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Neurological consequences of human calmodulin mutations
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作者 Helene H.Jensen Anders Olsen 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期943-944,共2页
When calcium ions enter the cytosol,it is a stimulatory signal for cellular events.The calcium sensor calmodulin picks up the change in calcium concentration and relays this information to its more than 300 downstream... When calcium ions enter the cytosol,it is a stimulatory signal for cellular events.The calcium sensor calmodulin picks up the change in calcium concentration and relays this information to its more than 300 downstream interaction partners.In this way,calmodulin affects cellular processes such as fertilization,muscle contraction,neuronal firing,and apoptosis.That is,calmodulin is involved in(nearly)everything!The significance of calmodulin is emphasized by the fact that we all carry three different genes(CALM1,2,3)on different chromosomes that encode the exact same calmodulin protein,and these are all expressed in all cell types.Moreover,throughout vertebrate evolution,the protein sequence has remained completely unchanged. 展开更多
关键词 consequences unchanged calmodulin
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miR-132-3p/CAMTA1对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠施万细胞的调控作用
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作者 朱瑾 欧阳欣 +4 位作者 刘屿 钱叶梅 夏斌 施延安 俞力夫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期571-577,共7页
目的探讨miR-132-3p通过钙调素结合转录因子1(CAMTA1)对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠(FNI)中施万细胞的调控作用。方法用I-125粒子辐射大鼠施万细胞,并在细胞中转染miR-132-3p mimic、miR-132-3p inhibitor以及sh-CAMTA1。免疫荧光检... 目的探讨miR-132-3p通过钙调素结合转录因子1(CAMTA1)对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠(FNI)中施万细胞的调控作用。方法用I-125粒子辐射大鼠施万细胞,并在细胞中转染miR-132-3p mimic、miR-132-3p inhibitor以及sh-CAMTA1。免疫荧光检测S100B和β-TubulinⅢ荧光强度。RT-qPCR检测miR-132-3p的表达,Western blot检测CAMTA1蛋白表达。EdU染色评估细胞增殖,Transwell检测细胞迁移。同时,构建FNI大鼠模型并在大鼠面部植入I-125粒子,HE、LFB染色以及IF染色评估大鼠面神经组织的病理损伤。StarBase v2.0数据库和双荧光素酶报告实验验证miR-132-3p和CAMTA1的靶向关系。结果S100B和β-TubulinⅢ在大鼠施万细胞中显著表达。I-125粒子辐射组中miR-132-3p表达降低(P<0.001),抑制细胞的增殖(P<0.001)和迁移(P<0.001)。过表达miR-132-3p或敲降CAMTA1显著促进施万细胞的增殖(P<0.001)和迁移(P<0.05),敲降miR-132-3p则具有相反的作用。机制研究显示,miR-132-3p靶向负调控CAMTA1。体内实验结果显示,过表达miR-132-3p通过抑制CAMTA1的蛋白表达,减弱I-125粒子对FNI大鼠面神经损伤的促进作用。结论过表达miR-132-3p抑制CAMTA1的表达,促进施万细胞的增殖和迁移,抑制I-125对FNI大鼠面神经损伤的促进作用。 展开更多
关键词 面神经损伤 miR-132-3p 施万细胞 钙调素结合转录因子1 增殖 迁移
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生姜提取物对染铝毒大鼠学习记忆功能和神经细胞结构的影响及其可能作用机制
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作者 谢晶 蒋小云 +3 位作者 覃黎黎 韦益宇 郑艳艳 杨莉 《广西医学》 CAS 2024年第5期713-720,共8页
目的分析生姜提取物(GRE)对铝染毒大鼠学习记忆功能及神经细胞结构的影响,并基于钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、蛋白激酶C(PKC)探讨其可能的作用机制。方法将36只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、铝染... 目的分析生姜提取物(GRE)对铝染毒大鼠学习记忆功能及神经细胞结构的影响,并基于钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、蛋白激酶C(PKC)探讨其可能的作用机制。方法将36只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、铝染毒组、临床药物组、低剂量GRE(L⁃GRE)组、中剂量GRE(M⁃GRE)组、高剂量GRE(H⁃GRE)组,每组6只大鼠。空白对照组大鼠自由饮用不含氯化铝的饮用水,其余组大鼠饮用含10 mg/mL结晶氯化铝的饮用水。