基于TP53突变型胃癌患者DAXX表达特征的预后模型及其对临床结局的预测价值

目的分析TP53突变型胃癌(GC)患者死亡结构域相关蛋白(DAXX)表达特征并构建预后模型,评价该模型对GC患者预后的预测价值。方法收集癌症基因组图谱数据库中TP53野生型和突变型GC患者的DNA变异特征;收集2014年1月至2016年12月温州医科大学附属第一医院手术切除的GC标本,并通过免疫组化检测p53蛋白表达状态和DAXX的亚细胞定位。绘制生存曲线分析不同DAXX表达状态TP53突变型GC患者的生存差异。采用Cox比例风险回归模型评估TP53突变型GC患者DAXX细胞核表达水平及不同临床病理特征对患者预后的预测效能,建立可视化临床预后模型。结果GC患者的TP53突变主要集中于p53 DNA结合区域,且与肌联蛋白基因、低密度脂蛋白受体相关蛋白1B基因和丝聚蛋白基因的突变水平有关。与TP53野生型GC患者相比,TP53突变型GC患者DAXX的mRNA表达显著升高(P<0.05)。免疫组化分析结果显示,与TP53野生型GC患者相比,TP53突变型GC患者DAXX细胞质表达显著下降,细胞核表达显著升高,核质比显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。生存分析结果显示,在TP53突变型GC患者中,DAXX高表达,尤其是DAXX细胞核高表达提示预后良好。单因素和多因素Cox回归分析结果显示,年龄>67岁、肿瘤分期Ⅲ期、DAXX细胞核低表达是影响TP53突变型GC患者预后的独立危险因素(均P<0.10)。基于这3个指标建立的预后模型能准确预测TP53突变型GC患者的预后;模型一致性指数为0.740,显示出良好的预测效能。结论DAXX细胞核表达联合年龄、分期等临床病理特征,可较好地预测TP53突变型GC患者的预后。

死亡结构域相关蛋白的核-质定位对乳腺癌MCF-7细胞功能的影响

目的研究死亡结构域相关蛋白(death domain-associated protein,DAXX)在乳腺癌细胞MCF-7中的表达及核-质定位,并探讨这两者对MCF-7细胞功能的影响。方法通过构建LV-DAXX-RNAi-GFP干扰与LV-DAXX-GFP过表达慢病毒质粒,转染MCF-7细胞,敲低和过表达DAXX。采用核-质分离法与免疫荧光法验证DAXX在MCF-7细胞中的表达与核-质定位,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,MTT法检测细胞增殖情况。结果核-质分离法与免疫荧光法均证实DAXX主要定位在MCF-7细胞核,转染LV-DAXX-GFP慢病毒质粒主要上调了MCF-7细胞质内DAXX的表达,而转染LV-DAXX-RNAi-GFP慢病毒质粒则主要下调了DAXX在MCF-7细胞核内的表达;流式细胞术证实下调DAXX的核内表达可以使MCF-7细胞凋亡率上升,细胞增殖受抑,并将细胞阻滞在S期,而上调DAXX的细胞质内表达对MCF-7的细胞凋亡、细胞周期和细胞增殖均无显著影响。结论DAXX在乳腺癌MCF-7细胞中主要定位在细胞核,DAXX表达于细胞核或者细胞质可能对MCF-7细胞功能有着相反的作用。

Daxx基因在小鼠睾丸精子发生过程中的表达特征

目的:研究死亡结构域相关蛋白(Daxx)基因在小鼠睾丸精子发生过程中的表达特征,初步探讨其在生精过程中的作用。方法:通过实时荧光定量PCR(q PCR)、Western印迹及免疫荧光等方法检测Daxx在不同周龄野生型小鼠睾丸组织以及成年睾丸支持细胞雄激素受体特异性敲除(SCARKO)和雄激素受体敲除(ARKO)小鼠睾丸中的表达特征。结果:q PCR、Western印迹和免疫荧光结果表明,Daxx基因在出生4周后小鼠睾丸中高表达,且主要定位于细胞核;与野生型小鼠相比,SCARKO小鼠睾丸中DAXX的表达差异不显著(0.853±0.058 vs1.000±0.015),但在生精细胞细胞核中呈极性分布;DAXX在ARKO小鼠睾丸表达显著降低(0.299±0.026 vs1.000±0.015,P<0.01)。结论 :Daxx基因在小鼠睾丸发育中期时表达最高。ARKO小鼠中DAXX的表达与野生型相比显著降低,睾丸支持细胞中AR基因特异性敲除影响DAXX定位。DAXX可能参与调控小鼠的精子发生过程。

