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db-cAMP对转化细胞钙调素基因表达与细胞骨架的影响 被引量:5
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作者 柳惠图 王端顺 +4 位作者 张鸿卿 薛绍白 游劲松 杜春英 王晓良 《实验生物学报》 CSCD 1990年第3期273-283,共11页
转化的C_3H_(10)T_(1/2)细胞表现增殖速度加快、表面微绒毛增加,细胞变圆,叠层生长,ConA受体呈帽状分布,微管、微丝、纤粘蛋白分布明显减少。与增殖有关的癌基因c-fos表达增强,同时发现与细胞增殖、转化和细胞骨架调节有关的钙调素(CaM... 转化的C_3H_(10)T_(1/2)细胞表现增殖速度加快、表面微绒毛增加,细胞变圆,叠层生长,ConA受体呈帽状分布,微管、微丝、纤粘蛋白分布明显减少。与增殖有关的癌基因c-fos表达增强,同时发现与细胞增殖、转化和细胞骨架调节有关的钙调素(CaM)基因表达加强。用1mmo/Ldb-cAMP处理转化细胞,观察到CaM基因和原癌基因c-fos的表达分别在处理后1小时和2小时急剧下降。处理后4—5天,转化细胞表型趋正常化,大部分细胞恢复单层生长。细胞表面微绒毛和泡状物减少,ConA受体帽状分布消失,恢复分散分布在细胞膜上的特点。细胞生长明显被抑制,用优先在G_1期表达的4F_1 cDNA为探针进行分子杂交,证实了经db-cAMP处理后的细胞被阻抑在G_1期。经db-cAMP处理6天的转化细胞中微管、微丝、纤粘蛋白基本恢复正常分布。实验表明CaM的表达增强与转化细胞表型变化和细胞骨架组装减弱密切相关,db-cAMP作用后CaM表达下降是抑制转化细胞增殖并使细胞表型和细胞骨架分布趋于正常的关键事件之一。 展开更多
关键词 db-camp 细胞骨架 CaM基因表达
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dB-cAMP和顺铂的化疗效果与肿瘤细胞间缝隙连接通讯的相互关系 被引量:1
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作者 罗阳 冮岩 +3 位作者 郭丽 鲁海欧 刘佳 李宏 《沈阳医学院学报》 1996年第1期1-4,15,共5页
为探讨肿瘤细胞缝隙连接通讯(GJIC)的功能状态对化疗药物抗癌效果的影响,本研究选用GJIC功能迥异的人膀胱癌细胞系BIU,EJ和卵巢癌细胞系CaOv3,借助多种细胞生物学手段,观察它们对广谱抗癌药顺铂(DDP)和GJIC调节剂dB-cAMP的反应。结果显... 为探讨肿瘤细胞缝隙连接通讯(GJIC)的功能状态对化疗药物抗癌效果的影响,本研究选用GJIC功能迥异的人膀胱癌细胞系BIU,EJ和卵巢癌细胞系CaOv3,借助多种细胞生物学手段,观察它们对广谱抗癌药顺铂(DDP)和GJIC调节剂dB-cAMP的反应。结果显示,正常培养条件下,3种细胞的GJIC均较弱,dB-cAMP对BIU,CaOv3和EJ细胞的GJIC分别呈上调、略上调和无作用。抑癌实验显示,dB-cAMP本身可在一定程度上抑制3种细胞的生长;顺铂通过诱导细胞凋亡而呈明显的杀伤效应。然而,dB-cAMP与顺铂配伍使用,并不改善顺铂的抑癌效果。这说明,1)dB-cAMP的抑癌效应未必经过调节GJIC的通路;2)GJIC的改善与否同肿瘤细胞的药物敏感性无关。因此,在肿瘤细胞的分化程度和遗传学变异未加纠正的情况下,单纯调节GJIC的功能无助于化疗效果的提高。 展开更多
关键词 顺铂 db-camp 缝隙连接通讯 肿瘤细胞生长
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db-cAMP对胚胎干细胞来源的神经细胞酪氨酸羟化酶mRNA水平的影响
3
作者 周欣 王振宁 王太一 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期259-261,共3页
目的 体外诱导胚胎干细胞 (ES细胞 )定向分化为多巴胺能神经元并促进其长期存活和特性维持。方法 以全反式维甲酸 (ATRA)诱导 ES细胞定向分化为神经细胞 ,培养液中加入双丁酰基环腺苷磷酸 (db-c AMP)继续培养 ,RT- PCR方法检测酪氨酸... 目的 体外诱导胚胎干细胞 (ES细胞 )定向分化为多巴胺能神经元并促进其长期存活和特性维持。方法 以全反式维甲酸 (ATRA)诱导 ES细胞定向分化为神经细胞 ,培养液中加入双丁酰基环腺苷磷酸 (db-c AMP)继续培养 ,RT- PCR方法检测酪氨酸羟化酶基因 (TH基因 )和 survivin基因的 m RNA水平变化。结果  db-c AMP可上调 ES细胞来源的神经细胞中 TH基因的 m RNA水平 ,在实验早期还可上调 survivin基因的 m RNA水平。结论  db- c AMP可以促进 ES细胞来源的多巴胺能神经元的存活和特性维持 ,抗凋亡可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 ES细胞 神经分化 多巴胺能神经元 db-camp 全反式维甲酸 帕金森综合征
