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麝香多肽体外诱导成年大鼠和人骨髓间充质干细胞定向分化为神经元的研究 被引量:38
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作者 肖庆忠 李浩威 +4 位作者 温冠媚 黄少华 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1179-1182,T003,共5页
目的 :观察麝香多肽体外定向诱导成年大鼠和人骨髓间质干细胞 (Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSCs)分化为神经元的能力。方法 :采用含 10 0 - 15 0mg/L麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导成年大鼠和人BMMSCs分化为神经元 ,免疫组... 目的 :观察麝香多肽体外定向诱导成年大鼠和人骨髓间质干细胞 (Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSCs)分化为神经元的能力。方法 :采用含 10 0 - 15 0mg/L麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导成年大鼠和人BMMSCs分化为神经元 ,免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、神经巢蛋白 (nestin)的表达。结果 :成年大鼠和人BMMSCs在加入含麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导后 ,BMMSC胞体收缩 ,突起伸出 ,形似神经元 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。结论 :麝香多肽可以在体外诱导成年大鼠和人BMMSCs定向分化为神经元。 展开更多
关键词 骨髓 干细胞 神经元 麝香多肽 细胞分化
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我国不同地区二尾蛱蝶线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ的DNA序列差异 被引量:5
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作者 王戎疆 万宏 +1 位作者 雷光春 李绍文 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期775-779,共5页
通过对我国不同地区二尾蛱蝶线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ (COⅡ )DNA部分序列的比较分析 ,研究了二尾蛱蝶的遗传分化以及台湾海峡对其分化的影响。台湾和大陆二尾蛱蝶的COⅡ基因有0 75 %~ 1%的差异 ,估算其分化时间大约在 37 5~ 5 0万年... 通过对我国不同地区二尾蛱蝶线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ (COⅡ )DNA部分序列的比较分析 ,研究了二尾蛱蝶的遗传分化以及台湾海峡对其分化的影响。台湾和大陆二尾蛱蝶的COⅡ基因有0 75 %~ 1%的差异 ,估算其分化时间大约在 37 5~ 5 0万年前 ,台湾海峡可能有效地阻隔了两岸二尾蛱蝶的基因交流 ;台湾和大陆二尾蛱蝶间明显的基因差异可能与它们分属不同亚种有关 ,而大陆上不同地区的二尾蛱蝶也有较大的基因差异 ,推测大陆二尾蛱蝶可能存在 2个亚种。 展开更多
关键词 二尾蛱蝶 细胞色素氧化酶Ⅱ 遗传分化 台湾海峡
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链霉菌发育控制启动子—P_(TH4)对孢子形成的影响 被引量:2
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作者 谭华荣 贾君永 +2 位作者 聂丽平 杨海花 田宇清 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期373-380,共8页
在原核生物发育分化的分子遗传学研究中,链霉菌因其复杂的分化生命周期,无与伦比的合成次级代谢产物的能力(目前世界上所知的数千种天然抗生素的70%由链霉菌产生),使之成为原核生物乃至微生物发育与分化研究的最好模式系统[1... 在原核生物发育分化的分子遗传学研究中,链霉菌因其复杂的分化生命周期,无与伦比的合成次级代谢产物的能力(目前世界上所知的数千种天然抗生素的70%由链霉菌产生),使之成为原核生物乃至微生物发育与分化研究的最好模式系统[1],为研究基因时空表达和阐明分化调... 展开更多
关键词 启动子 PTH4 链霉菌 分化 发育控制 孢子形成
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联合应用纳米金和磷酸钙骨水泥支架促进牙髓干细胞的增殖和成骨分化 被引量:4
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作者 夏阳 陈慧敏 +3 位作者 胡姝颖 孙剑飞 郭宇 马珊珊 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期590-594,共5页
