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Effect of IFN-γ/IL-10 on IL-10 Receptor Expression of Human Decidual Stromal Cells in Early Pregnancy 被引量:6
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作者 Chang-ying XING Sui-qi GUI 《Journal of Reproduction and Contraception》 CAS 2006年第2期65-74,共10页
Objective To study the role of IFN-γ/IL-10 cytokines protein expression of human decidual stromal cells(DSC) vitro. on IL-10 receptor gene and in human early pregnancy in vitro. Methods Human DSC was isolated and c... Objective To study the role of IFN-γ/IL-10 cytokines protein expression of human decidual stromal cells(DSC) vitro. on IL-10 receptor gene and in human early pregnancy in vitro. Methods Human DSC was isolated and cultured in vitro, and the expression of IL-10R1 and IL-10R2 gene was analyzed after cells had been treated with TH2-type cytokines IL-10 and TH1-type cytokines IFN-γ within 60 rain with semiquantitative reverse transcriptase-PCR, then the influence of IL-10 and IFN-γ on expression of IL-10R protein was examined by first trimester DSC using flow cytometry. In addition, the vitality of DSC was detected by MTT. Results IL-10R1 mRNA levels of DSC treated with IL-10 (10 ng/ml) reached the peak level within 15 rain, and were significantly lower at 30 rain, then were not detected at 45 min. The expression of IL-10R1 were induced to moderate level by IFN-γ(10 ng/ml) within 30 rain, and reduced to undetected levels at 60 min. There was no significant difference of IL-10R2 expression (P〉0.05) between treated and not with the abovementioned cytokines. The IL-10R protein expression and vitality of DSC were significantly enhanced by IL-10 (10 ng/ml) and IFN-γ (10 ng/ml) which treated DSC 48 h (P〈0.05). Coneclusion IL-10 and IFN-γ may play an important role of biologic function in early pregnancy by influencing IL-10R expression of DSC. 展开更多
关键词 IL-10 IFN-Γ decidual stromal cell IL-10 receptor in vitro
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Co-Culture of Early Embryo with Human Decidual Stromal Cells in vitro by Improvement of Early Embryo Development 被引量:3
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作者 闫洁 朱桂金 +1 位作者 刘建新 艾继辉 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2000年第1期79-81,共3页
Summary: An early embryo co-culture system with human decidual stromal cells was established to study its effect on early embryonic cleavage and growth in vitro. Three hundred and eight 2-cell mouse embryos were co-cu... Summary: An early embryo co-culture system with human decidual stromal cells was established to study its effect on early embryonic cleavage and growth in vitro. Three hundred and eight 2-cell mouse embryos were co-cultured with human decidual stromal cell monolayer in MEM+0. 4 % bovine serum albumin (BSA) and 163 embryos cultured in MEM+15 % FCS alone as control. Among the mouse 2-cell embryos co-cultured with human decidual stromal cells, 72.73 % developed to the morula stage and 67.21 % cavitated to blastocysts with 59. 74 % hatching, as compared with 61. 34 % to morula stage, 48. 47 % to blastocysts and none hatching in the controls, respectively. Co-cultured embryos cleaved slightly faster than controls and showed no or less fragmentation than those in the control. These results suggested that human decidual stromal cells can support early embryonic development and yield a reasonable number of embryos with good quality up to blastocyst stage. 展开更多