Daxx抑制K562细胞向巨核细胞分化

目的:观察过表达死亡结构域相关蛋白(Daxx)对K562细胞活力和向巨核细胞分化的影响。方法:建立稳定过表达Daxx的K562细胞,荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR和Western blot检测Daxx的过表达效果,CCK-8法检测过表达后细胞活力的变化;佛波酯(PMA)诱导K562细胞向巨核细胞系分化,Western blot检测在K562细胞向巨核细胞分化过程中Daxx和p-ERK的表达变化,流式细胞术检测CD41和CD61的表达变化;PMA处理过表达Daxx的K562细胞,NBT还原实验检测细胞分化情况,流式细胞术检测过表达Daxx后CD41和CD61的表达变化,Western blot检测p-ERK的蛋白水平。结果:建立了稳定的过表达Daxx的K562细胞,过表达Daxx抑制K562细胞的活力。PMA诱导K562细胞向巨核细胞分化,CD41和CD61表达水平增高,同时p-ERK的蛋白水平升高,Daxx表达水平下降。过表达Daxx可以抑制K562细胞向巨核细胞分化,CD41和CD61表达降低,同时p-ERK的蛋白水平降低。结论:过表达Daxx可以抑制K562细胞生长及向巨核细胞分化,同时抑制ERK的磷酸化。

IGFBP-5及cFLIP在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达及意义

目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白-5(IGFBP-5)、细胞型Fas相关死亡结构域蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cFLIP)及高危型人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR及免疫组织化学SP法检测28例正常宫颈组织、37例CIN、40例宫颈癌组织中IGFBP-5、cFLIP表达,二代杂交捕获法检测上述患者宫颈分泌物中高危型HPV DNA。结果IGFBP-5蛋白在正常组织、CIN、宫颈癌中表达差异有统计学意义(P<0.05),在CINⅡ/Ⅲ组达高峰,在宫颈浸润癌中IGFBP-5表达下降,且与临床分期、病理分化程度及淋巴结转移有关。IGFBP-5 mRNA在宫颈癌中高于正常组织,但低于CIN组(P<0.05)。cFLIP蛋白及mRNA在正常组织未见表达,在CIN及宫颈癌中随病变程度加深而表达量增加,各组表达差异有统计学意义(P<0.05)。HPV阳性率在CIN及宫颈癌中高于正常组(P<0.05)。结论IGFBP-5及cFLIP与宫颈病变的发展有关,可用于判断患者病情变化及预后。

胃癌组织中c-FLIP、NF-κBp65的表达变化及意义

目的探讨细胞型Fas相关的死亡区域蛋白样白介素-1转换酶抑制蛋白(c-FLIP)、细胞核因子κB(NF-κB)在胃癌发生、发展中的作用。方法选择胃癌组织标本80份(胃癌组)和癌旁组织80份(癌旁组),采用免疫组化法检测两组的c-FLIP、NF-κB p65,分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组c-FLIP、NF-κB p65阳性率明显高于癌旁组(P均<0.05);c-FLIP的表达与胃癌临床分期、分化程度、淋巴结转移、术后复发相关(P均<0.05),NF-κB p65的表达与浸润深度、分化程度、淋巴结转移、术后复发相关(P均<0.05);c-FLIP和NF-κB p65在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.303,P=0.006)。结论 c-FLIP、NF-κB p65的高表达可能在胃癌的发生、发展中起重要作用。

