头穴脉冲磁针对脑梗塞患者血浆t-PA、PAI-Ⅰ活性、D-dimer含量的影响

目的 运用自制的脉冲磁针治疗仪作用于头穴 ,治疗急性脑梗塞病人并探讨其治疗疾病的机理。方法 设立脉冲磁针组 30例 ,同时设立常规针刺组、静磁针组各 30例做对照组。测定 3组治疗前后血浆中组织型纤溶酶原激活物 (t- PA)、组织型纤溶酶原激活物抑制物 (PAI- )、D-二聚体 (D- dimer)的含量。结果与结论 脉冲磁针组与常规针刺组比较无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,两组与静磁针组比较均有显著差异 (P<0 .0 1)

四步法消除SYBR GreenⅠ实时定量RT-PCR中引物二聚体的影响

为建立一种新的SYBRgreenⅠ实时定量RT PCR方法 ,使之能够有效消除引物二聚体 (PDs)对实时定量结果的影响 .对RT PCR特异性扩增产物和PDs分别进行了凝胶电泳检测和熔解曲线分析 .依据PDs和扩增产物的熔解温度 (Tm)特点 ,在通用的三步法的延伸步骤之后 ,增加一个短暂的 (5s)恒温和荧光检测步骤 ,使这个步骤的温度高于PDs的Tm,但低于扩增产物的Tm,简称该法为四步法 .PDs的Tm 通常高于 72℃ ,但低于扩增产物的Tm .将四步法第四步的温度设置在高于PDs的Tm ,但低于扩增产物的Tm 时 ,四步法能够有效地消除PDs的影响 .对三步法和四步法SYBRgreenⅠ实时定量RT PCR进行了比较 ,发现三步法根本不能用于RNA的实时定量 ,而四步法能够实现包括低丰度RNA在内的RNA的定量 .选择Tm 值尽可能小的引物 ,使PDs与扩增产物Tm 值之间有足够的差距 ,将更有利于四步法的应用 。

SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测脑胶质瘤中RASSF1A mRNA

目的 建立检测RASSF1A(RASassociationdomainfamily 1ARASSF1A)mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR的方法 ,了解脑胶质瘤中RASSF1A的表达水平 ,研究RASSF1AmRNA的表达和肿瘤恶性程度的关系。方法 构建克隆载体作为定量模板 ,RocheLightCycler 定量检测 4 8例不同恶性程度胶质瘤组织和 6例正常脑组织标本。结果 4 8例脑胶质瘤组织中有 5例未检出RASSF1AmRNA。与内参照三磷酸甘油醛脱氢酶基因GAPDH(glyceraldehycle 3 phosphatedehydrogenase,GAPDH)比较后 ,RASSF1AmRNA的表达范围从 0 .0 8～ 1.0 0 /μg ,均值为 (0 .5 0± 0 .0 0 4 ) /μg。 6例正常脑组织标本均有RASSF1AmRNA的表达 ,范围从 0 .70～ 1.80 /μg ,均值为 (1.0 5± 0 .0 8) /μg。各期胶质瘤中RASSF1A的mRNA的表达水平均低于正常脑组织 ,但胶质瘤不同病理级别组之间的差异无显著意义。结论 胶质瘤中RASSF1A的mRNA的表达水平均低于正常脑组织。成功地建立了SYBRGreenⅠ实时定量检测RASSF1A基因表达方法 ,为研究RASSF1A表达水平下调的机制、表达水平和肿瘤的恶性程度、转移。