关键词 human decidual stromal cells EMBRYO CO-CULTURE
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Stromal cell decidualization and embryo implantation: a vulnerable step leading to successful pregnancy
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作者 Luhan Jiang Sudini R.Fernando +3 位作者 Suranga P.Kodithuwakku Dandan Cao William S.B.Yeung Kai-Fai Lee 《Reproductive and Developmental Medicine》 CAS CSCD 2024年第2期101-110,共10页
Endometrial stromal cell decidualization is a crucial step in endometrial remodeling during pregnancy.Decidualization is controlled by orchestrated ovarian hormones,followed by the activation of various downstream sig... Endometrial stromal cell decidualization is a crucial step in endometrial remodeling during pregnancy.Decidualization is controlled by orchestrated ovarian hormones,followed by the activation of various downstream signaling pathways.Accumulating evidence has shown multiple functions of decidualized endometrial stromal cells during embryo implantation,including tissue remodeling,antioxidative stress,angiogenesis,and immune tolerance.The distinct secretomes of decidualized stromal cells also reveal their intensive interactions with epithelial,endothelial,and immune cells.However,aberrant decidualization leads to pregnancy failures,such as recurrent pregnancy loss and repeated implantation failure.This review aimed to provide an overview of the molecular mechanisms underlying the divergent functions of decidualized endometrial stromal cells and their potential clinical applications.Moreover,the use of single-cell RNA sequencing data further enhances our understanding of these biological processes.This review discusses decidualization-related signaling pathways that serve as potential therapeutic targets for treating implantation failure in in vitro fertilization and provides novel approaches to investigate the underlying causes of female infertility. 展开更多
关键词 Endometrial stromal cell decidualIZATION Embryo implantation Recurrent pregnancy loss Repeated implantation failure
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氟苯尼考影响子宫内膜基质细胞蜕膜化的功能研究
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作者 何佳仪 代德贤 +3 位作者 李伟轲 高茹菲 王应雄 龙菁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期838-843,共6页
