表达载体中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白质,用Western blotting对重组蛋白进行鉴定。结果:采用计算机表位预测的方法选取HPV6、11、16型的CTL表位,通过5轮PCR人工合成人乳头瘤病毒CTL表位疫苗的基因片段HPVepi,用亚克隆的方法构建了重组表达质粒pET28a-Tat-HPVepi,并在大肠杆菌高效表达了该重组蛋白质,经Western blotting鉴定显示出特异性条带。结论:结合计算机表位预测和PCR的方法构建并在大肠杆菌中高效表达了一种人乳头瘤病毒CTL表位疫苗。 展开更多
关键词 乳头瘤状病毒 t淋巴细胞 细胞毒性 表位 t淋巴细胞 病毒疫苗 穿膜肽 大肠杆菌
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胞质转导肽-HBcAg_(18-27)-Tapasin诱导C57BL/6小鼠T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及HBV特异性CTL的表达 被引量:4
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作者 唐余燕 陈小华 +2 位作者 汤正好 臧国庆 余永胜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期229-232,共4页
目的观察融合蛋白胞质转导肽(CTP)-HBcAg18-27-Tapasin诱导C57BL/6小鼠T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及HBV特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的表达。方法 C57BL/6小鼠随机分为实验组CTP-HBcAg18-27-Tapasin、对照组CTP-HBcAg18-27、HBcAg18-27-... 目的观察融合蛋白胞质转导肽(CTP)-HBcAg18-27-Tapasin诱导C57BL/6小鼠T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及HBV特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的表达。方法 C57BL/6小鼠随机分为实验组CTP-HBcAg18-27-Tapasin、对照组CTP-HBcAg18-27、HBcAg18-27-Tapasin及空白组(生理盐水)。经肌肉免疫小鼠,ELISA检测T淋巴细胞分泌细胞因子;流式细胞术(FCM)检测T淋巴细胞内的细胞因子;CCK-8法检测T淋巴细胞增殖活性。结果实验组能有效刺激小鼠T细胞分泌Th1型细胞因子;FCM检测实验组融合蛋白诱导的CTL水平明显高于其他组;且实验组T淋巴细胞增殖活性明显高于对照组及空白组。结论 CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白免疫C57BL/6小鼠后,能提高T淋巴细胞增殖活性,能有效刺激T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及增加CTLs的表达。 展开更多
关键词 胞质转导肽 tAPASIN t细胞增殖 细胞毒t淋巴细胞
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HLA-A*0201限制性CTL表位定量结构与活性研究 被引量:6
15
作者 梅虎 周原 +1 位作者 廖志华 李志良 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第9期949-952,共4页
采用VHSE氨基酸结构描述子表征HLA-A*0201限制性表位结构,以遗传算法和偏最小二乘相结合(GA-PLS)对102个训练集进行定量构效关系建模.剔除3个异常样本后,据候选模型交互检验及50个外部测试集预测结果,筛选得到最优偏最小二乘模型(A=2),... 采用VHSE氨基酸结构描述子表征HLA-A*0201限制性表位结构,以遗传算法和偏最小二乘相结合(GA-PLS)对102个训练集进行定量构效关系建模.剔除3个异常样本后,据候选模型交互检验及50个外部测试集预测结果,筛选得到最优偏最小二乘模型(A=2),其R2,Q2和Rp2red分别为0.755,0.621和0.680.构效研究显示:CTL表位活性主要与1,2,7,8,9位氨基酸残基疏水、1,2位立体及6位残基电性等性质密切相关. 展开更多
关键词 细胞毒t细胞 表位 定量构效关系 遗传算法 偏最小二乘
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乙型肝炎病毒包膜区和核心区CTL抗原表位变异对感染慢性化及疾病转归的影响 被引量:5
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作者 哈明昊 佘会元 +6 位作者 吴建秋 孙莉萍 沈文娟 黄钟鸣 陈晓兰 单文艳 何慧芳 《实用肝脏病杂志》 CAS 2015年第6期581-584,共4页
