小承气汤化学成分研究及挥发油成分分析

目的:研究小承气汤化学成分及汤剂中挥发油的成分。方法:采用硅胶和凝胶等色谱分离化合物,并根据波谱数据和理化性质鉴定其结构;对小承气汤水蒸气蒸馏所得挥发油,运用GC-MS技术,计算机检索结合人工解析。结果:分离得到11个化合物,分别鉴定为大黄酚(1),大黄素甲醚(2),厚朴酚(3),β-谷甾醇,(4),反式-肉桂酸(5),大黄素(6),芦荟大黄素(7),大黄酸(8),没食子酸(9),大黄酚-8-O--βD-葡萄糖苷(10),橙皮苷(11)。从挥发油中鉴定出67个化合物,主要成分为对-聚伞花素(16.43%),D-柠檬烯(42.61%),δ-松油烯(14.46%),β-桉叶烯(5.42%)等。结论:提取分离的11个化合物均为首次从小承气汤中分离得到。

大鼠灌胃厚朴及厚朴三物汤后和厚朴酚的药动学比较

目的:研究厚朴及厚朴三物汤中和厚朴酚在大鼠体内的药代动力学特征,探讨药物配伍对和厚朴酚在大鼠体内过程的影响。方法:用HPLC法测定厚朴组和厚朴三物汤组中和厚朴酚在大鼠体内的血药浓度,估算二者的药代动力学参数。结果:两组中和厚朴酚在大鼠体内药-时曲线均符合一级吸收二房室模型,主要药代动力学参数AUC、Cmax、Tmax、CL/F等有显著差异(P<0.05)。结论:厚朴三物汤中大黄枳实配伍能影响和厚朴酚的吸收、分布和排泄等。

厚朴汁炙远志对小鼠胃Cajal间质细胞Ca^(2+)通道的影响

目的考察厚朴汁炙远志含药血清对小鼠胃Cajal间质细胞内离子活性来影响胃动力的细胞钙通道机制。方法采用体外小鼠胃Cajal间质细胞和含药血清共孵。实验分成:空白组、厚朴组、远志组、远志配厚朴组、厚朴汁炙远志含药血清高、中和低剂量组。采用分光光度法检测细胞内外钙离子浓度和微量ATP酶、ELISA法检测1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)浓度。结果远志组的胞内游离Ca2+浓度、ATP酶活性、和IP3浓度与空白组比较均显著升高(P<0.05,P<0.01),而厚朴组、远志配厚朴组,厚朴汁炙远志含药血清高和中剂量组的Ca2+浓度、ATP酶活性、IP3浓度与远志组比较,显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论远志能抑制胃Cajal间质细胞活性,使细胞钙离子内流,产生自由基导致细胞成分破坏,诱发细胞凋亡;而厚朴汁炙远志能缓解细胞钙超载,维持细胞稳态,从而缓解胃动力障碍。

基于血清药物化学和网络药理学的厚朴“下气除满”药效物质基础和作用机制研究

目的:基于血清药物化学与网络药理学探究厚朴“下气除满”药效物质基础和作用机制。方法:采用高效液相色谱-质谱法分析厚朴水煎剂及大鼠血清、尿液、粪便中的成分。分析条件为Agilent Extend-C;色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸(A)-乙腈(B)梯度洗脱;柱温为35℃;体积流量为1.0 mL·min;进样量为10μL。利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、STITCH、SwissTargetPrediction、SuperPred数据库收集厚朴入血成分作用靶点,以“gastroparesis”为胃轻瘫疾病检索词,通过TTD、DiGSeE、OMIM、DrugBank和HPO数据库构建胃轻瘫靶点数据库,采用Cytoscape 3.5.1软件构建药物-入血成分-靶点网络图和蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,寻找核心靶点,通过DAVID数据库对核心靶点进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,阐述其作用机制。结果:从厚朴水煎剂中共鉴定54个成分;从大鼠血清中鉴定出14个成分,分别为和厚朴酚、厚朴酚、6′-O-甲基和厚朴酚、厚朴木脂素E、5-烯丙基-5′-(1″-羟基丙烯氧)联苯-2,2′-二醇、厚朴木脂素A、厚朴木脂素B、厚朴木脂素C、和厚朴三醇、木兰花碱、木兰箭毒碱、番荔枝碱、β-桉叶醇和β-谷甾醇;从大鼠尿液和粪便中共鉴定出13个成分,多数为入血的原型成分。入血成分共涉及118个靶点,其中人激肽原1(KNG1)、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、表皮细胞生长因子(EGF)、内皮型一氧化氮合酶3(NOS3)、血管内皮生长因子A(VEGFA)为PPI中的核心基因;富集分析显示厚朴入血成分可能通过雌激素信号通路、RAS信号通路及胰岛素神经通路等发挥胃肠推动作用。结论:厚朴酚类和生物碱类成分可能是厚朴发挥“下气除满”功效的物质基础,为其质量标志物的研究提供参考。