目的:磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)支架以其良好的生物相容性和骨引导活性而广泛应用于组织工程骨缺损的修复中,但是其骨引导活性有限。因此考虑联合应用纳米金(gold nanoparticles,Au NPs)以促进牙髓干细胞的增殖和成... 目的:磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)支架以其良好的生物相容性和骨引导活性而广泛应用于组织工程骨缺损的修复中,但是其骨引导活性有限。因此考虑联合应用纳米金(gold nanoparticles,Au NPs)以促进牙髓干细胞的增殖和成骨分化。方法:以CPC支架作为基底接种牙髓干细胞,在培养基中添加5μg/m L Au NPs进行干细胞培养,以常规培养基组为对照。用透射电镜检测Au NPs的形貌。以荧光显微镜检测细胞接种4 h后的黏附状态,以CCK-8检测细胞增殖情况,检测细胞碱性磷酸酶的活性,并进行茜素红染色以说明矿化物形成情况。结果:Au NPs为均匀的球形,直径20 nm左右。细胞接种后4 h,实验组和对照组的细胞黏附状态没有显著差异。CPC上Au NPs培养基中的细胞14 d时数量多于对照组(P<0.05);且Au NPs培养基中细胞的碱性磷酸酶活性显著增高(P<0.05),矿化物的形成也显著增多(P<0.05)。结论:CPC支架联合Au NPs可显著促进牙髓干细胞的增殖和成骨分化。 展开更多
关键词 纳米金 磷酸钙骨水泥 牙髓干细胞 增殖 成骨分化
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半固态培养基法培养鼠磨牙牙胚的实验观察 被引量:5
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作者 朱奇 樊明文 +2 位作者 张旗 边专 陈智 《口腔医学纵横》 CSCD 2000年第4期254-256,共3页
目的 :观察体外培养的鼠磨牙牙胚发育过程的组织学变化。方法 :用 16d胎龄的昆明小鼠下颌第一磨牙牙胚置于RPMI- 16 40半固态培养基上培养 ,常规组织学观察。结果 :体外培养的牙胚可由帽状期进入钟状期 ,出现成牙本质细胞和成釉细胞的... 目的 :观察体外培养的鼠磨牙牙胚发育过程的组织学变化。方法 :用 16d胎龄的昆明小鼠下颌第一磨牙牙胚置于RPMI- 16 40半固态培养基上培养 ,常规组织学观察。结果 :体外培养的牙胚可由帽状期进入钟状期 ,出现成牙本质细胞和成釉细胞的分化及前期牙本质的形成。结论 :半固态培养基法培养牙胚可保持其发育过程。 展开更多
关键词 牙胚 器官培养 成牙本质细胞分化
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成年和老年大鼠局灶性脑缺血后脑室下区细胞的增殖分化 被引量:1
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作者 晋光荣 刘俊华 +1 位作者 李云涛 徐汉荣 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期387-390,共4页
目的:比较老年和成年大鼠局灶性脑缺血后脑室下区(SVZ)神经干细胞的增殖与分化。方法:制作大脑中动脉梗死模型, 用免疫组化法检测SVZ的5-溴脱氧尿核苷(BrdU)、神经元核抗原(NeuN)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数的变化。结果:SVZ的B... 目的:比较老年和成年大鼠局灶性脑缺血后脑室下区(SVZ)神经干细胞的增殖与分化。方法:制作大脑中动脉梗死模型, 用免疫组化法检测SVZ的5-溴脱氧尿核苷(BrdU)、神经元核抗原(NeuN)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数的变化。结果:SVZ的BrdU阳性细胞在正常组和假手术组成年大鼠明显多于老年大鼠。实验组成年和老年大鼠均在缺血后增加,28 d时仍高于正常水平,但成年大鼠各时间点均明显高于老年大鼠。在新生细胞中部分细胞是BrdU/NeuN或BrdU/GFAP双标细胞, 但老年大鼠BrdU/NeuN双标细胞明显少于成年大鼠。结论:大鼠脑缺血激活SVZ神经干细胞增殖能力,成年大鼠明显强于老年大鼠,且新生细胞分化为神经元的比例也明显高于老年大鼠。 展开更多
关键词 成年 老年 大鼠 局灶性脑缺血 脑室下区 细胞增殖 细胞分化
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牙本质基质对牙囊细胞增殖分化影响的体外研究 被引量:1
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作者 杨禾丰 李慧 +3 位作者 孙晶晶 郭维华 田卫东 李松 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2016年第6期338-342,共5页
目的:研究牙本质基质(DM)对人牙囊细胞(h PFCs)增殖、分化的影响。方法:酶消化组织块法分离培养hDFCs,经鉴定后取第4代细胞并将其随机分为2组,分别用DM浸提液(实验组)和α-DMEM培养液(对照组)进行培养。然后分别用CCK-8法检... 目的:研究牙本质基质(DM)对人牙囊细胞(h PFCs)增殖、分化的影响。方法:酶消化组织块法分离培养hDFCs,经鉴定后取第4代细胞并将其随机分为2组,分别用DM浸提液(实验组)和α-DMEM培养液(对照组)进行培养。然后分别用CCK-8法检测各组细胞在培养后1~7 d各时间点的增殖情况;用Western-blot检测培养7 d后各组细胞中ALP、Runx2、OPN、CP-23各成骨/成牙骨质相关基因的蛋白表达水平。结果:DM浸提液对h DFCs的增殖无明显促进作用(P〉0.05),但能明显上调其ALP、Runx2、OPN、CP-23蛋白表达水平(P〈0.05)。结论:牙本质基质浸提液可诱导hDFCs向成骨/成牙骨质向分化。 展开更多