目的探讨HBV包膜区和核心区细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗原表位变异的规律及对疾病发展转归的影响。方法本研究选择无症状HBsAg携带者(ASC)38例,慢性乙型肝炎(CHB)35例,乙型肝炎肝硬化(Lc)23例。采用DNA测序法检测HBV包膜区和核... 目的探讨HBV包膜区和核心区细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗原表位变异的规律及对疾病发展转归的影响。方法本研究选择无症状HBsAg携带者(ASC)38例,慢性乙型肝炎(CHB)35例,乙型肝炎肝硬化(Lc)23例。采用DNA测序法检测HBV包膜区和核心区病毒序列及表位变异情况,并分析其与临床转归的关系。结果在人组患者中,HBV包膜区CTL抗原表位41~49、88~96、97~108、172-180和185~194变异率分别为48个(55.2%)、13个(14.9%)、11个(12.6%)、9个(10.3%)和6个(6.9%);HBVCTL41~49位变异率在CHB和肝硬化患者中的变异率分别为60.0%和65.2%,显著高于ASCE31.6%,P〈0.05];HBV核心区CTL抗原表位18~27和91~95的变异率分别为18个(56.2%)和14个(43.8%),HBVCTLl8~27位的变异率在慢性乙型肝炎和肝硬化患者中分别为20.0%和30.4%,显著高于ASC[10.5%,P〈O.05];多变量分析表明,HBV核心区CTL4149的变异是预示HBV感染后患者肝内炎症活动、慢性乙型肝炎病程进展、迁延并发生肝炎肝硬化的独立危险因素。结论HBVCTL变异是HBV感染慢性化的重要原因,预示病情将进展或加重。 展开更多
关键词 乙型肝炎 细胞毒性t淋巴细胞 抗原表位 变异
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穿心莲二萜类化合物对B16细胞致敏小鼠CTL杀伤活性的影响 被引量:3
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作者 李满妹 徐炎 +4 位作者 程燕 张坤 吕艳青 姚新生 栗原博 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期688-692,共5页
目的研究穿心莲二萜类化合物(DAP)对B16细胞致敏小鼠脾脏CTL杀伤活性的影响。方法将♂BALB/c小鼠分为对照组、致敏组、50mg·kg-1及150mg·kg-1DAP给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群,乳酸脱氢酶(LDH... 目的研究穿心莲二萜类化合物(DAP)对B16细胞致敏小鼠脾脏CTL杀伤活性的影响。方法将♂BALB/c小鼠分为对照组、致敏组、50mg·kg-1及150mg·kg-1DAP给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群,乳酸脱氢酶(LDH)法和DiO/PI双染色法分别测定CTL杀伤活性。结果50mg·kg-1及150mg·kg-1DAP口服给药可以增加B16细胞致敏小鼠脾脏淋巴细胞中T细胞及CD8+T细胞比例,降低T细胞中CD4+/CD8+比值并增强CTL对B16细胞的杀伤活性。结论DAP可增加B16细胞致敏小鼠脾脏T细胞比例及提高CTL杀伤活性。 展开更多
关键词 穿心莲 二萜类化合物 B16细胞 ctl 流式细胞术
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丙型肝炎病毒多CTL表位树突状细胞疫苗的构建及体外刺激T细胞应答 被引量:3
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作者 周云 李端 +5 位作者 陈琳 赵甫涛 马力 汪鸿 潘蕾 贾战生 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第1期40-44,共5页
目的构建丙型肝炎病毒(HCV)多细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位树突状细胞(DC)疫苗,观察其体外刺激的T细胞反应,为下一步做体内免疫实验提供一定的资料。方法构建和制备出含绿色荧光蛋白(GFP)标签的HCV两个CTL表位的重组腺病毒,感染DC,直接... 目的构建丙型肝炎病毒(HCV)多细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位树突状细胞(DC)疫苗,观察其体外刺激的T细胞反应,为下一步做体内免疫实验提供一定的资料。方法构建和制备出含绿色荧光蛋白(GFP)标签的HCV两个CTL表位的重组腺病毒,感染DC,直接在荧光显微镜下或用流式细胞仪检测其感染率;RT-PCR和Western Blot方法检测HCV多CTL表位的表达。流式细胞术分析感染前后DC的CD80、CD83、CD86和人类白细胞抗原(HLA)-DR的表达,CCK-8法观察感染重组腺病毒的DC促进T细胞的增殖效应。ELISA检测重组腺病毒刺激后的DC培养上清液内白细胞介素(IL)-12及DC和T细胞混合培养上清液内干扰素(IFN)-γ的含量。用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性CTL的杀伤活性。结果成功构建含GFP标签的HCV多CTL表位的重组腺病毒,并在DC中表达。重组腺病毒能促进DC成熟,DC的CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达分别为(71.19±3.29)%、(81.21±5.07)%、(91.23±4.24)%、(97.95±5.31)%。感染DC后促进同源T细胞增殖,DC:T为1:10时增殖指数为6.806±0.247。分泌的IL-12和IFN-γ也明显增多,分别达到(193.83±6.25)pg/ml和(111.14±2.09)pg/ml。感染DC刺激的CTL能特异性杀伤转染FL-J6/JFH的Huh-7.5细胞,当效靶比为100:1时,AD1-DC-L的杀伤率为35.99%。结论重组多CTL表位腺病毒在体外能有效感染DC,促进了T细胞反应,为下一步抗HCV的DC疫苗研制打下基础。 展开更多
