Application of Near-Infrared Spectroscopy in Determination of Schaftoside Acid in <i>Desmodium styracifolium</i>(Osb.) Merr.

The potential of Near Infrared Spectroscopy (NIRS) in quality control of Traditional Chinese Medicine has been evaluated. This study focuses on a rapid and non-destructive quantitative method for the determination of schaftoside acid content in Desmodium styracifolium by near-infrared spectroscopy. The schaftoside acid contents of 103 samples were determined by HPLC. The NIRS quantitative model of the ethanol extracts content was performed by partial least-squares (PLS) regression as linear regression with analysis values as calibration reference using 2nd derivative method as spectral preprocessing options. The model was verified by internal cross validation and external predictive validation with 22 Desmodium styracifolium samples. The correlation coefficients (r), the root-mean-square error of calibration (RMSEC), the root-mean-square error of prediction (RMSEP) and the root-mean-square error of cross-validation (RMSECV) of the calibration model for ethanol extracts content were 0.97201, 0.147, 0.162 and 0.433, respectively. The average recovery was 99.82%, and t-test showed that P > 0.5. Precision and repeatability RSD were 1.75% and 1.17%, RPD > 2.5. The data obtained from results showed that calibration model of NIRS was verified to be reliable, suggesting that the quantitative NIR models can be qualified to accurately quantify the ethanol extracts content of Desmodium styracifolium rapidly.

广金钱草不同极性萃取物体外降脂及降血糖活性的比较

该研究旨在比较广金钱草乙醇提取物及其各萃取相的体外降脂及降血糖活性。以φ=75%乙醇为溶剂,回流提取得到广金钱草醇提物,经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水依次萃取,利用比色法检测乙醇提取物及各萃取相中总黄酮、总酚含量,并根据胰脂肪酶和胆固醇酯酶的抑制率评价乙醇提取物及其各萃取相的体外降脂活性,对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率评价体外降血糖活性。研究结果显示乙酸乙酯萃取相中总黄酮和总酚含量最高,分别为154.57 mg/g和34.27 mg/g。乙醇提取物对胆固醇酯酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性最高,抑制率分别为53.24%和68.52%;正丁醇萃取相对胰脂肪酶表现出最高的抑制活性,抑制率达到77.39%。石油醚萃取相对α-淀粉酶的抑制作用最强,抑制率达到78.60%。研究表明,广金钱草乙醇提取物及其各萃取相具有显著的降脂和降血糖活性,可为其深入研究药理活性提供参考依据。

广金钱草全长转录组测序分析

目的:获得广金钱草Desmodium styracifolium(Osb.)Merr.全长转录组数据,深入挖掘其功能基因。方法:采用PacBio Sequel测序平台,对广金钱草的根、茎、叶3个部位混合样品进行全长转录组测序及分析。结果:共获得转录本140069条,N50长度为1542 nt,其中118906个(84.89%)转录本被成功注释。非冗余蛋白(NR)数据库注释中,与广金钱草最相近的物种是豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn;真核生物相邻类的聚簇(KOG)数据库注释中,比对到一般功能预测的转录本最多,有18064个;基因本体(GO)数据库注释中,86459个转录本分布于生物学过程、细胞组成和分子功能三大类45个功能组;京都基因与基因组百科全书(KEGG)注释中,参与广金钱草生物合成和其他次生代谢转录本3721个。在基因结构分析中,共得到74174个编码序列、3663个转录因子。简单序列重复(SSR)分析表明,40456个SSR中腺嘌呤和鸟嘌呤(AG)/胞嘧啶和胸腺嘧啶(CT)、AAG/CTT分别是二碱基、三碱基中优势重复类型。结论:获得了广金钱草全长转录本,为其后续的分子研究提供数据支持。