栀子厚朴汤加减联合生石膏治疗焦虑症的临床效果

目的探讨栀子厚朴汤加减联合生石膏治疗焦虑症的临床效果。方法选择2013年1月~2015年6月辽宁中医药大学附属第二医院收治的66例焦虑症患者,按照随机数字表法将其分为治疗组和对照组,各33例。治疗组给予栀子厚朴汤加减联合生石膏治疗,对照组给予抗焦虑药艾司唑仑片治疗。观察比较两组汉密尔顿焦虑量表(HAMA)疗效、评分,以及中医证候疗效、中医证候主证积分情况。结果治疗组HAMA疗效总有效率为97.0%,对照组为84.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后HAMA总评分、精神性焦虑因子评分、躯体性焦虑因子评分均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后HAMA总评分明显低于对照组(P<0.05),两组治疗后精神性焦虑因子评分、躯体性焦虑因子评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组中医证候疗效总有效率为90.9%,对照组为51.5%,差异有高度统计学意义(P<0.01)。两组治疗后暴躁易怒、失眠心悸评分均较治疗前明显降低(P<0.05),且治疗组治疗后暴躁易怒、失眠心悸评分均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论栀子厚朴汤和生石膏治疗焦虑症可以有效缓解患者的不良情绪,提高患者生活质量。

基于标准汤剂的姜厚朴饮片UPLC特征图谱建立及生姜成分的鉴别

目的:建立基于标准汤剂的姜厚朴饮片超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱方法,研究不同基原和药用部位特征图谱的差异性,建立厚朴生品与炮制品的区分方法。方法:采用UPLC建立姜厚朴标准汤剂和饮片UPLC特征图谱,对姜厚朴不同基原和药用部位特征图谱的差异性进行分析,并采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS)分析姜厚朴中生姜类成分。结果:20批姜厚朴标准汤剂、饮片有6个共有特征峰,通过对照品指认了2个特征峰,分别为厚朴酚、和厚朴酚;厚朴酚与和厚朴酚色谱峰的峰高比可能是厚朴与凹叶厚朴2种基原的区别点;姜厚朴根皮、干皮和枝皮特征图谱特征性成分含量差异有统计学意义,根皮中厚朴酚、和厚朴酚总量最高,干皮中特征峰1~4含量最高。采用LC-MS检测出姜厚朴中6-姜辣素和6-姜烯酚,并利用m/z为295和277的离子峰,成功区分厚朴与姜厚朴。结论:所建立的UPLC特征图谱方法能很好地用于姜厚朴不同基原和药用部位的差异性研究;所采用的LC-MS能有效地鉴别厚朴与姜厚朴。

厚朴四君子汤颗粒剂中有效成份提取物的高效液相色谱指纹图谱研究

目的建立厚朴四君子汤颗粒剂中有效成份提取物指纹图谱标准及指纹对照品,为厚朴四君子汤颗粒剂指纹图谱的检测提供依据。方法采用HPLC法建立提取物、颗粒剂指纹图谱,SHISEIDO CAPCELL PAK C18MGⅡ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.05%三氟乙酸水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长230 nm。结果建立的各HPLC指纹图谱测定条件分离良好,以指纹对照品为参比,测得厚朴四君子汤颗粒与提取物的相似度一致性良好。结论所建立的HPLC指纹图谱方法重复性好,可为厚朴四君子汤提取物、颗粒剂的质量控制提供依据。