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中c-FLIP与外源性凋亡途径的相关性分析

目的:分析类风湿关节炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中Fas相关死亡区样白介素1转换酶抑制蛋白(c-FLIP)与外源性凋亡途径相关蛋白死亡结构域蛋白(FADD)、caspase-8表达水平变化的相关性。方法:选择2014年1月至2015年6月福建医科大学附属漳州市医院类风湿关节炎患者60例,按照类风湿关节炎疾病活动指数将患者分为低、中、高活动度组(分别为22、20和18例)。同时选择健康体检者25名作为健康对照组。采用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测PBMC中c-FLIP、FADD和caspase-8的mRNA和蛋白表达水平,并采用Pearson检验对c-FLIP与FADD、caspase-8表达的相关性进行分析。结果:类风湿关节炎患者PBMC中c-FLIP、FADD和caspase-8的mRNA表达量均高于健康对照组(均P <0. 05)。其中,中活动度组PBMC中FADD和caspase-8的mRNA表达量高于低活动度组(均P <0. 05),c-FLIP的mRNA表达量与低活动度组相近(P>0. 05);高活动度组PBMC中c-FLIP的mRNA表达量高于中、低活动度组(均P <0. 05),caspase-8的mRNA表达量低于中、低活动度组(均P <0. 05),FADD的mRNA表达量高于低活动度组(P <0. 05)。类风湿关节炎患者PBMC中c-FLIP mRNA水平与FADD mRNA水平呈正相关(r=0. 323,P <0. 05),与caspase-8mRNA水平呈负相关(r=-1. 104,P <0. 05)。中活动度组c-FLIP和FADD蛋白表达量高于健康对照组、低活动度组和高活动度组(P <0. 05或P <0. 01);中、高活动度组caspase-8蛋白表达量高于健康对照组和低活动度组(P <0. 05或P <0. 01),且高活动度组caspase-8蛋白表达量高于中活动度组(P <0. 05)。结论:类风湿关节炎患者PBMC中凋亡相关蛋白c-FLIP可能参与了外源性凋亡途径,并可为类风湿关节炎病情评估提供参考。

DAXX翻译后修饰的研究进展

Fas死亡结构域相关蛋白(Fas death domain-associated protein)DAXX是一种高度保守的核蛋白,广泛分布于核质、核仁、胞浆、异染色质和早幼粒细胞白血病蛋白核体(PML-NBs)等亚细胞区域,在细胞凋亡和转录调控中发挥重要作用。DAXX功能的调控涉及一系列的翻译后修饰,包括泛素化修饰、类泛素样蛋白修饰、磷酸化修饰,通过修饰,可引起DAXX在各亚细胞区域间的转位,也可引起DAXX参与的生理功能的改变。本文对DAXX此方面的研究进展做一综述。

KLF5转录因子抑制TRAIL诱导PC-3前列腺癌细胞凋亡的分子机制

目的探究通过抑制KLF5表达促进TRAIL诱导的前列腺癌PC-3细胞凋亡的分子机制。方法在TRAIL诱导下,使用MTT实验、流式细胞实验、Western blot及qRT-PCR检测KLF5敲低组与对照组的PC-3细胞在细胞活性、凋亡比例及凋亡相关标志物的表达。结果在PC-3细胞中抑制KLF5表达后,TRAIL诱导下的细胞凋亡明显增加,TRAIL受体DR4、DR5表达上升,凋亡抑制因子c-FLIP蛋白表达下调,但是其mRNA表达水平不变。结论抑制KLF5,可以通过上调TRAIL受体、下调c-FLIP蛋白表达的途径,促进TRAIL诱导的前列腺癌PC-3细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。使用小干扰RNA或小分子药物抑制KLF5表达,可能是潜在的激素非敏感前列腺癌治疗手段。

Daxx在细胞凋亡中的研究进展

Fas死亡结构域相关蛋白(Fas death domain-associated protein,Daxx)是一种高度保守核蛋白,能与Fas死亡结构域结合,激活Jun氨基端激酶通路促细胞凋亡,在某些情况下Daxx也具有抗凋亡作用。Daxx在细胞凋亡中起着最重要的作用,这将为某些疾病的发病机制研究提供一定的理论与实践基础。