广金钱草中非黄酮类化学成分的研究

目的:对广金钱草中的化学成分进行研究。方法:采用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱、ODS柱、制备HPLC等色谱方法对广金钱草的醇提物进行分离纯化,再通过理化性质及波谱数据分析鉴定化合物结构。结果:从广金钱草中分离得到20个非黄酮类化合物,分别鉴定为:(+)-去氢催吐萝芙木醇(1)、(-)-loliolide(2)、β-谷甾醇(3)、水杨酸(4)、(+)-isololiolide(5)、6,7-二甲氧基-4-羟基-1-萘甲酸(6)、2,5-二甲氧基对苯二甲酸(7)、对羟基苯乙酮(8)、3-吲哚甲醛(9)、香草酸(10)、异香草酸(11)、对羟基苯甲酸(12)、4,5-dihydroblumenol(13)、β-胡萝卜苷(14)、7-氧代-豆甾-5,25-二烯-3-O-β-D-葡萄糖苷(15)、广金钱草内酯(16)、12-羟基茉莉酮酸(17)、麦芽酚(18)、4,5-二甲基-3-羟基-2,5-二氢-2-呋喃酮(19)、广金钱草碱(20)。结论:其中,化合物1、2、5~9、13、15、17、19为首次从该植物中分离得到。

广金钱草乙醇提取物不同极性部位抗氧化抗菌活性研究

为研究广金钱草不同极性部位抗氧化及抗菌活性。采用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇从广金钱草乙醇提取物萃取得到不同极性部位组分,并采用体外抗氧化活性和打孔法测定其抗氧化活性和抑菌活性。结果表明,醇提物中多酚含量为(7.074±0.312)mg/g,黄酮含量为(9.038±0.261)mg/g,石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水相萃取物中多酚含量依次为(11.167±0.175),(13.190±0.072),(12.776±0.037),(7.116±0.0378)mg GAE/g;黄酮含量范围为(9.038±0.261),(60.277±0.361),(80.697±0.121),(77.814±0.120),(24.823±0.150)mg CE/g。4种不同极性部位的DPPH自由基清除活性,铁离子还原力,ABTS自由基清除活性在(32.455±0.929)~(209.066±1.576)μmol TE/g,且均呈现出乙酸乙酯部位>正丁醇部位>石油醚部位>水部位的趋势。此外,广金钱草各部分部位物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌有较好的抗菌活性,也呈现出乙酸乙酯部位>正丁醇部位>石油醚部位>水相萃取部位的趋势。最小抑菌浓度结果表明,金黄色葡萄球菌和沙门氏菌对这4种极性溶剂萃取物的敏感性则较高,最不敏感的菌株是大肠杆菌。乙酸乙酯对3种细菌的MIC分别为6.25,25.00,6.25 mg/m L。广金钱草具有较好的抗氧化和抑菌活性,有望成为天然抗氧化和抑菌活性成分的主要来源。

壮药广金钱草的显微结构研究

目的:为鉴别广金钱草提供显微结构特征依据。方法:对广金钱草的茎、叶进行石蜡及冰冻制片,显微观察、拍照记录,并绘制墨线图。结果:明确了广金钱草茎、叶的显微结构特;在广金钱草的茎及叶中脉表皮发现棒槌状腺毛;在中柱鞘纤维层与韧皮部连接处有分泌细胞的存在。结论:研究结果发现了广金钱草新的显微特征,可以为完善相关质量标准提供参考。

套种广金钱草对幼龄茶园的影响

探究梯壁套种广金钱草(Desmodium styracifolium)对幼龄茶园杂草和茶树生长的影响,为“茶树+中草药”套种模式提供参考依据。通过在幼龄茶园梯壁套种广金钱草,并以清耕为对照,调查茶苗生长、杂草生长及广金钱草生长变化情况。结果表明:在套种广金钱草3个月后,茶园杂草密度和地上部鲜重较对照分别下降48.71%和34.40%,对茶园杂草株防效和盖度防效为48.71%和5.19%。在套种广金钱草15个月后,套种广金钱草的区域杂草种类数、密度、地上部鲜重和总覆盖度分别较对照下降50.00%、80.18%、86.39%和87.58%,且与对照呈显著性差异;对茶园杂草的株防效和盖度防效为80.18%和87.58%,与套种3个月相比呈显著性差异;广金钱草株高、根系长度和覆盖度达58.5 cm、32.8 cm和96.0%,茶园单位面积的广金钱草鲜重和干重达14800.4 kg/hm^(2)和4810.1 kg/hm^(2),可增收3.84×104元/hm^(2);但对茶苗植株高度和径粗无明显影响。因此,在幼龄茶园梯壁套种广金钱草,能有效防控茶园杂草,增加山地茶园护坡能力并减少水土流失,提高幼龄茶园经济收入,值得在生产上进一步推广应用。