3个月后给予空白对照组和铝染毒组大鼠灌胃生理盐水,临床药物组大鼠灌胃盐酸多奈哌齐溶液,分别给予L⁃GRE组、M⁃GRE组、H⁃GRE组大鼠灌胃100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg GRE溶液。持续干预4周后,采用Morris水迷宫实验评估大鼠的学习记忆功能,通过HE染色观察大鼠海马组织形态变化,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot检测大鼠海马组织CaMKⅡ、nNOS、PKC mRNA和蛋白表达水平。结果(1)与空白对照组相比,铝染毒组大鼠的逃避潜伏期延长且穿越平台次数减少(P<0.05),海马组织的神经细胞皱缩,神经细胞数量明显减少,CaMKⅡ、nNOS、PKC的mRNA表达水平及nNOS、PKC的蛋白表达水平降低(P<0.05)。(2)与铝染毒组比,L⁃GRE组、M⁃GRE组和H⁃GRE组大鼠的逃避潜伏期缩短,临床药物组、M⁃GRE组、H⁃GRE组大鼠的穿越平台次数增加(P<0.05);各给药组大鼠海马组织病理形态有不同程度的改善;临床药物组大鼠的CaMKⅡ、nNOS和PKC mRNA表达水平升高,各剂量GRE组大鼠nNOS和PKC mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。(3)与临床药物组相比,M⁃GRE组和H⁃GRE组大鼠的逃避潜伏期,以及各剂量GRE组的穿越平台次数和目标象限停留时间差异无统计学意义(P>0.05);各剂量GRE组大鼠海马组织病理形态改善程度更为明显;M⁃GRE组、H⁃GRE组大鼠的nNOS、PKC蛋白表达水平升高,L⁃GRE组大鼠的nNOS蛋白表达水平升高(P<0.05)。(4)各剂量GRE组组间大鼠逃避潜伏期、穿越平台次数及目标象限停留时间差异无统计意义(P>0.05);随GRE干预剂量增加,大鼠海马组织病理形态的改善效果越明显;H⁃GRE组大鼠的CaMKⅡmRNA表达水平高于L⁃GRE组(P<0.05)。结论GRE能够改善铝染毒大鼠的神经细胞结构和学习记忆功能,其中对神经细胞结构的改善效果优于盐酸多奈哌齐,对学习功能的改善效果与盐酸多奈哌齐相当。GRE的作用机制可能与拮抗铝所致CaMKⅡ、nNOS和PKC表达水平下降有关。 展开更多
关键词 铝染毒 生姜提取物 学习记忆 神经细胞结构 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 神经元型一氧化氮合酶 蛋白激酶C 大鼠
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老年急性脑梗死患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1变化及其与预后的关系 被引量:1
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作者 张恒 杨燕 +7 位作者 冯丹宁 王佩 王祝青 马娟娟 雷华斌 马亚如 叶青 王慧 《海南医学》 CAS 2024年第3期353-357,共5页
目的检测老年急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、钙调蛋白(CaM)、水通道蛋白1(AQP1)水平,并探讨其与预后的关系。方法回顾性分析2021年2月至2022年2月于北京中医药大学孙思邈医院就诊的104例老年急性脑梗死患者的临床资料... 目的检测老年急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、钙调蛋白(CaM)、水通道蛋白1(AQP1)水平,并探讨其与预后的关系。方法回顾性分析2021年2月至2022年2月于北京中医药大学孙思邈医院就诊的104例老年急性脑梗死患者的临床资料,依据入院后美国国立卫生研究院卒中(NHISS)量表评分进行分组,其中重度组23例,中度组43例,轻度组38例;采用改良Rankin(mRS)量表评估所有患者3个月后预后情况,并依据评分分组,其中预后不佳组37例,预后良好组67例,比较不同神经功能缺损程度患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平,应用Spearman相关性分析老年急性脑梗死患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平与神经功能缺损程度的相关性,采用多因素Logistic回归分析探究老年急性脑梗死患者预后不佳的影响因素。结果重度组患者的Lp-PLA2、CaM、AQP1水平分别为(328.24±84.26)U/L、(227.59±61.34)ng/mL、(44.51±8.26)μg/L,明显高于中度组的(264.56±61.44)U/L、(150.17±44.38)ng/mL、(35.19±5.98)μg/L和轻度组的(201.83±55.12)U/L、(83.24±20.14)ng/mL、(24.32±3.48)μg/L,且中度组患者的Lp-PLA2、CaM、AQP1水平明显高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析显示,老年急性脑梗死患者Lp-PLA2、CaM、AQP1水平与神经功能缺损程度均呈正相关性(P<0.05);预后不佳组与预后良好组患者的性别、年龄、身体质量指数(BMI)、基础疾病等资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),但预后不佳组患者的NIHSS评分为(16.58±3.51)分,明显高于预后良好组的(14.24±2.35)分,血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平分别为(273.84±53.26)U/L、(174.69±48.65)ng/mL、(41.32±6.88)μg/L,明显高于预后良好组的(211.56±51.89)U/L、(130.43±38.55)ng/mL、(32.64±3.72)μg/L,差异均具有统计学意义(P<0.05);经多因素Logistic回归分析显示,血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平为老年急性脑梗死患者预后不佳的危险因素(P<0.05)。结论伴随老年急性脑梗死神经功能缺损程度加重,患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平均会出现升高现象;且血清Lp-PLA2、CaM、AQP1为老年急性脑梗死患者预后不佳的危险因素,值得临床重视。 展开更多
关键词 急性脑梗死 老年 脂蛋白相关磷脂酶A2 钙调蛋白 水通道蛋白1 预后
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生血通便颗粒对血虚肠燥型慢传输型便秘大鼠结肠肌电及Ca^(2+)/CaM/MLCK信号通路的影响 被引量:1
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作者 罗雯鹏 王真权 +2 位作者 周佳敏 肖俐敏 王军文 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第2期97-103,共7页
