A Novel Synthesis of Difloxacin Hydrochloride

Difloxacin hydrochloride, one of aryl-fluoro quinolone antibiotic, has been synthesized in seven steps from 2, 4-dichloro-5-fluoroacetophenone via oxalylation, ethoxymethylenation, amination, cyclization, hydrolysis, decarbonylation and N-methylpiperazination. Additional four new intermediates are produced.

二氟沙星在鸡体内的药物代谢动力学及生物利用度研究

将 30只艾维茵肉鸡随机分为 3组 ,进行了静脉注射、肌肉注射及内服二氟沙星的药物代谢动力学研究。血浆样品经甲醇沉淀血浆蛋白 ,高速离心 ,用反相高效液相色谱法测定鸡血浆中二氟沙星的浓度 ,MCPKP计算机程序处理血浆药物浓度 时间数据。结果 ,健康鸡静脉注射给药的药时数据适合二室开放模型 ,主要药物代谢动力学参数为 :t1/ 2α=0 .6 9h± 0 .4 3h ;t1/ 2 β=6 .11h± 1.5 0h ;V1=1.70L/kg±0 .33L/kg ;Vd(area) =3.10L/kg± 0 .6 7L/kg ;ClB=0 .37L/ (kg·h)±0 .10L/ (kg·h) ;AUC =2 9.16 μg/ (mL·h)± 8.0 4 μg/ (mL·h)。健康鸡肌肉注射及内服给药的药时数据适合一级吸收一室模型 ,前者的主要药物代谢动力学参数为 :t1/ 2Ka=0 .17h± 0 .12h ,t1/ 2Ke=5 .6 4h± 0 .74h ,tmax =0 .86h± 0 .4 0h ,Cmax =2 .5 1μg/mL± 0 .36 μg/mL ,AUC =2 2 .6 2μg/ (mL·h) ± 3.2 8μg/ (mL·h) ,F =77.0 %± 11.8% ;后者的药物代谢动力学参数为 :t1/ 2Ka=1.4 6h± 1.0 0h ,t1/ 2Ke=8.2 0h± 3.12h ,tmax=4 .34h± 2 .4 0h ,Cmax=1.0 0 μg/mL± 0 .2 1μg/mL ,AUC =15 .82 μg/ (mL·h) ± 3.6 7μg/ (mL·h) ,F =5 4.2 %± 12 .6 %。二氟沙星在健康鸡体内的主要药物代谢动力学特征为

二氟沙星在猪体内的药物动力学及生物利用度研究

7头健康杂种猪 ,按照随机拉丁方设计 ,进行静注、肌注及内服二氟沙星 (5mg·kg-1)的药物动力学研究。血浆样品经甲醇沉淀血浆蛋白 ,高速离心 ,用反相高效液相色谱法测定猪血浆中二氟沙星的浓度 ,MCPKP计算机程序处理血浆药物浓度 时间数据。健康猪静注给药的药时数据适合二室开放模型 ,主要药物动力学参数为 :t1/ 2α1.5 8± 0 .6 4h ;t1/ 2 β17.14± 4.14h ;V11.34± 0 .16L·kg-1;Vd(area) 4.91± 1.88L·kg-1;ClB0 .2 0± 0 .0 6L·kg-1·h-1;AUC2 7.2 4± 8.12mg·L-1·h。健康猪肌注、内服给药的药时数据均适合一级吸收二室模型 ,主要药物动力学参数为 :t1/ 2ka0 .47± 0 .2 2和 0 .5 4± 0 .44h ;t1/ 2 β2 5 .79± 8.10和 16 .6 7± 4.0 4h ;tmax1.2 9± 0 .2 6h和 1.41± 0 .88h ;Cmax1.77±0 .6 6和 2 .2 9± 0 .85mg·L-1;AUC 2 4.98± 9.2 9和 2 6 .5 9± 5 .30mg·L-1·h-1;F (95 .3± 2 8.9) %和 (10 5 .7± 37.1) %。二氟沙星在健康猪体内的主要药物动力学特征为 :吸收迅速 ,达峰时间短 ,表观分布容积大 ,消除半衰期长 ;肌注、内服给药吸收完全 ;生物利用度高。

