Delta阿片受体参与低氧预处理减轻心肺复苏脑损伤的研究

目的研究delta阿片受体(DOR)是否参与了低氧预处理(HPC)对心肺复苏大鼠脑损伤的保护作用。方法 90只大鼠接受为期7d的HPC后,建立大鼠窒息性心肺复苏脑损伤模型,随机均分为五组:心跳停止(CA)组(A组)、HPC+CA组(B组)、Naltrindole(NTI,DOR特异性拮抗药)+CA组(C组)、HPC+人工脑脊液(ACSF)+CA组(D组)及HPC+NTI+CA组(E组)。A组仅建立心肺复苏模型;C组大鼠在窒息前30min经侧脑室注入含50nmolNTI的ACSF10μl;B、D、E组均接受连续7d的HPC,HPC结束后24h,B组大鼠接受气管插管、8min窒息以及心肺复苏;而D组和E组大鼠则在窒息前30min分别经侧脑室注入含0或50nmolNTI的ACSF10μl。观察复苏成功率并对存活大鼠的神经功能缺损进行评分,观察复苏后海马CA1区神经元损伤及凋亡情况。结果 HPC改善心肺复苏脑损伤后的神经功能缺损,抑制早期海马神经元的凋亡,增加海马CA1区存活神经元的数量,而DOR拮抗药Naltrindole明显消除了HPC的神经保护作用。结论在HPC减轻心肺复苏大鼠脑损伤的过程中,DOR发挥着重要作用。

Delta阿片受体、β-arrestin1、Bcl-2在溃疡性结肠炎大鼠脾脏组织中的表达及乌梅丸的干预作用

目的:观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠脾脏组织Delta阿片受体、β-arrestin1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达及乌梅丸的干预作用,旨在研究乌梅丸治疗结肠炎的机制.方法:56只SD大鼠随机分成空白对照组、结肠炎模型组、美沙拉嗪组、乌梅丸组(每组14只).除空白对照组外,其他3组均应用2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠.模型建成2 d后,空白对照组和结肠炎模型组分别以蒸馏水3 mL/只灌胃,美莎拉嗪组用美莎拉嗪混悬液(浓度50 g/L)、乌梅丸组用乌梅丸液(浓度0.51 g/L)以3 mL/只灌胃,连续给药15 d后取脾脏组织,应用Realtime-PCR检测Delta阿片受体、β-arrestin1、Bcl-2 mRNA的表达,应用Western blot技术检测Delta阿片受体、β-arrestin1、Bcl-2蛋白的表达.结果:空白对照组Delta阿片受体、β-arrestin1及Bcl-2 mRNA的相对表达分别为1.11±0.10、1.05±0.06及1.06±0.04;蛋白的相对表达分别为0.48±0.08、0.62±0.07及0.76±0.10.结肠炎模型组Delta阿片受体、β-arrestin1及Bcl-2的mRNA的相对表达分别为2.50±0.25、3.27±0.41及2.48±0.43;蛋白的相对表达分别为1.04±0.17、1.50±0.15及1.26±0.20.美沙拉嗪组Delta阿片受体、β-arrestin1及Bcl-2 mRNA的相对表达分别为1.52±0.09、1.63±0.27及1.56±0.09;蛋白的相对表达分别为0.68±0.17、0.77±0.15及0.96±0.16.乌梅丸组Delta阿片受体、β-arrestin1及Bcl-2 mRNA的相对表达分别为1.54±0.13、1.54±0.14及1.57±0.15;蛋白的相对表达分别为0.68±0.14、0.74±0.19及0.93±0.11.与空白对照组相比,结肠炎模型组Delta阿片受体、β-arrestin1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05);与结肠炎模型组相比,乌梅丸组、美沙拉嗪组Delta阿片受体、β-arrestin1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05),且乌梅丸组和美沙拉嗪组Delta阿片受体、β-arrestin1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达均无显著差异(P>0.05).结论:乌梅丸下调UC大鼠脾脏组织Delta阿片受体、β-arrestin1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达发挥治疗结肠炎的作用.