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db-cAMP对脑缺血再灌注大鼠皮质脊髓束可塑性及运动功能恢复的影响
4
作者 陈艳 李长清 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期91-93,共3页
目的:研究双丁酸环腺苷酸(db-cAMP)对脑缺血再灌注大鼠神经结构可塑性及运动功能恢复的影响,并对其发生机制进行探讨。方法:采用Longa改良线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,造模成功的大鼠20只随机分为实验组(10只)和对照组... 目的:研究双丁酸环腺苷酸(db-cAMP)对脑缺血再灌注大鼠神经结构可塑性及运动功能恢复的影响,并对其发生机制进行探讨。方法:采用Longa改良线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,造模成功的大鼠20只随机分为实验组(10只)和对照组(10只),参照Montoya设计的"楼梯测试"对大鼠运动功能进行定量评定,BDA顺行性示踪方法观察皮质脊髓束可塑性变化。结果:大鼠运动功能实验组较对照组明显改善,BDA顺行性示踪见颈膨大处跨过脊髓中线支配患侧前角的纤维数量较对照组明显增加。结论:db-cAMP能够促进脑缺血再灌注损伤大鼠神经结构可塑性的改善和运动功能的恢复。 展开更多
关键词 双丁酸环腺甘酸 皮质脊髓束可塑性 运动功能恢复 BDA顺行性示踪
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THE EFFECT OF db-cAMP ON THE GENE EXPRESSION OF CALMODULIN AND CYTOSKELETON IN THE TRANSFORMED CELLS
5
作者 柳惠图 王端顺 +4 位作者 张鸿卿 薛绍白 游劲松 杜春英 王晓良 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1992年第1期25-34,共10页
We have demonstrated that the distribution of microtubules (MT), mlcrofilaments (MF) and fibronectin (FN) were diminished, while the gene expression of the calmodulin and c- fos enhanced in the transformed C3H10T1/2 c... We have demonstrated that the distribution of microtubules (MT), mlcrofilaments (MF) and fibronectin (FN) were diminished, while the gene expression of the calmodulin and c- fos enhanced in the transformed C3H10T1/2 cells. After treatment with 1 mM db-cAMP for 1 hour and 2 hours, there was an early and repldly reduced in gene expression of Calmodulin and c-fos respectively. After db-cAMP treatment for 4 -5 days, the number of capping cells of ConA binding decreased significantly and the cell surface microvllll decreased as well. The growth of treated cells was inhibited markedly. By using 4F1 cDNA probe, which is preferentially expressed In G1 phase, we have found that the db- cAMP treated cells were