去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa抗实验性心律失常作用

目的研究去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa(DCⅣa)是否具有抗实验性心律失常的作用。方法采用氯化钡、乌头碱、毒毛花苷G及结扎左冠状动脉前降支诱发大鼠或豚鼠心律失常模型,八道生理记录仪观察并记录Ⅱ导联心电图,观察DCⅣa对实验性心律失常的预防作用。结果DCⅣa能缩短氯化钡和乌头碱诱发大鼠心律失常的持续时间,增加恢复正常心律的动物数;增加诱发豚鼠心律失常的毒毛花苷G用量;延长冠脉结扎致大鼠心律失常发生的潜伏期,缩短心律失常的持续时间,降低室颤发生的百分率。结论DCⅣa具有明显的抗心律失常作用。

去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa对缺氧复氧心肌细胞损伤的保护作用

目的研究去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa(DCⅣa)是否为龙牙木匆心木总皂苷抗心肌缺血的有效成分之一。方法取体外培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧6 h复氧3 h心肌细胞损伤模型,并于缺氧及复氧开始时分别加入终浓度为2.5,1.0和0.1 mg.L-1的DCⅣa。检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)漏出量,丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。MTT法检测心肌细胞存活率。结果DCⅣa(2.5,1.0 mg.L-1)显著减少缺氧及复氧后LDH和CK漏出量,降低MDA含量,提高SOD活性,提高心肌细胞存活率。结论DCⅣa为龙牙木匆心木总皂苷抗心肌缺血的有效成分之一,可减轻缺氧复氧对心肌细胞的损伤,对心肌细胞具有直接的保护作用。

苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏细胞间纤连蛋白和胶原Ⅳ蛋白表达的影响

目的探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠细胞间纤连蛋白(FN)和胶原Ⅳ蛋白(Ⅳ-CP)表达的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组及苦瓜总皂苷5 mg/(kg·d),治疗组左肾切除加1次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4、8周处死大鼠各半,测血糖、24 h尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测FN和Ⅳ-CP蛋白的表达。结果治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高(P<0.05);免疫组化、RT-PCR和Western Blot与模型组相比治疗组大鼠肾脏组织FN和Ⅳ-CP表达明显降低(P<0.05)。结论苦瓜总皂苷可以通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织细胞间纤连蛋白和Ⅳ型胶原的表达,改善肾功能。

黄芪多糖和三七总皂苷配伍对糖尿病大鼠肾组织Ⅳ型胶原及层黏连蛋白表达的影响

目的探讨黄芪多糖(APS)和三七总皂苷(PNS)配伍对糖尿病大鼠肾组织Ⅳ型胶原及层黏连蛋白的影响。方法通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,将糖尿病模型大鼠随机分为模型组、APS组、PNS组、APS组+PNS组和贝那普利组,除模型组外,每天给药1次,连续给药8周。8周后测定大鼠24 h尿总蛋白、血糖、血肌酐和尿素氮;采用免疫组化法测定糖尿病大鼠肾组织内转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板源性生长因子(PDGF-BB)、Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)和层粘连蛋白(LN)的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠24 h尿总蛋白、血糖、血肌酐和尿素氮含量显著升高(P﹤0.01),肾组织中TGF-β1、PDGF-BB、Col-Ⅳ和LN蛋白表达显著增强(P﹤0.01);与模型组比较,APS、PNS、APS与PNS配伍组大鼠的24 h尿总蛋白、血糖、血肌酐和尿素氮显著降低(P﹤0.01),肾组织中TGF-β1、PDGF-BB、Col-Ⅳ和LN蛋白表达显著减少(P﹤0.01),APS与PNS配伍组的作用优于APS、PNS单用组(P﹤0.05,P﹤0.01)。结论 APS和PNS配伍对糖尿病大鼠的肾脏具有保护作用,其作用机制可能与其下调TGF-β1、PDGF-BB、Col-Ⅳ和LN蛋白表达,从而抑制细胞外基质合成有关。

异叶梁王茶甙Ⅲ和Ⅳ的结构

继前报后,又从异叶梁王茶[Nothopanax davidii(France)Harms]树皮中分离得到两种五环三萜皂甙。经化学和波谱(IR,~1HNMR,^(13)CHMR,~1H-~1HCOSY,^(13)C-~1H COSY,MS)分析,分别鉴定为3-O-α-(2’,4’-O-二乙酰基)-L-吡喃阿拉伯糖-3β-羟基齐墩果-12-烯-28,29-双羧酸-28-O-[α-L-吡喃鼠李糖(1-4)-β-D-吡喃葡萄糖(1—6)-β-D-吡喃葡萄糖]酯甙(Ⅲ),命名为异叶梁王茶甙Ⅲ和3-O-β-(2-O-乙酰基)-D-吡喃木糖-3β-羟齐墩果-12-烯-28,29-双羧酸甙(Ⅳ),命名为异叶梁王茶甙Ⅳ。这两种皂甙均系首次从植物中分出的新化合物。