瑞芬太尼痛觉过敏大鼠Delta阿片受体mRNA的表达水平

目的：探讨切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠背根神经节及海马Delta阿片受体mRNA表达水平的变化。方法：健康雄性SD大鼠32只，尾静脉置管后随机分为4组，瑞芬太尼组（R组）输注瑞芬太尼1μg·kg-1·min-1，切口痛组（I组）输注等体积生理盐水，甘氨酸组（G组）输注甘氨酸15μg·kg-1·min-1，对照组（C组）输注等体积生理盐水，最后一次痛阈测定后留取大鼠L4-L6背根神经节及海马标本，应用实时定量PCR方法测定Delta阿片受体mRNA的表达水平。结果：R组、I组、G组均发生痛觉过敏，且R组痛觉过敏的程度高于I组和G组；R组海马Delta阿片受体mRNA表达水平（4.359±1.031）显著高于C组、I组（2.373±1.014）和G组（2.411±0.326）（P＜0.05）；R组背根神经节Delta阿片受体mRNA表达水平（2.108±0.361）显著高于C组、I组（1.409±0.435）和G组（1.413±0.234）（P＜0.05）。结论：瑞芬太尼可在切口痛模型大鼠中引发痛觉过敏，其机制可能与背根神经节及海马Delta阿片受体mRNA表达上调有关。

Mu-、kappa-、delta-阿片受体在成年大鼠正常胃组织的免疫组织化学定位研究

目的观察mu-、kappa-、delta-阿片受体在成年大鼠正常胃组织中的分布与定位。方法选用成年雄性wistar大鼠胃组织切片进行免疫组织化学染色,用免疫组织化学技术对Mu-、kappa-、delta-阿片受体在大鼠胃组织的分布进行定位分析。结果mu-阿片受体免疫阳性物质主要分布于胃黏膜上皮及黏液层、胃主细胞、肌间神经丛等部位;kappa-、delta-阿片受体免疫阳性物质主要分布于胃主细胞、肌间神经丛等部位。结论mu-、kappa-、delta-阿片受体在胃主细胞膜和胞浆、肌间神经丛等部位均有分布,但仅mu-阿片受体还存在于胃黏膜上皮及黏液层,提示阿片受体参与了胃各种生物学功能及胃粘膜的损伤、修复与再生。

Delta阿片受体激活对体外培养大鼠软骨细胞凋亡的影响

目的：研究delta阿片受体激活对体外培养新生大鼠软骨细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法：体外分离培养新生大鼠软骨细胞，用delta阿片受体进行干预，MTT法测定细胞活力；AnnexinV-FITC／PI双标记法测定细胞凋亡；免疫印迹分析caspase-3和细胞外信号调节激酶（ERK）蛋白表达水平。结果：delta阿片受体激动剂DADLE（1 μmol／L）可增强软骨细胞ERK蛋白的磷酸化，抑制软骨细胞凋亡，但这种现象可被delta阿片受体阻断剂Naltrindole（10μmol／L）所逆转，并且给予ERK特异性抑制剂U0126（10μmol／L）亦可逆转DADLE抑制细胞凋亡的作用。结论：Delta阿片受体激活可抑制大鼠软骨细胞凋亡，其机制可能与激活ERK途径相关。