目的观察生血通便颗粒对血虚肠燥型慢传输型便秘(STC)大鼠结肠肌电及Ca^(2+)/CaM/MLCK信号通路的影响,探讨其治疗STC的作用机制。方法采用洛哌丁胺灌胃结合尾部放血法建立血虚肠燥型STC大鼠模型。将大鼠分为对照组、模型组、枸橼酸莫沙... 目的观察生血通便颗粒对血虚肠燥型慢传输型便秘(STC)大鼠结肠肌电及Ca^(2+)/CaM/MLCK信号通路的影响,探讨其治疗STC的作用机制。方法采用洛哌丁胺灌胃结合尾部放血法建立血虚肠燥型STC大鼠模型。将大鼠分为对照组、模型组、枸橼酸莫沙必利组和生血通便颗粒组,每组8只,给药组分别予相应药物灌胃,连续14 d。观察大鼠治疗前后一般状况,检测大鼠粪便含水量,生物机能实验系统检测结肠肌电慢波频率、振幅及变异系数,测定肠道推进率,HE染色观察结肠组织病理变化,比色法检测结肠平滑肌细胞Ca^(2+)浓度,Western blot检测结肠平滑肌组织缝隙连接蛋白43(Cx43)、钙调蛋白(CaM)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化肌球蛋白轻链20(p-MLC20)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠体质量、粪便含水量和肠道推进率显著降低(P<0.01),结肠肌电慢波频率减慢、频率变异系数增加(P<0.01),慢波振幅和振幅变异系数增加(P<0.01);结肠黏膜结构受损,可见炎性改变,糜烂明显,结肠平滑肌细胞内Ca^(2+)浓度及Cx43、CaM、MLCK、p-MLC20蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,枸橼酸莫沙必利组和生血通便颗粒组大鼠体质量、粪便含水量和肠道推进率显著升高(P<0.05,P<0.01),结肠肌电慢波频率加快、频率变异系数减小(P<0.01),慢波振幅和振幅变异系数减小(P<0.05,P<0.01);结肠黏膜结构较完整,糜烂情况改善,结肠平滑肌细胞内Ca^(2+)浓度及Cx43、CaM、MLCK、p-MLC20蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论生血通便颗粒可改善血虚肠燥型STC大鼠症状,恢复结肠动力,其机制可能与调节结肠肌电节律性、激活Ca^(2+)/CaM/MLCK信号通路相关。 展开更多
关键词 生血通便颗粒 慢传输型便秘 钙离子 钙调蛋白 肌球蛋白轻链激酶
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Changes of Calmodulin Distribution in the Embryo Sac of Oryza sativa Before and After Fertilization: an Immunogold Electron Microscope Study 被引量:4
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作者 杨军 赵洁 +1 位作者 梁世平 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第3期264-272,共9页
Changes of calmodulin (CaM) distribution in the embryo sac of rice (Oryza sativa subsp. Japonica) at various stages before and after fertilization have been investigated by using immunogold electron microscopy. Before... Changes of calmodulin (CaM) distribution in the embryo sac of rice (Oryza sativa subsp. Japonica) at various stages before and after fertilization have been investigated by using immunogold electron microscopy. Before pollination, both cytoplasm and vacuoles of the egg cell, synergids and central cell were labeled by gold particles. A small amount of gold particles were localized in the nucleus, endoplasmic reticulum, mitochondria and dictyosomes. From pollination to fertilization, CaM amount increased in these cells, especially rich in the starch of amyloplasts. Increase of gold particles in the central cell began about 2 h earlier than that in the egg cell. There was no distinct difference of CaM amount between the degenerated and the persistent synergids. It is interesting to observe an obvious change of CaM distribution form during pollination and fertilization from scattered single particles to clustered particles, and back again to single particles after the fertilization finished. CaM was also localized extracellularly in the embryo sac wall as well as in the wall and intercellular space of nucellus cells. The extracellular CaM also changes in its amount and form after pollination. These results suggest that CaM, either intra- or extra-cellular, may play important roles in fertilization and zygote formation. 展开更多
关键词 calmodulin POLLINATION FERTILIZATION rice embryo sac immunogold electron microscope localization
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甘蔗类钙调素ScCML13与SCMV运动蛋白P3N-PIPO的互作研究
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作者 玉泉馨 杨宗桃 +7 位作者 张海 程光远 焦文迪 曾康 罗廷绪 黄国强 王璐 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1855-1866,共12页
