猪流感H1N1亚型病毒dM2蛋白的原核表达及鉴定

为构建猪流感病毒H1N1亚型dM2蛋白的原核表达系统,获得具有生物活性的GST-dM2重组蛋白。研究从H1N1亚型猪流感病毒核酸中克隆出M2全长基因,采用OE-PCR技术得到缺失跨膜区的M2基因(dM2),构建重组表达质粒pGEX-6p-dM2,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后,进行GST亲和层析柱纯化和Western-blotting鉴定。结果表明GST-dM2融合蛋白在大肠杆菌BL21中获得较高表达,并以可溶形式存在,表达量为22.75%。纯化后的GST-dM2重组蛋白为38 kD,经Western-blotting证明具有良好的反应原性。GST-dM2重组蛋白的成功获得,为进一步研究猪流感亚单位疫苗奠定了基础。

吡格列酮对DM2大鼠肝脏及MCP-1表达的影响

目的:观察吡格列酮对2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,DM2)大鼠血、尿单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)表达及肝脏组织结构和功能的影响。方法:正常对照组(NC组)以普通饲料喂养;DM2 SD大鼠模型采用高糖高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射的方法建立。将模型组大鼠随机分为糖尿病组(DM组)和吡格列酮组(PIO组),后者采用吡格列酮对PIO组大鼠进行干预治疗。8周后检测血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)水平、生化指标及肝脏组织病理的改变情况,同时检血、尿MCP-1水平、尿白蛋白/尿肌酐(urinary albumin/creatinine ratio,ACR)、尿视黄醇结合蛋白(urinaryretinol binding protein,URBP)的变化。结果:与NC组比较,DM组和PIO组第8周空腹血糖及HbAlc水平均明显升高,但DM组及PIO组间差异无统计学意义(P>0.05);第8周DM组与PIO组的尿ACR、URBP、血及尿MCP-1和肝脏纤维化程度均高于NC组(P<0.05),而PIO组4项指标较DM组明显降低,且UMCP-1与ACR呈正相关;病理显示,PIO组大鼠肝脏病变程度均较DM组明显减轻,肝组织MCP-1表达减少。结论:吡格列酮对DM2大鼠肝脏有明显的保护作用,其保护作用是独立于降糖作用之外的。其机制可能与其抑制肝组织MCP-1表达及其合成有关。

DM2患者血脂、尿酸和CRP测定的临床分析

目的:为了探讨2型糖尿病(DM2)患者血脂、尿酸(SUA)和C-反应蛋白(CRP)测定的临床意义。方法:采用生化法测定了78例DM2患者和66例正常对照组的血脂(TC、TG、HDL-C和LDL-C)水平,过氧化物酶免疫分析测定了SUA水平以及免疫比浊法测定了CRP水平,并与66例正常对照组进行了对比性分析。结果:78例DM2患者的TC、TG和LDL-C水平较之66例正常对照组明显增加(P<0.05～<0.01),血清HDL-C水平明显降低(P<0.01),尤以血清TG水平的增高和HDL-C水平的降低最为突出。36例DM2患者治疗明显好转后,血清TC和LDL-C恢复正常,TG水平明显降低(P<0.05),HDL-C水平明显增高(P<0.05),78例DM2患者的SUA和CRP水平较之66例正常对照组明显增高(P均<0.01),36例DM2患者治疗明显好转后,SUA和CRP水平明显降低(P均<0.05)。结论:DM2患者不仅存在着血脂和尿酸代谢紊乱,而且也是一种低度炎症反应性疾病。血脂、SUA和CRP水平的动态观察是考核疗效有价值的指标。

DM2患者微血管病变时测定血浆ET、hs-CRP和TNF-α水平的临床意义

目的:为了探讨2型糖尿病(DM2)患者微血管病变时测定血浆ET、hs-CRP和TNF-α水平的临床意义。方法:ET、hs-CRP和TNF-α测定均采用放射免疫分析,并与65例正常对照组进行了对比性分析。结果:126例DM2患者的血浆ET、hs-CRP和TNF-α水平均非常明显地高于正常对照组(P均<0.01);50例伴有微血管病变的DM2患者血浆ET、hs-CRP和TNF-α水平明显高于不伴有微血管病变的DM2患者(P分别为<0.05、<0.01和<0.01)和非常明显高于正常对照组(P<0.001)。表明:血浆ET、hs-CRP和TNF-α水平随DM2的严重程度而增高。结论:血浆ET、hs-CRP和TNF-α水平是诊断DM2患者或早期发现DM2微血管病变的有效指标。

血清CysC和RBP联检对糖尿病患者肾损害早期诊断的价值

目的:探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)和视黄醇结合蛋白(retinol binding pro-tein,RBP)联检对诊断2型糖尿病(DM2)患者肾损害早期的临床价值。方法:选择91例DM2患者,采用乳胶颗粒增强免疫比浊法检测血清Cys C,免疫透射比浊法检测血清RBP,酶法检测血清BUN、SCr的含量,与44例健康体检者(健康对照组)进行对照比较。结果:患者血清Cys C、RBP、BUN和SCr水平均高于对照组,联检Cys C、RBP的阳性率明显高于单项。结论:血清Cys C和RBP是DM2患者早期肾损害的良好指标,联检可提供较新的概念,有助于对患者肾脏损伤的早期诊断和疗效观察。

2型糖尿病患者的血脂分析和超敏C-反应蛋白测定在诊断和治疗中的临床应用

目的 探讨2型糖尿病患者血脂分析和hs-CRP测定在诊断和治疗中的临床应用.方法 利用生化法测定了70例DM2患者治疗前后的血脂水平,速率散射比浊法测定了血清中的hs-CRP.并与正常对照组进行了比较性研究.结果 70例DM2患者治疗前血脂TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB水平均较之60例正常对照组明显增高（P〈0.05～0.01）,而血脂APOA与正常对照组无明显差异（P〉0.05）.血清hs-CRP水平较之正常对照组明显增高（P〈0.01）;治疗后血脂TC、TG、HDL-C、LDL-C.APOA、APOB和hs-CRP水平均恢复至正常水平（P〉0.05）,而血清TG水平虽降低明显,但较之正常对照组仍明显增高（P〈0.05）.结论 糖尿病是一种血脂代谢紊乱和炎症性疾病,治疗前后血脂分析和炎症因子水平的测定,足糖尿病诊断和随访观察的有效手段.