大鼠局灶脑缺血/再灌注动物模型早期不可逆损伤范围的判断

目的 通过嗜银三步染色、甲苯胺蓝染色和 HE染色观察局灶脑缺血 /再灌注早期的神经元缺血改变 ,找出缺血早期可逆与不可逆损伤范围的界限。方法 Wistar大鼠 42只经线栓法制作局灶脑缺血 /再灌注模型。动物分为空白对照组 ,假手术组 ,缺血 2小时不灌注组 (O2 R0 ) ,缺血 2小时再灌注 0 .5小时组 (O2 R0 .5 )、再灌注 2小时 (O2 R2 )、再灌注 4小时组 (O2 R4)和再灌注 2 4小时组 (O2 R2 4) 7组 ,每组各 6只动物。动物经特殊组织处理后进行 HE、TB染色和嗜银三步染色 ,用图像分析仪测量黑色神经元所在范围 (缺血中心区 )。结果 本实验动物模型的成功率为 90 %。嗜银三步染色后正常神经元呈黄色或棕黄色 ,与棕黄色的背景难以区分 ;缺血损伤神经元呈黑色 ,黑色神经元的胞体呈塌陷外观 ,神经元的突起呈螺丝样并有不同程度的崩解 ;黑色神经元所在区域的神经纤维网呈灰色或灰黑色 ,与邻近区域的棕黄色背景有明显的差别 ;皮层黑色神经元在各层分布不同 ,并有柱型集中特征 ;缺血 2小时不灌注组动物用嗜银三步染色就能显示黑色神经元。结论 嗜银三步染色能选择性显示局灶脑缺血的早期缺血神经元 ,黑色神经元所在范围代表了早期的缺血中心区 ,黑色神经元可能是不可逆损伤神经元。黑色神经元的辨认可用于区分早?

大鼠局灶脑缺血-再灌注动物模型半暗带的动态变化

目的 根据黑色神经元辨认不同缺血和再灌注期间的缺血中心区 ,阐明缺血早期半暗带的范围 ,并对其进行动态观察 ,以期阐明半暗带的形态特征。方法 将 72只雄性 Wistar大鼠随机分为假手术组、空白对照组、持续缺血 2 4h(O2 4R0 )、缺血 4h再灌注 2 4h组 (O4R2 4) ,以下类推 ,即 O2 R0、O2 R0 .5、O2 R2、O2 R4、O2 R8、O2 R2 4、O2 R48、O2 R96组 ,每组 6只动物。实验组经线栓法制成局灶脑缺血 -再灌注模型。动物脑组织经灌注固定后进行苏木素 -伊红、甲苯胺蓝和铅铀染色 ,分别作光镜和电镜观察 ,并用图像分析仪测量缺血中心区和半暗带范围。结果 再灌注后短期内半暗带扩大 ,于再灌注 2 h达最大 (P<0 .0 5 ) ,再灌注 4～ 48h内半暗带范围相对稳定。缺血中心区和半暗带内细胞形态有多种类型 ,并随再灌注时间而变化。