accumulated at G1 phase. Of particular interest is the fact that the distribution of microtubules, mlcrofilaments and fibronectln were recovered after treatment with 1 mM db-cAMP for 6 days. It is suggested that the Inhibition of proliferation, alteration, of phenotype and reco- very of cytoskeleton is transformed cells after treatment with db-cAMP are related to the Inhibition of gene expression of Calmodulin. 展开更多
关键词 THE EFFECT OF db-camp ON THE GENE EXPRESSION OF CALMODULIN AND CYTOSKELETON IN THE TRANSFORMED CELLS GENE FIGURE
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db-cAMP和卵丘细胞单层对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育潜力研究 被引量:1
6
作者 徐国旗 华再东 +4 位作者 张立苹 肖红卫 刘西梅 许生成 郑新民 《湖北农业科学》 2015年第24期6303-6306,共4页
为提高卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的能力,探讨了双丁酰基腺苷酸环化酶(db-c AMP)和卵丘细胞单层共培养对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育潜力。结果表明,成熟培养液中分别添加0、0.5、1.0、1.5和2.0 mmol/L的db-c AMP时,卵... 为提高卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的能力,探讨了双丁酰基腺苷酸环化酶(db-c AMP)和卵丘细胞单层共培养对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育潜力。结果表明,成熟培养液中分别添加0、0.5、1.0、1.5和2.0 mmol/L的db-c AMP时,卵母细胞的体外成熟率依次降低,但浓度为1 mmol/L时的孤雌胚囊胚率(27.03%)显著高于其他各组(P<0.05);卵丘细胞单层共培养卵母细胞时,其成熟率、卵裂率及囊胚率(86.00%、89.04%、28.36%)也得到了显著提高;0.4 mmol/L的db-c AMP和卵丘细胞单层共培养时,其成熟率和卵裂率(85.78%和88.95%)与对照组差异不显著,但囊胚率(35.14%)显著提高。0.4 mmol/L的db-c AMP和卵丘细胞单层共培养能够显著提高猪卵母细胞的体外成熟及孤雌胚胎的发育潜力。 展开更多
关键词 卵丘细胞单层 体外发育
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db-cAMP对转化细胞增殖抑制及其对CaM水平和PKⅡ活性的影响
7
作者 周涛 王端顺 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期54-58,共5页
目的 探讨双丁酰 环核苷酸 (db cAMP)对转化细胞增殖及细胞表型作用的机理。 方法 以流式细胞光度术 (flowcytometry ,FCM)、软琼脂集落形成、放射免疫、Northern印迹和激酶活性分析等方法观察db cAMP对转化的C3H1 0 T1 2 小鼠成纤... 目的 探讨双丁酰 环核苷酸 (db cAMP)对转化细胞增殖及细胞表型作用的机理。 方法 以流式细胞光度术 (flowcytometry ,FCM)、软琼脂集落形成、放射免疫、Northern印迹和激酶活性分析等方法观察db cAMP对转化的C3H1 0 T1 2 小鼠成纤维细胞增殖、细胞表型、钙调素 (calmodulin ,CaM)表达及蛋白激酶Ⅱ (proteinkinaseⅡ ,PKⅡ )活性的影响。 结果 db cAMP(1mmol L)使C3H1 0 T1 2 转化细胞增殖及软琼脂集落形成能力受到显著抑制 ,转化细胞中CaM的表达及PKⅡ活性明显高于正常细胞 ,经db cAMP处理后也受到明显抑制。 展开更多
关键词 双丁酰-环核苷酸 细胞增殖 蛋白激酶Ⅱ 肿瘤