Daxx在斑马鱼胚胎发育中的作用及其机制研究

目的明确死亡结构域相关蛋白(Daxx)在斑马鱼胚胎发育过程中的时-空表达谱,并研究其作用与机制。方法利用原位杂交技术检测Daxx的表达谱;利用吗啉反义寡核苷酸介导的基因敲减技术敲低Daxx的表达,观测斑马鱼胚胎发育情况,并用pH3和TUNEL染色检测Daxx敲低后细胞增殖及凋亡的改变;通过Real-Time PCR实验研究Daxx影响细胞凋亡和胚胎发育的分子机制。结果敲低Daxx后斑马鱼胚胎细胞凋亡和畸形率显著增加,这一表型能被p53蛋白共敲低所恢复;在分子机制上,Daxx敲低可不同程度特异性激活bax、mdm2、p21和cyclin G1等p53下游多个基因的表达,Daxx富含酸性氨基酸的功能区介导了上述过程。结论 Daxx利用其自身结构域与p53作用,并特异调控其下游关键基因的表达,参与调节斑马鱼胚胎细胞凋亡和形态发育。

死亡结构域蛋白Daxx与DNA病毒蛋白相互作用及影响的研究进展

死亡结构域蛋白Daxx是一种多功能蛋白,能参与细胞凋亡、抗病毒等活动。病毒感染发生时,病毒生成的某些蛋白与Daxx相互作用,经不同途径可抑制或促进Daxx的抗病毒反应。Daxx与不同病毒蛋白或甚至同一病毒的不同蛋白相互作用,都将产生不同的抑制或促进作用。现对Daxx与人腺病毒、人巨细胞病毒和人乳头瘤病毒等DNA病毒表达蛋白的相互作用及影响作一简要概述。

Caski细胞内Daxx与HPV16 E2蛋白的结合作用

目的研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白在Caski细胞内与Daxx的相互作用,探讨它们在HPV16所致宫颈癌发生发展中的作用。方法利用间接免疫荧光染色技术观察HPV16 E2和Daxx在Caski细胞中的分布或共定位;通过免疫共沉淀试验和免疫印迹分析HPV16 E2与Daxx在Caski细胞内的相互作用。结果在Caski细胞内,Daxx和HPV16 E2主要分布于胞浆,少数分布于胞核,且两种信号在细胞浆内有一定的共存;抗E2抗体能沉淀Daxx,反之抗Daxx抗体同样能够沉淀HPV16 E2。结论 HPV16 E2与Daxx在Caski细胞存在直接的相互作用。

凋亡因子FADD蛋白与Caspase-7蛋白在胃腺癌中的表达及意义

目的:探讨胃腺癌中Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)与半胱氨酸蛋白酶-7蛋白(Caspase-7)的表达及意义。方法:采用免疫组化S P法检测60例胃腺癌组织及50例正常胃黏膜组织F A D D蛋白与C a s p a s e-7蛋白的表达情况,分析二者与胃腺癌临床病理特征的关系,以及胃腺癌组织中二者表达的相关性。结果:FADD蛋白和Caspase-7蛋白阳性产物均为棕黄色颗粒状,主要位于细胞质。胃腺癌组织FADD蛋白和Caspase-7蛋白的阳性表达率均明显低于正常胃黏膜组织(38.3%vs 60.0%,46.7%vs 68.0%,P<0.05)。FADD蛋白、Caspase-7蛋白表达与胃腺癌患者性别、年龄无关(P>0.05),与胃腺癌分化程度、T N M分期、淋巴结转移、浸润深度有关。Spearman相关分析结果显示,胃腺癌FADD蛋白和Caspase-7蛋白表达呈正相关关系(r=0.362,P<0.05)。结论:FADD蛋白与Caspase-7蛋白低表达可能在胃腺癌的发生发展过程中具有协同作用。

BmDaxx对家蚕细胞和幼虫组织凋亡的调控作用(英文)