关键词 人牙囊细胞(hPDFCs) 增殖 分化 牙本质
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诱导人卵黄囊间质干细胞向成骨细胞及神经细胞定向分化
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作者 那晓东 余伟华 +9 位作者 赵自平 朱美玲 钟小英 雷俊霞 宋新民 黄春浓 张秀明 李艳 项鹏 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期636-641,共6页
目的:分离纯化及体外定向诱导人卵黄囊间质干细胞(hYS -MSC)分化为成骨细胞及神经细胞。方法:卵黄囊细胞经贴壁培养、传代纯化得到hYS -MSC ,检测其表面抗原表达、对其进行核型分析、细胞周期检测并测定AKP活性;采用地塞米松、β-甘油... 目的:分离纯化及体外定向诱导人卵黄囊间质干细胞(hYS -MSC)分化为成骨细胞及神经细胞。方法:卵黄囊细胞经贴壁培养、传代纯化得到hYS -MSC ,检测其表面抗原表达、对其进行核型分析、细胞周期检测并测定AKP活性;采用地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C作成骨诱导剂、β-巯基乙醇或复方丹参注射液作为神经诱导剂诱导hYS -MSC向成骨细胞及神经细胞定向分化。组织化学方法作成骨检测;免疫组化方法检测NSE、NF及GFAP在经神经诱导hYS -MSC中的表达。结果:hYS -MSC易于纯化,在培养过程中保持正常核型,具有较大增殖能力。hYS -MSCCD2 9、CD4 4、CD16 6及CD10 5表达阳性,CD34、CD4 5和CD86为阴性;AKP弱阳性。hYS -MSC经成骨诱导AKP强阳性,诱导两周后形成钙盐沉积形成的矿化区。hYS -MSC经神经诱导可见NSE、NF或GFAP阳性细胞,符合神经元及胶质细胞的生物学特征。结论:hYS -MSC在体外培养过程中具有较大增殖能力并保持正常核型,与成体MSC表型一致,在体外可以诱导分化为成骨细胞、神经元及胶质细胞。 展开更多
关键词 干细胞 胎儿发育 分化 成骨细胞 神经元
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再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞生物学特性的初步研究 被引量:17
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作者 岳寒 陈磊 +1 位作者 李静 赵春华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期20-24,35,共6页
目的:研究再生障碍性贫血(aplastic anemia,从)患者骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的生物学特性和初步探讨其异常和AA发生的可能关系。方法:取AA患者骨髓间充质干细胞,测定其生长曲线和倍增时间;流式细胞仪检测其细胞... 目的:研究再生障碍性贫血(aplastic anemia,从)患者骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的生物学特性和初步探讨其异常和AA发生的可能关系。方法:取AA患者骨髓间充质干细胞,测定其生长曲线和倍增时间;流式细胞仪检测其细胞周期和免疫表型;体外定向诱导其向脂肪、成骨、内皮和神经细胞分化;用real-time PCR及油红O染色法比较AA和正常对照组MSCs的成脂分化的不同。结果:AA患者和正常成人的MSCs均呈梭形贴壁生长;AA组细胞倍增时间长于对照组;CD105、CD44、CD29、CD106、FlK-1均阳性;96.51%的细胞处在G0/G1期;AA患者的MSCs保持了多向分化潜能,体外诱导形成脂滴较对照组早,诱导早期的脂蛋白脂酶表达增高。结论:再生障碍性贫血患者的骨髓间充质干细胞增殖能力较正常成人弱,骨髓间充质干细胞的易成脂性可能参与了再障的发病环节。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 骨髓 间充质干细胞 生物学特性 脂肪细胞分化
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慢病毒介导E-cadherin过表达对人脂肪干细胞成表皮分化的影响
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作者 张林霞 张爱君 +4 位作者 陶常波 李雪阳 马志兵 沈才齐 金培生 《徐州医学院学报》 CAS 2016年第4期211-215,共5页