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二丁酰基环一磷酸腺苷和维生素C对金仓鼠恶性转化细胞(BHLB_4)表型逆转的相加作用 被引量:2
8
作者 艾军 董稚明 梁索源 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期343-344,共2页
二丁酰基环一磷酸腺苷和维生素C对金仓鼠恶性转化细胞(BHLB_4)表型逆转的相加作用艾军,董稚明,梁索源河北省肿瘤研究所(石家庄050011)外源性二丁酰基环一磷酸腺苷(dbcAMP)能引起肿瘤细胞或转化细胞的形态和... 二丁酰基环一磷酸腺苷和维生素C对金仓鼠恶性转化细胞(BHLB_4)表型逆转的相加作用艾军,董稚明,梁索源河北省肿瘤研究所(石家庄050011)外源性二丁酰基环一磷酸腺苷(dbcAMP)能引起肿瘤细胞或转化细胞的形态和生长行为发生"逆转"[1]。例如,... 展开更多
关键词 db-camp BHLB4 维生素C 转化细胞
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双丁酸环腺苷酸促进脑缺血再灌注大鼠轴突再生和运动功能恢复 被引量:3
9
作者 牛陵川 李长清 +2 位作者 陈艳 刘圣山 黄莹 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期805-808,共4页
目的观察给予外源性环腺苷酸类似物——双丁酸环腺苷酸(db-cAMP)对脑缺血再灌注(I/R)大鼠轴突再生、患肢运动功能恢复、RhoA信号通路活动的影响,探讨其临床应用可能性及机制。方法将大鼠分为正常组、假手术组、脑I/R对照组、脑室注射生... 目的观察给予外源性环腺苷酸类似物——双丁酸环腺苷酸(db-cAMP)对脑缺血再灌注(I/R)大鼠轴突再生、患肢运动功能恢复、RhoA信号通路活动的影响,探讨其临床应用可能性及机制。方法将大鼠分为正常组、假手术组、脑I/R对照组、脑室注射生理盐水组(生理盐水组)和脑室注射db-cAMP组(db-cAMP组),采用线栓法制作大鼠大脑中动脉I/R模型,脑室灌注在造模前完成。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测缺血灶周边脑组织生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA和RhoAmRNA的表达,用ZeaLonga评分法对患肢运动功能进行评分。结果脑I/R对照组大鼠缺血灶周边脑组织GAP-43mRNA的表达在造模术后6h略有降低,第24小时开始增高,第7天达到高峰,第14天开始降低但仍高于假手术组(P<0.05,P<0.01)。脑I/R对照组大鼠缺血灶周边脑组织RhoAmRNA表达于造模术后6h开始增高,第48小时达到高峰,之后开始下降,第7天和14天仍高于假手术组(P<0.01)。db-cAMP组大鼠缺血灶周边组织GAP-43mRNA在造模术后各时间点均高于脑I/R对照组和生理盐水组大鼠,第7天最显著(P<0.05,P<0.01)。db-cAMP组大鼠缺血灶周边组织RhoAmRNA在造模术后各时间点均显著低于脑I/R对照组和生理盐水组大鼠(P<0.05,P<0.01)。脑I/R对照组,生理盐水组和db-cAMP组大鼠在造模术后各时间点神经功能缺损评分呈相同变化趋势,db-cAMP组大鼠在造模术后第14天神经功能缺损评分显著低于脑I/R对照组和生理盐水组(P<0.05)。结论db-cAMP能够促进脑I/R损伤轴突再生和运动功能的恢复,其机制与抑制RhoA信号通路活动有关。 展开更多
关键词 轴突再生 脑缺血 双丁酸环腺苷酸 RHOA 生长相关蛋白-43
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精氨酸酶Ⅰ参与环腺苷酸促进脑缺血再灌注大鼠的轴突再生 被引量:2
10
作者 张燕虹 李长清 牛陵川 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期369-376,共8页