类钙调素(Calmodulin-like,CML)是植物特有的钙信号感受器蛋白之一,参与植物生长发育和响应外界环境信号转导。甘蔗(Saccharum spp.hybrid)中CML应答甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)侵染尚未见报道。本研究从甘蔗热带种Badil... 类钙调素(Calmodulin-like,CML)是植物特有的钙信号感受器蛋白之一,参与植物生长发育和响应外界环境信号转导。甘蔗(Saccharum spp.hybrid)中CML应答甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)侵染尚未见报道。本研究从甘蔗热带种Badila(S.officinarum)中克隆了一个CML基因,命名为ScCML13。该基因开放读码框(open reading frame,ORF)长度为519 bp,编码172 aa。生物信息学分析表明,ScCML13属于稳定的亲水脂溶蛋白,无跨膜结构域,有4个结合Ca2+的EF-hand结构域;系统进化树分析表明,该蛋白在单子叶和双子叶植物中及单子叶C3和C_(4)植物中具有明显分化;酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)试验表明,ScCML13与SCMV的运动蛋白P3N-PIPO互作。亚细胞定位试验表明ScCML13定位于内质网和细胞核。共定位试验发现ScCML13会干扰SCMV-P3N-PIPO的质膜(plasma membrane)或胞间连丝(plasmodesmata)定位。实时荧光定量PCR(Real Time Quantitative PCR,RT-qPCR)分析发现,ScCML13基因主要在甘蔗叶片中表达,在节间和根中的相对表达量低;ScCML13基因在感染SCMV后2 h显著上调,随后下调至与对照组相比的水平,而在感染后期上调。 展开更多
关键词 类钙调素 甘蔗花叶病毒 P3N-PIPO 蛋白互作
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Using Isolated Embryo Sacs and Early Proembryos for Localization of Calmodulin mRNA Before and After Fertilization in Nicotiana 被引量:3
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作者 陈绍荣 吕应堂 +1 位作者 杨弘远 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第7期686-689,共4页
An in situ hybridization technique for localization of calmodulin(CaM) mRNA in isolated entire embryo sacs and proembryos in Nicotiana tabacum L.cv.W38 has been developed. This technique can be applied to smal... An in situ hybridization technique for localization of calmodulin(CaM) mRNA in isolated entire embryo sacs and proembryos in Nicotiana tabacum L.cv.W38 has been developed. This technique can be applied to small amounts of materials in which a whole view of CaM mRNA distribution can be obtained. The authors revealed that CaM mRNA expression changes dramatically before and after fertilization. Especially interesting is that a prominent CaM mRNA band appears between the egg apparatus and polar nuclei temporarily during the period of pollination and fertilization. The band disappears just prior to fertilization and expands to a fan_shaped region that occupies the micropylar portion of the embryo sac. After fertilization, CaM mRNA accumulates in the elongated zygotes with higher concentration in their chalazal portion than in the micropylar portion. Such an asymmetrical pattern continues to manifest in the early proembryos. It is supposed that CaM mRNA may be involved in the early events and signaling steps associated with double fertilization and zygote polarization in higher plants. 展开更多
关键词 calmodulin mRNA in situ hybridization Embryo sac PROEMBRYO Nicotiana tabacum
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血清钙调蛋白水平与重型头颅损伤患者病情及预后的相关性
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作者 李凤玲 罗宽 杨学 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期926-929,共4页