新疆维吾尔族人群胃癌与维生素D受体基因FokⅠ多态性的相关性

目的:探讨维生素D受体基因FokⅠ酶切位点多态性与胃癌的相关性.方法:随机选取2013-03/2015-05新疆肿瘤医院就诊的维吾尔族胃癌患者147例(A组)及维吾尔族健康对照者151例(B组),采用多聚酶链反应-限制性酶切片段长度多态性方法测定维生素D受体基因FokⅠ酶切位点多态性,进行两组间比较;将本研究全部胃癌患者经PCR-RFLP测定后按是否带有f基因分为FF组(a组)与Ff+ff组(b组),进行组间D-二聚体测定水平比较.结果:胃癌患者的f等位基因表达频率高于对照组(57.8%vs 47.4%,P<0.05).多因素分析显示:含f等位基因(Ff+ff)的研究对象患胃癌的风险高于不含f等位基因(FF)的研究对象(OR=2.85);含f等位基因组中D-二聚体测定水平较不含f等位基因组明显升高(2.79±1.21 vs 1.09±0.65,P<0.05);随胃癌患者分化严重程度的逐步加重,单纯含F基因(FF)的患者的比例逐步下降(P<0.05).结论:维生素D受体基因FokⅠ酶切位点多态性与维吾尔族胃癌易感性相关联,f等位基因可能是维吾尔族胃癌发生的危险因素之一,而F位点可能是维吾尔族胃癌发生的保护因素.f等位基因可能是调节D-二聚体水平的因素之一,从而影响了维吾尔族胃癌患者的发生或预后.

微紫青霉CBHⅠ酶纤维素结合结构域在大肠杆菌中的分泌型表达及性质研究

为研究纤维素酶纤维素结合结构域的结构与功能 ,进而深入了解天然纤维素的生物降解机制和提高纤维素酶的生物工艺学价值 ,采用 PCR技术体外扩增了携带微紫青霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶 ( CBH ) CBD编码区的 DNA片段 ,将 CBD编码区 DNA片段插入带有 Erwiniacarotovora pe1 B前导肽序列的大肠杆菌质粒 p KK- tac- new上进行了表达 .携带微紫青霉 CBDCBH 编码区的大肠杆菌重组菌株 DH5α( p KK- tac- new- 8)产生有活性的分泌型 CBDCBH 蛋白 .SDS-PAGE检测显示所产生的 CBDCBH 蛋白分子量约 1 0 .8k D.在 IPTG诱导下 ,该菌株所产生的CBDCBH 蛋白含量达 45.2 mg/L,且 90 %以上的 CBD蛋白分泌到培养物上清液中 .结晶纤维素 CF-1 1溶液经 CBDCBH 处理后 ,浊度比对照提高了 1 2 8.9% ,天然棉花纤维结构经 CBDCBH 处理后产生一定程度的非水解性降解作用 ,表明微紫青霉 CBDCBH 具有解聚天然结晶纤维素的作用 .

单活性结构域T7核酸酶Ⅰ的制备及性质研究

T7核酸酶Ⅰ(T7EⅠ)是一种能特异识别并拆分重组中间体Holliday Junction(HJ)的多功能核酸酶,该酶不仅能特异识别和拆分HJ,而且能随机切刻双链DNA,特异识别并切割双链DNA中的切刻和单碱基错配位点.构建了两种原核表达载体用于表达MBP和His-tag融合的两种T7EⅠ突变体,MBP-T7EⅠ(E20K)和His6-T7EⅠ(E65K).每一种融合蛋白形成的同源二聚体不具有核酸酶活性,通过共表达或两种蛋白质共变性复性、双标签亲和纯化,最终获得具有单个活性结构域的T7EⅠ异源二聚体(T7EⅠ-SAD).以pUC(AT)和pUC19为底物测试T7EⅠ-SAD的HJ拆分活性、随机切刻活性和切刻位点切割活性,结果显示,T7EⅠ-SAD可特异识别并切刻HJ结构,但丧失了同时引入两个切刻位点的能力,其对pUC(AT)的特异切刻活力和对pUC19的随机切刻活力与野生酶相当.逐级变性梯度洗脱实验显示,T7EⅠ-SAD的稳定性与野生型酶接近,二聚体解离需要5.0～6.0mol/L尿素或1.75～2.0mol/L盐酸胍;凝胶阻滞实验表明T7EⅠ-SAD具备与HJ结构特异结合的能力.为具有细胞毒性蛋白的表达提供了一种新策略,同时提供了一种简便直观的蛋白质二聚体稳定性测试方法.