经典名方达原饮基准样品关键质量属性量值传递研究

目的建立经典名方达原饮基准样品的HPLC特征图谱,并对其关键质量属性量值传递进行研究。方法按照古代工艺制备15批达原饮基准样品,建立其特征图谱,明确其特征峰并对其进行特征峰归属分析;对达原饮基准样品进行多成分含量测定,分析主要成分从饮片到基准样品的传递规律。结果15批达原饮基准样品的特征图谱相似度均大于0.97,特征图谱相似度良好,共指认20个共有峰,其中4号峰来自槟榔,3、11、19、20号峰来自厚朴,12~16、18号峰来自黄芩,1、7、8、10号峰来自白芍,2、6号峰来自知母,5、17号峰来自甘草,9号峰为厚朴和白芍共有;全处方干膏率范围和平均转移率为12.88%~16.42%和72.41%。各指标成分的含量范围及饮片到基准样品的平均转移率分别为槟榔碱0.08%~0.19%和17.48%,厚朴酚与和厚朴酚0.0215%~0.0522%和15.85%,黄芩苷22.12%~28.72%和59.36%,芍药苷0.84%~1.32%和38.88%,芒果苷0.08%~0.13%和21.58%,甘草酸铵0.15%~0.25%和10.39%。结论特征图谱结合出膏率和多指标成分含量测定对达原饮基准样品的量值传递规律进行研究,为达原饮的质量控制和制剂开发提供了科学依据。

大黄、枳实、厚朴不同炮制品对小承气汤中药效组分的影响

目的研究大黄、枳实、厚朴饮片变化对小承气汤药效组分的影响,以期为临床的合理应用和饮片的质量标准提供参考。方法采用HPLC法分别测定各类成分。大黄游离蒽醌类(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–0.1%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长254 nm。大黄结合蒽醌类(番泻苷B、番泻苷A):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;柱温30℃;进样量10μL;检测波长340 nm。枳实黄酮苷类(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–水;梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;柱温40℃;进样量10μL;检测波长283 nm。厚朴木脂素类成分(和厚朴酚、厚朴酚):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长294 nm。结果小承气汤配伍剂量(大黄12 g–炒枳实9 g–姜厚朴6 g)不变,大黄、枳实、厚朴饮片改变时,小承气汤药效组分总量变化规律为:大黄–枳实–姜厚朴>酒大黄–炒枳实–姜厚朴>熟大黄–炒枳实–姜厚朴>大黄炭–炒枳实–姜厚朴≈小承气汤>大黄–炒枳实–厚朴,变化率分别为酒大黄组(6.561%)、熟大黄组(4.222%)、大黄炭组(0.118%)、枳实组(30.186%)、厚朴组(-11.218%)。除大黄炭组外,其余组的药效组分总量皆明显变化,其中枳实组变化最明显。结论同一味药材的不同炮制品在小承气汤处方中药效组分不同,对其他药味的影响亦不同,在小承气汤处方配伍中不可随意替代。

基于历代中医文献的厚朴汤剂中厚朴常用剂量探索

目的：研究厚朴在中医汤剂中的临床常用剂量,为临床合理使用厚朴提供参考。方法：收集历代中医方剂文献中含厚朴的方剂,利用Excel 2013筛选出水煎内服的厚朴方,采用SQL Server 2008构建厚朴方数据库。采用SPSS 19.0软件统计厚朴剂量的众数、频数、均数等参数。结果：共采集到4 674首含厚朴的方剂,筛选出含有剂量的内服汤剂775首。在历代内服汤剂的厚朴方中,厚朴剂量〈3 g的厚朴方占总数的23.87%;3-11.2 g的厚朴方占总数的52.26%;11.3-30 g的厚朴方占总数的12.26%;〉30 g的厚朴方占总数的11.61%。结论：在历代中医文献中,厚朴内服汤剂的炮制主要为姜制,厚朴临床常用剂量以3.5-11 g为宜。厚朴汤剂的常用剂量在隋唐及以前相对较大,宋代以后相对较小。