目的探讨血清钙调蛋白水平与重型头颅损伤患者病情及预后的相关性。方法选取2021年1月至2023年6月武汉科技大学附属老年病医院和武汉科技大学附属普仁医院收治的老年重型头颅损伤患者208例,随访3个月,最终入选192例,根据预后情况分为预... 目的探讨血清钙调蛋白水平与重型头颅损伤患者病情及预后的相关性。方法选取2021年1月至2023年6月武汉科技大学附属老年病医院和武汉科技大学附属普仁医院收治的老年重型头颅损伤患者208例,随访3个月,最终入选192例,根据预后情况分为预后不良组56例和预后良好组136例。收集一般资料,采用酶联免疫吸附法测量所有患者入组时血清钙调蛋白水平,采用Pearson相关性分析血清钙调蛋白水平与重型头颅损伤患者病情的相关性,采用多因素logistic回归模型筛选重型头颅损伤患者预后的相关因素,并采用限制性立方样条拟合血清钙调蛋白水平与重型头颅损伤患者预后的关系。结果预后良好组中线移位、急性生理与慢性健康评分Ⅱ、钙调蛋白水平较预后不良组明显降低,格拉斯哥昏迷评分、白蛋白水平较预后不良组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Pearson相关性分析显示,血清钙调蛋白水平与重型头颅损伤患者病情呈负相关(r=-0.804,P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,急性生理与慢性健康评分Ⅱ(OR=1.248,95%CI:1.076~1.447,P=0.003)、钙调蛋白(OR=1.030,95%CI:1.017~1.044,P=0.001)为重型头颅损伤患者预后的危险因素,格拉斯哥昏迷评分(OR=0.730,95%CI:0.536~0.994,P=0.045)、白蛋白(OR=0.730,95%CI:0.649~0.822,P=0.001)为重型头颅损伤患者预后不良的保护因素。限制性立方样条显示,血清钙调蛋白水平与重型头颅损伤患者预后情况呈线性剂量-反应关系(χ^(2)=27.080,P<0.01)。结论血清钙调蛋白水平与重型头颅损伤患者病情及预后相关。 展开更多
关键词 钙调蛋白 颅脑损伤 预后 预测 数据相关性
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黑鲷×真鲷杂交子代与真鲷的Calmodulin基因克隆与表达分析 被引量:3
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作者 陈淑吟 张志勇 +3 位作者 吉红九 李鹏 赵永超 张志伟 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2018年第4期435-446,共12页
采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得的黑鲷(Acanthopagrus schlegelii,♂)×真鲷(Pagrus major,♀)的杂交子代F_1(AP)与真鲷(Pm)的两组Calmodulin(CaM)基因序列。通过生物软件分析了两者的差异及所表达的蛋白质特性;同时,应用实时... 采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得的黑鲷(Acanthopagrus schlegelii,♂)×真鲷(Pagrus major,♀)的杂交子代F_1(AP)与真鲷(Pm)的两组Calmodulin(CaM)基因序列。通过生物软件分析了两者的差异及所表达的蛋白质特性;同时,应用实时荧光定量PCR技术检测了APCaM与PmCaM在仔鱼及2龄鱼的6种不同组织中的表达特征。结果表明:1)克隆得到APCaM与PmCaM的cDNA全长分别为1 230 bp、1 210bp,两基因序列均具有一个450 bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF),编码了一个由149个氨基酸组成的多肽,该多肽包含有高度保守的4个EF-hand功能结构域。杂交F_1与真鲷的CaM基因非翻译区差异位点主要在3'端,ORF区域有5个氨基酸差异。2)两基因与其它鱼类的核苷酸序列相似性最高为95%,与氨基酸序列相似性最高为100%;从基因序列结构及蛋白质属性表明APCaM与PmCaM属保守的CaM基因家族。3)定量分析表明CaM在检测组织中均有表达,其中APCaM在脑中表达量最高,PmCaM在性腺中表达最高;APCaM与PmCaM在脑、肌肉、性腺及鳃中的表达存在显著差异(P<0.01),在肝、肾组织及仔鱼中的表达无显著差异(P>0.05);结合杂交F_1与双亲本在生长及性腺发育上的性状,推测CaM可能与生长及性腺发育调控有关。这些结果为探讨CaM基因在杂交F_1及真鲷亲本中的作用及鲷科育种研究提供基础资料。 展开更多
关键词 黑鲷×真鲷杂交子代 钙调蛋白 基因克隆 mRNA表达
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大蒜类钙调蛋白基因AsCML15和AsCML42的分离及其在渗透胁迫中的功能分析
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作者 王广龙 许吴俊 +3 位作者 陈洋洋 胡珍珠 孙敏 熊爱生 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期80-86,共7页
类钙调素蛋白(CMLs)是植物中的Ca 2+感受器之一,参与植物的生长发育和适应环境变化的过程。为了解大蒜CML的序列特征及其对渗透胁迫的响应,从大蒜品种苍山四六瓣中克隆得到AsCML15和AsCML42基因,并对其在干旱以及盐胁迫条件下的表达模... 类钙调素蛋白(CMLs)是植物中的Ca 2+感受器之一,参与植物的生长发育和适应环境变化的过程。为了解大蒜CML的序列特征及其对渗透胁迫的响应,从大蒜品种苍山四六瓣中克隆得到AsCML15和AsCML42基因,并对其在干旱以及盐胁迫条件下的表达模式进行了分析。结果表明,AsCML15和AsCML42基因开放阅读框长度分别为498,543 bp,编码165,180个氨基酸残基。AsCML15和AsCML42分别含有4,3个EF-hand结构域。AsCML42与拟南芥AtCML42和AtCML43在进化关系上更为接近,而AsCML15与拟南芥AtCML15、AtCML16亲缘关系较近。荧光定量PCR结果表明,AsCML15和AsCML42在鳞茎、叶片、根都有表达,且均能被200 mmol/L NaCl和15%PEG6000所诱导。AsCML15和AsCML42基因可能参与了大蒜抵御盐胁迫和干旱胁迫的过程,可进一步鉴定其生物学功能。 展开更多
关键词 大蒜 类钙调蛋白 基因克隆 表达分析 渗透胁迫
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新型抗癫痫药Q808对颞叶癫痫大鼠的改善作用及其机制
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作者 郑微微 高帆 +3 位作者 杨振林 李佳芮 郭晶晶 李今子 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1243-1249,共7页