目的:探究氟苯尼考(florfenicol,FLO)暴露对蜕膜化的影响及线粒体在其中发挥的作用。方法:构建FLO暴露的原代小鼠蜕膜基质细胞(mouse decidual stromal cells,mDSCs)模型,经FLO(1.56、6.25、25.00μg/mL)暴露后,采用鬼笔环肽染色法观察... 目的:探究氟苯尼考(florfenicol,FLO)暴露对蜕膜化的影响及线粒体在其中发挥的作用。方法:构建FLO暴露的原代小鼠蜕膜基质细胞(mouse decidual stromal cells,mDSCs)模型,经FLO(1.56、6.25、25.00μg/mL)暴露后,采用鬼笔环肽染色法观察细胞形态变化,采用Western blot检测蜕膜化标志分子HOXA10表达以分析FLO对蜕膜化的影响;采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用Western blot检测细胞增殖标志分子PCNA表达以分析FLO对蜕膜化过程中细胞增殖、凋亡的影响;采用荧光探针Mito-tracker Red观察线粒体形态,采用免疫荧光检测线粒体外膜标志蛋白TOMM20表达并检测ATP水平以分析FLO对蜕膜基质细胞线粒体功能的影响。结果:25.00μg/mL FLO暴露导致细胞形态异常,蜕膜化标志分子HOXA10表达降低(P=0.002),细胞凋亡水平增加,细胞增殖能力降低;进一步发现FLO暴露后线粒体外膜标志蛋白TOMM20表达降低(P=0.010)、线粒体形态异常和ATP水平降低(P=0.003)。结论:25.00μg/mLFLO暴露可能与线粒体功能打破mDSCs的细胞增殖、凋亡平衡,损伤蜕膜化进程有关。 展开更多
关键词 氟苯尼考 蜕膜化 子宫内膜基质细胞 线粒体
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慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1沉默调控子宫内膜基质细胞蜕膜化与自噬
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作者 任健 陈晓燕 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第2期188-195,共8页
目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况... 目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况。从正常妊娠者的子宫内膜组织中分离并鉴定hESCs,将hESCs分为对照组、雌二醇(E_(2))+孕酮(P4)组、短发夹RNA(shRNA,sh)-正常对照(NC)+E_(2)+P4组、sh-SF-1+E_(2)+P4组,进行对应处理后,倒置显微镜下观察hESCs形态变化,Real-time PCR和Western blotting分别检测细胞内人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、泌乳素(PRL)的mRNA表达水平和蛋白表达水平,流式细胞术测定细胞周期分布,免疫荧光染色观察细胞内自噬标记物微管相关蛋白轻链3(LC3)表达情况,Western blotting测定细胞内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平。结果EM患者子宫内膜组织中SF-1 mRNA相对表达量和SF-1蛋白阳性率均高于正常妊娠者子宫内膜组织(P<0.05)。与sh-NC+E_(2)+P4组比较,sh-SF-1+E_(2)+P4组细胞多为长梭形,未见明显蜕膜化,IGFBP1、PRL的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞比例显著减少而S期细胞比例显著增加(P<0.05),细胞内LC3荧光表达增强,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高,Beclin-1蛋白相对表达量也显著上调(P<0.05)。结论EM患者子宫内膜组织内SF-1表达升高,通过慢病毒载体介导的SF-1沉默能够抑制hESCs蜕膜化过程,该作用可能与调控细胞自噬水平相关。 展开更多
关键词 子宫内膜基质细胞 类固醇生成因子-1 蜕膜化 自噬 免疫印迹法
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蜕膜组织NF-κB介导趋化因子与细胞因子调控子宫NK功能
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作者 余海鲲 茅佳钦 +1 位作者 陈书强 王晓红 《中国妇幼健康研究》 2024年第4期10-17,共8页
目的 探讨人子宫内膜基质细胞(hESC)蜕膜化过程中核因子κB(NF-κB)介导调控趋化因子、细胞因子产生进而影响子宫自然杀伤细胞(uNK)功能。方法 选取2022年10月1日至2023年3月1日在空军军医大学唐都医院妇产科行人工流产术终止妊娠的20... 目的 探讨人子宫内膜基质细胞(hESC)蜕膜化过程中核因子κB(NF-κB)介导调控趋化因子、细胞因子产生进而影响子宫自然杀伤细胞(uNK)功能。方法 选取2022年10月1日至2023年3月1日在空军军医大学唐都医院妇产科行人工流产术终止妊娠的20名健康孕妇,收集其蜕膜组织并分离纯化出人uNK。将hESC转染siRel A以抑制NF-κB的活性,随后体外诱导蜕膜化,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测相关趋化因子、细胞因子的mRNA水平。再转染siRel A的hESC诱导蜕膜化后与人原代uNK共培养,分别收获uNK和细胞上清液,采用流式细胞术检测uNK细胞因子分泌水平,通过体外成管实验、侵袭和划痕实验评估uNK上清体外促血管形成和促滋养层细胞侵袭迁移的能力。结果 转染siRel A后诱导蜕膜化产生的蜕膜基质细胞(DSC)内干扰素γ(IFN-γ)、基质金属蛋白酶(MMP)9、趋化因子CCL2的mRNA表达水平均显著降低(t值分别为3.290、6.415、5.095,P<0.05)。抑制NF-κB活性并诱导蜕膜化产生的DSC与uNK共培养后,抑制了uNK相关因子血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PLGF)和IFN-γ的分泌(t值分别为6.641、7.743、8.886,P<0.05)。此外,共培养后产生的uNK上清体外促血管形成能力受损(t值分别为4.629、5.522,P<0.05),并且促滋养层细胞侵袭和迁移能力均显著下降(t值分别为8.329、7.190,P<0.05)。结论 NF-κB调控蜕膜基质细胞趋化因子、细胞因子的表达,进而影响子宫自然杀伤细胞功能。 展开更多
关键词 NF-ΚB 蜕膜基质细胞 细胞因子 趋化因子 自然杀伤细胞
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Decidual stromal cells recruit Th 17 cells into decidua to promote proliferation and invasion of human trophoblast cells by secreting IL-17 被引量:23