不同等级厚朴饮片质量评价指标的系统聚类分析

目的：建立厚朴饮片质量评价指标的聚类分析,规范该饮片的质量规格。方法：测定不同产地及同一产地不同树龄厚朴饮片的水溶性浸出物、醇溶性浸出物、挥发油、厚朴酚与和厚朴酚的含量,并对其进行不同类间距离聚类分析。结果：厚朴饮片的水溶性浸出物、醇溶性浸出物、挥发油及总酚的含量与厚朴的级别呈正相关。厚朴饮片可分为三个等级,一级饮片：规格为厚度4-6 mm,挥发油质量分数〉0.7%,水溶性浸出物质量分数〉10%,醇溶性浸出物质量分数〉20%,厚朴酚与和厚朴酚总质量分数〉15%。二级饮片：规格为厚度2-4 mm,挥发油质量分数〉0.35%,水溶性浸出物质量分数〉5%,醇溶性浸出物质量分数〉8%,厚朴酚与和厚朴酚总质量分数〉7%。三级饮片：低于以上各指标值的均归为此类。结论：利用质量指标评价厚朴饮片与传统分级存在一定的相关性,为综合评价厚朴饮片质量规格提供了新思路。

姜厚朴饮片标准汤剂研究

目的制备16批姜厚朴饮片标准汤剂,测定其出膏率、指标成分含量、转移率及指纹图谱等数据,为其配方颗粒的制备和质量评价提供参考。方法依照中药饮片标准汤剂制备要求,制备16批姜厚朴饮片标准汤剂,参照《中国药典》2015年版方法测定厚朴酚与和厚朴酚含量,计算两者总和的转移率,测定汤剂的出膏率及pH值,并绘制HPLC指纹图谱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱:0～15 min,12%～16%乙腈;15～30 min,16%～28%乙腈;30～42 min,28%～74%乙腈;42～55 min,74%～80%乙腈;柱温40℃;体积流量1 mL/min;检测波长294 nm。结果 16批姜厚朴饮片标准汤剂中厚朴酚与和厚朴酚总和的转移率为6.5%～12.0%,出膏率3.41%～7.14%,pH值4.63～5.43,并用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A)软件进行指纹图谱分析,找到了7个共有峰,指认4个,分别为木兰苷B(1号峰)、木兰苷A(2号峰)、和厚朴酚(6号峰)、厚朴酚(7号峰)。对16批姜厚朴饮片标准汤剂进行相似度评价,其相似度均大于0.69。同时,建立了姜厚朴饮片标准汤剂指纹图谱。结论所建立的汤剂制备方法稳定可行,分析方法精密度、稳定性和重复性良好,可用于姜厚朴饮片标准汤剂的质量评价。

经典名方枳实薤白桂枝汤物质基准的量值传递研究

目的 建立经典名方枳实薤白桂枝汤(Zhishi Xiebai Guizhi Decoction,ZXGD)基准样品的HPLC特征图谱并对其进行多成分含量测定,研究ZXGD物质基准量值传递规律,为复方制剂研究奠定基础。方法 制备20批ZXGD基准样品,建立其特征图谱,明确其特征峰并对其进行特征峰的归属;对ZXGD基准样品进行多成分含量测定,分析主要成分从饮片-物质基准的传递规律。结果 20批ZXGD基准样品的特征图谱相似度均大于0.93,共匹配得到11个特征峰,分别来自于方中枳实(峰1、3~5、9)、厚朴(峰2、10、11)、桂枝(峰6~8);各指标性成分的含量范围及饮片-基准样品的平均转移率分别为辛弗林0.46%~0.85%和103.80%,橙皮苷0.58%~1.07%和42.36%,肉桂酸0.025%~0.047%和105.53%,桂皮醛0.09%~0.17%和5.40%,厚朴酚与和厚朴酚0.005 6%~0.010 3%和0.23%。结论 采用HPLC特征图谱和多成分含量测定对ZXGD物质基准的量值传递规律进行研究,该方法科学合理,且明确了饮片-物质基准的传递规律,实现了对经典名方ZXGD开发研究的全过程质量控制。

