检测α-synuclein ELISA夹心法的建立

目的建立定量检测α-synuclein的ELISA夹心法。方法采用抗人α-synuclein单抗包被酶标板,以兔抗人α-synuclein多抗为夹心抗体、HRP标记羊抗兔IgG为检测抗体、重组人α-synuclein为标准品,建立检测α-synuclein的间接ELISA法,并对36例正常对照、27例路易体痴呆患者脑脊液样本进行了检测。结果建立的夹心ELISA法检测α-synuclein的线性范围为1.56～200 ng/ml,批内、批间变异系数分别为为7.51%和13.7%,36例正常对照、27例路易体痴呆患者脑脊液α-synuclein的含量比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立了一种检测α-synuclein的夹心ELISA法。

氧化苦参碱-黄芪多糖复方对新城疫Ⅳ系疫苗免疫雏鸡血清IL-2和IFN-γ水平的影响

为了探讨氧化苦参碱-黄芪多糖中草药复方对抗新城疫病毒（NDV）感染效果，旨在为筛选确实有效的防治鸡新城疫的中药组方，将14日龄非免疫健康罗曼公雏鸡150羽随机均分为5组，1组-3组分别为氧化苦参碱-黄芪多糖复方高、中、低剂量组，4组为免疫对照组，5组为空白对照组。除空白对照组外均用新城疫Ⅳ系疫苗滴鼻、点眼免疫，28日龄重复免疫。在首次免疫的同时，1组-3组分别口服高、中、低剂量氧化苦参碱-黄芪多糖复方药物，疫苗对照组和空白对照组口服等量生理盐水，每天1次，连续3 d。分别于14、28和42日龄采血，用双抗夹心 ELISA 法检测血清中 IL-2和 IFN-γ的浓度。结果显示，复方的高、中、低剂量在各时间点血清 IL-2浓度显著高于免疫对照组（P ＜0．05）；血清 IFN-γ浓度均显著高于免疫对照组（P＜0．05）。说明中药成分复方能显著增强雏鸡对新城疫疫苗的免疫应答，高、中剂量的效果较好，可用于促进细胞免疫，提高机体抗病能力。

产志贺毒素大肠杆菌志贺毒素Ⅰ型双抗体夹心ELISA检测方法的建立

为建立双抗体夹心ELISA法检测产志贺毒素大肠杆菌(STEC)Ⅰ型志贺毒素(Stx1),利用重组Ⅰ型志贺毒素A亚单位(Stx1A)免疫小鼠,制备单克隆抗体,从中筛选出非竞争性的2株单抗,构建双抗体夹心法ELISA检测方法,并对试验样品中的志贺毒素进行检测。结果显示:共获得4株针对Stx1A的单克隆抗体,分别为1H2-G7、2H1-C12、8E7-E6和2F6-F8。当8E7-E6作为包被抗体,而2F6-F8作为检测抗体时,其检测毒素的OD值最高。对样品中的Stx进行检测,表明该方法只有效识别Stx1,对Stx2不识别。结论:成功建立了用于检测Stx1的双抗体夹心ELISA法,为临床上快速诊断STEC感染奠定了基础。