Delta阿片受体激动剂DADLE在大鼠缺血性脑损伤中的作用

目的研究delta阿片受体激动剂DADLE([D-Ala2,D-Leu5]-enkephalin)在大鼠全脑缺血性脑损伤中的作用。方法 60只成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠被随机分入6组,每组10只:假手术对照(Sham)组、人工脑脊液(ACSF)组、DADLE0.2mmol/L(DADLE0.2)组、DADLE2mmol/L(DADLE2)组、DADLE20mmol/L(DADLE20)组和DADLE2mmol/L+纳曲吲哚2mmol/L(联合用药)组。应用立体定位技术分别对各组大鼠的左侧侧脑室注射相应剂量的实验药物10μL。45min后对大鼠行全脑缺血10min,5d后进行运动功能和水迷宫检测,最后处死动物进行脑组织病理学检查。结果 ACSF组的运动功能评分显著低于其他5组(P值均<0.05);3个不同剂量DADLE组间差异均有统计学意义(P值均<0.05),DADLE20组最高,联合用药组显著低于DADLE2和DADLE20组(P值均<0.05)。术后7、8d,ACSF组的水迷宫检测潜伏期均显著长于同时间点的其他5组(P值均<0.05);3个不同剂量DADLE组间同时间点潜伏期的差异均有统计学意义(P值均<0.05),DADLE20组最短,联合用药组均显著长于同时间点的DADLE20组(P值均<0.05)。同时间点各组间及同组各时间点间游泳速度的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。术后6、7、8d,ACSF组的目标象限游泳时间均显著短于同时间点的其他5组(P值均<0.05);3个不同剂量DADLE组同时间点目标象限游泳时间的差异均有统计学意义(P值均<0.05),DADLE20组最长,联合用药组均显著短于同时间点的DADLE20组(P值均<0.05)。ACSF组海马CA1区的存活神经元数目显著少于其他5组(P值均<0.05),DADLE剂量依赖性地增加海马CA1区的存活细胞数,3个不同剂量DADLE组同时间点的差异均有统计学意义(P值均<0.05),联合用药组显著少于DADLE2组(P<0.05)。结论 DADLE侧脑室注射具有明显减轻缺血性脑损伤的效应,其作用呈剂量依赖性,其机制主要是激活delta受体,同时亦可能有其他机制参与。

乌梅丸对实验性结肠炎大鼠脾脏组织Delta-阿片受体表达的影响

目的观察乌梅丸对实验性结肠炎大鼠脾脏组织Delta-阿片受体(DOR)的mRNA和蛋白表达的影响,旨在研究乌梅丸治疗结肠炎的新机制。方法 56只SD大鼠随机分成空白对照组、结肠炎模型组、美沙拉嗪组、乌梅丸组(每组14只)。除空白对照组外,其他3组均应用2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠。模型建成2天后,空白对照组和结肠炎模型组分别以蒸馏水每只3ml灌胃,美莎拉嗪组用美莎拉嗪混悬液(浓度50g/L)、乌梅丸组用乌梅丸液(浓度0.515g/L)以每只3ml灌胃,连续给药15天后取脾脏组织,应用real time-PCR检测DOR的mRNA的表达,应用Western blot技术检测DOR蛋白的表达。结果与空白对照组相比,结肠炎模型组DOR的mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05);与结肠炎模型组相比,乌梅丸组、美沙拉嗪组DOR的mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05),但乌梅丸组和美沙拉嗪组DOR的mRNA和蛋白表达均无显著差异(P>0.05)。结论乌梅丸可能通过下调脾脏组织DOR的mRNA和蛋白表达,发挥治疗结肠炎的作用。

Binding properties of C-truncated delta opioid receptors

目的：研究δ阿片受体Ｃ末端在受体结合配体的亲和力及选择性中的作用．方法：在中国苍鼠卵巢细胞（ＣＨＯ细胞）中分别稳定表达Ｃ末端截短３１个氨基酸残基及野生型δ阿片受体，用受体结合分析法研究表达产物与配体的结合特征．结果：表达得到典型突变受体克隆ＣＨＯＴ及野生型受体克隆ＣＨＯＷ．ＣＨＯＴ结合［３Ｈ］ｄｉｐｒｅｎｏｒｐｈｉｎｅ（Ｄｉｐ）及［３Ｈ］［ＤＡｌａ２，ＤＬｅｕ５］ｅｎｋｅｐｈａｌｉｎ（ＤＡＤＬＥ）的Ｋｄ值与ＣＨＯＷ一致，δ选择性激动剂对二者与［３Ｈ］Ｄｉｐ的结合均有很强的抑制作用，且Ｋｉ相似；而μ及κ选择性激动剂则对二者均无抑制作用．结论：δ阿片受体的Ｃ末端与受体结合配体的亲和力及选择性无关．

δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠肺功能的保护作用

目的探讨δ阿片受体激动剂DADLE(D-Ala2-D-Leu5-enkephali)对脓毒症大鼠肺功能保护作用及其机制。方法SD大鼠72只,分为假手术组(SO组)、脓毒症组(SEP组)和DADLE给药组(DADLE组),每组24只。采用改良盲肠结扎穿孔方法(CLP)建立大鼠脓毒症模型,SO组除不结扎、刺穿盲肠外,其余操作同SEP组,DADLE组模型建立后立即按5 ml/kg体重静脉注射浓度为0.5 mg/ml的DALDE。于手术后2、6、10 h开腹取血行动脉血气分析;测定肺组织湿/干重(W/D)比值;测定肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、三磷酸腺苷(ATP)含量;检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;观察并比较各组肺组织病理改变。结果与SEP组相比,DA-DLE组PaCO2、PaO2均明显提高(P<0.05);W/D值明显降低(P<0.05);肺组织MPO、MDA含量明显降低(P<0.05),ATP含量明显升高(P<0.05);血浆TNF-α和IL-6含量明显降低(P<0.05);肺组织病理学改变明显减轻。结论δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肺功能具有一定的保护作用。

复方苦参汤对溃疡性结肠炎DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号转导通路的干预作用

目的:探讨复方苦参汤对溃疡性结肠炎大鼠DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号转导通路的干预作用.方法:SD♂大鼠84只(体质量200g±20g)随机分为空白对照组、模型组、美沙拉嗪组、复方苦参汤大剂量组、复方苦参汤中剂量组和复方苦参汤小剂量组,每组14只.除对照组外,其余5组均依据Morris等三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)建立大鼠溃疡性结肠炎模型.造模后观察记录大鼠的大便和精神状态,并于第3天随机处死2只造模大鼠,取结肠镜下观察其病理组织学变化发现:大鼠结肠糜烂、充血及溃疡,证明造模成功.建立大鼠溃疡性结肠炎模型后给予美沙拉嗪组大鼠3mL/d(0.5g/L)美沙拉嗪混悬液灌胃,复方苦参汤大、中、小剂量组分别按不同含生药浓度的复方苦参汤液3mL/d(0.67、0.34、0.17g/L)灌胃,对照组和模型组给予等量的生理盐水3mL/d灌胃,连续灌胃15d后,禁食24h,处死大鼠,取结肠组织石蜡包埋切片,HE染色比较各组结肠组织病理组织学改变,Realtime-PCR和免疫组织化学技术检测实验大鼠结肠组织的Bcl-2、β-arrestin1及δ阿片受体(delta opioid receptor,DOR)mRNA和蛋白表达表达变化.结果:各组大鼠结肠组织中Bcl-2、β-arrestin1和DOR表达有显著差异(P<0.05).与对照组比较,模型组的大鼠结肠黏膜组织Bcl-2、β-arrestin1和DOR表达明显升高(24.11±12.61vs11.88±5.90,38.90±5.30vs14.34±8.97,23.57±9.96vs9.68±3.94,均P<0.05);与模型组比较,美沙拉嗪组和复方苦参汤大、中、小剂量组的大鼠结肠黏膜组织Bcl-2、β-arrestin1、DOR表达均显著下降,但美沙拉嗪组和复方苦参汤大、中、小剂量组之间比较Bcl-2、β-arrestin1、DOR表达无显著差异.结论:在实验性溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中DOR、β-arrestin1和Bcl-2的表达升高,DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号转导通路可能参与了溃疡性结肠炎的病理过程,复方苦参汤可改善溃疡性结肠炎大鼠的结肠组织病理学改变,机制可能与调节该信号通路有关.