双氟沙星及其代谢产物在中华绒螯蟹体内药物代谢及残留消除规律

采用高效液相色谱法,在口灌给药途径下,研究双氟沙星及其代谢产物沙拉沙星在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)体内的药代动力学。中华绒螯蟹以20 mg/kg剂量给药双氟沙星后,其血淋巴、肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢中药物-时间曲线关系符合开放性二室模型。双氟沙星在中华绒螯蟹体内吸收迅速,在不同组织中分布较广,达峰时间短。血淋巴、肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢中的Vd分别为3.170 L/kg、2.122 L/kg、1.045 L/kg、1.051 L/kg和0.203 L/kg;双氟沙星在中华绒螯蟹体内消除缓慢,在血淋巴、肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢中的消除半衰期t1/2β分别为96.316 h、88.228 h、137.524 h、67.021 h和124.679 h;总体清除率CLs分别为0.783 L/h.kg、0.040 L/h.kg、0.013 L/h.kg、0.011 L/h.kg和0.008 L/h.kg。代谢产物沙拉沙星在中华绒螯蟹血淋巴、肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢中药物水平的变化趋势与双氟沙星相似,都呈现多峰现象。但肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢4种组织中代谢产物沙拉沙星出现药峰的时候恰好是这4种组织中双氟沙星下降缓慢时期。鉴于双氟沙星及其代谢产物沙拉沙星在中华绒螯蟹体内消除缓慢,而可食组织中脂肪含量较高,因此若规定可食组织中双氟沙星的最大残留限量以脂肪中最大残留限量(100μg/kg)为标准,沙拉沙星的最大残留限量为30μg/kg,则建议双氟沙星在中华绒螯蟹中的休药期大于24d,才能保障食用者的安全。

盐酸二氟沙星的合成

以2,4-二氯氟苯为原料,经由乙酰化、β-酮酸酯化、乙氧亚甲基化、胺化、环合、水解、与 N-甲基哌嗪缩合、成盐等8步反应,制得盐酸二氟沙星,总收率31.6%。

二氟沙星对实验性感染猪支原体性肺炎及链球菌病的药效学研究

以试管两倍稀释法测得二氟沙星对猪肺炎支原体（ Ｆ１６ 株）和兰氏 Ｃ 群类马链球菌（ Ｃ５５ １ ２０ ）的最小抑菌浓度分别是０１６ｍ ｇ／ Ｌ及 １６ｍ ｇ／ Ｌ。肌注给药对猪支原体性肺炎及链球菌病的实验性治疗结果表明，低、中、高剂量二氟沙星组（２５、５、１０ｍ ｇ／ｋｇ）及蒽诺沙星组（２５ｍ ｇ／ｋｇ）用药 ５ 天（每隔 １２ 小时给药一次）对猪支原体性肺炎的治愈率分别是 ８０％ 、９０％ 、１００％ 及９０％ ；而支原体感染对照组的自愈率为１０％ 。低、中、高剂量二氟沙星组及蒽诺沙星组（２５ｍ ｇ／ｋｇ）用药 ４ 天（每隔 １２ 小时给药一次）对猪链球菌病的治愈率分别是 ５０％ 、８０％ 、８０％ 及 ８０％ ，而链球菌感染对照组的死亡率为 ５０％ 。

异育银鲫体内盐酸双氟沙星血浆蛋白结合率的变化与其药代动力学研究

为了研究盐酸双氟沙星(Difloxacin,DIF)在异育银鲫体内血浆蛋白结合率的变化及其与药代动力学之间的关系,实验采用超滤法测定了DIF在异育银鲫体内血浆蛋白结合率,运用HPLC测定其对应时间点药物浓度,并分析了血浆蛋白结合率变化对DIF体内处置的影响。实验以感染嗜水气单胞菌的异育银鲫为感染组,健康异育银鲫为对照组。结果显示:感染组各时间点DIF血浆蛋白结合率均高于对照组,感染组与对照组DIF血浆蛋白结合率与总药物浓度呈对数关系:y=9.01ln x+74.34和y=4.81ln x+65.15,DIF血浆蛋白结合率与游离药物浓度的对数关系式分别为:y=6.36ln x+64.91和y=4.36ln x+60.63;感染组和对照组血浆药时曲线均可使用开放性二室模型描述;感染组DIF的吸收和消除慢于对照组,其表观分布容积和曲线下面积大于对照组。结果显示异育银鲫体内感染嗜水气单胞菌促使DIF血浆蛋白结合率升高;血浆蛋白结合率升高导致药物以结合药物的形式储存于血液中可能是导致药物组织分布受限、消除缓慢、长时间滞留于血液原因之一。