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作者 Hai-Xia Wu Li-Ping Jin +2 位作者 Bing Xu Shan-Shan Liang Da-Jin Li 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2014年第3期253-262,共10页
T helper 17 (Th17) cells have both regulatory and protective roles in physiological conditions. The Th17 subset and the cytokine interleukin-17A (IL-17A) have been implicated in the pathogenesis of certain autoimm... T helper 17 (Th17) cells have both regulatory and protective roles in physiological conditions. The Th17 subset and the cytokine interleukin-17A (IL-17A) have been implicated in the pathogenesis of certain autoimmune diseases, several types of cancer and allograft rejection. However, the role of Th17 cells at the maternal/fetal interface remains unknown. Here, we demonstrate that Th17 cells are present in decidua and are increased in the peripheral blood of 10 clinically normal pregnancies based on intracellular cytokine analysis. Our results suggest a potential role of Th17 cells in sustaining pregnancy in humans. Furthermore, we demonstrate that decidual stromal cells (DSCs) but not trophoblast cells recruit peripheral Th17 cells into the decidua by secreting CCL2. The recruited Th17 cells promote proliferation and invasion and inhibit the apoptosis of human trophoblast cells by secreting IL-17 during the first trimester of pregnancy. These findings indicate a novel role for Th17 cells in controlling the maternal-fetal relationship and placenta development. 展开更多
关键词 decidual stromal cells INVASION PROLIFERATION Th17 cells trophoblast cells
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β-烟酰胺单核苷酸对反复着床失败患者子宫内膜基质细胞蜕膜化水平的影响 被引量:1
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作者 韩烁 时晓 +1 位作者 鹿群 刘明慧 《中国计划生育学杂志》 2023年第6期1276-1280,1498,共6页
目的:探讨在体外受精-胚胎移植反复着床失败患者子宫内膜基质细胞中添加β-烟酰胺单核苷酸(β-NMN)对子宫内膜基质细胞蜕膜化水平的影响。方法:活检获得反复着床失败3例患者子宫内膜组织,酶消化分离体外培养后获得了三株原代子宫内膜基... 目的:探讨在体外受精-胚胎移植反复着床失败患者子宫内膜基质细胞中添加β-烟酰胺单核苷酸(β-NMN)对子宫内膜基质细胞蜕膜化水平的影响。方法:活检获得反复着床失败3例患者子宫内膜组织,酶消化分离体外培养后获得了三株原代子宫内膜基质细胞。根据培养过程中添加β-NMN和诱导蜕膜化情况分为实验组、对照组、空白组。实验组在子宫内膜基质细胞蜕膜化培养过程中添加β-NMN,对照组不添加β-NMN,无蜕膜化培养为空白组。比较3组细胞培养过程中蜕膜标志物泌乳素(PRL)和人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)的mRNA表达和分泌水平。结果:实验组PRL(2.38±0.10 ng/nl)、IGFBP-1(1.89±0.12 ng/nl)水平均高于对照组(1.19±0.17 ng/nl、0.99±0.20 ng/nl)(P<0.05),对照组与空白组相比无差异;定量PCR检测蜕膜前后细胞内PRL(15.82±12.92)和IGFBP-1(9.86±8.67)的mRNA表达量上升(P<0.05)。结论:反复着床失败患者子宫内膜基质细胞蜕膜化中添加β-NMN能够提高蜕膜化水平。 展开更多
关键词 体外受精-胚胎移植 反复着床失败 子宫内膜基质细胞 β-烟酰胺单核苷酸 蜕膜化 泌乳素 人胰岛素样生长因子结合蛋白1
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槲皮素对母胎界面免疫调节的影响
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作者 傅祝婧 田野 +3 位作者 周旋乐 兰慧珍 吴双钰 楼毅云 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期68-76,共9页
母胎界面免疫失衡与不良妊娠结局密切相关,是生殖领域亟待解决的热点问题之一。随着中医药在生殖领域中的应用,发现槲皮素在菟丝子、桑寄生等常用补肾中药中含量丰富,可起到一定的妊娠保护作用。作为常见的黄酮类物质,槲皮素具有强大的... 母胎界面免疫失衡与不良妊娠结局密切相关,是生殖领域亟待解决的热点问题之一。随着中医药在生殖领域中的应用,发现槲皮素在菟丝子、桑寄生等常用补肾中药中含量丰富,可起到一定的妊娠保护作用。作为常见的黄酮类物质,槲皮素具有强大的抗炎、抗氧化、类雌激素等作用,可调节母胎界面免疫细胞(如蜕膜自然杀伤细胞、蜕膜巨噬细胞、T细胞、树突状细胞及髓源性抑制细胞)、绒毛外滋养层细胞及蜕膜基质细胞的功能及各细胞因子活性,通过减弱细胞毒性、减少组织细胞过度凋亡、抑制过度炎症反应等维持母胎免疫动态平衡。本文阐述了槲皮素对母胎界面各组成成分免疫调节过程中的作用及分子机制,以期为复发性流产等不良妊娠结局的治疗提供思路。 展开更多