目的:探讨新型抗癫痫药6-(4-氯苯氧基)-四唑^((5,1-a))酞嗪(Q808)对颞叶癫痫(TLE)大鼠神经元损伤的改善作用,并阐明其作用机制。方法:采用腹腔注射Q808的方法制备TLE大鼠模型。将45只造模成功大鼠随机分为模型组、低剂量Q808组和高剂量Q... 目的:探讨新型抗癫痫药6-(4-氯苯氧基)-四唑^((5,1-a))酞嗪(Q808)对颞叶癫痫(TLE)大鼠神经元损伤的改善作用,并阐明其作用机制。方法:采用腹腔注射Q808的方法制备TLE大鼠模型。将45只造模成功大鼠随机分为模型组、低剂量Q808组和高剂量Q808组,每组15只,低剂量Q808组和高剂量Q808组大鼠分别采用20和80 mg·kg^(-1) Q808灌胃,模型组大鼠采用等量0.3%羧甲纤维素钠灌胃,另选15只健康SD大鼠作为对照组。持续灌胃治疗4周后,观察各组大鼠行为表现,采用PONEMAH 6. X实验动物遥测平台记录各组大鼠脑电图,采用高尔基染色观察各组大鼠海马CA1神经元树突形态表现和神经元树突棘密度,采用Western blotting法检测各组大鼠海马组织中突触可塑性特异性蛋白钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)蛋白表达水平。结果:对照组大鼠活动正常,无抽搐等异常表现;模型组、低剂量Q808和高剂量Q808组大鼠出现不同程度活动减少、震颤点头、失去平衡、肌肉强直和前肢的抽搐,逐渐转变为全身肌肉强直和站立,随后向后跌倒,发作间期无抽搐发作。与对照组比较,模型组、低剂量Q808和高剂量Q808组大鼠癫痫发作总持续时间明显延长(P<0.01);与模型组比较,低剂量Q808和高剂量Q808组大鼠癫痫发作总持续时间明显缩短(P<0.01)。对照组大鼠海马组织CA1区神经元树突分布较为规律,树突网密集有序;模型组大鼠海马组织CA1区神经元树突排列紊乱,大量树突缠结,形成较粗大的神经纤维束;与模型组比较,低剂量Q808和高剂量Q808组大鼠海马组织CA1区神经元树突网络有所恢复,排列相对规律。与对照组比较,模型组大鼠海马组织CA1区神经元树突棘密度明显降低(P<0.01);与模型组比较,低剂量Q808和高剂量Q808组大鼠海马组织CA1区神经元树突棘密度明显升高(P<0.01)。与对照组比较,模型组、低剂量Q808组和高剂量Q808组大鼠海马组织中CaMKⅡ蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,低剂量Q808组和高剂量Q808组大鼠海马组织中CaMKⅡ蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:新型抗癫痫药Q808对TLE模型大鼠有改善作用,其机制可能与Q808能减轻海马组织CA1区神经元树突病变和增加突触可塑性相关蛋白CaMKⅡ蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 颞叶癫痫 6-(4-氯苯氧基)-四唑^((5 1-a))酞嗪 突触可塑性 钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ 长时程增强
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乳腺癌组织中CNN2、ANKRD22表达水平与临床病理特征的关系研究
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作者 顾桂源 黄山 沈预程 《检验医学与临床》 CAS 2024年第14期2006-2010,共5页
目的分析乳腺癌组织中钙调蛋白2(CNN2)、锚蛋白重复结构域22(ANKRD22)的表达水平与临床病理特征的关系。方法选择南通大学附属海安医院2018年1月至2023年4月收治的90例拟进行手术切除治疗的乳腺癌患者作为研究对象,收集乳腺癌组织及癌... 目的分析乳腺癌组织中钙调蛋白2(CNN2)、锚蛋白重复结构域22(ANKRD22)的表达水平与临床病理特征的关系。方法选择南通大学附属海安医院2018年1月至2023年4月收治的90例拟进行手术切除治疗的乳腺癌患者作为研究对象,收集乳腺癌组织及癌旁正常组织,使用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测CNN2、ANKRD22在乳腺癌组织及癌旁正常组织中的表达水平,观察不同病理特征的乳腺癌患者乳腺癌组织中CNN2、ANKRD22表达水平的差异,分析乳腺癌组织中CNN2、ANKRD22表达水平与临床病理特征(肿瘤最大径、病理分期、分化程度)的关系及对腋窝淋巴结转移的预测效能。结果乳腺癌组织CNN2、ANKRD22表达水平均明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。CNN2、ANKRD22在不同肿瘤最大径、病理分期、分化程度的乳腺癌组织中的表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着乳腺肿瘤最大径增加、病理分期升高和分化程度减小,乳腺癌组织中CNN2、ANKRD22的表达水平依次升高(P<0.05)。相关性分析结果显示,乳腺癌组织CNN2、ANKRD22表达水平与肿瘤最大径、病理分期呈正相关(r=0.427、0.316,P<0.05;r_(s)=0.452、0.357,P<0.05),与分化程度呈负相关(r_(s)=-0.514、-0.463,P<0.05);乳腺癌伴腋窝淋巴结转移患者乳腺癌组织中CNN2、ANKRD22表达水平高于不伴腋窝淋巴结转移患者(P<0.05);受试者工作特征曲线分析结果显示,乳腺癌组织中CNN2联合ANKRD22预测腋窝淋巴结转移的曲线下面积为0.905(95%CI:0.780~0.989)。结论乳腺癌组织中CNN2、ANKRD22的表达水平明显升高,与临床病理特征密切相关,二者联合预测腋窝淋巴结转移的效能较好,有助于评估病情,指导诊治。 展开更多
关键词 乳腺癌 钙调蛋白2 锚蛋白重复结构域22 病理特征 腋窝淋巴结转移
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Quantitative Stucture-Activity Relationship Studies onCalmodulin Antagonists of Alkylamino 1,2-Diphenylethvl-ene Compounds
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作者 雷小平 李重华 钟海振 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 1996年第4期169-173,共5页
从新的先导化合物6-氨基1,2-二苯乙烯-1出发,研究了15个烷氨基1,2-二苯乙烯类钙调素拮抗剂的结构与活性之间的关系。发现:顺式构型的活性一般比反式构型强,而双键还原的化合物活性更低。从芳香亲脂中心到碱性中心之间... 从新的先导化合物6-氨基1,2-二苯乙烯-1出发,研究了15个烷氨基1,2-二苯乙烯类钙调素拮抗剂的结构与活性之间的关系。发现:顺式构型的活性一般比反式构型强,而双键还原的化合物活性更低。从芳香亲脂中心到碱性中心之间的烷基链长度增加时,拮抗活性随之增强。QSAR分析显示:苯环上具较大脂水分配系数及给电子的取代基时拮抗活性可提高。 展开更多
关键词 calmodulin antagonists QSAR Hansch analysis
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CaMKⅡγ和CaMKⅡδ通过PI3K/Akt/Erk信号通路减轻小鼠神经元缺血再灌注损伤
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作者 刘昊铭 林子诗 叶靖 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期563-570,共8页