环腺苷酸(cAMP)作为细胞内的重要第二信使之一,主要通过激活下游cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA),进一步激活转录因子-cAMP效应元件结合蛋白(CREB),达到促进损伤轴突再生的作用.精氨酸酶Ⅰ主要是通过促进多胺的表达,从而克服髓鞘相关抑制因子... 环腺苷酸(cAMP)作为细胞内的重要第二信使之一,主要通过激活下游cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA),进一步激活转录因子-cAMP效应元件结合蛋白(CREB),达到促进损伤轴突再生的作用.精氨酸酶Ⅰ主要是通过促进多胺的表达,从而克服髓鞘相关抑制因子对轴突再生的抑制作用,达到促进轴突再生的效果.在脑缺血中,cAMP促进轴突再生的过程是否有精氨酸酶Ⅰ的参与及其与RhoA信号通路的关系尚不清楚.本研究采用线栓法制备脑缺血再灌注模型(MACO),采用Longa 5评分法对大鼠运动功能进行评分,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western蛋白印迹方法分别检测缺血灶周边脑组织生长相关蛋白43(GAP-43)和RhoA的mRNA和蛋白表达,免疫组化法进行GAP-43的形态学检测,作为轴突再生的标志.通过尾静脉注射cAMP类似物db-cAMP增加脑缺血后大鼠脑组织内cAMP的浓度后发现:db-cAMP处理可明显降低MACO大鼠的运动功能评分,且可促进GAP-43 mRNA及蛋白的表达,抑制RhoA mRNA及蛋白的表达,由此可见db-cAMP处理可促进脑缺血后大鼠运动功能的恢复,且这一过程与抑制RhoA通路,进而促进轴突再生有关;通过在db-cAMP的基础上给予精氨酸酶Ⅰ拮抗剂NOHA来降低精氨酸酶Ⅰ的活性发现:给予NOHA的大鼠运动功能评分明显增加,这一变化趋势与RhoA mRNA及蛋白表达的变化趋势相一致,而与GAP-43 mRNA及蛋白表达的变化趋势相反.因此可推断:精氨酸酶Ⅰ参与了db-cAMP促进轴突再生、改善脑缺血后大鼠运动功能的过程,且与钝化RhoA通路有关. 展开更多
关键词 轴突再生 脑缺血 双丁酸环腺苷酸 RHOA 生长相关蛋白-43 精氨酸酶I
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清化颗粒对db/db糖尿病小鼠肠道环磷腺苷和三磷酸腺苷的影响 被引量:3
11
作者 李俊燕 王静懿 +2 位作者 徐杰 陆灏 陶枫 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期2398-2400,I0003,共4页
目的:探讨清化颗粒对db/db糖尿病小鼠肠道环磷酸腺苷(c AMP)和三磷酸腺苷(ATP)的影响。方法:6只雄性db/m小鼠为空白对照组,24只雄性db/db糖尿病小鼠随机分为模型对照组、清化颗粒低剂量组、清化颗粒中剂量组和清化颗粒高剂量组,干预4周,... 目的:探讨清化颗粒对db/db糖尿病小鼠肠道环磷酸腺苷(c AMP)和三磷酸腺苷(ATP)的影响。方法:6只雄性db/m小鼠为空白对照组,24只雄性db/db糖尿病小鼠随机分为模型对照组、清化颗粒低剂量组、清化颗粒中剂量组和清化颗粒高剂量组,干预4周,IPGTT法观察小鼠血糖水平变化,ELISA法分析小鼠肠道c AMP、ATP和血清胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的水平,组织病理学观察小鼠回肠组织形态变化。结果:与模型对照组比较,清化颗粒下调db/db糖尿病小鼠的空腹血糖(FBG)(P<0.01),增加肠道c AMP水平(P<0.01),降低肠道ATP水平(P<0.01)和血清GLP-1水平(P<0.01),并具有剂量依赖性。清化颗粒明显改善db/db糖尿病小鼠回肠组织的形态。结论:清化颗粒能够降低db/db糖尿病小鼠的血糖水平,促进GLP-1分泌,改善回肠组织形态,其机制可能与增加肠道c AMP水平,降低肠道组织中ATP水平有关。 展开更多
关键词 清化颗粒 DB/DB糖尿病小鼠 胰高血糖素样肽-1 三磷酸腺苷 环磷酸腺苷
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双丁酰cAMP对癌细胞膜上凝集素受体的影响及其与侵袭能力的相关性
12
作者 邱雪杉 王恩华 宋继谒 《解剖科学进展》 CAS 1997年第2期176-178,共3页
双丁酰cAMP是一种诱导分化剂,对体外培养的癌细胞具有一定诱导分化作用。本文着重观察了双丁酰cAMP对培养的人肺腺癌细胞膜上多种凝集素受体表达的影响,并将体外经双丁酰cAMP处理的癌细胞接种于裸鼠皮下,观察移植瘤自发... 双丁酰cAMP是一种诱导分化剂,对体外培养的癌细胞具有一定诱导分化作用。本文着重观察了双丁酰cAMP对培养的人肺腺癌细胞膜上多种凝集素受体表达的影响,并将体外经双丁酰cAMP处理的癌细胞接种于裸鼠皮下,观察移植瘤自发性生长状况。结果表明,经双丁酰cAMP处理的人肺腺瘤细胞表面数种凝集素受体表达降低,同时伴有移植后成瘤潜伏期延长、侵袭能力下降。由于癌细胞膜结构和功能的改变与癌细胞的识别粘附及侵袭能力密切相关,这一结果提示双丁酰cAMP对癌细胞膜的影响可能是恢复癌细胞间粘附识别作用,降低其侵袭能力的机制之一。 展开更多
关键词 双丁酰 CAMP 癌细胞膜 凝集素受体 侵袭能力 癌细胞 诲导分化