关键词 肝炎病毒属 表位 树突细胞 病毒性肝炎疫苗 t淋巴细胞 细胞毒性
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胰腺癌高表达抗原MUC4 CTL表位肽的筛选与改造 被引量:4
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作者 范柳笛 刘辉 +1 位作者 袁磊 时冉冉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期811-816,共6页
目的:观察胰腺癌高表达抗原黏蛋白4(MUC4)的改造表位是否有HLA-A2限制性抗肿瘤能力。方法:首先运用RT-PCR和Western blot方法检测MUC4在胰腺癌细胞系CAPAN-2和ASPC-1的表达情况。通过Net CTL 1.2、BIMAS、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分... 目的:观察胰腺癌高表达抗原黏蛋白4(MUC4)的改造表位是否有HLA-A2限制性抗肿瘤能力。方法:首先运用RT-PCR和Western blot方法检测MUC4在胰腺癌细胞系CAPAN-2和ASPC-1的表达情况。通过Net CTL 1.2、BIMAS、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分来选取MUC4的HLA-A2限制性表位;替换MUC4抗原锚定位点氨基酸获得改造肽;候选表位肽的合成方法为标准的Fmoc化学合成法,结合力实验用于检测候选表位与T2A2细胞表面HLA-A2分子的结合能力,ELISPOT实验检测候选表位肽诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)分泌IFN-γ的能力,体外细胞毒实验活性检测候选肽诱导CTL的能力。结果:MUC4在胰腺癌细胞系CAPAN-2和ASPC-1均有表达。P1944-1Y、P1944-2L、P1944-1Y2L、P2004和P2004-1Y9V具有较好的结合力,且P2004-1Y9V、P1944-1Y2L等改造肽与HLA-A2的结合力高于原肽。ELISPOT实验结果显示表位肽P1944、P1944-1Y2L、P2004和P2004-1Y9V诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。P1944-1Y2L和P2004-1Y9V诱导特异性T细胞免疫分泌的IFN-γ略高于原肽。细胞毒实验结果显示表位P1944、P1944-1Y2L、P2004和P2004-1Y9V对CAPAN-2细胞均有一定的杀伤作用。P1944-1Y2L和P2004-1Y9V特异性CTLs对CAPAN-2细胞杀伤率高于原肽特异性CTLs。结论:MUC4抗原改造表位P1944-1Y2L、P2004-1Y9V与天然表位P1944、P2004相比有更高的HLA-A2分子亲和力,保留了原有的免疫原性,并且改造肽抗肿瘤免疫效应强于天然表位。P1944-1Y2L和P2004-1Y9V是优秀的MUC4抗原的HLAA2限制性CTL候选表位,可以成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位。 展开更多
关键词 黏蛋白4 表位 细胞毒性t淋巴细胞
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生物信息学方法在CTL表位预测中的应用 被引量:4
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作者 支轶 吴玉章 万瑛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期155-159,共5页
细胞毒性T淋巴细胞(CytotoxicTlymphocyte ,CTL)在机体抗感染免疫和肿瘤免疫中发挥重要作用。引起有效CTL免疫应答的,并非完整的蛋白质抗原分子,而是抗原来源的特异性CTL表位。因此,对CTL表位作出高效、准确地预测,进而通过实验方法鉴定... 细胞毒性T淋巴细胞(CytotoxicTlymphocyte ,CTL)在机体抗感染免疫和肿瘤免疫中发挥重要作用。引起有效CTL免疫应答的,并非完整的蛋白质抗原分子,而是抗原来源的特异性CTL表位。因此,对CTL表位作出高效、准确地预测,进而通过实验方法鉴定,是基于表位的疫苗设计以及发展特异性CTL免疫应答检测技术的关键。近年来,随着生物信息学的迅猛发展,一系列该领域的新成果被应用于CTL表位预测。通过建立新的算法和编写相应程序,大大提高了CTL表位鉴定的效率,加快了基于表位的新药研发进程。 展开更多
关键词 ctl 表位 生物信息学 基序 人工神经网络
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