二氢埃托啡对大鼠脑阿片受体的结合特性

本文在大鼠脑匀浆P_2膜上,观察了二氢埃托啡(DHE)对[~3H]纳洛酮,[~3H]DPDPE和[~3H]埃托啡(预先用30nmol/L吗啡和100nmol/L DADLE阻断μ和δ受体)与阿片受体结合的抑制强度。结果表明:DHE对[~3H]纳洛酮与阿片受体结合的抑制强度远远大于对[~3H]DPDPE和[~3H]埃托啡(预先阻断μ和δ受体后)。DHE对μ,δ和κ受体的相对亲和力之比为1951:2:1,提示DHE为μ受体相对选择性配体。

CREB磷酸化蛋白水平对δ阿片受体激动剂后处理脑保护作用的影响

目的建立大鼠窒息性心肺复苏脑损伤模型,探讨环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化蛋白在δ阿片受体(DOR)激动剂BW373U86后处理对心肺复苏脑损伤的保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠随机分为四组:假手术组(Sham组)、模型组(ACA组)、激动剂组(BW组)和拮抗剂组(Nal组)。除Sham组外,均采用8min窒息法建立大鼠窒息性心肺复苏脑损伤模型。自主循环恢复(ROSC)后,ACA组和BW组分别静脉给予生理盐水1ml和BW373U861mg/kg;Nal组在静脉给予BW373U861mg/kg前,静注DOR拮抗剂Naltrindole1mg/kg。观察四组大鼠复苏成功率,ROSC后1、2、3、7d对存活大鼠进行神经功能缺损评分,观察复苏后大鼠CREB磷酸化水平和mRNA表达的变化,以及海马CA1区神经元的损伤情况。结果与Sham组比较,ACA组、BW组和Nal组海马组织中磷酸化的CREB(pCREB)蛋白相对表达明显升高(P<0.05),ROSC后各时点神经功能缺损评分均降低(P<0.05);海马CA1区存活神经元数明显减少(P<0.05)。与ACA组比较,BW组海马组织中pCREB蛋白相对表达升高、ROSC后各时点神经功能缺损评分升高(P<0.05)。与BW组比较,Nal组海马组织中pCREB蛋白相对表达降低,ROSC后各时点神经功能缺损评分降低(P<0.05),海马CA1区中ACA组和Nal组存活神经元数减少,病理损伤加重(P<0.05)。结论 CREB的磷酸化可能参与了DOR激动剂BW373U86后处理对心肺复苏脑损伤的保护作用。

大鼠脑内δ-阿片受体在累加电针抗缺血性脑损伤中的作用

目的探讨δ-阿片受体(DOR)在累加电针抗脑缺血损伤中的作用。方法大鼠随机分为7组:假手术组、单纯脑缺血组、脑缺血+电针组、脑缺血+假电针组、脑缺血+TAN-67(DOR激动剂)组、脑缺血+naltrindole(DOR拮抗剂)组、脑缺血+naltrindole+电针组。除假手术组外,其余各组均用大脑中动脉线栓法致大鼠局部脑缺血再灌注,缺血1 h再灌7 d。于缺血前30 min及再灌第2、4、5、6、7天,侧脑室注射naltrindole或TAN-67;于再灌开始及第2、4、5、6、7天,电针"水沟"和"内关"穴30 min。再灌后24 h评测神经功能缺损程度,再灌第7天后检测脑梗死体积。结果脑缺血+电针组或脑缺血+TAN-67组与单纯脑缺血组相比梗死体积减小、神经功能缺损减轻(P<0.05);脑缺血+naltrindole组与单纯脑缺血组相比梗死体积增大、神经功能缺损加剧(P<0.05);脑缺血+naltrindole+电针组与累加电针组相比,梗死体积增大、神经功能缺损评分加剧(P<0.05);假电针组与单纯脑缺血组相比梗死体积、神经功能缺损评分无显著性差异(P>0.05)。结论DOR拮抗剂naltrindole能够翻转累加电针对缺血/再灌大鼠的神经保护作用,提示其活动可能是累加电针抗脑缺血损伤中的重要机制。