目的观察钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的同工型CaMKⅡγ和CaMKⅡδ对鼠神经元细胞缺血缺氧再灌注损伤的影响,并探究其作用机制。方法分离胚胎期第18天胎鼠大脑用于提取原代神经元,在5%CO_(2)、37℃条件下培养,分为常规培养的对照组... 目的观察钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的同工型CaMKⅡγ和CaMKⅡδ对鼠神经元细胞缺血缺氧再灌注损伤的影响,并探究其作用机制。方法分离胚胎期第18天胎鼠大脑用于提取原代神经元,在5%CO_(2)、37℃条件下培养,分为常规培养的对照组、空白对照组(si-NT)、CaMKⅡγ敲除组(si-CAMK2G)和CaMKⅡδ敲除组(si-CAMK2D)。研究组神经元转染处理后,更换为无糖培养基,并将其置于缺氧环境中模拟氧糖剥夺(OGD/R)条件,持续1 h,随后复原标准培养环境。通过对神经元裂解物行免疫蛋白印迹检测磷脂酰肌醇-3-激酶/细胞外信号调节激酶(PI3K/Akt/Erk)信号通路构件的表达量,并建立小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,通过对比假手术组(Sham)(n=25)和MCAO组(n=25)PI3K/Akt/Erk信号通路表达来进行验证。结果si-CAMK2G组的胎鼠神经元细胞在OGD/R 12、24、48、72 h的生存率明显低于si-NT组(P<0.01或0.001),并可逆转OGD/R介导的胎鼠神经元细胞CaMKⅡγ表达上调。si-CAMK2G组和si-CAMK2D组与si-NT组相比,PI3K/Akt/Erk信号通路表达受到明显抑制(P<0.01)。在MCAO模型中,MCAO组小鼠脑CaMKⅡδ和CaMKⅡγ的表达显著增加并激活了PI3K/Akt/Erk信号通路,CaMKⅡδ和CaMKⅡγ,Erk、磷酸化Erk、Akt和磷酸化Akt在MCAO造模成功再灌注后24、48、72和96 h的表达显著高于Sham组再灌注24 h(P<0.05,0.01或0.0001)。结论CaMKⅡγ和CaMKⅡδ在神经元细胞发生缺血缺氧损伤时的神经保护作用可能是通过PI3K/Akt/Erk信号通路介导的。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ 神经保护 磷脂酰肌醇-3-激酶 细胞外信号调节激酶 信号通路
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小鼠中缝背核向屏状核投射神经通路的形态学特征
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作者 巩涛 蔡志平 +1 位作者 史娟 李云庆 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第4期414-421,共8页
目的探索小鼠中缝背核(DRN)向屏状核(CLA)投射神经通路的形态学特征。方法分别将逆行示踪剂594 retrobeads和顺行示踪剂生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入CLA(n=3)和DRN(n=3),结合5-羟色胺(5-HT)免疫荧光染色,观察逆行标记神经元的分布和神... 目的探索小鼠中缝背核(DRN)向屏状核(CLA)投射神经通路的形态学特征。方法分别将逆行示踪剂594 retrobeads和顺行示踪剂生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入CLA(n=3)和DRN(n=3),结合5-羟色胺(5-HT)免疫荧光染色,观察逆行标记神经元的分布和神经化学特征以及顺标神经纤维和终末在全脑和CLA内的分布;利用钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)-Cre、谷氨酸脱羧酶67(GAD67)-Cre动物结合狂犬逆行跨突触病毒(RV)标记,观察DRN-CLA通路的下游靶神经元类型。结果DRN的吻、中、尾段均能观察到594 retrobeads阳性神经元的胞体,中段的腹侧亚核(DRV)分布较多,且90%以上的逆行标记神经元为5-HT阳性。BDA顺标纤维密集分布于腹侧被盖区、束旁核、腹侧苍白球、杏仁中央核等区,CLA内的神经纤维和终末相对稀疏。RV跨突触逆行标记结果显示,CaMKⅡ-Cre动物的DRN中含有较多的突触前神经元,而GAD67-Cre动物DRN中突触前逆行标记神经元较少。结论DRN-CLA通路是以DRV分布为主的5-HT能投射通路,其在CLA内的纤维和终末较为稀疏,主要与CLA内的CaMKⅡ阳性神经元形成突触联系。 展开更多
关键词 中缝背核 屏状核 5-羟色胺能神经元 钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶Ⅱ阳性神经元 神经束路示踪 免疫荧光 小鼠
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超极化激活环核苷酸门控通道4和钙依赖性蛋白激酶Ⅱ在心源性猝死患者窦房结中的表达情况及其法医学意义
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作者 王威 张霄 +4 位作者 张世林 丁艳杰 刘淑瑜 曾珍 金波 《当代医学》 2024年第12期9-12,共4页
目的探讨心源性猝死(SCD)患者窦房结组织超极化激活环核苷酸门控通道4(HCN4)和钙依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)蛋白表达情况及其法医学意义。方法收集2018年1月至2022年12月川北医学院司法鉴定中心尸检心脏标本200份,其中SCD100份(SCD组),非... 目的探讨心源性猝死(SCD)患者窦房结组织超极化激活环核苷酸门控通道4(HCN4)和钙依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)蛋白表达情况及其法医学意义。方法收集2018年1月至2022年12月川北医学院司法鉴定中心尸检心脏标本200份,其中SCD100份(SCD组),非SCD100份(非SCD组)。两组均进行常规苏木精-伊红(HE)染色,采用免疫组织化学方法检测两组标本窦房结组织中HCN4和CAMKⅡ蛋白表达,图像处理软件计算目的蛋白的AOD值。结果SCD以成年男性为主且在死因中以冠心病占比最多。SCD组中HCN4的AOD值低于非SCD组,CAMKⅡ的AOD值高于非SCD组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论窦房结中HCN4、CaMKⅡ异常表达可能是心源性猝死的机制,HCN4、CaMKⅡ有望成为心源性猝死的分子标记。 展开更多
关键词 法医病理学 窦房结 心源性猝死 超极化激活环核苷酸门控通道4 钙依赖性蛋白激酶Ⅱ
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β淀粉样蛋白_(1-42)质粒的构建及其与钙调蛋白的结合作用
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作者 齐爽 孙旋旋 +4 位作者 王绮萱 贺意婷 李佳睿 苏敬阳 郝丽英 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第6期495-500,共6页