广金钱草的化学成分研究

目的：对广金钱草Desmodium styracifolium（Osbeck）Merr．的化学成分进行研究。方法：运用多种层析分离方法进行分离纯化，通过^1H、^13CNMR等波谱技术确定化合物的结构。结果：分离并鉴定了9个化合物分别为：芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-阿拉伯苷（1）、木犀草素-6-C-葡萄糖苷（2）、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷（3）、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-葡萄糖苷（4）、芹菜素（5）、木犀草素（6）、豆甾醇-3—0-β—D-葡萄糖苷（7）、β-胡萝卜苷（8）、β-谷甾醇（9）。结论：其中化合物4～8均为首次从该植物中分离得到。

柱色谱-紫外分光光度法测定广金钱草中总黄酮的含量

目的 建立广金钱草中总黄酮的含量测定方法。方法 选用测定波长 2 72 nm,以 6 - C-葡萄糖 - 8- C-木糖洋芹素 (vicenin- 2 )为对照品 ,采用柱色谱 -紫外分光光度法对不同来源的广金钱草进行了总黄酮的含量测定。结果 vicenin- 2在 10 .8～ 2 5 .2 μg/ m L 具有良好的线性关系 ,回归方程为 Y=0 .0 30 9X+0 .0 16 (r=0 .9999) ,平均回收率为 10 0 .82 % ,RSD为 1.30 %。结论 该方法操作简便 ,结果准确 ,重复性好 。

氮磷钾配比施肥对广金钱草产量及质量的影响

测定了不同氮磷钾配施条件下广金钱草的株高、地径、种子产量、药材干重及夏佛塔苷含量。结果表明:施肥组生长状况及产量与不施肥组具有极显著差异,其中单施钾肥30g·m-2的广金钱草株高及药材干重最高,分别为174.04cm、94.50g;单施氮肥40g·m-2地径最粗,达到16.79mm;施氮、磷肥各80g·m-2,钾肥30g·m-2种子产量最高,增产率达到179.30%;施氮肥40g·m-2,磷肥80g·m-2,钾肥80g·m-2夏佛塔苷含量最高,达到0.175%。由此可知氮磷钾的合理配施能够促进广金钱草的生长并提高产量,同时影响夏佛塔苷的积累。以株高、地径、种子产量、药材干重、夏佛塔苷含量为评价标准。根据氮磷钾肥料多元二次曲线回归方程数学模型计算结果,得出氮最佳施肥量:42.4～64.5g·m-2,磷:49.5～59.0g·m-2,钾:30.0～41.0g·m-2。氮磷钾最佳施肥组合为N∶P∶K=5.4∶5.5∶3.7。

广金钱草的化学成分

目的研究广金钱草(Desmodium styracifolium (Osb.) Merr.)的化学成分.方法利用大孔吸附树脂色谱、硅胶色谱方法进行分离纯化;根据波谱解析、理化常数分析及文献对照进行结构鉴定.结果从广金钱草水提取物经过大孔吸附树脂的体积分数为60%的乙醇洗脱物中分离鉴定了6个化合物,分别为(3α,4β,5α)4,5-二氢3(1吡咯基)4,5二甲基2(3H)呋喃酮(Ⅰ)、水杨酸(Ⅱ)、香草酸(Ⅲ)、阿魏酸(Ⅳ)、3,4二甲氧基苯酚(Ⅴ)和乙二酸(Ⅵ).结论化合物Ⅰ～Ⅳ首次从广金钱草分离得到,其中化合物Ⅰ为新天然产物.