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DB模式下建筑电气工程投标报价、设计与造价管理 被引量:2
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作者 肖玉辉 《工程建设与设计》 2017年第1期167-169,共3页
DB(Design-Build)模式是指公司受业主委托,按照合同约定对工程建设项目的设计、采购、施工、试运行等实行全过程的承包。建筑电气作为建筑设备的一部分,不仅为建筑物提供基本的附属功能,也为空调,给排水,消防,燃气采暖,生产设备等设备... DB(Design-Build)模式是指公司受业主委托,按照合同约定对工程建设项目的设计、采购、施工、试运行等实行全过程的承包。建筑电气作为建筑设备的一部分,不仅为建筑物提供基本的附属功能,也为空调,给排水,消防,燃气采暖,生产设备等设备提供能源与联动。论文结合在韩日总包公司的工作经验及"营改增"政策的影响,就建筑电气在DB模式整个项目周期内,尤其是投标报价、设计及预决算过程中值得注意的问题进行分析。 展开更多
关键词 建筑电气 DB模式 营改增
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二丁酰环磷酸腺苷诱导脆性X智力低下一号基因重启及再表达的研究
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作者 陈瑶 池秀芳 姚英民 《中国优生与遗传杂志》 2015年第5期29-30,共2页
目的探讨二丁酰环磷酸腺苷(db-CAMP)对细胞内脆性X综合征FMR1基因再激活的可能性。方法利用硝普钠(SNP)封闭FMR1基因表达,建立脆性X综合征的细胞模型,用Real-time PCR及Western Blot的方法分别从基因及蛋白水平检测二丁酰环磷酸腺苷对F... 目的探讨二丁酰环磷酸腺苷(db-CAMP)对细胞内脆性X综合征FMR1基因再激活的可能性。方法利用硝普钠(SNP)封闭FMR1基因表达,建立脆性X综合征的细胞模型,用Real-time PCR及Western Blot的方法分别从基因及蛋白水平检测二丁酰环磷酸腺苷对FMR1基因封闭后的再激活作用。结果发现db-CAMP可以激活封闭的FMR1基因,0.5umol/LdbCAMP作用12h可使FMR1m RNA表达量上升为封闭组的9.4倍,达到正常细胞的水平;在蛋白水平,0.5mmol/L的db-CAMP作用72h时可提高FMRP表达量1.11倍。结论通过给予外源性c AMP(db-CAMP)可有效地诱导封闭FMR1基因的转录重启与蛋白水平的再表达,这为脆性X综合征的替代治疗提供一种新的思路与药物途径。 展开更多
关键词 脆性X综合征 脆性X智力低下一号基因(FMR1) 二丁酰环磷酸腺苷(db-camp)
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丙烯酰胺对NB-1细胞钙稳态的影响 被引量:2
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作者 李冲 王茜 +6 位作者 曹燕花 刘楠 关维俊 王学生 肖经纬 李斌 李忠生 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第3期194-196,共3页
目的研究丙烯酰胺(AM)对神经细胞钙稳态的影响,探讨AM致神经损伤的可能机制。方法将人神经母细胞瘤(NB-1)细胞诱导分化成熟后,以不同浓度AM进行体外染毒,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测神经元损伤程度,并应用ATP酶检测试剂盒测定不同损伤程... 目的研究丙烯酰胺(AM)对神经细胞钙稳态的影响,探讨AM致神经损伤的可能机制。方法将人神经母细胞瘤(NB-1)细胞诱导分化成熟后,以不同浓度AM进行体外染毒,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测神经元损伤程度,并应用ATP酶检测试剂盒测定不同损伤程度的细胞Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力的变化。以Fluo-3/AM为荧光指示剂,用激光共聚焦方法检测细胞内游离钙离子浓度的瞬时变化情况。结果 AM染毒组成熟NB-1细胞存活率有明显下降,提示AM对神经细胞有毒性作用;AM染毒组Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力值也均下降,差异具有统计学意义(P<0.05);AM作用于成熟NB-1细胞可立即引起细胞内钙离子浓度升高。结论 AM可能通过影响神经细胞钙稳态产生毒性作用。 展开更多