二氟沙星对实验性感染猪链球菌病及支原体性肺炎的药效学研究

本文报道国内新近研制的畜禽专用氟喹诺酮类抗菌药物———二氟沙星对实验性感染猪链球菌病及支原体性肺炎的药效学研究。以试管两倍稀释法测得二氟沙星对兰氏C群类马链球菌(C5512 0 )和猪肺炎支原体 (F16 株 )的最小抑菌浓度 (MIC)分别是 1 6级及 0 16mg/L。肌注给药对猪链球菌病和支原体性肺炎的实验性治疗结果表明 ,低、中、高剂量二氟沙星组 (2 5、5、10mg/kg)及恩诺沙星组 (2 5mg/kg)用药 5d(每隔 12h给药 1次 )对猪链球菌病的治愈率分别是 4 0 %、70 %、80 %及 70 % ,而链球菌感染对照组的死亡率为 70 % ;低、中、高剂量二氟沙星组及恩诺沙星组(2 5mg/kg)用药 5d(每隔 12h给药 1次 )对猪支原体性肺炎的治愈率分别是 80 %、90 %、90 %及80 % ;而支原体感染对照组的自愈率为 10 %。

高效液相色谱-质谱联用法测定豆芽中恩诺沙星含量

采用高效液相色谱-质谱联用法测定豆芽中恩诺沙星的含量。样品经0.1mol/L NaOH溶液提取后,经WatersOasis MAX阴离子交换柱净化,以双氟沙星为内标,采用反相高效液相色谱分离,以乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,通过带有电喷雾离子化源的串联质谱仪,应用正离子扫描,在多反应监测模式下进行定性与定量分析。本法线性范围为1～100μg/kg,平均回收率为91.6%～94.0%,相对标准偏差不大于6.6%,方法的检出限为0.3μg/kg。

三种兽用氟喹诺酮类药物对人工诱发鸡霍乱的疗效比较

采用试管肉汤两倍稀释法 ,测得恩诺沙星、单诺沙星及二氟沙星对鸡多杀性巴氏杆菌的最小抑菌质量浓度分别是 0 .0 5、0 .2及 0 .4mg/L 按 5mg/kg的剂量 ,分别给人工诱发霍乱病鸡内服恩诺沙星、单诺沙星及二氟沙星 ,每1 2h给药 1次 ,连续 3d 这些药物对鸡霍乱的治愈率分别为 96 .7%、83.3%及 83.3% ,而感染对照鸡的死亡率为1 0 0 %

双氟沙星对异育银鲫血脑屏障渗透性及消除规律

以异育银鲫(Carassais auratus gibebio)为研究对象,采用组织匀浆法和高效液相色谱法,研究了双氟沙星(Difloxacin,DIF)通过异育银鲫血脑屏障情况,并比较分析了大脑和外周组织中DIF消除差异。结果显示,根据DIF 96h半数致死剂量(2840 mg/kg b.W)给药后,第96h时异育银鲫大脑组织匀浆中DIF的含量为(10.49±0.35)μg/g;同时在临床推荐用药剂量(20 mg/kg)给药后的15个时间点(0?960h)上均能从大脑组织匀浆中检测出DIF。上述结果表明DIF能渗透通过血脑屏障而进入异育银鲫大脑组织。另外,在大脑和外周组织消除过程上,以大脑组织中的DIF消除过程最为平缓(按照20 mg/kg给药)。到试验第960h,大脑组织中DIF含量最高,为(0.392±0.007)μg/g,且大脑中的消除半衰期最长,为1157.713h。因此,异育银鲫大脑组织可作为DIF药物残留分析的靶组织。另根据欧盟关于食品中DIF最大残留限量(MRL)之规定,实验条件下DIF休药期至少为25d。结果为研究鱼类血脑屏障作用,DIF神经毒性及其在水产养殖上的临床应用提供了参考。

二氟沙星对3种海洋弧菌的抗菌后效应研究

采用试管二倍稀释法测定二氟沙星对鳗弧菌W-1、副溶血弧菌1614和溶藻弧菌1833的最小抑菌浓度(MIC);采用菌落计数法测定二氟沙星对鳗弧菌、副溶血弧菌和溶藻弧菌的抗菌后效应(PAE)。结果显示,二氟沙星在1×MIC、2×MIC和4×MIC浓度时,对鳗弧菌W-1、副溶血弧菌1614和溶藻弧菌1833的PAE分别为:0·64、1·09和2·16h;0·74、1·73和2·64;0·54、1·08和2·05h。二氟沙星对这3种弧菌具有明显的抗菌后效应,并且随着二氟沙星浓度的增加,抗菌后效应的时间也明显延长。