不同产地广金钱草夏佛塔苷含量比较

为研究我国不同产地广金钱草药材中夏佛塔苷含量,采用HPLC法测定了收集于广东、广西、海南、江西、云南5省31乡镇的63份野生广金钱草和69份栽培广金钱草的夏佛塔苷含量,并进行了方差分析和多重比较。结果表明:野生广金钱草夏佛塔苷含量平均为(0.28±0.02)%,栽培广金钱草平均为(0.35±0.02)%,海南、广西两地野生广金钱草夏佛塔苷含量分别比广东高32.38%和30.35%,栽培广金钱草分别高111.39%和83.44%。野生与栽培广金钱草的夏佛塔苷含量均达到2010年版《中国药典》≥0.13%的标准,不同产地广金钱草中夏佛塔苷含量差异明显,海南、广西产广金钱草具有较高的夏佛塔苷含量。

不同来源和部位的广金钱草中化学成分研究

目的:研究不同市场、不同产地、不同部位的广金钱草中3种化学成分含量,为广金钱草临床应用提供科学依据。方法:采用HPLC法,对不同药材市场、不同产地广金钱草地上部分、茎及叶中夏佛塔苷、异夏佛塔苷和异牡荆苷的含量进行测定。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸溶液(32∶68),流速为1.0 mL/min,检测波长为272 nm。结果:叶中夏佛塔苷、异夏佛塔苷和异牡荆苷的含量均高于地上部分和茎;亳州、安国、玉林、樟树、禹州5个市场地上部分及五通、中庸、宛田3个产地样品叶中夏佛塔苷含量多数均≥0.13%;异夏佛塔苷存在于地上部分、茎、叶中,异牡荆苷仅存在于叶中;玉林市场药效成分含量要优于其他市场,五通产地的药材质量要优于中庸、宛田产地。结论:广金钱草药材质量评价时,建议增加异夏佛塔苷这一指标;贮存药材时,建议减少贮存时间、保持药材完整性;叶是广金钱草3种化学成分的主要富集部位。

氮磷钾配施对广金钱草生长和夏佛塔苷含量影响的研究

研究氮、磷、钾配施对广金钱草药材生长及夏佛塔苷含量的影响,为广金钱草的合理施肥及规范化种植提供依据。试验设计采用大田随机区组法,夏佛塔苷含量测定采用HPLC法。除A03、A06、A12、A13处理外,其他各施肥处理夏佛塔苷含量均达到2010版《中国药典》不低于0.13%的最低标准。其中,施氮量12g/m2,氮:磷:钾=3:2:2(A07)、施氮量18g/m2,氮:磷:钾=3:1:1(A13)及施氮量18g/m2,氮:磷:钾=3:2:1(A14)处理的生物量积累和夏佛塔苷单株产量位于前3位。通过相关分析结果表明,夏佛塔苷含量的积累与地上部分和地下部分的生物量呈极显著正相关关系。通过对施肥量、产量、夏佛塔苷含量的综合比较发现,以施氮量12g/m2,氮:磷:钾=3:2:2(A07)处理最为经济有效,氮、磷、钾合理配施能够提高广金钱草药材的产量和质量。

广金钱草根腐病病原生物学特性研究

目的:研究温度、pH、培养基、碳源和光照对广金钱草茄病镰刀菌生长、产孢以及孢子萌发的影响。方法:设置不同处理,每处理接3个平板,每项实验重复3次。结果:茄病镰刀菌生长温度范围为12～37℃,最适为20～30℃。茄病镰刀菌在pH3.0～14.0范围内均能生长,最适pH为9.0～11.0。PDA、PSA、OMA和Czapek培养基对茄病镰刀菌生长影响不显著,但对孢子萌发率有较大影响,在Czapek培养液中孢子萌发率最高。不同碳源Czapek培养基上茄病镰刀菌生长和孢子萌发率明显不同,以蔗糖和麦芽糖为碳源的培养基菌落扩展最快,其次是葡萄糖和乳糖,果糖最差,同时以果糖、葡萄糖、麦芽糖和蔗糖为碳源的Czapek培养液孢子萌发最高,而乳糖较低。光照对茄病镰刀菌菌丝生长没有影响,但有利于产孢。