电针上调δ阿片受体的表达减轻大鼠急性缺血性脑损伤

目的:探讨δ-阿片受体(delta-opioid receptor,DOR)在电针抗急性脑缺血损伤中的作用。方法:51只大鼠随机分为假手术组、假电针组、模型组、电针组、DOR拮抗剂+电针组。除假手术组外,其余各组均用大脑中动脉线栓法致大鼠局部脑缺血并行再灌注。电针于再灌注时开始,持续30min。再灌注24h后检查神经功能缺损程度、脑梗死体积。另取12只大鼠分为假手术组、模型组、电针组和DOR拮抗剂+电针组,蛋白印迹法检测脑组织中DOR蛋白的表达。结果:与模型组、假电针组比较,电针组脑梗死体积减小(P<0.05),神经功能缺损评分增加(P<0.05)。电针组60kD的DOR蛋白表达较模型组增加(P<0.05),36kD的DOR蛋白表达有增加趋势,但差异无统计学意义。DOR拮抗剂+电针组脑梗死体积、神经功能缺损评分与模型组和假电针组比较,差异无统计学意义,DOR蛋白表达和模型组比较,差异亦无统计学意义。结论:电针通过增加DOR的表达减轻缺血性脑梗死和神经功能缺损。

δ阿片受体激动剂在全脑缺血再灌注损伤中的神经保护机制

目的观察δ阿片受体激动剂DADLE对大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡细胞及磷酸化p38表达的影响,探讨DADLE在全脑缺血再灌注损伤细胞凋亡中的脑保护机制。方法采用二血管加低血压阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组(n=10),模型组(n=10),治疗组(再按DADLE静脉注射不同剂量分为3个亚组2 mg组、3 mg组、5 mg组,n=10),TUNEL法检测凋亡细胞,Western blot检测神经元磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)蛋白的表达。结果 DADLE可显著减少大鼠缺血神经元细胞凋亡,与假手术组比较,缺血后大鼠神经元磷酸化p38 MAPK表达水平增加(P<0.05),与模型组比较,治疗组各组磷酸化p38 MAPK表达水平有所降低(LSD-t值依次为0.61、1.61、1.8,P<0.05),且其作用呈剂量依赖性。结论δ阿片受体激动剂DADLE对大鼠全脑缺血再灌注损伤有神经保护作用,抑制磷酸化p38 MAPK的表达,减少细胞凋亡是其脑保护作用机制之一。

短蛸呼吸、循环、排泄和生殖系统δ受体的免疫组织化学定位

采用免疫组织化学SABC法对短蛸呼吸、循环、排泄和生殖系统中δ受体进行定位研究。试验结果表明,短蛸呼吸系统、循环系统、排泄系统、生殖系统中均有δ受体存在,充分说明δ受体在短蛸体内分布是比较广泛的。可以发现短蛸δ受体大多阳性较弱。δ受体可能参与短蛸呼吸、循环、泌尿、生殖、内分泌等功能的调节。而δ受体在短蛸不同部位分布密度的不同,可能与各器官的功能不同有关。