氢氧化钠水解地榆总皂苷制备地榆皂苷化合物Ⅳ的工艺优选

目的:优化地榆总皂苷的碱水解工艺,提高水解产物地榆皂苷化合物Ⅳ的含量。方法:采用正交试验设计,考察水解时间、氢氧化钠体积分数、料液比、水解温度对地榆总皂苷水解过程的影响。结果:影响水解的主次因素依次是料液比>氢氧化钠体积分数>水解温度>水解时间,优选的最佳工艺为料液比1∶80;氢氧化钠体积分数20%,水解时间3.5 h,水解温度82℃。结论:采用优化后的水解条件能够得到含量较高的地榆皂苷化合物Ⅳ,适合工业化生产。

苦瓜皂苷与乳清蛋白水解物协同对二肽基肽酶-Ⅳ的抑制活性

为评价动植物源天然产物的二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制活性,以苦瓜皂苷(momordica saponins,MS)、乳清蛋白胃蛋白酶水解物(whey protein pepsin hydrolysates,WPPHs)、乳清蛋白胰蛋白酶水解物(whey protein trypsin hydrolysates,WPTHs)为原料,采用单因素试验和响应面分析优化水解条件,再将MS与WPPHs、WPTH进行复配,结合模拟体外消化,探究DPP-Ⅳ抑制活性。结果表明,MS、WPPHs及WPTHs具有DPP-Ⅳ抑制活性,最佳水解条件为:当酶添加量4%、pH2.7酶解2h时,WPPHs的DPP-Ⅳ抑制率最高为15.43%;当酶添加量4%、pH 7.6酶解4 h时,WPTHs的DPP-Ⅳ抑制率最高为14.62%。苦瓜皂苷与乳清蛋白水解物具有协同对二肽基肽酶-Ⅳ抑制活性作用,当MS与WPPHs、WPTHs的复配体积比均为1:1时,显著高于两者单独累加(p<0.05)。经胃消化后,WPPHs的DPP-Ⅳ抑制率降低2.02%,MS和WPTHs的DPP-Ⅳ抑制率升高0.99%、7.01%;经肠道消化后,WPPHs的DPP-Ⅳ抑制率升高2.23%,而MS和WPTHs的DPP-Ⅳ抑制率降低4.12%、2.70%。研究结果可为天然动植物源产物协同对二肽基肽酶-Ⅳ抑制活性提供了基础性数据,为降血糖功能性产品的开发提供新的方向。

氨液水解法用于提高黄芪中黄芪甲苷含量的工艺研究

目的:探讨氨试液水解法用于提高黄芪甲苷含量的最佳工艺条件;比较氨解前后黄芪总皂苷的含量差异。方法:采用正交设计试验对影响氨解程度的主要因素进行考察,以黄芪甲苷含量为指标,用高效液相色谱法测定其含量。采用大孔吸附树脂-比色法测定氨解前后黄芪总皂苷的含量。结果:浓氨试液与药材的配比对氨解程度的影响最为显著。最佳氨解工艺参数为:浓氨试液与药材配比1∶5,氨试液浓度为2%时,于90℃水浴回流2 h,黄芪甲苷含量较原药材提高约16倍。比色法结果显示氨解前后黄芪总皂苷含量无统计学差异。结论:氨解法可显著提高黄芪药材中黄芪甲苷的含量,且氨解过程并未影响黄芪总皂苷的含量。说明该法可使其他类型的皂苷转化为黄芪甲苷,具有较高实用价值,可为工业生产提供参考依据。

冰片配伍黄芪甲苷与三七总皂苷对脑缺血/再灌注后血脑屏障通透性的影响

目的 探讨冰片、黄芪甲苷(AST Ⅳ)和三七总皂苷(PNS)配伍对脑缺血/再灌注后血脑屏障(BBB)的影响。方法 脑缺血/再灌注大鼠灌胃给药,观察神经功能缺损症状,测定脑组织含水量和BBB通透性、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、ZO-2、咬合蛋白(Occludin)及闭合蛋白5(Claudin-5)表达。结果 脑缺血/再灌注后,大鼠出现神经功能缺损症状,神经功能评分和脑含水量增加,BBB破坏。各药物能不同程度减轻上述病理改变,冰片+AST Ⅳ+PNS效应最强,优于药物单用及AST Ⅳ+PNS。脑缺血/再灌注后,ZO-1、ZO-2、Occludin、Claudin-5表达减少。各药物使ZO-1增加,除AST Ⅳ外,上调Occludin表达;冰片+AST Ⅳ+PNS还明显上调ZO-2,且上调ZO-1、ZO-2、Occludin的效应优于药物单用及AST Ⅳ+PNS。结论 冰片、AST Ⅳ和PNS能不同程度降低脑缺血/再灌注后BBB通透性的增加,减轻脑水肿,对抗脑组织损伤,三药合用有增强效应,机制可能与协同抑制缺血后ZO-1、ZO-2、Occludin表达下调,保护BBB有关。

