植物内源激素对原生质体培养的影响

以烟草试管苗叶，美味猕猴桃、毛花猕猴桃子叶愈伤组织以及玉米叶片为材料，进行了内源激素水平的测定和原生质体培养的研究．结果表明：高水平内源玉米素核苷（ZR）含量和高ZR与吲唑乙酸（IAA）质量比有利于原生质体再生细胞的分裂；高水平内源脱落酸（ABA）对再生细胞分裂有抑制作用．内源IAA，ZR和ABA含量对原生质体培养的影响在不同种之间存在差异．

超排对供体奶牛生产性能和繁殖力的影响

本文探讨了超数排卵对供体奶牛生产性能和繁殖的影响。26头供体牛组成2个处理组,青年母牛做供体处理组,采卵后至首次发情时间为19.8±3.6天,首次发情配种妊娠率为53.8％(7/13),超排处理到末次配种间隔情期为3.7±0.5个;经产母牛做供体处理组,泌乳曲线不正常,超排当月产奶量比超排前后月均有所下降(下降分别为:98.8±19.10和8.50±11.56kg),采卵后至首次发情时间为23.2±4.1天,与青年母牛组比指标差异显著(P<0.05),首次发情配种妊娠率为38.5(5/13),超排处理到末次配种间隔情期为 3.9±0.7个。结果表明,超排影响产奶量,对其繁殖力也有些影响。

单中心儿童心脏移植的供心保护经验总结

目的总结本中心儿童心脏移植供心的保护经验。方法武汉协和医院心脏移植中心自2008年9月至2015年8月，共完成21例儿童心脏移植，其中男11例，女10例，年龄3个月－18岁（11．75±7．94）岁，体重5．2～69（34．49±18．33）kg，身高56～172（133．61±35．79）cm，平均肺动脉压（MPAP）为20—52（33．15＋12．73）mmHg，心脏射血分数（EF）为15％～70％（40．25±20．14）％。21例心脏移植成人供心占15例，儿童供心占6例。供心获取和保护采用联合灌注改良St．Thomas液20ml／kg和康斯特保护液（HTK液）40。50ml／kg的方法，移植前供心修剪时再次灌注HTK液20mlVkg。结果供心冷缺血时间为106—522（269．55±152．51）min，体外循环时间为71～217（121．80±42．92）min，升主动脉阻断时间20—105（45．10±22．10）min。其中19例患者顺利停机，2例术后因早期供心功能不全而使用体外膜肺氧合（ECMO）辅助后成功脱机。所有患者均康复并顺利出院，术后3周复查EF为（67．47~5．75）％，术后平均随访16月尚无死亡病例。结论儿童心脏移植是治疗儿童终末期心脏病和复杂先天性心脏病的有效治疗手段。本中心采用的联合两种心肌保护液的供心灌注保护方法简单易行，心肌保护效果良好，尤其是对边缘供心的保护效果确切，取得良好的临床效果。

心脏移植供心的心肌保护研究

目的总结4例心脏移植的供心保护经验。方法缩短热缺血时间,切除供心时先以冷晶停跳液500 ml灌注,使供心迅速停搏,心包内放入冰屑使供心降温,切除供心后,再灌注0-4℃UW保存液1000 ml(6-8分钟灌注完),用浸泡法低温保存供心,4例供心热缺血时间分别为3、4、6、6分钟,冷缺血时间分别为220、415、215、226分钟。结果升主动脉开放后,3例自动复跳,1例电击除颤后复跳,围手术期供心功能良好,术后患者康复顺利,现心功能均为Ⅰ级。结论用此方法可使供心得到良好的心肌保护。