关键词 槲皮素 母胎界面 蜕膜免疫细胞 滋养层细胞 蜕膜基质细胞 母胎免疫耐受 分子机制 综述
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子痫前期蜕膜基质细胞通过CX3CL1/CX3CR1途径协同dNK细胞抑制滋养细胞的增殖与侵袭
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作者 王茹 邓乾葆 +1 位作者 张忠霞 黄素静 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期599-605,共7页
目的:在子痫前期(PE)蜕膜组织中探究CX3CL1/CX3CR1的表达及其对dNK细胞功能的影响和对滋养细胞增殖与侵袭的调控。方法:取40例2018年9月至2019年10月于海南医学院第二附属医院产科住院分娩的孕产妇胎盘蜕膜组织,其中20例为PE患者(PE组)... 目的:在子痫前期(PE)蜕膜组织中探究CX3CL1/CX3CR1的表达及其对dNK细胞功能的影响和对滋养细胞增殖与侵袭的调控。方法:取40例2018年9月至2019年10月于海南医学院第二附属医院产科住院分娩的孕产妇胎盘蜕膜组织,其中20例为PE患者(PE组),20例为正常妊娠女性(NP组),应用RT-PCR、ELISA及免疫组化(IHC)实验检测CX3CL1在两组胎盘蜕膜组织中的表达;分离早孕原代蜕膜基质细胞与蜕膜自然杀伤(dNK)细胞,细胞经形态学与流式细胞术鉴定,利用上调或沉默CX3CL1的腺病毒载体(ad-CX3CL1或ad-shCX3CL1)感染蜕膜基质细胞,RT-PCR验证感染效率;将蜕膜基质细胞与dNK细胞进行共培养,并将其分为4组:ad-vector+dNK组、ad-CX3CL1+dNK组、ad-shCX3CL1+dNK组和ad-CX3CL1+CX3CR1+dNK组;ELISA检测各组共培养体系上清液中炎症因子TNF-α与IFN-γ表达;取上述4组共培养体系的上清液处理滋养细胞系HTR8,EdU增殖实验与Transwell侵袭实验检测处理后的HTR8细胞增殖与侵袭能力的改变。结果:与NP组相比,CX3CL1在PE组胎盘蜕膜组织中的表达异常升高(P<0.01);成功分离了早孕蜕膜基质细胞与dNK细胞;与ad-vector相比,感染ad-CX3CL1或ad-shCX3CL1能显著促进或抑制蜕膜基质细胞中CX3CL1在mRNA水平的表达(P<0.01);与ad-vector+dNK组相比,ad-CX3CL1+dNK组上清液中TNF-α与IFN-γ表达明显升高(P<0.05),且共培养体系的上清液能显著抑制滋养细胞的增殖与侵袭能力(P<0.05),而ad-shCX3CL1+dNK组与ad-CX3CL1+anti-CX3CR1+dNK组上清液中TNF-α与IFN-γ表达均显著降低(P<0.05),共培养体系的上清液能显著促进滋养细胞的增殖与侵袭能力(P<0.05);且与ad-CX3CL1+dNK组相比,ad-CX3CL1+anti-CX3CR1+dNK组上清液中TNF-α与IFN-γ的表达明显降低(P<0.05),但滋养细胞的上述功能明显增加(P<0.05)。结论:CX3CL1在PE患者的胎盘蜕膜组织中的表达呈异常增高现象,且蜕膜基质细胞能够通过CX3CL1/CX3CR1途径协同dNK细胞调控滋养细胞的增殖与侵袭能力,而这一作用可能与其影响dNK细胞对TNF-α与IFN-γ的分泌相关。 展开更多
关键词 子痫前期 蜕膜基质细胞 CX3CL1/CX3CR1 蜕膜NK细胞 滋养细胞 增殖 侵袭
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高纯度子宫内膜细胞分离和体外培养技术及其应用 被引量:13
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作者 宿爱琴 糜若然 +2 位作者 涂持坤 张双革 张玉华 《医学研究生学报》 CAS 2002年第2期115-117,C001,共4页
目的 :分离、纯化子宫内膜间质细胞 (ESC)和腺上皮细胞 ,建立体外ESC蜕膜化模型。 方法 :选择正常育龄妇女的新鲜子宫内膜组织 ,经多酶消化制成细胞悬液 ,分离、纯化间质细胞和腺上皮细胞 ;分别培养至细胞聚合成片 ,随机分组 ,用等渗... 目的 :分离、纯化子宫内膜间质细胞 (ESC)和腺上皮细胞 ,建立体外ESC蜕膜化模型。 方法 :选择正常育龄妇女的新鲜子宫内膜组织 ,经多酶消化制成细胞悬液 ,分离、纯化间质细胞和腺上皮细胞 ;分别培养至细胞聚合成片 ,随机分组 ,用等渗浓度的甾体激素诱导ESC体外蜕膜化改变。 结果 :分离的间质细胞其纯度达 95 %以上 ,其细胞活力达 92 %~ 95 %。在此体外培养系统中 ,ESC对生理剂量激素的应答出现与活体相仿的蜕膜化改变。 结论 :利用此技术可在细胞和分子水平上研究子宫内膜的各种功能及其调节。 展开更多
关键词 子宫内膜间质细胞 体外培养 蜕膜化 应用
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马鞭草提取液对体外培养人早孕蜕膜细胞的影响 被引量:6
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作者 张曙萱 王海琦 欧宁 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 2004年第4期242-246,共5页
目的 :探讨马鞭草及米非司酮抗早孕的细胞学作用机理 ,初步确定马鞭草抗生育的有效部位。方法 :实验选用早孕人工流产蜕膜组织进行体外培养 ,观察马鞭草提取液A、B、C、D及米非司酮对蜕膜细胞形态 ,增殖 ,细胞凋亡及细胞周期动力学的影... 目的 :探讨马鞭草及米非司酮抗早孕的细胞学作用机理 ,初步确定马鞭草抗生育的有效部位。方法 :实验选用早孕人工流产蜕膜组织进行体外培养 ,观察马鞭草提取液A、B、C、D及米非司酮对蜕膜细胞形态 ,增殖 ,细胞凋亡及细胞周期动力学的影响。结果 :高于 12 .5mg/ml的A、B、C及 80 μg/ml的米非司同酮均可明显改变蜕膜基质细胞 (DSC)的形态 ,并对其增殖产生显著的抑制作用。 2 5mg/ml的A、B、C及米非司酮(80 μg/ml) 均促进细胞凋亡 ,对细胞周期无明显影响。D均无明显作用。结论 :马鞭草、米非司酮均有抗早孕作用。抑制蜕膜细胞生长 。 展开更多
关键词 马鞭草 蜕膜基质细胞 米非司酮 细胞凋亡 早孕 孕激素
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miR-181a促进人子宫内膜间质细胞蜕膜化催乳素的表达 被引量:10
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作者 张群 刘红玉 +4 位作者 蒋玥 王玢 颜桂军 孙海翔 胡娅莉 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第2期129-134,共6页