关键词 丙烯酰胺(AM) NB-1 db-camp CA2+-ATP酶 NA+-K+-ATP酶
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吗啡成瘾大鼠伏核电刺激前后CREB含量变化的研究 被引量:3
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作者 兰津 王桂松 +5 位作者 周洪语 徐纪文 田鑫 陈清山 王丽丽 王宝峰 《立体定向和功能性神经外科杂志》 2010年第3期133-136,共4页
目的研究脑深部电刺激(DBS)刺激吗啡成瘾大鼠伏核后,伏核cAMP反应元件蛋白(CREB)含量的变化。方法 40只雄性SD大鼠,随机分组,正常对照组(NS组)、吗啡成瘾组(MA组)、假刺激组(SS组)、刺激组(DBS组)各10只,MA组、SS组和DBS组建立吗啡成瘾... 目的研究脑深部电刺激(DBS)刺激吗啡成瘾大鼠伏核后,伏核cAMP反应元件蛋白(CREB)含量的变化。方法 40只雄性SD大鼠,随机分组,正常对照组(NS组)、吗啡成瘾组(MA组)、假刺激组(SS组)、刺激组(DBS组)各10只,MA组、SS组和DBS组建立吗啡成瘾大鼠动物模型,SS组和DBS组大鼠双侧伏核植入电极。DBS组大鼠行伏核电刺激,刺激后利用western blotting的方法检测各组大鼠伏核CREB的含量。结果 NS组大鼠伏核CREB含量明显低于MA组,P<0.01;DBS组大鼠伏核CREB含量明显低于MA组,P<0.01;SS组大鼠伏核CREB含量与MA组相比则无明显差异性。结论 DBS电刺激伏核,使吗啡成瘾大鼠伏核CREB含量降低,提示DBS对成瘾大鼠心理依赖的戒断效应可能是通过抑制CREB的表达而起作用。 展开更多
关键词 吗啡成瘾 脑深部电刺激(DBS) cAMP反应元件蛋白(CREB)
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二丁酰环磷酰苷和氨茶碱对PC12细胞缺氧葡萄糖剥夺保护作用初探
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作者 李晓华 姚英民 +1 位作者 李宁 陈红武 《中国优生与遗传杂志》 2010年第5期84-86,共3页
目的探讨二丁酰环磷酰苷(db-cAMP)和氨茶碱分别作用以及联合用药对缺氧葡萄糖剥夺(oxygen-glu-cose deprivation,OGD)条件下大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞活性和凋亡的影响。方法采用OGD方法建立体外培养的PC12细胞缺氧缺血模型。将P... 目的探讨二丁酰环磷酰苷(db-cAMP)和氨茶碱分别作用以及联合用药对缺氧葡萄糖剥夺(oxygen-glu-cose deprivation,OGD)条件下大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞活性和凋亡的影响。方法采用OGD方法建立体外培养的PC12细胞缺氧缺血模型。将PC12细胞分为正常对照组和OGD组,OGD组又分为未用药组,氨茶碱组,db-cAMP组和联合用药组(氨茶碱和db-cAMP)。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察不同药物和不同加药时间(0h,1h,2h,4h,8h,16h)对OGD后PC12细胞活性影响;用Hoechst33342荧光染料测定细胞凋亡。结果经OGD 4h后,OGD组与正常组相比细胞活性降低和凋亡率增加(P<0.05),db-cAMP 1×10-4μmol/L组与未用药组相比细胞活性增高,凋亡率减低(P<0.05);氨茶碱5×10-2μg/L组与未用药组相比细胞活性和凋亡率无明显差别(P>0.05);3×10-2μg/L氨茶碱和1×10-5μmol/L的db-cAMP联合用药组与未用药组相比细胞活性增高,凋亡率减低(P<0.05);联合用药组与1×10-4μmol/L的db-cAMP组相比细胞活性和凋亡率无明显差异(P>0.05);OGD损伤后4h内加药组较未用药组细胞活性明显增加(P<0.05),8h以后加药组与1h和2h加药组相比活性明显降低(P<0.05)。结论提示db-cAMP对缺氧缺血损伤有保护作用,氨茶碱和db-cAMP两药联合使用有协同作用,OGD损伤后4h内给药可提高细胞活性,其中1-2h内给药效果最好。 展开更多
关键词 PC12细胞 缺氧葡萄糖剥夺 氨茶碱 db—cAMP
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