冰片配伍黄芪甲苷与三七总皂苷抗脑缺血再灌注损伤有效剂量的研究

目的探讨冰片配伍黄芪甲苷(astragalosidesⅣ, ASTⅣ)和三七总皂苷(panax notoginseng saponins, PNS)抗脑缺血再灌注损伤的有效剂量。方法采用U6*(64)均匀设计实验,设立6个不同剂量的冰片、ASTⅣ和PNS配伍,予大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)再灌注大鼠灌胃干预,以神经功能评分、脑梗死率、脑含水量、脑组织病理形态、血脑屏障(bloodbrain barrier, BBB)通透性评价药物的作用,对效应指标进行多重线性回归分析,确立3种组(成)分的有效配伍剂量,并在此基础上进行验证。结果均匀设计实验表明,大鼠脑缺血再灌注后,出现明显的神经功能障碍,脑梗死率、脑含水量、神经细胞损伤率和BBB通透性均显著增加。冰片、ASTⅣ、PNS不同剂量配伍对上述指标均有一定的改善作用;多重线性回归分析表明,冰片7.5 mg/kg、ASTⅣ10 mg/kg、PNS25 mg/kg配伍为其抗脑缺血再灌注损伤的有效配伍剂量。验证实验显示,3种药物高、低剂量配伍能显著降低脑缺血再灌注大鼠神经功能评分和脑梗死率,3种药物配伍的效应显著优于各药物单用或ASTⅣ+PNS配伍(P<0.05或P<0.01)。结论冰片、ASTⅣ、PNS配伍可增强抗脑缺血再灌注损伤的效应,3种药物的有效配伍剂量为冰片7.5 mg/kg+ASTⅣ10 mg/kg+PNS 25 mg/kg。

胀果甘草中皂甙Ⅰ和Ⅱ的结构鉴定

胀果甘草中皂甙Ⅰ和Ⅱ的结构鉴定邹坤，赵玉英，张如意（北京医科大学植化教研室北京１０００８３）继前文工作（１，２，３），我们利用大孔吸附树脂初步分离，ＨＰＬＣ进一步分离，从胀果甘草（Ｇｌｙｃｙ－ｒｒｈｉｚａｉｎｆｌａｔａＢａｔ）根及根茎的１０％乙醇提取...

高效液相色谱—蒸发光散射测定蒙古黄芪中黄芪甲苷的含量及其提取工艺的优化

目的研究高效液相色谱—蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定山西道地药材蒙古黄芪中黄芪甲苷含量的方法,优选黄芪中黄芪甲苷的醇-氨提取工艺。方法采用HPLC-ELSD法,梯度洗脱,以黄芪甲苷的含量为指标,采用L9(34)正交试验筛选黄芪的最佳提取工艺条件。结果色谱柱理论塔板数按黄芪甲苷计算为127001,分离度为2.25,拖尾因子为1.02,表明对称性良好,保留时间为35.58min;最佳提取工艺为A3B2C1D3,即甲醇∶氨水为9∶1,溶剂总量150ml,超声40min,提取3次。结论该方法适用于黄芪中黄芪甲苷的含量测定,优选得到的提取工艺操作简便。

黄芪药材中黄芪甲苷和总皂苷含量的比较

目的比较不同产地黄芪药材中黄芪甲苷和总皂苷的含量。方法采用HPLC法测定黄芪甲苷的含量,采用紫外分光光度法测定黄芪总皂苷的含量,并考察两者的相关性。结果黄芪甲苷含量为0.13-1.53 mg·g^-1,黄芪总皂苷含量为7.5-17.2 mg·g^-1。结论不同产地黄芪药材中黄芪甲苷和总皂苷含量的差异较大,两种含量之间存在相关性。