目的探讨E-cadherin对人脂肪干细胞(hADSCs)成表皮分化的影响。方法利用胶原酶消化法从成人脂肪组织中分离培养hADSCs。携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒载体(Lv-EGFP)介导E-cadherin基因以10、25、50和100的感染复数(... 目的探讨E-cadherin对人脂肪干细胞(hADSCs)成表皮分化的影响。方法利用胶原酶消化法从成人脂肪组织中分离培养hADSCs。携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒载体(Lv-EGFP)介导E-cadherin基因以10、25、50和100的感染复数(MOI)作用72h转染hADSCs,荧光显微镜下观察荧光强度并统计转染效率。Lv-EGFP-E-cadherin过表达组慢病毒和Lv-EGFP对照组慢病毒分别转染hADSCs,未转染的hAD-SCs为空白组;4天后RT-PCR检测E-cadheimmRNA的表达。将各组hADSCs经成表皮诱导14天后,RT-PCR检测表皮细胞标志物CK18、ZO-1mRNA的表达情况。结果3代以后hADSCs呈均一长梭形,增殖活跃。MOI=10、25、50、100时,EGFP阳性率分别为51.9%±2.68%、95.1%±3.82%、95.6%±2.56%、96.9%±2.25%,选择MOI=25为最佳转染滴度进行后续实验。与对照组及空白组相比,转染Lv-EGFP-E-cadherin过表达慢病毒可显著增强hADSCs中E-cadherinmRNA的表达(P〈0.05),E-cadherin过表达后可显著增高细胞中CK18、ZO-1mRNA的表达(P〈0.05),促进成表皮分化。结论E-cadherin过表达可在一定程度上促进hADSCs向表皮细胞诱导分化。 展开更多
关键词 E-CADHERIN 脂肪干细胞 表皮分化 慢病毒 创面修复
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温热病高热证治浅析 被引量:4
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作者 余甘霖 《中国中医急症》 2005年第6期548-549,559,共3页
高热为温热病中常见急症,其病因多为邪毒合侵,病机重点是热盛伤阴,病在气分阶段多邪实与阴伤并重,治疗常用解毒、清气、救阴、保津诸法。应注意详查病机、把握常变、权衡主次先后以确定治疗重点。
关键词 温热病 高热 证治规律
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我国丁苯橡胶产业链供需分析 被引量:1
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作者 谢引莉 《当代石油石化》 CAS 2019年第11期17-23,36,共8页
近年来,国内丁苯橡胶市场竞争激烈,去产能明显。整个丁苯橡胶产业链都处于供过于求的局面,行业整体开工率在六到七成。市场长期低迷,丁苯橡胶和下游轮胎、胶管、胶带、制鞋行业经过了近两三年来的优胜劣汰和产业升级,在产能扩张上已经... 近年来,国内丁苯橡胶市场竞争激烈,去产能明显。整个丁苯橡胶产业链都处于供过于求的局面,行业整体开工率在六到七成。市场长期低迷,丁苯橡胶和下游轮胎、胶管、胶带、制鞋行业经过了近两三年来的优胜劣汰和产业升级,在产能扩张上已经不再盲目,现存的各个企业已经在惨烈的市场竞争中找到了自身发展的价值。丁苯橡胶的需求格局随着环境的变化在变化,丁苯橡胶生产企业在产品差异化、顶替进口和扩大出口上寻找着各具特色的生存之道。 展开更多
关键词 丁苯橡胶 产业链 需求格局 产品差异化
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Effects of electro-acupuncture on embryo implanted potential of patients with infertility of different syndromes
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作者 孔风云 张琪瑶 +4 位作者 管群 菅福琴 孙伟 王越 JIAO Yue 《World Journal of Acupuncture-Moxibustion》 2012年第4期32-36,共5页
Objective To explore the impacts of electro-acupuncture on embryo implanted potential and its molecular mechanism in patients with infertility of different syndromes. Methods Among infertile patients treated with in v... Objective To explore the impacts of electro-acupuncture on embryo implanted potential and its molecular mechanism in patients with infertility of different syndromes. Methods Among infertile patients treated with in vitro fertilization and embryo transplantation (IVF-ET) combined with electro-acupuncture, 82 cases of kidney deficiency syndrome (group A), 74 cases of liver qi stagnation syndrome (group B) and 54 cases of phlegm dampness syndrome (group C) were selected. Patients in three groups all received a long program of ovarian hyperstimulation. Additionally, electro-acupuncture was applied before controlled ovarian hyperstimulation (COH) and in the process of ovarian hyperstimulation. Contents of human leukocyte antigen G (HLA-G) in the serum were determined in three groups respectively on the 2nd day of menstruation (M2) and the day of human Chorionic Gonadotropin (hCG) injection. Content of HLA-G in the culture solution of three groups was examined separately on the day of embryo transplantation. The fertilization rate, implantation rate and clinical pregnancy rate were observed for patients in three groups. Results Contents of HLA-G in the serum on the day of hCG injection and in the culture solution on the day of embryo transplantation in group A and B were significantly higher than those in group C (all P0.05). However, there was no significant difference with contents of HLA-G in serum on M2 day among three groups. The high quality embryo rate in either group A (73.6%, 352/478) or group B (70.6%, 379/537) was significantly higher than that in group C (54.2%, 208/384) with significantly statistical difference (all P0.01). But there were no significant differences in clinical pregnancy rate, fertilization rate and cleavage rate among three groups. Conclusion Electro-acupuncture combined could increase contents of HLA-G in the body and the level of HLA-G secreted from embryos of patients in the process of IVF-ET. Eventually, the pregnancy outcome and the pregnancy rate are improved. It showed better clinical effects of electro-acupuncture for patients with kidney deficiency and liver qi stagnation syndromes than those of phlegm dampness syndome. 展开更多
关键词 INFERTILITY female ELECTRO-ACUPUNCTURE in vitro fertilization(IVF) embryo transplantation (ET) syndrome differentiatio
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严重烧伤后局部肠黏膜免疫组织细胞功能的变化 被引量:6
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作者 白晓东 刘贤华 肖光夏 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期741-743,共3页
目的 对烧伤后肠黏膜免疫组织淋巴细胞增殖、分化进行观察。 方法 无特殊病原菌 (SPF)小鼠分为正常对照组、给菌对照组及给菌后烧伤组 ,后两组动物经口给入白色念珠菌。给菌对照组于给菌后 14d处死取材 ,给菌后烧伤组于 14d致 2 0 %T... 目的 对烧伤后肠黏膜免疫组织淋巴细胞增殖、分化进行观察。 方法 无特殊病原菌 (SPF)小鼠分为正常对照组、给菌对照组及给菌后烧伤组 ,后两组动物经口给入白色念珠菌。给菌对照组于给菌后 14d处死取材 ,给菌后烧伤组于 14d致 2 0 %TBSAⅢ度烧伤 ,伤后 1,2 ,3d处死取材。观察项目 :(1)淋巴细胞体内增殖情况 ;(2 )肠固有层IgA型浆细胞数量变化 ;(3)肠黏液中特异抗白色念珠菌IgA水平变化 ;(4 )白色念珠菌黏附情况。 结果  (1)给菌组淋巴细胞增殖分化活跃 ,烧伤后增殖下降 ,IgA型浆细胞数减少 ,以伤后 2d为最低。 (2 )伤后肠黏液中特异抗白色念珠菌IgA水平下降 ;(3)伤后白色念珠菌黏附增加。 结论 烧伤造成淋巴细胞增殖下降 ,IgA型浆细胞数量下降 。 展开更多
关键词 烧伤 黏膜免疫 增殖 分化 白色念珠菌
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后腹腔镜手术对患者机体免疫功能影响的研究 被引量:2