“发汗”前后厚朴质量标志物的预测分析

厚朴为临床常用道地中药,历版《中国药典》规定厚朴需经产地加工"发汗"处理,产地加工"发汗"影响其道地性和品质。该文基于中药饮片质量标志物(Q-marker)的概念及研究模式,通过分析厚朴饮片有效成分组,辨别厚朴饮片"发汗"前后发生显著变化的差异成分;结合药效、药动学及药性研究结果,明确其主要药效物质基础,综合研究结果分析预测"发汗"前后厚朴的质量标志物,以期为提高厚朴的质量标准提供参考。

基于相对质量常数的姜厚朴饮片等级评价

目的:建立传统性状评价和现代内在质量评价相结合的姜厚朴饮片等级评价标准。方法:测定28批姜厚朴饮片的外观性状参数和内在药效指标成分(厚朴酚与和厚朴酚)含量,计算相对质量常数,假设所测样品的平均相对质量常数为100%,其120%以上列为一等,60%~120%列为二等,剩余列为三等。结果:姜厚朴饮片的相对质量常数范围为0. 09~1. 78。一级姜厚朴饮片相对质量常数≥0. 64,二级姜厚朴饮片相对质量常数介于0. 32~0. 64,三级姜厚朴饮片相对质量常数≤0. 32。结论:相对质量常数结合了传统外在性状指标和内在药效成分指标,能够客观、合理、科学的划分姜厚朴饮片等级,可为建立和完善该饮片的等级标准提供参考。

UFLC-MS/MS法同时测定栀子厚朴汤中10个成分的含量

目的:建立超快速液相色谱-串联质谱法同时测定栀子厚朴汤中10个成分(京尼平苷、京尼平龙胆双糖苷、和厚朴酚、厚朴酚、异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素和橙皮素)的含量。方法:采用Shim-Pack XR-ODS色谱柱(75 mm×3.0 mm,2.2μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~10 min,10%B→30%B;10~12 min,30%B→60%B;12~18 min,60%B→85%B),平衡时间为5min,流速为0.5 mL·min-1,柱温为30℃,进样量为5μL;质谱采用3200 QTRAP三重四极杆串联质谱仪,离子源为电喷雾电离源(ESI源),检测方式为负离子检测,扫描模式为多反应检测(MRM)。结果:京尼平苷、京尼平龙胆双糖苷、和厚朴酚、厚朴酚、异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素和橙皮素质量浓度分别在1~40μg·mL-1(r=0.999 6)、0.2~8μg·mL-1(r=0.999 7)、0.1~4μg·mL-1(r=0.999 3)、0.1~4μg·mL-1(r=0.999 7)、0.2~8μg·mL-1(r=0.999 5)、1~40μg·mL-1(r=0.999 7)、0.2~8μg·mL-1(r=0.998 5)、1~40μg·m L-1(r=0.999 7)、0.1~4μg·m L-1(r=0.999 2)和0.02~0.8μg·m L-1(r=0.999 4)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为98.0%、98.5%、96.9%、98.8%、98.4%、99.3%、99.4%、98.7%、98.9%和97.9%。6批样品中上述10个成分的含量范围分别为京尼平苷4.51%~4.83%,京尼平龙胆双糖苷0.805%~0.841%,和厚朴酚0.125%~0.134%,厚朴酚0.133%~0.144%,异柚皮苷0.403%~0.435%,柚皮苷5.54%~5.84%,橙皮苷0.210%~0.222%,新橙皮苷3.98%~4.30%,柚皮素0.059 2%~0.066 0%,橙皮素0.021 3%~0.022 3%。结论:本方法准确灵敏,稳定性和重复性好,可用于栀子厚朴汤的质量控制。