目的目前虽已发现一些在胚胎着床过程中起重要作用的分子,但微小RNA(microRNA,miRNA)在蜕膜化过程中作用的研究报道较少,文中调查孕鼠围着床期子宫组织中miR-181a的表达规律,并探讨miR-181a对人子宫内膜间质细胞(human endometrial stro... 目的目前虽已发现一些在胚胎着床过程中起重要作用的分子,但微小RNA(microRNA,miRNA)在蜕膜化过程中作用的研究报道较少,文中调查孕鼠围着床期子宫组织中miR-181a的表达规律,并探讨miR-181a对人子宫内膜间质细胞(human endometrial stromal cell,hESC)体外诱导蜕膜化过程中蜕膜化标志基因蜕膜化催乳素(decidual prolactin,dPRL)表达的调控作用。方法收集怀孕0~6.5 d孕鼠子宫组织,采用TRIZOL法提取总RNA,通过实时定量PCR检测子宫组织中miR-181a的表达。制备Ad-miR-181a重组腺病毒,并感染hESC,24 h后采用0.5 mmol/L 8-Br-cAMP和1μmol/L Medroxyproges-terone(MPA)联合进行体外蜕膜化诱导培养;通过化学发光免疫法和实时定量PCR分别检测细胞培养液上清中dPRL的浓度与间质细胞中催乳素(prolactin,PRL)mRNA的表达;同时采用荧光素酶报告基因检测miR-181a对hESC中dPRL(-332/+65)启动子的调控作用。结果早孕小鼠子宫组织中miR-181a的表达高于非妊娠小鼠子宫,且随着妊娠天数的增加呈逐渐上升的趋势,在小鼠着床"窗口期"即孕4.5 d达到高峰(2.60±0.15倍,P<0.01,n=5),孕5.5 d子宫miR-181a的表达开始平稳下降;成功获得滴度为5.19×1010ifu/ml的miR-181a腺病毒,该腺病毒介导的miR-181a过表达显著增加hESC蜕膜化标志基因dPRL mRNA表达水平,增高超过8倍(P<0.01);在8-Br-cAMP和MPA联合诱导hESC体外蜕膜化时,高表达miR-181a可明显增加8-Br-cAMP联合MPA诱导的PRL mRNA表达水平与PRL蛋白分泌(P<0.01)。荧光素酶报告基因进一步证实miR-181a可以激活dPRL(-332/+65)启动子的活性达到2倍(P<0.05)。结论 miR-181a参与8-Br-cAMP和MPA诱导子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中PRL的表达调控。 展开更多
关键词 miR-181a 催乳素 蜕膜化 人子宫内膜间质细胞
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人早孕母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表达 被引量:10
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作者 邢长英 归绥琪 王海燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期538-544,共7页
目的:研究正常早孕绒毛及蜕膜组织细胞因子信号转导负调控因子(Suppressors of cytok ine signaling,SOCS)基因和蛋白水平表达,以揭示SOCS在母胎界面生理性调节作用。方法:半定量RT-PCR检测早孕绒毛组织、蜕膜组织及原代培养早孕滋养细... 目的:研究正常早孕绒毛及蜕膜组织细胞因子信号转导负调控因子(Suppressors of cytok ine signaling,SOCS)基因和蛋白水平表达,以揭示SOCS在母胎界面生理性调节作用。方法:半定量RT-PCR检测早孕绒毛组织、蜕膜组织及原代培养早孕滋养细胞、蜕膜基质细胞SOCS1、SOCS2、SOCS3mRNA水平;W estern b lot检测早孕绒毛组织及蜕膜组织SOCS1、SOCS2、SOCS3蛋白表达;免疫组化定位SOCS1、SOCS2、SOCS3在早孕绒毛组织、蜕膜组织表达;ELISA检测滋养细胞、蜕膜基质细胞分泌IL-10、IFNγ-。结果:正常母胎界面见SOCS1、SOCS2、SOCS3基因表达,其中SOCS3绒毛/蜕膜阳性率73.7%/71.1%;SOCS2绒毛/蜕膜阳性率50.0%/39.5%,SOCS1最少,绒毛/蜕膜阳性率34.2%/31.6%;SOCS1、SOCS2、SOCS3蛋白表达与转录水平基本一致;正常母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表达主要定位于绒毛滋养细胞和蜕膜间质;体外无血清培养滋养细胞和蜕膜基质细胞SOCS2、SOCS3低表达,SOCS1未见表达,其分泌的IL-10随时间而增高(P<0.05)。结论:正常早孕母胎界面表达SOCS1、SOCS2、SOCS3,无刺激条件下滋养细胞和蜕膜基质细胞低表达SOCS2、SOCS3,SOCS在正常妊娠Th平衡中具有重要意义。 展开更多
关键词 绒毛 蜕膜 细胞因子信号转导抑制分子 滋养细胞 蜕膜基质细胞
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Luminex液相芯片技术测定人早孕滋养层细胞及蜕膜细胞中基质金属蛋白酶的表达 被引量:5
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作者 贺晓恒 陈士岭 +1 位作者 孙玲 邢福祺 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1136-1139,共4页
目的研究人正常早孕滋养层细胞与蜕膜细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的表达特点,探讨子宫内膜蜕膜化进程中MMPs的变化及对胚胎着床的影响。方法收集正常妇女分泌期子宫内膜及人正常早孕绒毛和相应蜕膜标本各5例,分别进行离体培养,鉴定其纯... 目的研究人正常早孕滋养层细胞与蜕膜细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的表达特点,探讨子宫内膜蜕膜化进程中MMPs的变化及对胚胎着床的影响。方法收集正常妇女分泌期子宫内膜及人正常早孕绒毛和相应蜕膜标本各5例,分别进行离体培养,鉴定其纯度在98%以上后,收集培养上清液,利用Luminex(LumAvidinBeads)测定培养上清液中MMPs(MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-12、MMP-13)蛋白表达的变化,分析MMPs在不同培养条件下的表达差异及表达之间的相关性。