目的探讨β淀粉样蛋白_(1-42)(Aβ_(1-42))与钙调蛋白(CaM)的结合作用。方法采用生物信息学方法获取阿尔茨海默病(AD)异常表达的核心基因,预测AD防治的潜在靶蛋白;通过基因重组的方法构建GST-Aβ_(1-42)重组质粒并进行DNA测序;琼脂糖凝... 目的探讨β淀粉样蛋白_(1-42)(Aβ_(1-42))与钙调蛋白(CaM)的结合作用。方法采用生物信息学方法获取阿尔茨海默病(AD)异常表达的核心基因,预测AD防治的潜在靶蛋白;通过基因重组的方法构建GST-Aβ_(1-42)重组质粒并进行DNA测序;琼脂糖凝胶电泳进行重组质粒的酶切鉴定;提取纯化GST-Aβ_(1-42)融合蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定是否纯化成功;GST pull-down检测质粒表达的GST-Aβ_(1-42)蛋白与CaM的结合作用。结果获取连接度排名前20的核心基因,将CaM作为靶蛋白;质粒的DNA测序结果证明重组质粒构建成功,琼脂糖凝胶电泳结果显示,酶切后的片段与Aβ_(1-42)片段分子量大小理论值符合,进一步证明重组质粒构建成功;SDS-PAGE凝胶电泳结果显示GST-Aβ_(1-42)蛋白能够与CaM结合,并具有浓度依赖性。结论Aβ_(1-42)重组质粒构建成功,且与CaM具有结合作用。 展开更多
关键词 Β淀粉样蛋白 质粒构建 钙调蛋白 结合能力 活性鉴定
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牡荆素调节环磷酸腺苷激活的交换蛋白1/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ信号对大鼠心肌梗死后心肌肥大与纤维化的作用
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作者 赵天昊 袁慧 +3 位作者 麻祖青 陶星宇 张宇 董六一 《心脑血管病防治》 2024年第2期10-15,共6页
目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建... 目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建立MI模型,假手术组只穿线不结扎。检测大鼠心功能变化;苏木精-伊红(HE)染色观察心脏病理学变化,天狼星红染色观察心脏纤维化,电镜观察心肌线粒体损伤情况;Western Blot检测Epac1、CaMKⅡ等蛋白变化。结果(1)大鼠MI 4周后,与假手术组比较MI组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和左心室射血分数(LVEF)均降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室舒张末期内径(LVIDd)和舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)增加(P<0.01),牡荆素组大鼠心脏LVIDs、LVIDd、LVPWs和LVPWd较MI组降低,LVFS和LVEF均升高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)牡荆素可降低大鼠心脏重量指数(P<0.01),并减小MI组大鼠心肌细胞横截面积,同时减轻大鼠左心室壁心肌纤维化程度(P<0.01),牡荆素组大鼠心肌胞浆内线粒体肿胀较MI组减轻,线粒体形态较完整,空泡形成较少;(3)Western Blot结果显示牡荆素抑制大鼠MI后Epac1激活(P<0.01),抑制其下游CaMKⅡ激活与细胞外调节激酶的磷酸化(P<0.01),同时可抑制B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)上调(P<0.05),上调Bcl-2(P<0.01),抑制凋亡蛋白裂解半胱天冬酶3(Cleaved-Caspase 3)的活化(P<0.05)。结论牡荆素可通过抑制Epac1/CaMKⅡ通路,改善大鼠MI后心脏功能,抑制心肌肥大和纤维化。 展开更多
关键词 牡荆素 心肌缺血 凋亡 环磷酸腺苷激活的交换蛋白1 钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ
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非接触共培养体系下抑制ARPE-19中CAMKⅡ表达对HUVECs迁移和侵袭及管腔形成的影响
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作者 徐卫星 刘华 张岩 《国际眼科杂志》 CAS 2024年第4期508-514,共7页
目的:探讨非接触共培养体系下抑制人视网膜色素上皮细胞(ARPE)中Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CAMKⅡ)表达对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移、侵袭、管腔形成的影响。方法:将过表达CAMKⅡ-δ的ARPE-19样本进行RNA测序,应用生物信息学... 目的:探讨非接触共培养体系下抑制人视网膜色素上皮细胞(ARPE)中Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CAMKⅡ)表达对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移、侵袭、管腔形成的影响。方法:将过表达CAMKⅡ-δ的ARPE-19样本进行RNA测序,应用生物信息学分析差异基因参与的功能。使用transwell小室构建ARPE-19和HUVECs非接触共培养体系,根据实验干预措施分为:空白组:仅接种未共培养的HUVECs,无ARPE-19细胞;对照组:ARPE-19和HUVECs细胞均使用完全培养基进行共培养;AIP组(CAMKⅡ抑制组):ARPE-19使用含有AIP(160 nmol/L)的完全培养基,HUVECs使用完全培养基,进行共培养。检测HUVECs迁移、侵袭和管腔形成能力的变化,并通过Western blotting检测CAMKⅡ/AMPK/mTOR/VEGFA蛋白表达水平。结果:生信分析发现差异基因参与细胞生长与死亡和细胞运动等生物学过程。划痕和transwell迁移实验均表明AIP组的HUVECs相对迁移率均明显低于对照组(均P<0.05)。而侵袭和小管形成实验表明,AIP组的相对侵袭率和相对管腔形成率较对照组无明显改变(均P>0.05)。Western blotting结果表明AIP组CAMKⅡ、P-mTOR、VEGFA蛋白表达较对照组均明显下调,而P-AMPK蛋白表达较明显上调(均P<0.05)。结论:在非接触共培养体系下抑制ARPE-19细胞中CAMKⅡ表达可以显著降低HUVECs迁移能力,但不能改变侵袭和管腔形成能力,这可能是通过AMPK/mTOR/VEGFA信号通路实现的。 展开更多
关键词 Ca^(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CAMKⅡ) 自生肽2相关抑制肽(AIP) 迁移 人视网膜色素上皮细胞(ARPE) 人脐静脉内皮细胞(HUVECs)
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