中性粒细胞胞外诱捕网通过CCDC25促进骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用研究

目的探究中性粒细胞胞外捕获网(neutrophil extracellular traps,NETs)在骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及其相关机制。方法纳入骨肉瘤患者和健康受试者各20例,通过ELISA检测血清中PAD4和H3cit水平。提取两组人群外周血中性粒细胞,比较NETs形成差异。将NETs与骨肉瘤细胞MG63共孵育,期间加入DNA降解酶DNaseⅠ,分为对照组、NETs组和NETs+DNaseⅠ组。通过蛋白质印迹检测CCDC25蛋白表达水平,CCK8检测细胞增殖水平,Transwell检测细胞迁移和侵袭水平。将si-NC和si-CCDC25转染至MG63,加入NETs共孵育,分为si-NC组和si-CCDC25组,通过蛋白质印迹检测CCDC25蛋白表达水平,CCK8检测细胞增殖水平,Transwell检测细胞迁移和侵袭水平。结果与健康受试者比较,骨肉瘤患者血清中PAD4和H3cit水平升高(P<0.05),NETs形成能力增强。与对照组比较,NETs组CCDC25蛋白表达升高,细胞增殖、迁移和侵袭水平升高(P<0.05)。与NETs组比较,NETs+DNaseⅠ组CCDC25蛋白表达降低,细胞增殖、迁移和侵袭水平降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-CCDC25组CCDC25蛋白表达降低,细胞增殖、迁移和侵袭水平降低(P<0.05)。结论NETs通过释放的DNA激活骨肉瘤细胞CCDC25表达,从而促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭。

C^n空间中的第Ⅰ型B-M积分表示的拓广

利用C^n中有界凸区域的第1型积分表示的拓广形式和第Ⅰ型的 Bochner-Martinelli公式,拓广了第Ⅰ型Bochner-Martinelli积分表示。已有的Bochner-Martinelli积分表示及其拓广形式(除了Bochner-Ono公式外)都可以视为文中积分表示的特款。

瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅰ及其CBD的噬菌体表面展示系统的构建

为研究纤维素酶的酶活性和吸附特性之间的关系,将瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅰ(endoglucanaseⅠ,EGⅠ)和其吸附结构域(cellulose-binding domains,CBD)的基因经PCR扩增后,连接到载体pCANTAB5E上,构建成噬菌粒展示载体pCANTAB5E-egⅠ和pCANTAB5E-egⅠ-cbd。将这些噬菌体展示载体转化到大肠杆菌TGⅠ中,在辅助噬菌体M13KO7的帮助下得到重组噬菌体。用ELISA和Somogyi方法分别测定了EGⅠ及其CBD的表面展示噬菌体对纤维素的亲和性和EGⅠ的CMC活性,结果显示EGⅠ及其CBD已功能展示于噬菌体表面。该系统的成功构建为今后利用噬菌体展示的方法进行纤维素酶的酶分子改造提供了基础。