采用荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)方法体外扩增并鉴定家蚕死亡结构域相关蛋白基因(BmDaxx)。结果表明:BmDaxx及其下游基因BmFadd和BmDredd的表达水平在BmDaxx过表达后显著升高,但在BmDaxx的RNA干扰后,BmDaxx和BmFadd的表达水平显著降低;BmDaxx过表达增加半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3/7(cystein-asparate protease-3/7,caspase-3/7)活性,而RNA干扰则降低caspase-3/7活性。用caspase-3/7抑制剂处理BmN细胞后,与对照组相比,BmDaxx、BmFadd和BmDredd的转录水平降低。在家蚕吐丝期,BmDaxx在丝腺中的表达量显著高于其他组织,这与丝腺的凋亡退化过程相一致。注射caspase抑制剂后,凋亡相关基因BmDaxx、BmFadd和BmDredd的表达水平显著降低。由此可以认为,BmDaxx及其下游基因BmFadd和BmDredd之间存在着相互作用,它们在BmN细胞和丝腺细胞凋亡中起着关键作用。

死亡结构域相关蛋白(Daxx)的研究进展

病毒对宿主的感染能力,以及宿主对病毒感染的抵抗能力取决于病毒和宿主的相互作用。内在性免疫是宿主细胞抵抗病毒感染的重要方式之一。死亡结构域相关蛋白(death domain-associated protein,Daxx)最初是作为Fas死亡结构域(death domain of Fas,FasD D)的相互作用蛋白和具有调控凋亡信号途径的功能分子被鉴定的。近年来,Daxx在宿主细胞抵抗病毒感染过程中的功能研究极为活跃。文章从Daxx的分子特性、Daxx与病毒蛋白的互作机制等方面综述了Daxx的研究进展。

DAXX在胃癌中的表达定位及其小泛素化修饰对胃癌恶性表型的影响

目的:研究死亡结构域相关蛋白(DAXX)在胃癌中的表达与定位,并探讨小泛素化修饰(SUMO)的DAXX对胃癌细胞恶性表型的影响。方法:生物信息学分析肿瘤基因图谱(TCGA)计划中DAXX在胃癌中的表达与预后;RT-qPCR检测各胃癌细胞系中DAXX的mRNA水平。收集2017年1月至6月温州医科大学附属第二医院育英儿童医院胃癌术后患者20对癌和癌旁组织,免疫组化检测DAXX的表达。CCK-8和划痕实验分别检测DAXX对细胞增殖和迁移的作用。Western blot检测DAXX的核-浆蛋白分布及其对SUMO-2/3的影响。结果:生物信息学分析显示,DAXX在胃癌中的表达水平高于癌旁组织,但其表达高低对患者生存预后无影响(P=0.52);免疫组化结果显示胃癌组织DAXX的阳性率高于癌旁,且在细胞核中高表达;RT-qPCR证实胃癌细胞系中DAXX的mRNA表达量升高。CCK-8和划痕实验提示DAXX明显抑制细胞增殖(P<0.05)并促进细胞迁移(P<0.01)。Western blot显示DAXX核-浆蛋白分布差异,且存在SUMO-2/3修饰。结论:DAXX在胃癌组织中高表达,且主要定位于细胞核。DAXX可能通过与SUMO-2/3结合,抑制胃癌增殖和促进转移。

RIP3－DAXX在全脑缺血诱导神经元死亡中的作用及机制

目的：探讨受体相互作用蛋白3（RIP3）、Fas死亡结构域相关蛋白（DAXX）在SD大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区锥体细胞死亡中的作用及机制。方法采用四动脉结扎法建立SD大鼠全脑缺血模型，缺血15 min后分别灌注6 h、5天。大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、给药组（ Necrostatin－1，Nec－1组）和溶媒（ DMSO）对照组。免疫组织化学法检测RIP3、DAXX蛋白的表达变化情况，焦油紫染色法检测神经元细胞死亡的形态学变化。结果大鼠脑缺血再灌注6 h，大鼠海马神经元中RIP3、DAXX的表达明显增高，与假手术组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。 NEC－1组RIP3、DAXX的表达明显降低，与缺血再灌注组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。大鼠脑缺血再灌注5天后，缺血再灌注组大鼠海马CA1区存活的锥体细胞数目明显减少，与假手术组比较差异有统计学意义（P＜0．01）；NEC－1组大鼠海马CA1区存活的锥体细胞数目明显增多，与缺血再灌注组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。结论 RIP3、DAXX参与了脑缺血再灌注后诱导神经元死亡的调控。

