P53与两型TNF-α介导的杀瘤效应的关系

目的 :探讨p53与分泌型和跨膜型TNF介导的杀瘤效应的关系。方法 :应用PCR SSCP方法确定受试肿瘤细胞p53基因突变情况 ,并分别将野生型p53表达质粒转染p53突变细胞株 ,将突变型p53转染p53无异常的肿瘤细胞 ,检测转染对两型TNF杀瘤效应的影响。结果 :多数S TNF耐受肿瘤细胞株(Raji、HL 60、K562 )均可检出p53突变 ;转染野生型p53可增强S TNF α对靶细胞的杀伤作用 ,转染突变型p53对S TNF α的胞毒效应有抑制作用 ;而TM TNF α的杀瘤效应不受野生型p53的影响。结论 :TM TNF α与S TNF α相比有更广的杀瘤谱 ,TM TNF α的杀瘤效应并不依赖野生型p53 ,这可能是TM TNF α比S TNF α杀瘤谱更广的机制之一。

量子点-CK19抗体荧光探针对乳腺癌细胞免疫荧光标记及毒性研究

目的:制备量子点-细胞角蛋白19抗体(cytokeratin,CK19)荧光探针,利用其光学性质和特异性识别能力对乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行荧光标记,并探讨其细胞毒性。方法:用水热法合成CdTeS量子点,并将其与CK19抗体连接。通过直接免疫荧光法,利用合成的量子点-CK19抗体探针对乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行荧光标记,并观察探针在细胞内的分布。分别采用流式细胞术和MTT法,检测探针作用后细胞凋亡情况和增殖变化。结果:量子点-CK19抗体探针能与抗原特异性结合,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜示,该探针能有效对乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行特异性荧光标记,荧光主要位于细胞质和细胞膜,荧光清晰明亮,持续时间长。与对照组相比,量子点-CK19抗体探针浓度≤2nmol/L时,对照组乳腺癌细胞株MDA-MB-231的凋亡率为(3.763±0.130)%,0.25nmol/L组为(3.760±0.161)%,0.5nmol/L组为(3.827±0.107)%,1nmol/L组为(3.947±0.081)%,2nmol/L组为(4.013±0.055)%。单因素方差分析结果显示,各剂量组与对照组比较,差异无统计学意义,F=3.023,P=0.071。量子点-CK19抗体探针可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖,F=133.407,P<0.001;且存在时间-效应(F=299.142,P<0.001)和剂量-效应(F=9.105,P<0.001)关系,随着探针浓度的增加和作用时间的延长,A值逐渐减小,但除了浓度2nmol/L作用48h外,其余各组的抑制率均<7%。结论:成功制备了量子点-CK19抗体荧光探针,该探针能有效对乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行荧光标记,且具有良好的光学性质和较低的细胞毒性。