D-二聚体、肌钙蛋白Ⅰ在鉴别急性心肌梗死、急性主动脉夹层、急性肺栓塞所致的致命性胸痛病因诊断中的作用

目的:探讨急诊科床旁快速检测(POCT)D-二聚体、肌钙蛋白Ⅰ(Tn I)对急性心肌梗死(AMI)、急性主动脉夹层(AAD)、急性肺栓塞(APE)所致致命性胸痛的鉴别意义。方法:回顾性分析2015年1月至2017年1月因胸痛于急诊科就诊,并确诊为AMI、AAD、APE的270例患者的临床资料,分为AMI组(200例)、AAD组(35例)、APE组(35例),分析患者的D-二聚体、Tn I水平对致命性胸痛鉴别诊断的临床指导意义,通过绘制ROC曲线,评估D-二聚体、Tn I的鉴别效果。结果:270例患者,经冠脉造影明确诊断AMI 200例,经主动脉CTA明确诊断AAD 35例,经肺动脉CTA明确诊断APE 35例,对3组D-二聚体、Tn I进行统计学分析。(1)D-二聚体:结果显示APE组高于AAD组,AAD组高于AMI组。D-二聚体区分AMI、AAD效果的ROC曲线下面积是(0.958±0.013),理想界点值为314 ng·mL^(-1),其敏感性为0.971,特异性为0.910,区分AMI、APE效果的ROC曲线下面积是(0.995±0.003),理想界点值为435 ng·mL^(-1),其敏感性为1,特异性为0.950,区分AAD、APE效果的ROC曲线下面积是(0.942±0.029),理想界点值为670 ng·mL^(-1),其敏感性为0.886,特异性为0.943。(2)Tn I:结果显示AMI组高于AAD组和APE组,而AAD组和APE组之间无统计学差异,Tn I区分AMI、AAD效果的ROC曲线下面积是(0.939±0.015),理想界点值为0.390 ng·mL^(-1),其敏感性为0.84,特异性为1,区分AMI、APE效果的ROC曲线下面积是(0.941±0.015),理想界点值为0.365 ng·mL^(-1),其敏感性为0.845,特异性为1,区分AAD、APE效果的ROC曲线下面积是(0.513±0.070),诊断价值较低。(3)Tn I与D-二聚体数据拟合后的ROC曲线:区分AMI、AAD效果的ROC曲线下面积是(0.995±0.004),理想界点值PRE-1为0.212 596 4,其敏感性为1,特异性为0.975,区分AMI、APE效果的ROC曲线下面积是(0.999±0.001),理想界点值PRE-1为0.171 704 0,其敏感性为1,特异性为0.995,区分AAD、APE效果的ROC曲线下面积是(0.955±0.026),理想界点值PRE-1为0.573 510 9,其敏感性为0.857,特异性为1。结论:POCT检测D-二聚体、Tn I有助于致命性胸痛的鉴别诊断,可提高疾病的诊断率。

铑(Ⅰ)催化有机汞化合物偶联反应机理的研究

研究了β-氯化萘汞在［CIRh（CO）2］2催化下于六甲基磷酰胺溶液中的偶联反应动力学，证明其反应为二级，求得了偶联反应动力学常数．α-氯化萘汞和α-溴汞代苯乙酸乙酯在相同的反应条件下不发生偶联反应；在α一溴汞代苯乙酸乙酯的偶联反应条件下分离和鉴定了有机铑（I）中间体，根据所提出的反应机理，对上述现象进行了讨论．

两个二亚胺及双膦配体混配铜(Ⅰ)配合物的合成、结构与太赫兹光谱

在甲醇和二氯甲烷混合溶液中制备了2个二亚胺、双膦配体混配的铜(Ⅰ)配合物[Cu2(Dpq)2(dppBz)2](SCN)2·0.5Dpq·3CH3OH (1)和[Cu2(Dppz)2(dppb)2](BF4)2·2CH3OH·2H2O (2)(Dppz=二吡啶[3,2-a:2’,3’-c]并吩嗪,Dpq=吡嗪并[2,3-f][1,10]菲咯啉,dppBz=1,2-双(二苯基磷基)苯,dppb=1,4-双(二苯膦基)丁烷),通过X射线单晶衍射确定了配合物的精确结构,并使用元素分析、核磁共振氢谱、红外光谱、紫外可见吸收光谱、荧光光谱、太赫兹时域光谱(THz-TDS)对配合物进行了表征。1的晶胞中包含2个独立的金属中心,还含有0.5个未配位的Dpq分子,类似结构较为少见;而2为通过双膦配体桥联形成新颖的双核结构。通过弱相互作用力分析可知1为三维立体堆积结构,结构中含有独特的C-S…π作用;2通过C-H…π及π…π作用形成一维无限链,大量弱相互作用的存在使配合物更加稳定。发射光谱表明配合物1在578 nm处有较强的发射,而2在547 nm有绿光发射。配合物2的THz-TDS图中在1.2 THz处的尖锐峰是由C-H···F弱相互作用引起的。

两个二亚胺-铜(Ⅰ)-膦配合物的合成、结构和太赫兹时域光谱（英文）

本文报道了2个新的Cu(Ⅰ)配合物:[Cu(PPh3)2(dppz)]I(1)(PPh3=三苯基膦,dppz=二吡啶并[3,2-a∶2′,3′-c]吩嗪)和[Cu2(dppm)2(dppz)2]Cl2(2)(dppm=双(二苯基膦)甲烷)的合成,并通过X射线单晶衍射、元素分析、核磁共振氢(膦)谱、荧光光谱和太赫兹时域光谱对其进行了分析和表征。分析结果显示配合物1是一个单核配合物,中心Cu(Ⅰ)离子与2个含膦配体(PPh3)和1个含氮配体(dppz)进行配位,形成了一个扭曲的四面体结构。与1不同的是,配合物2是由CuCl,dppm和dppz以1∶1∶1的比例混配得到的双核配合物。其中,双膦配体dppm作为桥联配体,连接了2个Cu(Ⅰ)离子。荧光光谱表明所有的发射峰均源于金属到配体的电荷转移跃迁(MLCT)。同时,使用太赫兹时域光谱技术表征了2种配合物以及相应的配体。