c-FLIP不同单体沉默对重症急性胰腺炎大鼠中性粒细胞凋亡的影响研究

目的探讨细胞型Fas相关死亡域样白细胞介素-1β转换酶抑制蛋白(c-FLIP)不同单体沉默对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠中性粒细胞凋亡的影响。方法选取50只SD雄性大鼠建立SAP模型,将造模成功的40只大鼠随机分为对照组、c-FLIP siRNA-NC组、c-FLIPS siRNA组、c-FLIPL siRNA组,每组10只;另取10只大鼠为假手术组。c-FLIP siRNA-NC组、c-FLIPS siRNA组、c-FLIPL siRNA组大鼠尾静脉注射1 nmol/ml的对应siRNA溶液,假手术组、对照组大鼠尾静脉注射等量生理盐水;转染后72 h,测定各组大鼠腹水量、血清淀粉酶及血清中性粒细胞凋亡水平,并观察胰腺组织病理变化。测定各组大鼠中性粒细胞中c-FLIPS、c-FLIPL、受体相互作用蛋白1(RIP1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)mRNA和蛋白表达水平。结果对照组、c-FLIP siRNA-NC组胰腺组织坏死严重、崩解,胰腺细胞排列紊乱,可见大量炎性细胞浸润;c-FLIPS siRNA组、c-FLIPL siRNA组胰腺细胞坏死减少,炎性细胞浸润减少,但胰腺组织疏松紊乱。与假手术组比较,对照组和c-FLIP siRNA-NC组腹水量、血清淀粉酶、中性粒细胞c-FLIPS mRNA和蛋白表达水平、c-FLIPL mRNA和蛋白表达水平升高,中性粒细胞凋亡率、RIP1 mRNA和蛋白表达水平、Caspase-8 mRNA和蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);但对照组与c-FLIP siRNA-NC组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。与c-FLIP siRNA-NC组比较,c-FLIPS siRNA组和c-FLIPL siRNA组腹水量、血清淀粉酶、中性粒细胞c-FLIPS、c-FLIPL mRNA和蛋白表达水平降低,中性粒细胞凋亡率、RIP1、Caspase-8 mRNA和蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);但c-FLIPS siRNA组比较与c-FLIPL siRNA组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论沉默c-FLIP的两种单体c-FLIPS、c-FLIPL可明显促进SAP大鼠血液中性粒细胞凋亡,且对SAP具有明显缓解作用;其机制与c-FLIPS、c-FLIPL能明显抑制SAP大鼠血液中性粒细胞c-FLIPS、c-FLIPL的mRNA和蛋白表达,促进RIP1、Caspase-8 mRNA和蛋白的表达,进而激活坏死性凋亡途径有关。

诱导痰RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区甲基化在肺癌诊断中的价值

目的:探讨诱导痰中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区异常甲基化及其联合检测在肺癌诊断中的价值。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)技术,检测82例肺癌患者诱导痰和对应肿瘤组织以及25例肺部良性病变组织中RASSF1A,p16和DAPK3种基因启动子区甲基化改变,并分析三者与临床病理资料的关系。结果:肺癌病理组织中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区甲基化检出率分别为63.4%,59.8%和58.5%,对应的诱导痰三者甲基化检出率分别为54.9%,48.8%和51.2%;肺部良性病变组织中甲基化检出率均为零,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。RASSF1A基因甲基化检出率在中高分化和无淋巴结转移的肺癌中明显低于低分化和未分化及有淋巴结转移者(P<0.05),与年龄、性别、吸烟指数、临床分期及病理类型无关,而p16和DAPK基因甲基化检出率与上述因素均无明显相关性(P>0.05);联合检测3种基因甲基化的检出率为73.2%。结论:联合检测诱导痰中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区高甲基化有可能作为诊断肺癌及评估预后的简便有效的指标,并能提高检出率。