无关供者骨髓移植中HLA-C_W基因与急性GVHD相关性的初探

目的探讨无关供者骨髓/外周血造血干细胞移植(BMT/PBSCT)后的急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生与供/受者HLA-CW等位基因匹配程度的相关性。方法选择HLA-A、B、DRBI相同、并业已进行BMT/PBSCT的无关供/受者对,采用PCR-SSP方法对供受者进行HLA-CW位点的高分辨基因定型,并收集移植后患者的临床资料,对HLA-CW基因与aGVHD的相关性进行回顾性分析。结果观察4例HLA-A、B、DRBI相同的移植患者,即急淋(ALL)患者1例、慢性髓细胞白血病(CML)患者2例、急性髓细胞白血病(AML)患者1例,HLA-CW等位基因完全相合、半相合和完全不相合的患者分别为1例、2例和1例,结果1例CML及1例AML患者中出现Ⅲ度aGVHD。结论无关供者骨髓/外周血造血干细胞移植中,供受者HLA-CW等位基因匹配程度对急性GVHD具有重要影响,并建议对HLA-CW基因进行常规检测。

献血者抗核抗体及抗可提取性核抗原抗体谱的检测

目的探讨抗核抗体(ANA)及抗可提取性核抗原(ENA)抗体谱在健康献血者中检测的临床意义。方法应用间接免疫荧光法检测ANA,同时采用免疫印迹技术检测抗ENA抗体,采用血液分析仪进行白细胞计数和分类。结果93例健康献血者中ANA阳性14例(15.1%),其中45～55岁阳性者11例(39.3%),随着年龄增高,ANA的阳性检出率逐渐增高(χ2=94.01,P<0.05);健康献血者中,不同性别ANA阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。与ANA阴性组比较,ANA阳性献血者白细胞、中性粒细胞绝对值和中性粒细胞相对数差异均有统计学意义(P<0.05)。结论健康人可能存在生理性自身免疫应答,但不一定能激活自身免疫系统,引起自身免疫损伤而导致自身免疫性疾病。

猪内源性逆转录病毒在异种移植中的感染风险

猪作为异种移植供体可有效解决人类同种移植供体短缺的问题,但猪内源性逆转录病毒具有潜在的感染风险,严重影响了猪器官、组织、细胞在临床中的应用。因此,在异种移植应用于临床前,阐明猪内源性逆转录病毒的感染风险性至关重要。

体外膜肺氧合用于脑心双死亡供者器官获取的流程和方法

目的总结体外膜肺氧合（ECMO）用于脑心双死亡供者（DBCD）器官获取的流程和方法。方法回顾分析2009年1月至2012年12月完成的39例DBCD器官捐赠。39例供者中，男性30例，女性9例，年龄（28．1±10．2）岁，体质量指数为（21．3±2．5）kg／m2；原发病为重型脑外伤29例，脑血管意外8例，以及缺血缺氧性脑病2例。评估供者危险指数为1．27±0．28。39例供者在捐赠器官过程中均使用了ECMO支持。结果ECMO使用时间为（161±77）min。ECMO起始流量为（3．14±0．24）L／min，平衡流量为（1．76±0．58）L／min，复灌流量为（3．10±0．48）L／min。供者器官热缺血时间均为0min。供者评估时、ECMO使用前、器官获取前供者胆红素总量、丙氨酸转氨酶均无显著性差异，但获取前血清肌酐水平显著升高，尿量显著减少。共获取38个肝脏，78个肾脏，分别实施了37例肝移植、64例肾移植。1个肝脏因合并乙型肝炎病毒表面抗原阳性未匹配到合适受者而未使用，14个肾脏因肾功能不全、肾结石未使用。结论供者家属和伦理委员会对使用ECMO没有争议，ECMO辅助DBCD器官获取可避免热缺血损伤，获得更满意的移植效果。