C^n 空间中有界域上第Ⅰ型 Cauchy-Fantappie' 公式的另一种形式

得到的Ｃｎ空间中有界域上全纯函数积分表示，其积分核含有全纯函数导数，是第Ⅰ型Ｃａｕｃｈｙ—Ｆａｎｔａｐｐｉｅ′公式的另一种形式。利用这个公式，通过适当选择其中向量函数，可以得到许多域上全纯函数的第Ⅰ型积分的拓广形式。

北京鸭apoA－Ⅰ溴化氰裂解片段的分离纯化、性质及其与鸭肝HDL受体结合研究

本文对北京鸭ａｐｏＡ－Ⅰ溴化氰裂解片段的理化性质、部分结构和抗原性以及其与鸭肝细胞膜ＨＤＬ受体的结合进行了研究。ａｐｏＡ－Ⅰ用溴化氰裂解后经ＨＰＬＣ分离得两个纯的肽段Ｐ５和Ｐ６，对二肽段作了氨基酸组成分析，并分别测定了Ｐ５，Ｐ６Ｎ端的１４和９个氨基酸残基序列。通过与鸡ａｐｏＡ－Ⅰ的比较，根据同源性及肽段大小，定出Ｐ５、Ｐ６分别位于鸭ａｐｏＡ－Ⅰ的第１３８－１７０ａａ和第７５－１３６ａａ的区域。Ｉｍｍｕｎｏ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ法测定结果表明，Ｐ５、Ｐ６都含有鸭ａｐｏＡ－Ⅰ的抗原决定簇；用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ免疫检测，发现鸭ａｐｏＡ－Ⅰ的Ｐ５、Ｐ６二片段都能与鸭肝细胞膜ＨＤＬ受体结合，提示鸭ａｐｏＡ－Ⅰ的中间区域即第７５－１７０ａａ区域可能参予鸭ａｐｏＡ－Ⅰ与鸭肝ＨＤＬ受体的结合。

鸭RIG-Ⅰ蛋白C端helicase结构域和RD结构域的原核表达及其单克隆抗体的制备

利用PCR技术将鸭维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)helicase区和RD区部分编码序列分别进行扩增,并分别命名为c、d段;克隆到p ET30a原核表达载体,构建了重组原核表达质粒p ET30a-c和p ET30a-d,通过转化BL21(DE3)感受态菌、IPTG诱导、镍柱纯化表达蛋白,将纯化的c、d蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体(m Ab),采用ELISA、Western blot和间接免疫荧光试验对单克隆抗体进行鉴定分析。获得鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体有14株与原核分段表达的c、d蛋白有良好的反应性,其中3株与真核表达的RIG-Ⅰ蛋白有良好的反应性。制备的鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体为RIG-Ⅰ在抗病毒天然免疫信号转导途径的研究奠定了基础。