结果①在不同培养条件下,MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9均有表达,MMP-12及MMP-13分别在ESC及DSC中无表达,且MMP-8、MMP-12、MMP-13表达均低。②与子宫内膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在DSC,EVCT中表达均降低,降低有显著性差异(P<0.05),而MMP-2、MMP-8、MMP-9在DSC,EVCT中则显著升高,升高有显著性差异(P<0.05)。且在蜕膜细胞中,MMP-1、MMP-3、MMP-2、MMP-7高表达尤为显著。③与蜕膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在EVCT中表达显著降低(P<0.05)。MMP-2、MMP-9、MMP-13在EVCT中升高有显著性(P<0.05)。且在滋养层细胞中,MMP-2、-9高表达尤为显著。④MMPs之间的相关性:MMP-2与MMP-9相关关系显著(P<0.05),且关系较密切(r=0.6645)。MMP-1,MMP-3,MMP-7两两间相关关系显著(P<0.05),且关系密切(r>0.7340)。其他MMP之间相关关系不显著。结论首次利用LuminexxMAP方法多通量的检测到子宫内膜间质细胞、早孕蜕膜细胞与滋养层细胞的多种MMPs的表达,它们均可分泌多种MMP,但是不同种类组织细胞的表达量不同;MMPs可能通过调控子宫内膜蜕膜化及母胎界面间MMPs的变化而影响胚胎着床,为成功妊娠创造条件。 展开更多
关键词 绒毛外细胞滋养层细胞 蜕膜细胞 子宫内膜 基质金属蛋白酶 液相蛋白芯片
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早孕期人蜕膜趋化因子CCL2及其受体CCR2的表达及意义 被引量:3
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作者 贺银燕 贺晓菊 +2 位作者 郭培奋 周雯慧 李大金 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期632-636,639,共6页
目的:分析人早孕蜕膜及蜕膜基质细胞趋化因子受体CCR2及其配体CCL2在人早孕蜕膜组织及蜕膜基质细胞的表达和分泌,以探讨CCR2/CCL2在母-胎界面的生物学作用。方法:收集早孕期蜕膜组织,分离蜕膜基质细胞,分别用半定量RT-PCR、免疫化学方... 目的:分析人早孕蜕膜及蜕膜基质细胞趋化因子受体CCR2及其配体CCL2在人早孕蜕膜组织及蜕膜基质细胞的表达和分泌,以探讨CCR2/CCL2在母-胎界面的生物学作用。方法:收集早孕期蜕膜组织,分离蜕膜基质细胞,分别用半定量RT-PCR、免疫化学方法分析正常人早孕蜕膜组织和培养的人蜕膜基质细胞CCR2/CCL2表达;并且用流式细胞术和ELISA法分别检测蜕膜基质细胞表面CCR2的表达和培养的蜕膜基质细胞上清中CCL2的分泌。结果:人早孕蜕膜组织和蜕膜基质细胞均高水平转录和翻译CCR2/CCL2,培养的基质细胞能分泌大量的CCL2,其分泌量呈时间依赖性。结论:早孕蜕膜高表达和分泌CCR2/CCL2可能参与早孕期母-胎免疫调节。 展开更多
关键词 蜕膜 蜕膜基质细胞 趋化因子 CCR2/CCL2
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胰岛素样生长因子系统在人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达 被引量:2
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作者 李蕾 李尚为 +2 位作者 曹泽毅 彭芝兰 韩字研 《山东医药》 CAS 北大核心 2002年第1期17-19,共3页
为探讨胰岛素样生长因子系统 (IGFs)在体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达及其作用 ,采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术半定量检测体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中 IGFs m RNA表达水平。结果显示 ,体外培养的人早孕蜕膜基... 为探讨胰岛素样生长因子系统 (IGFs)在体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达及其作用 ,采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术半定量检测体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中 IGFs m RNA表达水平。结果显示 ,体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中可以检测出胰岛素样生长因子 - II(IGF- II) m RNA、胰岛素样生长因子 - I受体 (IGF- IR) m RNA、胰岛素样生长因子结合蛋白 - 3(IGFBP- 3) m RNA表达 ,其中 IGF- II m RNA、IGF-IR m RNA表达为强阳性 ,IGFBP- 3m RNA表达较弱。因此认为 ,IGFs可能在早期妊娠蜕膜和绒毛滋养层发育分化、胎盘形成和胚胎生长发育过程中以自分泌和 (或 )旁分泌方式发挥重要的调节作用。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子 蜕膜基质细胞 早孕 基因表达 体外培养 IGFS mRNA
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孕激素及胰岛素样生长因子对体外培养的人早孕蜕膜基质细胞增殖活性的影响 被引量:3
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作者 李尚为 李蕾 +3 位作者 马谊 曹泽毅 彭芝兰 韩字研 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期442-444,共3页