乌梅丸对结肠炎大鼠δ阿片受体、β-抑制蛋白1、Bcl-2表达的影响

背景:溃疡性结肠炎(UC)是慢性非特异性肠道炎症性疾病,发病机制尚未明确,肠黏膜免疫功能紊乱可能起有关键作用。目的:探讨乌梅丸对结肠炎模型大鼠δ阿片受体(DOR)、β-抑制蛋白1(β-arrestin1)、Bcl-2表达的影响。方法:56只Sprague-Dawley大鼠随机分为模型组、乌梅丸组、美沙拉秦组和空白组,模型组、乌梅丸组和美沙拉秦组采用5%TNBS和50%乙醇灌肠诱导结肠炎。造模成功后,乌梅丸组、美沙拉秦组分别予乌梅丸药液和美沙拉秦悬浊液灌胃,模型组和空白组予0.9%NaC l溶液灌胃,连续15 d,第16 d处死大鼠,取结肠标本。分别采用免疫组化法和real-time PCR检测结肠组织DOR、β-arrestin1、Bcl-2蛋白和mRNA表达。结果:乌梅丸能明显改善模型大鼠的结肠炎症损伤。模型组结肠组织DOR、β-arrestin1、Bcl-2蛋白和mRNA表达水平较空白组显著升高(P<0.05);乌梅丸组和美沙拉秦组DOR、β-arrestin1、Bcl-2蛋白和mRNA表达水平较模型组显著降低(P<0.05),但两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号转导通路参与了UC发病过程,乌梅丸可能通过干预该通路发挥对UC的治疗效应。

不同剂量δ受体拮抗剂对急性心肌梗死大鼠内皮素、心肌酶及梗死面积的影响

目的采用吗啡及不同剂量δ受体拮抗剂纳曲吲哚盐酸盐(NTI)组,观察其对急性心肌缺血-再灌注大鼠内皮素、心肌酶及心肌梗死面积的影响,以说明δ受体拮抗剂可增强吗啡对大鼠急性心肌缺血再灌注心肌的保护作用,且与剂量成正相关。方法健康SD大鼠雌雄不拘共25只,每组5只,随机分成单纯缺血再灌注组、吗啡组、吗啡+小剂量NTI组、吗啡+中剂量NTI组、吗啡+大剂量NTI组,建立大鼠心肌缺血-再灌注模型。分别于缺血前10 min及再灌注4.5 h采血及采取组织标本,采用放射免疫法测定血浆内皮素-1,免疫抑制分析法测定心肌酶,用氯化三苯基四氮唑染色测定心肌梗死面积,数码照相图像分析系统计算心肌梗死面积。结果吗啡+大剂量NTI组较其他实验组可显著降低大鼠血浆内皮素-1、心肌酶(P<0.01)及缩小心肌梗死面积(P<0.01),而吗啡组与小剂量及中剂量NTI组两两之间差异无统计学意义。结论δ受体拮抗剂可通过降低血浆内皮素、心肌酶及缩小心肌梗死面积而增强吗啡对大鼠急性心肌缺血-再灌注心肌的保护作用。

阿片受体δ-FLAG-pIRES2-EGFP表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

目的构建带FLAG标签的大鼠δ型阿片受体的pIRES2-EGFP表达质粒(δ-FLAG-pIRES2-EGFP),并实现其在CHO细胞中的表达。方法以含大鼠全长δ阿片受体基因的δ-pMD20-T载体为模板,设计引物并行PCR扩增,在δ基因C端引入FLAG标签,AT克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切连接入pIRES2-EGFP中,将获得的δ-FLAG-pIRES2-EGFP载体转染CHO细胞,应用荧光显微镜观察EGFP表达情况,并采用细胞免疫荧光和蛋白印迹法检测δ-FLAG的表达。结果测序及酶切结果表明获得了带FLAG标签的δ基因,成功构建δ-FLAG-pIRES2-EGFP表达质粒,在荧光显微镜下,转染细胞可以观察到绿色荧光。应用免疫荧光和蛋白印迹法可观察到目的基因表达。结论成功构建了δ-FLAG-pIRES2-EGFP表达质粒,并在CHO细胞中实现了高效表达。

阿片受体与临床效应

阿片激动μ受体,引起欣快、抑制快动眼睡眠、镇痛和抑制交感神经功能;阿片激动κ受体,引起犒赏抑制、心绪不良、心律失常和抑制阿片戒断症状;阿片激动δ受体,引起镇痛效应、性欲减退、减慢心率和抑制呼吸。本文就阿片受体的种类及其临床效应做一综述。