急诊胸痛患者血清hs-cTnⅠ及炎症指标分析

目的研究急诊胸痛患者血清超敏肌钙蛋白(hs-cTnⅠ)及炎症指标在早期临床诊断中的意义,为患者早期临床诊断提供思路。方法回顾性分析2017年9月至2018年9月在西安市第三医院接受诊断与治疗的120例急性胸痛患者的诊疗情况。按照病情状况,将所有患者分为两组,其中72例急性冠脉综合征患者为研究组,48例非急性冠脉综合征患者为对照组。比较就诊后0~2 h、2~4 h、4~6 h两组患者血清hs-cTnⅠ、血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)以及D二聚体(D-D)水平。结果随着时间的延长研究组患者血清hs-cTnⅠ,hs-CRP以及D-D水平明显升高;治疗4~6 h,研究组患者血清hs-cTnⅠ、hs-CRP以及D-D水平分别为(7.90±2.53)μg/L,(7.71±2.89) mg/L和(0.74±0.31) mg/L,明显高于对照组的(0.02±0.04)μg/L、(2.24±1.37) mg/L及(0.47±0.10) mg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);血清hs-cTnⅠ的特异度为65.9%、灵敏度为88.5%、准确度为54.5%,明显高于hs-CRP的特异度60.1%、灵敏度80.3%、准确度44.8%以及D-D的特异度58.6%、灵敏度58.3%、准确度47.1%;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论急诊胸痛患者血清超敏肌钙蛋白(hs-cTnⅠ)及炎症指标在早期临床诊断中有重要意义,可以为患者早期临床诊断提供思路。

CR3的Ⅰ结构域的克隆和在CHO细胞中的表达及配体结合特性的研究

目的研究白细胞整合素ＣＲ３α亚基的Ⅰ结构域在配体结合中的作用。方法克隆ＣＤ１１ｂ的Ⅰ结构域，用重叠ＰＣＲ的方法将其与信号肽ＤＮＡ连接，克隆到表达载体ＰＥＥ６ＨＣＭＶ．ＧＳ，转化ＣＨＯ－Ｋ１细胞。表达的Ⅰ－结构域经ＳＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ｍｏｎｏ－Ｓ柱纯化后，与Ｃ３ｂｉ进行配体结合实验。结果用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得重组的Ⅰ结构域分子量为２９ｋＤ。重组的Ⅰ结构域可以与Ｃ３ｂｉ结合，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析示结合常数为３００±１１３ｎｍｏｌ／Ｌ，这种结合可以被抗Ⅰ－结构域单克隆抗体ＬＰＭ１９Ｃ和ＥＤＴＡ抑制。结论Ⅰ结构域对于结合单体Ｃ３ｂｉ是必要的和充分的，结合需要二价阳离子。

鲫鱼蛋白激酶PKR-like的Zα结构域与聚肌胞苷酸的结合

根据鲫鱼类PKR蛋白激酶基因(CaPKR-like)的全长cDNA序列,克隆CaPKR-likeZα结构域cDNA(Zα1、Zα2和Zα1Zα2),原核表达成功获得3种融合蛋白PZα1、PZα2和PZα1Zα2。凝胶阻滞实验结果显示:PZα1、PZα2、PZα1和PZα2混合表达蛋白不能与聚肌胞苷酸(PolyI∶C)结合,而表达完整的Zα结构域的PZα1Zα2与PolyI∶C有明显的结合现象。另外,3种表达多肽PZα1、PZα2和PZα1Zα2在体外分别都能聚合形成二聚体。与PZα1相比,PZα2和PZα1Zα2二聚化现象显著。结果暗示病毒复制时产生的副产物dsRNA能与CaPKR-like蛋白的相关结构域结合从而调节其生理功能。

重组蜘蛛丝蛋白MiSp NT结构域在不同pH环境下的Trp荧光光谱及圆二色谱分析

为明确蛛丝蛋白NT结构域的生物学功能,首次研究了MiSp NT结构域在不同pH条件下的二聚化动力学及二级结构特性.基于蛛丝蛋白MiSp全长编码基因,克隆并分别在BL21(DE3)和Rosetta-gami 2(DE3)中重组表达MiSp NT结构域:BL21(DE3)表达水平较高,约35 mg/L LB培养基,表达产物需经短暂超声和2 mol/L尿素促溶;Rosetta-gami 2(DE3)表达产物可溶性较好,但表达水平仅为BL21(DE3)一半左右.融合蛋白经凝血酶介导的2次Ni-NTA纯化,纯度达到95%以上.Trp荧光光谱分析表明,MiSpNT在pH为7.0左右时开始二聚化,pH5.7时二聚体为主要构象,pH T约为6.6.MiSpNT在pH 7.5,6.5和5.5条件下的CD图谱相似,均主要为α-helix,表明NT二聚化与二级结构水平的变化没有直接联系.本研究为进一步探索蛛丝蛋白NT结构域的结构和功能以及成丝机理提供线索.