心脏死亡器官捐赠中器官切取的手术方法与技巧总结

目的对心脏死亡器官捐赠（DCD）中供者器官切取手术方法的特点与技巧进行总结，观察器官移植后移植物的功能。方法回顾性分析26例DCD供者器官切取的临床资料，分别采用上腹部多器官联合切取法和肝肾分别切取法切取供者器官。结果26例供者器官的平均热缺血时间为4rain（110min），器官切取手术操作顺利，器官切取手术平均耗时为27min（20-45min）。共获得供肝22个，供。肾44个，上腹部多器官（包括肝脏、胰腺和十二指肠）2个；所获取器官进行肝移植24例（其中2例供肝进行劈离式肝移植供给4例受者），肾移植42例（其中2例供者的双肾进行双肾移植），上腹部多器官移植2例。所有移植手术均顺利，移植器官的功能恢复良好，未出现原发性移植物无功能等并发症。结论在DCD器官切取手术中，上腹部多器官联合切取法和肝肾分别切取法的手术步骤简捷、安全可靠，要求术者掌握熟练的外科技巧，动作迅速准确，能最大限度减少供者器官的热缺血时间，以保证获取高质量的供者器官。

空气氧合常温机械灌注对心死亡大鼠肾缺血损伤的修复作用

目的:通过建立大鼠心死亡供肾常温机械灌注(normothermic mechanical perfusion,NMP)模型,探讨空气氧合NMP和氧气氧合NMP对心死亡供肾损伤修复的影响。方法:取12只12~14周龄的健康雄性SD大鼠,建立大鼠心脏死亡供体器官捐献(donation after cardiac death,DCD)模型。大鼠肾脏在热缺血损伤30 min并冷保存8 h后,采用随机数字表法随机分为使用氧气氧合NMP(O组,6只)、空气氧合NMP(A组,6只)2 h。另取相同数量大鼠,采用随机数字表法随机平分为开腹即获取肾组织的假手术组(C组,6只)和心死亡后仅静态冷保存8 h的心死亡肾脏静态保存组(SCS组,6只)作为O组和A组的对照。微板法检测肾灌注液损伤指标肌酐(Cr)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)水平变化,HE染色评定肾组织中肾损伤指标,免疫组织化学和蛋白质印迹法检测髓过氧化物酶(MPO)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达,酶联免疫吸附法检测TNF-α和IL-6水平,硫代巴比妥酸和WST-8法测定脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。采用t检验和单因素方差分析比较组间变量的差异。结果:氧气氧合NMP体系(O组)的肾动脉处灌注液氧分压为(576.3±68.2)mmHg,空气氧合NMP体系(A组)氧分压为(137.0±39.1)mmHg,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,SCS组、O组和A组的病理损伤评分分别为(7.0±0.1)分、(5.0±0.9)分和(2.5±0.5)分,SCS组肾损伤评分显著高于后两组,组间差异均有统计学意义(P均<0.05);A组评分亦较O组显著降低,差异亦有统计学意义(P<0.05)。O组供肾NMP前后灌注液的△Cr、△AST、△LDH分别为(43.9±52.8)μmol/L、(532.3±52.8)U/L和(9998.0±2014.4)U/L,A组上述指标分别为(12.6±3.5)μmol/L、(49.1±50.4)U/L和(1477.0±810.4)U/L,均较O组显著降低,且差异均有统计学意义(P均<0.05)。O组灌注后肾组织中MDA含量和SOD活力分别为(0.192±0.018)mmol/g和(0.6±0.3)×10^(3) U/g,A组为(0.162±0.023)mmol/g和(1.7±0.4)×10^(3) U/g;O组TNF-α和IL-6水平分别为(124.376±19.635)ng/g和(4.038±1.026)×10^(3) ng/g,A组为(89.331±13.123)ng/g和(1.774±0.518)×10^(3) ng/g。与O组相比,A组肾组织中MDA含量及TNF-α和IL-6水平降低、SOD活力升高,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。半定量分析结果显示,A组MPO和ICAM-1组织表达均较O组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠空气氧合NMP,可有效模拟肾灌注氧气压力的生理状态,降低氧化应激和炎症损伤,更有利于DCD供肾缺血损伤的修复。