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作者 裴琼 阎成全 +4 位作者 张慧民 高彬 才胜勇 高希民 陈沛林 《中国临床研究》 CAS 2015年第8期1014-1016,共3页
目的探讨后腹腔镜手术对泌尿系疾病患者免疫功能的影响。方法选择2011年1月至2013年12月期间收治的需手术治疗的泌尿系疾病患者84例,按随机数字表法将其分为观察组与对照组,各42例。观察组给予后腹腔镜手术治疗,对照组给予常规手术治疗... 目的探讨后腹腔镜手术对泌尿系疾病患者免疫功能的影响。方法选择2011年1月至2013年12月期间收治的需手术治疗的泌尿系疾病患者84例,按随机数字表法将其分为观察组与对照组,各42例。观察组给予后腹腔镜手术治疗,对照组给予常规手术治疗,分别检测两组患者术前、术后1、24、72 h的血清白细胞介素(IL)-6水平及T淋巴细胞亚群CD3、CD4百分率,并进行对比分析。结果 (1)IL-6水平:观察组仅术后1 h显著高于术前(P<0.05),对照组术后1、24、72 h既显著高于术前(P均<0.05),也显著高于观察组(P均<0.05)。(2)CD3、CD4百分率:两组患者术后1 h均较术前显著降低(P均<0.05);其后均逐渐回升,至术后72 h,观察组回升至术前水平,对照组仍低于术前1 d,术后72 h观察组显著高于对照组(P均<0.05)。结论后腹腔镜手术对机体免疫功能的影响较小,较大程度维护了机体神经及内分泌系统的稳定,有利于机体的恢复。 展开更多
关键词 后腹腔镜手术 免疫功能 白细胞介素-6 白细胞分化抗原3 白细胞分化抗原4 泌尿系统疾病
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蒙古羊脂肪来源间充质干细胞的分离培养及体外分化诱导 被引量:1
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作者 高晋芳 刘宗正 +3 位作者 韦林盖 周欢敏 张焱如 曹俊伟 《山东大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期20-24,共5页
建立蒙古羊脂肪间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)体外分离培养方法,并对其生物学特性和多向分化潜能进行鉴定。利用I型胶原酶将蒙古羊脂肪组织消化后,离心得到单核细胞,并进行传代培养,测定其倍增时间。采... 建立蒙古羊脂肪间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)体外分离培养方法,并对其生物学特性和多向分化潜能进行鉴定。利用I型胶原酶将蒙古羊脂肪组织消化后,离心得到单核细胞,并进行传代培养,测定其倍增时间。采用甲苯胺蓝染色和PAS染色法以及RT-PCR法,分别从组织学水平和基因水平对第3代蒙古羊ADSCs向成神经和成心肌的诱导分化情况进行鉴定。结果显示,分离得到的脂肪间充质干细胞大小较为均匀,呈梭形或星形的成纤维细胞样;传代接种后第4天细胞进入指数生长期,第8天进入平台期,前10代ADSCs的倍增时间平均为34.1 h;经成神经诱导后,细胞呈胶质细胞状,RT-PCR检测ENO2和GFAP基因表达呈阳性;心肌诱导后,细胞体积增大,多呈长梭形,平行排列,诱导15 d后部分细胞可见类肌管样结构,PAS染色可见明显的糖原沉积,RT-PCR检测NKX2.5和GATA-4基因表达呈阳性。表明获得的蒙古羊ADSCs具有多向分化潜能。 展开更多
关键词 蒙古羊 脂肪间充质干细胞 脂肪组织 诱导分化
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人非ATP酶依赖性调节颗粒13对人牙周膜细胞的调节作用
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作者 赵曦 巢永烈 +1 位作者 陈丕修 卿列华 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2014年第2期13-18,共6页
目的探讨人非ATP酶依赖性调节颗粒13(hRpn13)通过泛素-蛋白酶体通路(UPP)途径对人牙周膜细胞(PDLC)的作用,从而揭示其对PDLC增殖、分化和功能的调节作用。方法通过转染敲除来改变PDLC中hRpn13的表达后,用MTT法观测细胞形态,4′,6-二脒基... 目的探讨人非ATP酶依赖性调节颗粒13(hRpn13)通过泛素-蛋白酶体通路(UPP)途径对人牙周膜细胞(PDLC)的作用,从而揭示其对PDLC增殖、分化和功能的调节作用。方法通过转染敲除来改变PDLC中hRpn13的表达后,用MTT法观测细胞形态,4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)来检测细胞增殖情况,通过检测碱性磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原纤维的分泌情况来检测细胞成骨分化情况,最后通过检测NF-κB受体活化子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、泛素化蛋白的改变来研究hRpn13对PDLC功能的调节作用及其可能机制。结果 hRpn13对成纤维细胞的增殖和ALP的活性,Ⅰ型胶原蛋白以及RANKL、OPG的表达起到了负性调节作用,同时hRpn13使泛素化蛋白聚集减少。结论 hRpn13可以通过影响UPP通路来调节成纤维细胞的增殖、分化和功能。 展开更多
关键词 人非ATP酶依赖性调节颗粒13 泛素-蛋白酶体通路 牙周膜细胞 成骨分化
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