二氟沙星肺靶向微球制剂的制备

以可生物降解的明胶为载体,液体石蜡为油相,Span-80为乳化剂,选择正交设计优化空白明胶微球生产工艺,并考察其理化性质,采用乳化交联法制备二氟沙星肺靶向明胶微球。采用紫外可见分光光度计法,测定微球中二氟沙星的含量。结果表明,优选所制的二氟沙星肺靶向明胶微球形态圆整,表面光滑,平均粒径为8.33μm,粒径分布在5.0～25.0μm的微球达到95.71%,二氟沙星明胶微球包封率为62.43%,载药量为13.71%。采用动态分析法研究体外释药特性,二氟沙星明胶微球在12h处药物释放量达到65%,24h内药物释放量达到71%。制备工艺稳定可行,所得二氟沙星明胶微球具有良好的缓释效果。

二氟沙星单克隆抗体的研制及其免疫学特性的鉴定

采用改进的碳二亚胺法,将半抗原二氟沙星(DIF)与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(O-VA)偶联,制备得到二氟沙星全抗原DIF-BSA和DIF-OVA。采用紫外(UV),凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-DIF免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备二氟沙星单克隆抗体(DIF mAb),并对其效价、亲和力和特异性等进行鉴定。结果表明,BSA与DIF偶联成功,分子结合比为1:4.7,筛选出1H10、2F12、4D8共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:5.12×102、1:3.2×101、1:2.56×102,腹水效价分别为1:2.56×105、1:1.28×105、1:6.4×104。同种亚型分别为IgG1、IgG1、IgG2a,亲和常数(Ka)分别为2.94×1010L/mol、1.72×1010L/mol和1.35×1010L/mol。亲和力最高的1H10对DIF的IC50为2.2ng/ml,单抗与其他氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应。通过试验获得高效价、敏感、特异的mAb,适用于动物性食品中DIF的残留检测的免疫学试验。

双氟沙星在异育银鲫体内药代动力学研究

采用反相高效液相色谱法(RP-HLPC),研究了(25±1)℃水温条件下单次经口灌注20mg.kg-1双氟沙星(DIF)后,DIF在异育银鲫体内的药代动力学特征及其代谢产物沙拉沙星(SAR)的残留规律。结果表明:DIF在血液及各组织中的药时数据均符合二室开放模型。血液和各组织中均出现重吸收峰现象,肝脏组织达峰浓度最大。其中DIF在血液、肝脏、肾脏、肌肉中吸收半衰期(T1/2α)分别为0.144、0.274、0.137和8.636h;消除半衰期(T1/2β)分别为18.322、26.013、33.066和52.504h;总体清除率(CL)分别为0.082、0.068、0.077和0.058L.h.kg-2;药时曲线下面积(AUC)分别为243.244μg.mL.h-2和294.857、258.587、344.630μg.g.h-2;表观分布容积(Vd)分别为0.676、0.220、0.226和1.258L.kg-1,血浆蛋白结合率为52.39%～64.10%。组织中均可检测到DIF的代谢产物SAR,其中血液中检测到的时间迟于其它组织;根据肌肉组织的DIF和SAR最大残留限量为100和30μg.kg-1,建议DIF休药期为18d以上。

二氟沙星在中性水溶液中的光化学性质(英文)

对二氟沙星在中性水溶液中的光化学性质进行了研究.在pH值为7.17的水溶液中二氟沙星的紫外吸收峰位于273 nm(摩尔消光系数ε=33000 dm3·mol-1·cm-1),323 nm(ε=15500 dm3·mol-1·cm-1),335 nm(ε=15500 dm3·mol-1·cm-1)处.荧光吸收和发射光谱均显示二氟沙星具有pH效应,其pKa(电离平衡常数)测定分别为5.9和9.8.二氟沙星的荧光量子产额较低,在pH=3.00时达到最大值,为0.06.同时对二氟沙星在中性水溶液中的激光光解和脉冲辐解进行详细研究.激光光解研究发现在水溶液中二氟沙星的三重激发态位于620nm,其摩尔消光系数为7900 dm3·mol-1·cm-1.通过能量转移的方法得到其三重激发态的能量为263.5 kJ·mol-1,三重激发态的量子产额为0.21.在激光激发下,二氟沙星进行单光子电离其量子产额为0.02.脉冲辐解研究表明二氟沙星可以与水合电子(e-aq)及羟基自由基(·OH)快速反应,其二级反应动力学常数分别为1.72×1010和1.0×1010dm3·mol-1·s-1.本文对二氟沙星光化学性质的研究有助于确定其光敏毒性的产生机理.

