金岛膜表面二硫双琥珀酰亚胺基丙酸酯分子吸附行为的表面增强红外光谱分析

二硫双琥珀酰亚胺基丙酸酯(dithiobis-succinimidyl propionate,DTSP)是一种重要的同源双功能偶联分子,广泛地应用于蛋白质在载体表面的共价固定。研究利用表面增强红外光谱分析了DTSP分子在真空蒸镀金岛膜表面的吸附特性。首先通过密度泛函理论对吸附于金表面的DTSP分子进行了结构优化,计算了该分子的振动模式和红外强度。表面增强红外吸收和变角偏振反射吸收测量结果表明TSP分子在金表面有序排列,其五元杂环平面与金表面法线成65°左右的二面角。此外,表面增强红外光谱还成功地监测到了TSP分子和Nα′,Nα″二(羧甲基)-L-赖氨酸在金表面的实时组装过程。

mPEG-SPA对红细胞A、B抗原的遮蔽及稳定性初步研究

目的探讨mPEG-SPA修饰对A、B、AB三种血型红细胞上A、B抗原的遮蔽效果及稳定性。方法采用合适浓度的mPEG-SPA修饰不同血型红细胞,并分别保存在O型血浆中以观察红细胞凝集情况、保存在原血浆和MAP液中以测定游离血红蛋白。结果连续保存45d,显微镜下观察mPEG-SPA修饰的红细胞在O型血浆中未见凝集,在原血浆中保存21d时血浆游离血红蛋白≤0.29g/L;在MAP液中保存35d时游离血红蛋白≤1g/L。结论在保存期内,经mPEG-SPA化学修饰的A、B、AB三种血型红细胞的抗原遮蔽效果稳定、游离血红蛋白指标均符合临床输血要求。

3-(4-羟基-3,3′-二^(125)I-苯基)丙酸-N-琥珀酰亚胺酯的合成

一、引言3-(4-羟基苯基)-丙酸-N-琥珀酰亚胺酯简称HPNS试剂,作为碘化的载体与蛋白质相结合,在临床上用于心肌梗塞疾病的诊断。其特点是蛋白质本身不直接与^(125)

蓖麻毒素及其SPDP修饰物对小鼠肝脏GSH含量的影响

目的： 观察蓖麻毒素（ＲＴ）修饰前后对小鼠肝脏毒性的影响． 方法： ＲＴ用３－（２－吡啶二巯基）丙酸Ｎ－羟基琥珀酰亚胺酯（ＳＰＤＰ） 一种异型双功能交联剂，进行化学修饰；生成ＲＴ的ＳＰＤＰ衍生物（ＰＤＰ－Ｒ），测定两者在不同剂量和时间对小鼠肝脏还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量的影响，以比较两者的毒性差别． 结果： 随着中毒剂量的增加和时间的延长，两者均可使小鼠肝脏ＧＳＨ含量下降（Ｐ＜ ０．０１），但ＲＴ组下降程度较ＰＤＰ－Ｒ组更加明显（Ｐ＜ ０．０１），表明ＰＤＰ－Ｒ对小鼠毒性弱于ＲＴ． 结论： 用ＳＰＤＰ修饰ＲＴ可降低其对小鼠的毒性，这对改进ＲＴ抗癌作用可能是一种有意义的尝试．

蛋白A与联硫基二(琥珀酰亚胺丙酸盐)修饰电化学免疫传感器测定雌二醇(英文)

将抗体结合蛋白A和交联剂联硫基二(琥珀酰亚胺丙酸盐)(DTSP)组成的骨架修饰到电极表面,再将单克隆雌二醇抗体与骨架中的蛋白A相结合,制备出电化学免疫传感器.利用样品雌二醇与辣根过氧化酶所标记的雌二醇同传感器表面抗体的竞争性结合,将该传感器用于测定溶液中样品雌二醇的浓度;利用方波伏安法监测电化学还原辣根过氧化酶催化产生的苯醌分子的电流,以还原电流为纵坐标,以雌二醇浓度为横坐标绘制标准曲线.结果表明,雌二醇浓度在50～1 500ng.L-1范围内与方波伏安还原电流呈良好的线性关系,灵敏度为0.51μA.ng-1.L,检测限为50ng.L-1.所制备的免疫传感器良好的分析性能得益于蛋白A和DTSP所组成的骨架,该骨架能够增加免疫分子组分在电极表面的修饰量,并能够控制抗体在电极上的结合方位,使其抗原结合位点朝向电极外端,减少结合空间阻碍.

尿激酶抗人交联纤维蛋白-D-二聚体单抗化学偶合体的制备

利用双功能试剂Ｎ－琥珀酰亚胺－３（２－二硫吡啶）丙酸酯（ＳＰＤＰ）作交联剂，合成了尿激酶（ＵＫ）－抗人交联纤维蛋白降解物Ｄ－二聚体单抗（ＭＡ－ＨＩＤ１）化学偶合体（ＵＫＭＡ－ＨＩＤ１），并用苯甲脒－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ及人交联纤维蛋白降解物Ｄ－二聚体－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱纯化，获得偶合体产物．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ呈现一条带，其分子量约为２０００００．纤维蛋白平板法测活结果显示，偶合体中酶比活为５３０００ＩＵ／ｍｇ尿激酶蛋白，与偶联前的５４３００ＩＵ／ｍｇ蛋白相仿．ＥＬＩＳＡ测试显示，偶合体对人交联纤维蛋白降解物Ｄ－二聚体有免疫反应性。

新型Y型聚乙二醇-尿酸氧化酶修饰物的制备及免疫原性和生物活性评价

目的制备一种新型支链(Y型)聚乙二醇(Y-shape polyethylene glycol,PEG)修饰的尿酸氧化酶,并对该修饰酶的体外酶活性和稳定性,在大鼠体内药效学、药动学和免疫原性进行评估,为其临床研究给药方案的设计和优化提供依据。方法运用凝胶电泳、高效液相色谱技术研究聚乙二醇修饰产物的理化特征,采用酶反应-紫外分光光度法对酶生物活性进行检测,结合ELISA方法分析修饰酶的免疫原性。以大鼠为模型,研究不同聚乙二醇修饰的尿酸氧化酶在体内的药动学。结果 Y型聚乙二醇尿酸氧化酶修饰物rUOX-mPEG2的表观相对分子质量比线性聚乙二醇修饰的产物rUOX-mPEG更大,聚乙二醇分子的修饰度更高,在相同温度和pH条件下的活性明显高于直链型聚乙二醇尿酸氧化酶修饰物。动物实验表明,该聚乙二醇-尿酸氧化酶修饰物在体内呈现良好的动力学特征,并在体内具有更长的药效维持时间。免疫原性实验结果也表明,Y型聚乙二醇修饰能有效降低免疫原性。结论 Y型聚乙二醇修饰尿酸氧化酶的酶学性质明显优于重组酶和直链型修饰的尿酸氧化酶,药效维持时间显著高于后者,免疫原性和国外品种采用的直链修饰尿酸氧化酶相当,且明显低于重组酶,在大鼠体内呈线性动力学特征。