金钱草联合碳酸锂预防草酸钙肾结石机制

目的:将金钱草抑制结石形成多作用靶点和碳酸锂单作用靶点相结合,探讨预防大鼠肾结石形成及作用机制.方法:90只成年雄性Wistar大鼠随机分入九组(正常、对照、低中高剂量金钱草组、碳酸锂组和低中高剂量金钱草联合碳酸锂组).经一周适应环境,5%草酸铵饲料喂养实验组大鼠一周后,以不同浓度水煎剂灌胃(1 mL/次,2次/天).第21天留取尿液/24 h、血及肾标本.检测血、尿标本各项理化指标,观察尿结晶、肾结晶沉积和病理改变.结果:血清锂仅在碳酸锂及联合治疗组检测到,且呈逐渐增高趋势,高剂量金钱草联合治疗组为1.38±0.41mmol/L.中高剂量联合治疗组的尿柠檬酸水平较中高剂量金钱草组增高53%,较碳酸锂组增高24.3%,尿量/24 h增加1倍,尿草酸水平降低1倍.结论:中剂量金钱草联合碳酸锂组对尿柠檬酸浓度表现出显著的协同调节作用,使尿柠檬酸水平较正常大鼠升高4.15倍.

广金钱草多糖抗氧化活性研究

目的研究广金钱草多糖的抗氧化活性。方法采用分光光度法研究了广金钱草多糖提取物的体外抗氧化作用,建立1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH自由基)、超氧阴离子自由基、还原力等几种不同的体外抗氧化模型,以此来评价该多糖的抗氧化活性。结果广金钱草提取纯化后的多糖样品中纯多糖含量达63%,当DPPH自由基清除率为50%时样品的浓度(IC50)为0.115 mg·m L-1。伴随着多糖浓度的升高其清除自由基能力逐渐增强,广金钱草多糖还原力的大小与其浓度大小成正比。结论广金钱草多糖表现出较高的抗氧化性,其浓度与抗氧化活性呈现一定的量效关系。

广金钱草化学成分的研究

自豆科山蚂蝗属植物广金钱草[Desmodium styracifolium (Osbeck)Merr.]中分离得到八个化合物,其中两个为新化合物,命名为广金钱草碱(desmodimine,Ⅰ)和广金钱草内酯(desmodilactone,Ⅱ),两个已知三萜类成分为羽扇豆酮(Ⅲ)和羽扇豆醇(Ⅳ);其他还有三十三烷(Ⅴ),硬脂酸(Ⅵ),β-谷甾醇(Ⅶ)和花生酸花生醇酯(Ⅷ)。并通过光谱分析推定两个新化合物的化学结构。其他六个化合物均为首次从该植物中分离得到。

种植密度对广金钱草碳氮代谢和产量的影响

采用田间试验研究了高(160000株/hm2)、中(120000株/hm2)、低(80000株/hm2)3个密度处理对广金钱草碳氮代谢、单株产量和单位面积产量的影响。结果表明:低密度处理能显著提高广金钱草叶片叶绿素含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、硝酸还原酶活性和谷氨酸—丙酮酸转氨酶活性;单株产量以低密度处理最高,分别比高密度和中密度处理提高61.88%和10.57%;而单位面积产量则以中密度处理最高,分别比高密度和低密度处理提高9.80%和35.66%。

基肥对中药材广金钱草植株生长的影响及效益分析

为了探讨施基肥对广金钱草植株生长、产量及效益的影响。采用施用鸡粪和鸡粪加复合肥进行广金钱草种植试验。结果表明:施基肥的处理与对照相比,植株主茎平均多长6.2～21.3 cm、分枝多3.9～13.5条,药材产量每平方米增产最少为82.7 g,最多达422.4 g;以每平方米施鸡粪6 kg的处理效果最佳,植株主茎最长、分枝最多、产量最高,投入产出比最高(1∶5.28)。基肥能极大促进广金钱草植株生长和增加分枝,显著提高药材产量及效益。