国产双氟沙星的体内抗菌作用研究

对九株临床常见菌做了双氟沙星(Difloxacin)的小鼠体内保护试验。结果显示,口服双氟沙星对大肠杆菌、绿脓杆菌、肺炎克雷伯氏杆菌、肺炎链球菌和金葡球菌感染小鼠的保护作用明显优于氟哌酸(Norfloxacin)。口服双氟沙星对肺炎链球菌感染小鼠的保护作用比氟哌酸强6～20倍,对金葡球菌感染小鼠的保护作用比氟哌酸强13倍。用双氟沙星治疗肺炎克雷伯氏杆菌感染小鼠的半数保护剂量作用有效于氟哌酸(双氟沙星ED_(50)1.08mg/kg,氟哌酸ED_(50)4.39mg/kg),双氟沙星的保护作用是氟哌酸的4倍。双氟沙星对大肠杆菌引起的感染小鼠保护作用比氟哌酸保护作用至少强2～3倍。 研究结果表明,双氟沙星具有良好的体内抗菌作用。

二氟沙星残留检测的Ci-ELISA方法建立

以合成的二氟沙星（DIF）人工抗原为基础，制备出了高效价抗DIF血清（1：2^9×10^4），并建立了DIF间接竞争酶联免疫吸附测定法（Ci—ELISA法）。标准曲线的线性回归方程为y=-0．223x-I-0．9631（r=0．9929），中值（I50）=119．21ng／ml，最低检测（LOD）=1．14ng／ml，线性范围为1．14～10000ng／ml，方法的平均批内变异系数（CV）为4．83％，平均批间CV为10．69％。DIF以浓度15～10000ng／ml在鸡肉中添加时，回收率为81．24％～90．64％，变异系数为8．18％～11．75％。

高效液相色谱荧光检测法测定牛奶中3种氟喹诺酮残留研究

目的：建立牛奶中环丙沙星、双氟沙星和沙拉沙星3种氟喹诺酮残留的高效液相色谱荧光检测方法。方法：样品经磷酸盐缓冲液稀释、提取后,用Waters Oasis HLB固相萃取小柱进行浓缩、净化,Extend-C18柱（250 mm×4.6 mm×5μm）分离;流速：0.8 ml/min;柱温：35℃;流动相：甲醇＋乙腈＋0.2%甲酸（15＋15＋70）;荧光检测波长：λex为275 nm;λem为445 nm。结果：在0.1-5.0 mg/L范围内三种被测化合物均呈良好线性关系,方法回收率在90.0%-102.0%之间,相对标准偏差为4.1%-10.0%,最低检出限环丙沙星、双氟沙星和沙拉沙星分别为0.02、0.015和0.02 mg/L。结论：所建方法简便、灵敏、重现性好、干扰少、特异性好,能满足牛奶中三种目标化合物的检测要求。

蜂蜜中4种氟喹诺酮残留的高效液相色谱-质谱测定

目的：建立蜂蜜中氧氟沙星、恩诺沙星、双氟沙星、沙拉沙星4种氟喹诺酮残留的高效液相色谱-质谱联用检测方法。方法：样品经磷酸盐缓冲液稀释、溶解后，用Waters Oasis MAX小柱进行净化、提取，Cloversil—C18柱（150mm×4．6mm×5μm）分离；流速：0．5ml／min；柱温：30℃；流动相：乙腈／0．05％三氟乙酸（25／75，v／v）；通过电喷雾电离离子化在选择离子监测（SIM）模式下测定，氧氟沙星、恩诺沙星、双氟沙星、沙拉沙星定量分析离子m／z：362．0[M＋H]^＋、360．1[M＋H]^＋、400．0[M＋H]^＋和386．0[M＋H]^＋，外标法定量。结果：在0．50—100．0μg／kg范围内4种目标化合物均呈良好的线性关系，平均回收率大于95．3％，RSD均小于3．5％，检出限为0．5μg／kg。结论：本法简便、灵敏、重现性好、特异性强，是蜂蜜中4种氟喹诺酮残留检测的有效方法。