黄芪甲苷配伍三七总皂苷对OGD/R大鼠脑微血管内皮细胞增殖、凋亡及线粒体功能的影响

目的观察黄芪甲苷(AST IV)配伍三七总皂苷(PNS)对氧糖剥夺后再复糖复氧(OGD/R)大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)增殖、凋亡及线粒体功能的影响。方法差速密度梯度离心法提取BMECs,免疫荧光检测血管性血友病因子(vWF)表达对细胞进行鉴定,取第3代BMECs,采用AST IV与PNS高(100μmol/L+60μmol/L)、中(50μmol/L+30μmol/L)、低(25μmol/L+15μmol/L)剂量配伍预处理24 h,以OGD/R建立缺血再灌注损伤模型,同时设立正常组和模型组。CCK8法测定细胞增殖情况,LDH漏出率检测细胞损伤,AnnexinⅤ/PI双染检测细胞凋亡,TraKineTMPro活细胞线粒体染色试剂盒对线粒体进行染色,激光共聚焦观察线粒体结构,JC1染色测定线粒体膜电位变化情况。结果成功培养分离BMECs,阳性表达vWF,与正常组比较,模型组细胞存活数量明显减少(P<0.05),LDH漏出率显著增加(P<0.01),细胞凋亡率显著增加(P<0.01);与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍均能促进BMECs增殖、抑制LDH的释放和抑制细胞凋亡(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组线粒体荧光强度明显降低,分布不均;与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍组深红色荧光强度有所增强。与正常组比较,模型组线粒体膜电位水平下降(P<0.01),与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍组线粒体膜电位明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论 AST IV配伍PNS在体外能促进缺血再灌注模型BEMCs细胞增殖,抑制细胞凋亡,降低LDH漏出率,其机制与保护线粒体,增加线粒体膜电位有关。

HPLC与比色法测定复方黄芪注射液中总皂苷与黄芪甲苷含量

目的:建立复方黄芪注射液中黄芪总皂苷与黄芪甲苷含量的测定方法。方法:黄芪总皂苷采用比色法(540nm,722型分光光度计);黄芪甲苷采用 HPLC—ELSD 法,Novapark^(?)C_(18)(3.9*150mm,4μm)色谱柱,流动相为乙腈—水(36:64),流速为1ml/min,柱温30℃,ELSD 参数:移管温度为105℃,气体流量1.50SLPM。结果:总皂苷平均回收率为100.64％,RSD 为1.74％;黄芪甲苷平均回收率为99.62％,RSD 为1.57％。结论:方法简便、快捷、准确、可靠,可用于复方黄芪注射液的质量控制。

正交试验优选断血流软胶囊提取工艺

以醉鱼草皂苷Ⅳb含量、断血流总皂苷含量和浸膏得率为考察指标,采用正交试验设计优选断血流软胶囊的提取工艺。最佳提取工艺为药材粒度为中粉,10倍量水,煎煮2次,每次1.0h,优选得到的工艺稳定、合理、可行。

黄芪皂苷的三种提取方法对黄芪甲苷含量的影响

用薄层扫描法测定并比较三种不同皂苷提取方法对黄芪甲苷含量的影响。分别采用大孔树脂吸附法、正丁醇萃取法和KOH回流提取法制备供试品。以氯仿-甲醇-水为展开系统,薄层扫描法测定黄芪甲苷含量。结果显示,大孔树脂吸附法、正丁醇萃取法和KOH回流提取法三种方法提取物中黄芪甲苷平均含量分别为0.07768%,0.05578%,0.06953%。结果显示大孔树脂法提取黄芪所得黄芪甲苷含量较高。

糖智宁胶囊定性定量方法研究

目的建立糖智宁胶囊的定性定量方法。方法采用TLC法对糖智宁方中黄连进行定性鉴别,采用HPLC法测定糖智宁胶囊中葛根素和竹节参皂苷Ⅳa的含量。色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温30℃;以0.2%磷酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱;流速1 mL min-1;检测波长203 nm。结果薄层色谱鉴别中,特征斑点清晰、分离度好、专属性强、阴性样品无干扰;在HPLC法中,葛根素和竹节参皂苷Ⅳa线性范围分别是:0.122 4～1.836μg(r=0.999 9)、0.249 6～3.744μg(r=0.999 9);平均加样回收率分别为98.3%、97.1%;RSD分别为1.0%、0.7%。结论所建方法专属性强,重复性好,可用于糖智宁胶囊的质量控制。

HPLC法测定补气养血汤中黄芪甲苷含量

目的:建立补气养血汤中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:采用HPLC法,以乙腈--水(30∶70)为流动相,203nm为检测波长,对补气养血汤中黄芪甲苷含量进行了测定。结果:此方法的平均回收率为99.9%,RSD为1.95%,补气养血汤中黄芪甲苷的含量不少于0.2198mg/mL,其保留时间为8.09min。结论:本方法操作简便,快捷,准确,可用于该制剂的初步质量控制。

正交试验优化逆萎康的水提工艺

目的优选逆萎康的最佳提取工艺。方法采用L9(34)正交试验方法,以雪胆总皂苷、黄芪甲苷含量为指标,考察提取次数、提取时间及固液比因素对逆萎康提取效果的影响,优选提取工艺。结果逆萎康的最佳工艺条件为提取2次,提取1 h,固液比12倍。结论该提取工艺操作简便、准确,可为逆萎康颗粒剂的制备提供参考。