目的探讨孕激素及胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ、Ⅱ)对体外培养的人早孕蜕膜基质细胞增殖活性的影响。方法采用3H-TdR掺入法检测孕激素及IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ对体外培养的人早孕5~7周蜕膜基质细胞增殖活性的影响。结果孕激素、IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ对... 目的探讨孕激素及胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ、Ⅱ)对体外培养的人早孕蜕膜基质细胞增殖活性的影响。方法采用3H-TdR掺入法检测孕激素及IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ对体外培养的人早孕5~7周蜕膜基质细胞增殖活性的影响。结果孕激素、IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ对人早孕5~7周蜕膜基质细胞有明显的促增殖作用,可增加细胞增殖1.6~3.4倍(P均<0.01),且具有时间依赖性(P均<0.01)。结论孕激素及IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ可能通过调节人早孕蜕膜基质细胞的增殖和蜕膜化,对胚胎着床及早期妊娠的维持起重要作用。 展开更多
关键词 孕激素 胰岛素样生长因子 蜕膜基质细胞
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过氧化氢对蜕膜化小鼠子宫内膜基质细胞的影响 被引量:3
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作者 覃金春 蒋凌云 +1 位作者 靳玉甫 覃爱平 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第2期122-126,共5页
目的植入前的胚胎对氧化应激敏感,低氧状态可能更有利于胚胎的生长及发育。文中旨在探讨过氧化氢(H_2O_2)对蜕膜化小鼠子宫内膜基质细胞(ESCs)的影响,构建蜕膜化小鼠ESCs氧化应激模型。方法采用酶解联合筛网过滤及差时贴壁方法分离培养... 目的植入前的胚胎对氧化应激敏感,低氧状态可能更有利于胚胎的生长及发育。文中旨在探讨过氧化氢(H_2O_2)对蜕膜化小鼠子宫内膜基质细胞(ESCs)的影响,构建蜕膜化小鼠ESCs氧化应激模型。方法采用酶解联合筛网过滤及差时贴壁方法分离培养原代小鼠ESCs。实验分为4组(n=8):空白对照组为含基础培养液的小鼠子宫内膜基质细胞(ESCs);蜕膜化组:基础培养液中加入10 nmol/L E2、1μmol/L P4体外诱导小鼠ESCs蜕膜化72 h;阴性对照组:小鼠ESCs蜕膜化诱导成功后,仅予基础培养液干预4 h;氧化应激组:小鼠ESCs蜕膜化诱导成功后,分别加入含50、100、150、200、250、300μmol/L H_2O_2的基础培养液继续干预4 h。免疫组化法检测Vimentin、Cytokeratin表达鉴定原代小鼠ESCs,RT-PCR检测d PRP mRNA的表达鉴定ESCs蜕膜化,CCK-8法检测H_2O_2干预后细胞生长和增殖活性,流式细胞仪检测细胞内ROS水平判断氧化应激程度。结果成功分离、培养和鉴定原代小鼠ESCs。镜下观察细胞呈梭形和多角形、放射状排列;细胞免疫荧光染色检测结果表明Vimentin表达(+)、Cytokeratin(-),原代小鼠ESCS纯度达(96.3±0.49)%。10 nmol/L E2、1μmol/L P4作用下,蜕膜化组蜕膜化标志物d PRP mRNA显著高于空白对照组(1.0010±0.0011 vs 0.000 2±0.0000,P<0.01)。与阴性对照组抑制率[(1.000±0.000)%]比较,氧化应激组在H_2O_2浓度为50、100、150、200、250、300μmol/L作用下抑制率[(0.013±0.004、0.032±0.007、0.069±0.023、0.172±0.007、0.395±0.018、0.706±0.013)%],其中150、200、250、300μmol/L H_2O_2与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。进一步评估50、100μmol/L H_2O_2干预后测得的细胞内氧化应激组ROS明显高于阴性对照组(27.77±4.20 vs 17.47±0.61,43.57±6.58 vs 17.47±0.61,P=0.001)。结论 50、100μmol/L H_2O_2不影响蜕膜化小鼠ESCs的生长、增殖,且随H_2O_2浓度增加,刺激细胞内ROS的产生增多,100μmol/L H_2O_2可作为蜕膜化小鼠ESCs氧化应激模型建立的合适刺激浓度。 展开更多
关键词 氧化应激 过氧化氢 蜕膜化 子宫内膜
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Nur77促进人子宫内膜蜕膜化间质细胞中催乳素的表达 被引量:4
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作者 蒋玥 赵静 +4 位作者 华美娟 甄鑫 胡娅莉 颜桂军 孙海翔 《医学研究生学报》 CAS 2011年第1期5-10,共6页
目的蜕膜化催乳素在妊娠的建立与维持中具有重要作用,但目前对参与蜕膜化催乳素表达调节因子的研究较少。文章旨在探讨孤儿核受体Nur77在人子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中对蜕膜化标志基因(Prolactin,PRL)的作用。方法制备Ad-Flag-Nur77... 目的蜕膜化催乳素在妊娠的建立与维持中具有重要作用,但目前对参与蜕膜化催乳素表达调节因子的研究较少。文章旨在探讨孤儿核受体Nur77在人子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中对蜕膜化标志基因(Prolactin,PRL)的作用。方法制备Ad-Flag-Nur77重组腺病毒,通过荧光素酶报告基因和荧光定量PCR结合重组腺病毒介导的Nur77过表达及小干扰RNA沉默Nur77基因的实验,阐述Nur77对蜕膜催乳素的调控作用。结果成功获得滴度为8×1010ifu/ml的重组Nur77腺病毒,该腺病毒可在子宫内膜间质细胞中高表达Flag-Nur77融合蛋白;体外培养的人子宫内膜间质细胞经8-Br-cAMP和甲羟孕酮(medroxy progesterone,MPA)刺激后,Nur77的表达明显增加,并在体外诱导蜕膜化培养的第3天达到高峰;过表达Nur77可明显上调人子宫内膜间质细胞中dPRL(-332/+65)启动子活性>4倍,并以浓度依赖的方式明显增加人子宫内膜间质细胞中PRL mRNA的表达,P<0.01;功能缺失实验进一步表明基因沉默内源性Nur77蛋白表达明显抑制dPRL启动子活性达60%,同时显著抑制8-Br-cAMP和MPA诱导的人子宫内膜间质细胞中PRLmRNA的表达,P<0.01。结论孤儿核受体Nur77参与8-Br-cAMP和MPA诱导子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中PRL的表达调控。 展开更多
关键词 Nur77 催乳素 蜕膜化 人子宫内膜间质细胞
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